桃幼胚下胚轴高频植株离体再生

以桃品种京艳和晚蜜不同发育阶段合子胚下胚轴为外植体进行离体培养,用6-BA、CPPU和TDZ等细胞分裂素诱导下胚轴直接再生不定芽试验。结果表明,花后70d下胚轴为诱导的最佳材料,供试细胞分裂素中,诱导活性为TDZ>CPPU>6-BA,苯脲类细胞分裂素TDZ5mg/L与NAA0.01mg/L配合对下胚轴再生具有极强的诱导作用,京艳诱导再生率高达95.2%,平均不定芽数达每外植体25.3个。京艳的诱导率显著高于晚蜜。IBA 0.5mg/L适于诱导再生幼茎的生根,生根率和移栽成活率分别达到92.6%和65.5%。组织学观察表明不定芽起源于皮层薄壁细胞,属直接再生方式。     

桃离体组织分化再生植株的研究

  以奉化‘玉露’桃叶片、幼茎、下胚轴、子房、胚珠、胚乳及花后45～50 d 和75 d 的未成熟胚、完全成熟的种胚为外植体, 进行离体培养再分化试验。结果表明只有花后45～50 d 和75 d 的未成熟胚产生白色致密节球状的愈伤组织, 并可诱导出不定芽, 不定芽分化率分别为73. 8 %和15. 5 %; 62BA 诱导愈伤组织不定芽的效果优于KT。不定梢转移生根成苗获得了完整的再生植株。探讨了不同激素和碳源等对不定芽诱导的影响。     

中国樱桃‘对樱桃’不定根离体再生植株的研究

 采用中国樱桃‘对樱桃’( Prunus pseudocerasus) 无菌生根苗的不定根作为外植体, 成功诱导了胚性愈伤组织, 实现了通过分化不定芽和诱导初生体细胞胚两种方式再生植株。根切段在MS + NAA1.0 mg/L + BA 0.05 mg/L + IBA 0.05 mg/L 培养基诱导获得胚性愈伤组织, 诱导频率达54.2 % , 该愈伤组织在MS + NAA 1.0 mg/L + BA 0.5 mg/L 培养基上不定芽分化率为100 % , 不定芽在MS + BA 0.5 mg/L + IBA 0.1mg/L 培养基上生长发育良好, 转入MS + NAA 0.02 mg/L + IBA 0.02 mg/L 生根培养基生根率达100 %; 整体不定根系统在MS 附加2 ,4-D 1.0～3.0 mg/L 和BA 0.5 mg/L 的培养基上同时诱导初生体细胞胚发生和单极不定芽发生, 每外植体上平均体细胞胚数5～25 个, 不定芽3～22 个。体细胞胚转到MS + BA 0.5 mg/L +IBA 0.1 mg/L 培养基上发育为完整植株, 植株再生率100 %。     

菜用大黄组培苗不定芽增殖能力比较研究

以5个欧洲菜用大黄品种‘RT’、‘RO'、‘RV’、‘R5’和‘R19'种子为试材,以组培苗茎尖为外植体,在MS+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+5.3 g/L琼脂+30 g/L蔗糖培养基上进行连续24 d的离体培养,研究不同欧洲菜用大黄品种组培苗不定芽增殖能力差异.结果表明:5个品种的不定芽再生方式可以分为基部愈伤组织萌发再生不定芽和腋芽萌发再生不定芽.各品种间不定芽再生能力差异显著,‘RT'的再生不定芽增殖速度最快,增殖系数最大,为3.71,‘R19'的再生不定芽增殖速度最慢,增殖系数最小,为1.96；根据各品种增殖系数连续变化曲线得出,菜用大黄合理的继代周期为24 d.     

西瓜未成熟胚高效再生体系的建立

为了建立西瓜高效遗传转化的再生体系,以西瓜杂交品种‘秀玲’、自交系‘97103’和野生种质‘PI296341’的未成熟胚为外植体,分析了基因型、未成熟胚发育时间和植物生长调节剂等因素对体外再生率的影响,获得了西瓜离体培养再生植株。结果表明,以授粉后24 d的西瓜未成熟胚为外植体,在MS+SH维生素+6-BA2.2 mg·L-1培养基上,‘秀玲’、‘97103’和‘PI296341’的未成熟胚外植体能够诱导出不定芽,不定芽诱导率为87.78%、82.78%和86.11%,不定芽在MS+SH维生素+6-BA 0.2 mg·L-1+IAA 0.02 mg·L-1培养基上伸长、展叶,在MS+IBA 1.0mg·L-1的培养基上诱导生根得到完整的再生植株。以未成熟胚为外植体获得再生植株的途径,可为西瓜遗传转化提供有效的受体系统。     

梅花不同外植体离体培养及体细胞胚诱导植株再生

以梅花品种‘雪梅’和‘绿萼’的叶片、叶柄、茎段及未成熟子叶为外植体进行离体培养,探讨了体胚发生途径与植株高效再生方法。结果表明,成熟组织再生能力低,不定芽再生困难。在添加1.0mg·mL-1BA,1.0mg·mL-1NAA,1.0mg·mL-1IBA的1/2MS培养基中,‘雪梅’和‘绿萼’未成熟子叶的体胚诱导率最高,分别为40.4%和25.3%;同时将初生胚转移至新鲜培养基上可产生大量次生胚。在添加0.5mg·mL-1BA,0.1mg·mL-1TDZ和1.0mg·mL-1IBA的1/2MS基本培养基中,体细胞胚发育成完整植株的频率较高,‘绿萼’达26.7%,‘雪梅’达23.8%。再生植株成功移栽至温室且生长良好。     

西洋梨叶片直接再生体细胞胚

 西洋梨‘红安久’和‘绿安久’两个品种的无菌苗幼叶为试材, 研究了不同培养基对叶片分化不定梢及体细胞胚的影响。结果表明: 基本培养基的组成是影响叶片分化为不定梢还是体细胞胚的关键因素, 植物生长物质的种类和水平是影响体细胞胚再生率高低的重要因素。诱导培养基NN69 附加TDZ 2 mg/L 及NAA 0. 1 mg/L , 体细胞胚再生率最高, 绿安久达55. 5 % , 红安久为47. 3 %。NN69 附加BA5 mg/L 及NAA 0. 1 mg/L , 不定梢再生率最高, 绿安久达100 % , 红安久为85. 7 %。     

欧洲葡萄体胚诱导及农杆菌介导的遗传转化研究

以欧洲葡萄(Vitis vinifera L.)品种"无核白"(‘Thompson Seedless’)、"佳利酿"(‘Carignane’)、"红地球"(‘Red Globe’)的雄蕊、雌蕊和花蕾为外植体,对花器官体细胞胚诱导及农杆菌介导的转芪合成酶基因进行研究。结果表明:所采用的5种胚性愈伤组织诱导培养基中,MC培养基较适于雄蕊胚性愈伤组织的诱导,"无核白"、"佳利酿"和"红地球"雄蕊的胚性愈伤组织诱导率分别为1.7%、0.3%和11.8%;PIV培养基可诱导"无核白"和"佳利酿"雌蕊胚性愈伤组织形成,诱导率分别为4.0%和3.2%,而"红地球"雌蕊在MC培养基上诱导率最高,达5.6%;仅"红地球"的花蕾在MS1培养基上可诱导产生胚性愈伤组织,诱导率为0.5%。改良X6液体培养基较有利于次生胚的诱导;B培养基有利于体细胞胚萌发成苗。转基因材料经抗性筛选和植株再生,获得了2株"无核白"抗性苗,经PCR和PCR-Southern检测表明,目的基因被整合到转基因植株中。     

‘洛阳包头’大白菜叶柄高效植株再生体系的建立

以‘洛阳包头’大白菜无菌苗叶柄为外植体,研究了大白菜通过直接器官发生建立植株再生体系的方法。结果表明:不同激素组合对‘洛阳包头’大白菜无菌苗顶芽增殖、大白菜叶柄不定芽的诱导以及再生植株生根的影响不同;配方MS+BA 1.0mg/L+IBA 0.3mg/L的培养无菌苗顶芽基增殖率最高,达86.7%;配方MS+BA 2.5mg/L+IBA 0.3mg/L对大白菜叶柄不定芽的诱导效果较好,诱导率为76.7%;配方MS+IBA 1.0mg/L诱导再生植株生根率最高,达90.0%。     

不同甜瓜品种再生体系的比较研究

以不同基因型的甜瓜品种为材料,研究了不同激素组合,Ag NO3质量浓度以及基因型对甜瓜再生的影响。结果表明,不定芽诱导中最适宜的激素组合为MS+1.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1ABA(脱落酸),在此培养基上薄皮甜瓜‘IVF501’和‘IVF509’的不定芽诱导率分别为88.00%、79.60%,厚皮甜瓜‘IVF525’和‘IVF604’的不定芽诱导率分别为76.50%、74.75%。不同质量浓度的Ag NO3对甜瓜不定芽分化的影响有差异,1.0 mg·L-1Ag NO3有抑制愈伤组织分化的作用,能有效减少玻璃化的发生,当质量浓度为2.0 mg·L-1时,虽然明显地抑制了愈伤组织分化,但同时降低了不定芽分化率。薄皮甜瓜‘IVF501’与厚皮甜瓜‘IVF525’具有较高的不定芽诱导率,将诱导的不定芽转入伸长培养基中(MS+6-BA 0.05 mg·L-1),分化的不定芽能够伸长长大,在生根培养基中(MS+IAA 0.4 mg·L-1)容易生根。薄皮甜瓜获得完整再生植株需50~60 d,厚皮甜瓜获得完整再生植株需60~75 d。     

不同培养条件对‘丰香’草莓离体叶片再生的影响

 以草莓品种‘丰香’离体叶片为外植体, 探讨了基本培养基、不同细胞分裂素、暗培养、硝酸银浓度以及不同植物生长调节剂组合对不定芽再生的影响。结果表明, 基本培养基中以MS 最为适合,WPM、QL 、AS 培养基均不利于不定芽的再生, 而TDZ 的诱导效果好于BA。以MS 基本培养基附加TDZ2.0 mg·L - 1和IBA 0.8 mg·L ^-1可以使‘丰香’叶片不定芽的再生率高达72.33 % , 平均每叶再生芽5.59个。暗培养14 d 可以将‘丰香’叶片的不定芽再生率提高到90.09 %。硝酸银对于提高‘丰香’叶片的不定芽再生没有明显效果, 但在一定程度上改变了细胞分化的方向。     

不同基因型梨叶片离体培养和植株再生

 以‘巴梨’、‘身不知’和‘早酥’梨试管苗叶片为外植体, 对不定芽进行了诱导、增殖和生根。重点探讨了基本培养基、植物生长调节剂配比、AgNO₃ 不同浓度和NH4⁺-N与NO3^--N比例对不定芽再生的影响。结果表明, MS + TDZ 0.5 mg/L + IBA 0.1 mg/L为‘巴梨’叶片不定芽发生的最佳培养基。在QL + TDZ 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L培养基上, 暗培养3周后转光下培养, ‘身不知’和‘早酥’分别获得89.6%、81.2%的不定芽再生率和3.45、3.73的平均再生芽数; 对‘巴梨’和‘早酥’不定芽再生有效促进的AgNO₃ 浓度范围为0.1～0.5 mg/L, 0.1～4.0 mg/L的AgNO₃、1∶2～7的NH₄⁺-N∶NO ₃^--N和21.50mmol/L的K+对‘身不知’叶片再生均有促进作用, 缺乏NH₄⁺-N不利于不定芽的再生; 转移到MS+BA1.0 mg/L + IBA 0.1 mg/L培养基上能快速增殖; 在MS、1 /4MS + IBA 1.0～2.5 mg/L +蔗糖5～15 g/L +活性炭0.5～1.0 g/L上获得了不同程度的生根苗。     

Growth regulator requirements for adventitious regeneration from Lilium bulb-scale tissue in vitro,in relation to duration of bulb storage and cultivar

Addition of NAA (1-naphthylacetic acid) to the nutrient medium strongly influenced the adventitious regeneration of plantlets from bulb-scale tissue of lilies in vitro. The percentage of regenerating explants, the number of plantlets per explant, and also the bulblet growth of the resulting plantlets were affected by the auxin, low concentrations being stimulatory and high concentrations inhibitory.The cytokinins BA (6-benzyladenine) and 2iP (N6-[Δ2-isopentenyl]-adenine) did not influence the adventitious regeneration, but caused aberrant growth of the regenerated plantlets.Prolonged cold storage of the mother bulbs decreased the demand for exogenous auxin for maximum adventitious regeneration. The optimum for bulblet growth was not affected.Results of experiments with cultivars ‘Pirate’, ‘Enchantment’ and ‘Connecticut King’ suggest an inverse relationship between the in vivo propagation rate by scaling and the NAA demand for optimal adventitious regeneration in vitro.     

河套蜜瓜子叶诱导形成体细胞胚的研究

 以河套蜜瓜成熟种子子叶为外植体, 研究体细胞胚途径再生培养的主要影响因子, 并对体胚发生过程进行了观察。结果表明; 体细胞胚发生对培养基糖源浓度要求较高, MS附加60 g/L的糖源效果最好; 最佳植物生长调节剂组合为2,4-D 2.0 mg/L + 6-BA 1.0 mg/L; 1日苗龄子叶为最佳外植体源; 在诱导培养基上经暗培养1周、光培养1周, 再转入胚发育培养基, 有利于成熟胚的产生; 体细胞胚可产生在愈伤组织内部或表面、外植体表面、不定根上及外植体维管束的束中分生组织等部位。     

早熟桃幼胚愈伤组织再生植株技术研究

自然授粉的早熟桃新端阳(Amsden june)幼胚愈伤组织再生植株子叶产生的圆球状愈伤组织可以分化不定梢。不定梢分化的适宜培养基为1/2MS大附加BA1.0mg/1和蔗糖3％,同时观察到胚状体的存在。愈伤组织继代培养6代以后,仍保持其分化能力。不定梢生根成功,生根率达83.3％。     

多胺与脱落酸对辣椒子叶再生的影响

 以‘中椒5 号’甜椒和‘湘研10 号’辣椒为试材, 探讨了Spm (精胺) 、Spd (亚精胺) 和ABA(脱落酸) 的不同浓度与不同添加时期对子叶再生的影响。结果表明: 在不定芽分化期和伸长期添加100μmol·L^-1的精胺能显著提高中椒5 号和湘研10 号不定芽的伸长率, 分别较对照提高78%和73%; 在不定芽分化期添加0.3 mg·L^-1的ABA 能促进不定芽分化, 两品种分别较对照提高52.8 %和71.6 %。     

酿酒葡萄‘神索’体胚发生及再生体系遗传稳定性分析

 以酿酒葡萄‘神索’未成熟合子胚为外植体, 通过植物生长调节剂、光照、温度等因素的控制, 研究了葡萄体胚的产生、保存及植株再生。结果表明, 以NN为基本培养基, 诱导胚性愈伤组织的适宜植物生长调节剂水平是1.0 mg·L ^{- 1} 2,4-D; 诱导体胚的生长调节剂水平是1.0 mg·L ^-1 NAA + 0.5 mg·L ^{- 1} BA, 体胚诱导率为37.5%; 5℃微光条件, 适宜体胚的保存; 体胚成熟及植株再生的植物生长调节剂水平是0.05 mg·L ^{- 1} NAA + 0.5 mg·L ^{- 1} BA, 成苗率为42.1%。利用流式细胞仪并结合染色体计数对体胚及再生植株细胞核DNA含量及染色体鉴定表明, 体胚细胞染色体存在一定的变异, 而体胚再生植株倍性稳定, 细胞核DNA含量及染色体数与供体母株一致。