桑叶多糖的分离及红外光谱和气相色谱分析

多糖是桑叶中的重要功能性成分之一。采用水煮提取、乙醇分级沉淀和Sephadex G-100凝胶层析的方法,从桑叶中分离、纯化出3种多糖组分:MPSⅠ、MPSⅡ和MPSⅢ。经红外光谱分析,MPSⅠ不同于MPSⅡ和MPSⅢ,表现出长分子链、β-糖苷键构型和含酰胺基团等特征。气相色谱分析结果显示,L-鼠李糖、D-葡萄糖和D-半乳糖是3种桑叶多糖的共同成分,其中D-葡萄糖和D-半乳糖的构成比例较大,3种桑叶多糖的单糖构成也存在明显差异。     

桑叶粗多糖最佳提取工艺研究

为探究桑叶粗多糖最佳提取工艺,利用正交试验设计对桑叶粗多糖的提取工艺进行优化。以桑叶粗多糖得率为评价指标,以加水倍数、煎煮时间、煎煮次数为考察因素,设计3因素3水平正交试验,采用苯酚一硫酸比色法进行桑叶粗多糖含量测定,比较得出桑叶水提物的最佳制备工艺,并在此基础上考察不同浓度乙醇对桑叶粗多糖提取的影响。结果显示,煎煮次数对桑叶粗多糖提取率影响最大,当加水倍数为25倍,煎煮时间为2 h,煎煮2次时桑叶水提物中桑叶粗多糖提取率最高,为4.94%。但结合影响因素分析,最终确定桑叶水提物的最佳提取工艺为加25倍水,煎煮2 h,煎煮3次。乙醇浓度对桑叶粗多糖的含量及得率影响很大,70%乙醇醇沉所得水提物中桑叶粗多糖质量最大,40%乙醇醇沉所得桑叶粗多糖含量最高,平均含量达41.5%,显著高于其他乙醇浓度（P < 0.05）,提示乙醇浓度越高,桑叶粗多糖含量越低,但得率越高。桑叶粗多糖最佳提取工艺为：加水倍数为25倍,煎煮时间2 h,煎煮3次,采用70%乙醇醇沉。     

桑叶水溶性多糖提取工艺的研究

为了开发利用桑叶中水溶性多糖的药用功能 ,在单因子基础上进行正交试验 ,进一步优化了桑叶水溶性多糖的提取工艺 :烘干的桑叶粉质量浓度为 0 0 4 0g/mL ,在 75℃水浴中提取 2次 ,抽提 6 0min ,提取液用 80 % (终体积分数 )乙醇醇析。在此最佳提取工艺下 ,多糖得率为 2 5 0 8%。     

艾叶不同极性溶剂提取物的抗氧化能力的研究

试验旨在研究艾叶非挥发性成分不同极性溶剂提取物的抗氧化活性,探究艾叶非挥发性提取物抗氧化活性与多酚、黄酮以及多糖含量的关系。采用60～90℃石油醚去除艾叶中的脂溶性色素与挥发性物质,残渣分别以乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、水逐级提取。使用铁离子还原法（FRAP）和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）法测定4种提取物的抗氧化活性,将抗氧化活性转化为奎诺二甲基丙烯酸（Trolox）当量,测定提取物中的多酚、黄酮、多糖含量。结果显示：在水相、乙醇相、正丁醇相以及乙酸乙酯相中,多酚、黄酮、多糖主要富集在水相和乙醇相中,黄酮含量能够直接影响艾叶的抗氧化活性。研究表明,艾叶非挥发性提取物的抗氧化活性主要存在于水相和乙醇相中,黄酮类物质是抗氧化活性的主要成分,可将其作为天然抗氧化活性成分进行深度开发。     

桑树叶蛋白提取及蛋白粉制备工艺

桑叶蛋白质的氨基酸种类齐全,是营养均衡的优质蛋白质资源。以桑叶粉为原料提取蛋白质并制备蛋白粉,选择桑叶干燥方法、桑叶蛋白浸提剂种类、桑叶蛋白提取液中的蛋白质沉淀分离方法等工艺条件进行单因素试验。结果表明,将桑叶自然晾干粉碎,以5 g/L Na OH溶液作为浸提剂,设定料液质量浓度为40 g/L,经超声波处理20 min后在40℃下浸提1 h获得桑叶蛋白提取液,再以1 mol/L HCl沉淀分离蛋白质,可使桑叶蛋白质的提取率达到14.42%,其中粗蛋白的质量分数可达49.58%,冷冻干燥获得的桑叶蛋白粉中总黄酮与多糖的质量比分别达到60.97 mg/g和12.32 mg/g。采用上述优化的工艺技术条件,可以提高桑叶蛋白质的提取率和制备出品质较优的桑叶蛋白粉。     

乙醇沉淀法提取茶花多糖的研究

以茶花为研究对象,以水为溶剂,在一定的条件下提取茶花多糖,提取液用乙醇进行沉淀,选取沉淀剂用量、沉淀时间、离心时间和提取次数4个因素做单因素试验,然后以离心时间、乙醇加入量、沉淀时间、提取次数作为因素,进行正交试验,来确定乙醇沉淀法提取茶花多糖的最佳工艺条件。乙醇沉淀法的最佳工艺条件为：浓缩液：沉淀剂为l：3、沉淀时间为6h,提取次数为2次。     

桑叶提取物的抗病毒活性检测

桑叶作为中药或功能饮品的重要成分在民间和临床上广泛应用。用70%乙醇对广东桑、白桑、鸡桑、鲁桑等桑种共20个品种的桑叶进行浸提,并依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到不同萃取组分及剩余水相组分。利用细胞病变减少法(CPE法)检测发现多个桑叶样品的萃取组分或水相组分含有抗病毒活性物质,且抗病毒活性具有选择性。其中,能有效抑制单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的样品最多,6个桑品种桑叶的乙酸乙酯萃取组分对HSV-1的半数抑制浓度(IC50)≤12.5μg/mL;广东桑品种桑叶的水相组分和石油醚萃取组分具有较高的抗甲型流感病毒(Flu A)活性;部分桑品种桑叶的萃取组分对登革病毒2型(DV2)也有一定的抑制活性;20个桑品种桑叶的4种萃取组分对柯萨奇B3病毒(CVB3)均无抑制活性。上述结果表明桑叶含有丰富、较为广谱的抗病毒活性成分,但不同桑品种间的桑叶化学成分及抗病毒活性有一定差异。     

鸡鲍氏3型志贺菌脂多糖及O抗原多糖的提纯与鉴定

为获得高纯度的鸡鲍氏3型志贺菌脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）及其亚单位O抗原多糖(O-polysaccharide,O-PS),采用改良热酚水法提取鸡鲍氏3型志贺菌的LPS,并联合使用葡聚糖凝胶层析得到高纯度的LPS;采用酸水解法联合葡聚糖凝胶层析获得高纯度的O-PS。生化方法检测结果显示所提纯LPS和O-PS纯度高,兔回肠襻试验结果显示所提纯的LPS活性好。本试验结果表明提取的LPS和O-PS可进行特异性研究及制备有效的候选疫苗。     

桑叶黄酮类化合物提取纯化、生物学功能研究进展

桑树在中国及亚洲一些国家广泛种植,桑叶和果实作为一种传统中药材被大量使用。一些研究表明,桑叶含有多种活性成分,如多糖、黄酮类化合物等。黄酮类化合物是桑叶中的主要活性成分,具有广泛的生物学功能。本文对桑叶黄酮类化合物的提纯方法、影响桑叶总黄酮含量的因素和生理功能等方面的研究现状进行了综述。     

可溶性玉米须多糖的提取与纯化

本试验采用水提醇沉法提取玉米须多糖,在不同的煎煮时间、提取温度、水料比条件下,探索最佳提取条件。并用不同体积的乙醇沉淀多糖,得出最佳醇沉体积比。水提后的玉米须残渣用β-葡聚糖酶和木聚糖酶酶解提取,比较用不同的酶量酶解条件下的最适提取条件,提取的粗多糖用三氯乙酸(TCA)法除多糖蛋白,用紫外扫描检验蛋白是否除尽。结果表明,玉米须多糖提取的最佳条件为:80min、80℃、18倍的水料比、2.5倍体积乙醇沉淀效果最佳;3%浓度的TCA溶液除蛋白质效果最好;通过紫外扫描检测纯化样品表明糖结合蛋白基本除尽。     

桑枝中氧化白藜芦醇的分离与鉴定

氧化白藜芦醇具有抑制酪氨酸酶活性的作用。为了从桑枝中有效提取这一生物活性物质,采用乙醇提取法获得桑枝粗提液,通过硅胶柱、葡聚糖柱柱层析法分离制备桑枝氧化白藜芦醇样品。运用核磁共振、HPLC-MS等方法鉴定样品的化学结构和分子质量,证实制备样品为氧化白藜芦醇,通过高效液相色谱检测其质量分数大于99%。研究结果为从桑枝中分离提取氧化白藜芦醇提供了一种简便有效的方法。     

Study on the Optimum Extraction Process of Mulberry Leaf Polysaccharide

The experiment was conducted to study the best extract process of mulberry leaf polysaccharide,three factors and three levels orthogonal test was designed to optimize the extraction process.Three factors were considered,including ratio of solid to liquid,decoction time,the time of extracting and the yield of mulberry leaf polysaccharide was determined with phenol-sulfurie acid colorimetry as the evaluate index.Meanwhile,the influence of ethanol concentrations on mulberry leaf polysaccharide extract was studied.The results showed that decoction times could greatest affect the extraction percent of the polysaccharides.The extraction percent of polysaccharide was the highest (4.94%) when the rate of solid to liquid was 25,the time of extracting was 2 h and decoction times was 2.While the most appropriate process was 25 times for the rate of sdid to liquid,2 h for extracting and decoction times was 3,considering with practical situations.The concentration of ethanol would significantly affect polysaccharides yield and purity.When the concentration of ethanol was 70%,the yield of mulberry leaf polysaccharid was highest.When the concentration of ethanol was 40%,the content of mulberry leaf polysaccharide was highest (41.5%),significantly higher than other ethanol concentration (P < 0.05).It suggested that the higher the ethanol concentration,the lower the polysaccharide content,but the higher the yield.The optimum extraction of mulberry leaf polysaccharides were that the rate of solid to liquid was 25,extractign for 2 h,decoction 3 times and 70% ethanol precipitation.     

The partial purification of Clostridium perfringens beta toxin.

An attempt was made to purify Clostridium perfringens Beta toxin. Crude toxin prepared by ammonium sulphate precipitation of culture supernatants was purified by chromatography on Sephadex G50, Sephadex G100 and DEAE cellulose. This material, although highly purified was not homogeneous on polyacrylamide gel electrophoresis. It had a toxicity of 800 000 mouse MLDs/mg N, a typical protein absorption spectrum in the UV region, an iso-electric point of 5, 6 and the main component had a molecular mass of 42 000 +/- 2 000 (estimated by electrophoresis in sodium dodecyl sulphate containing polyacrylamide gels).     

Partial purification and characterization of chicken interleukin-2.

Chicken interleukin 2 (IL-2) activity was partially purified from conditioned medium produced by culturing chicken splenic lymphocytes in the presence of concanavalin A. The purification procedure included sequential steps of gel filtration chromatography, reverse-phase high-pressure liquid chromatography, and phenyl-sepharose chromatography. Two peaks of IL-2 activity with apparent mol. wt. ranges of 36-39 kD and 17.5-25 kD were eluted from the Sephadex G100 gel filtration column. An increase in IL-2 spec. act. from 14 U mg-1 to between 2000 and 20,000 U mg-1 was obtained for the Sephadex G100 column peaks when subjected to the subsequent steps of the purification procedure. Alkylative reduction of the higher mol. wt. Sephadex G100 column peak (followed by re-chromatography with Sephadex G100), resulted in generation of the lower (17.5 kD) mol. wt. peak, indicating that chicken IL-2 is capable of either dimerizing or forming aggregates with other proteins. Elution of the lower mol. wt. IL-2 activity from a non-reducing sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel demonstrated an apparent mol. wt. for chicken IL-2 of 20 kD, which confirmed the range of 17.5-25 kD seen with gel filtration.     

桑枝皮多糖对小鼠的免疫调节试验

多糖对生物体具有免疫调节作用,从桑枝皮中可以提取获得多糖物质。分别以300、600、900 mg/kg剂量的桑枝皮多糖给正常小鼠和免疫抑制小鼠灌胃,对照组给予等量的蒸馏水,每天给药1次,连续给药7 d后检测观察小鼠体内部分生理生化指标的变化,探究桑枝皮多糖对小鼠的免疫调节作用机制。结果显示:桑枝皮多糖可增强正常小鼠因2,4-二硝基氟苯(DNFB)引起的迟发性变态反应以及免疫器官的发育和脾脏淋巴细胞增殖能力,试验组小鼠的血清溶血素抗体积数、碳廓清能力、NK细胞活性、白介素-2(IL-2)的浓度均显著高于对照组(P<0.05);桑枝皮多糖对免疫抑制试验小鼠的免疫功能也有一定的提升作用,除巨噬细胞吞食能力外,其他检测指标均有显著改善。试验结果还表明桑枝皮多糖改善小鼠免疫功能的生理生化指标,具有一定的量效关系。     

桑叶粗提物清除羟自由基能力的比较

实验采用物理化学方法(Phen-CuSO4-Vit.c-H2O2反应体系)测定和比较了桑叶提取物、银杏叶提取物和螺旋藻粗多糖清除羟自由基的能力,并测定了3种提取物中总黄酮、多酚类和糖类成分含量。结果发现,在清除羟自由基能力和延迟羟自由基攻击高峰出现的作用方面,桑叶提取物强于螺旋藻粗多糖,而比银杏叶提取物弱。提取物中总黄酮和多酚类物质的含量与清除羟自由基能力有密切关系。     

列当多糖对鸡新城疫病毒在鸡成纤维细胞中增殖的抑制作用

为研究列当多糖抗新城疫病毒(NDV)活性,用水提醇沉法提取列当总多糖及4种分级多糖,并通过苯酚硫酸法及红外光谱对列当多糖进行检测。通过MTT法测定各级多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全浓度。以3种加药方式(先加多糖后接种病毒、先接种病毒后加多糖、多糖和病毒感作后加)加药,检测列当多糖对新城疫病毒的阻断作用、抑制作用及直接杀灭作用。结果表明,列当总多糖及4种分级多糖均具有抗NDV活性,其中对NDV的抑制作用及阻断作用强于对NDV的直接杀灭作用。50%、80%梯度醇沉的列当多糖(OSP50、OSP80)及总多糖(OSPt),阻断作用下的病毒抑制率分别为19.50%、33.10%和22.30%,抑制作用下的病毒抑制率分别为19.00%、21.90%和22.60%,杀灭作用下对NDV的抑制率分别为,14.70%、17.50%和13.30%,其余各组多糖阻断作用、抑制作用及杀灭作用下的病毒抑制率均低于上述3组多糖。说明OSP50、OSP80及OSPt的抗NDV活性较好,可以作为进一步研究的材料。     

牛心肌肌红蛋白的提取纯化与鉴定

以牛心肌为原料,采用分段盐析法提取肌红蛋白,离心透析后,用Sephadex G-100柱层析纯化。电泳结果表明,纯化后的肌红蛋白为一条粗带,与纯品肌红蛋白比较位置完全相同,试验证试采用分段盐析法提取,Sephadex G-100柱层析纯化方法可获得肌红蛋白纯品。