斑点酶联免疫吸附试验检测猪瘟血清抗体最佳条件的研究

以硝酸纤维膜为固相载体,以猪瘟病毒为抗原,确定了Dot-PPA-ELISA检测猪瘟抗体的最佳反应条件。试验表明,猪瘟兔化弱毒经仔猪睾丸原代细胞培养纯化,以0.05mol/LpH9.5CBS缓冲液稀释至浓度为0.98～1.15mg/mL制备诊检抗原膜片;采用4%蛋清蛋白0.05mol/LpH9.5CBS封闭;检测反应稀释液应用0.01MPPBST(含0.1%PEG、0.05Tween-20),酶结合物工作浓度以1∶30,底物选取4-氯1-萘酚等为检测猪瘟血清抗体的最佳反应条件。重复试验证明了其检测稳定性好。交叉试验、阻断试验证明了其特异性强。     

应用ELISA检测珠海市供港澳猪猪瘟抗体

<正>猪瘟在我省流行比较严重,曾造成较大的经济损失。从1988年后全省采取每年春秋两防的免疫措施,使我省的猪瘟疫情得到了全而的控制,但是猪瘟病例时有发生。为了调查我市供港澳猪猪瘟的免疫情况,应用ELISA方法检测猪瘟免疫抗体。酶联免疫吸附试验(ELISA)具有操作简便、     

自贡市大安区猪瘟抗体水平的检测及其流行分析

1 材料与方法 1．1 试验材料 1．1．1 对照血清：标准猪瘟阳性血清、标准猪瘟阴性血清由购买的试剂盒配备。     

应用酶联免疫吸附法检测暴发病病原—嗜水气单胞菌的研究

作者制备了暴发病病原——嗜水气单胞菌TPS—30株的免、鸡抗血清,在此基础上建立了双抗体夹心酶联免疫吸附法。该法可测出10ng抗原,对点状气单胞菌、温和气单胞菌等菌株不发生交叉反应,且能有效地测出人工感染白鲫中的病原体,整个过程可在1.5h内完成,是一种有前途的暴发病快速诊断方法。     

竞争酶联免疫吸附方法检测氯霉素假阳性原因和质量控制的探讨

氯霉素是一种价格低廉的广谱抗生素,曾经是我国水产品等动物养殖中常用的抗菌药物之一。但由于氯霉素对人类存在潜在的危害,可引起再生障碍性贫血、粒状白细胞缺乏症、新生儿、早产儿灰色综合症等疾病,因此动物源性食品中氯霉素的残留受到世界各国和地区的高度重视。欧盟、美国     

酶联免疫吸附试验(ELISA)在水产品药物残留检测中存在的问题及对策

酶联免疫吸附试验(ELISA)具有操作简便、灵敏度高、样品容量大、仪器化程度和分析成本低的优点,已成为目前水产品药物残留检测中使用最普遍的方法之一,几乎所有重要的水产品药残检测都已建立或试图建立ELISA,如氯霉素、四环素、链霉素、己烯雌酚等.但ELISA也有影响因素较多,易出现假阳性结果等缺点.现将操作过程中需要注意的问题,作如下探讨.     

饲用植酸酶和纤维素酶最佳酶解条件的研究

采取正交试验的方法,研究植酸酶和纤维素酶对配合饲料的酶解效果以及酶解的最适条件。结果表明：饲料经植酸酶酶解后,无机磷含量增加了6．1％～47．2％,平均增加了25．9％;植酸酶酶解的最适条件为：55℃,pH4．6,作用时间为80分钟。饲料经纤维素酶作用后,葡萄糖含量增加了36．7％-80．7％,平均增加了54．8％;在50℃,pH5．0,作用时间为80分钟时,纤维素酶的酶解效果最好。     

稚鳖饲料适宜蛋白含量的研究

用蛋白质梯度法,以白鱼粉为蛋白源,对稚鳖蛋白质需求进行测定。试验期间水温28 3℃,420只稚鳖平均体重(11 23±0 93)g,分成7个组,每组3个重复,饲养60d。结果表明,蛋白质质量分数50 91%、54 81%生长较好,稚鳖饲料粗蛋白适宜质量分数应为49 52%。     

史氏鲟饲料脂肪的最适量研究

配制等氮（蛋白质含量41%）和等能量的（11.2MJ/kg饲料）的半精制史氏鲟饲料，以等量混合的海水鱼油、豆油作为添加的脂肪源，设0、2%、4%、6%、8%和10%共6种添加浓度。试验周期为25d。结果显示：增重率、饲料系数和蛋白质效率以脂肪含量7.6%～9.6%的饲料为最佳，考虑到饲料成本，建议把史氏鲟饲料脂肪的最适量设定在8%左右。     

采用OIE标准检测养殖对虾中传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的PCR检出类型

利用世界动物卫生组织(OIE)推荐的4对引物(389F/R、392F/R、77012F/77353R 和309F/R),通过普通 PCR 方法,对本实验室2011?2012年采集于国内不同地区的对虾样品进行 IHHNV(Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus)检测,并对国内存在的 IHHNV 检出类型进行初步分析。检测结果显示,在凡纳滨对虾、斑节对虾、中国对虾、宽沟对虾中均检测出了 IHHNV,而在脊尾白对虾中未检出。其中凡纳滨对虾阳性率最高,中国对虾阳性检测率最低。对虾样品2011年阳性率高于2012年,华东地区高于华北、华南两地。此外,根据4对引物的检测结果,得到国内 IHHNV 的4种 PCR 检出类型。     

锯缘青蟹细菌性传染病的病原菌研究

从宁波市锯缘青蟹（Scylla serrata)主要养殖海区5－9月间不同症状的病蟹体内分离到6株细菌，S9901、S9902、S9903、S9905和S9906，经感染试验确定S9902、S9903、S9905和S9906均为病原菌；此4株菌革兰氏染色阴性，具1根极生鞭毛，氧化酶反应阳性，发酵葡萄糖，不产气，不发酵肌醇，对0／129试剂敏感，为弧菌属种类；经赖氨酸、精氨酸、鸟氨酸脱羧酶、蔗糖、甘露醇发酵、6％氯化钠胨水生长、水杨素、枸橼酸盐利用等试验，根据第二代YGZ－9V系统，分别将其归为辛辛那提弧菌、溶藻弧菌和副溶血弧菌。4株菌对氯霉素、环丙沙星和硫酸庆大霉素等抗菌素表现出强敏感性，诺氟沙星、磺胺甲异恶唑等中度敏感，而对头孢唑啉钠、呋喃唑酮不敏感；中草药五倍子和五味子煎出液对4株菌均表现出较强的抑菌性能。     

潮间带垒石蒙网养鲍技术研究

1994年4月～1995年10月,在4个岩礁区共设置136个石垛,放养壳长1．3～3．0cm鲍苗55．1万只,进行潮间带垒石蒙网养鲍试验。对场址选择、放养密度、规格、投饵方法等进行了研究。结果：产商品鲍19．254t,平均亩产1397．8kg,平均壳长6．81cm,平均个体重39g,成活率89．6％,实现产值693.144万元、利润352.81万元。专家鉴定认为,养殖方式为国内首创,技术水平属世界先进。     

8.8kW渔船单拖网捕捞技术试验报告

为充分开发利用地方性、区域性和养殖区内的小型鱼虾贝类资源，对８．８ｋＷ渔船单拖网具结构进行了设计。在乳山和海阳沿海进行了单、双拖网捕捞对比试验，并扩大推广。结果：单拖比双拖作业增产增值３５￣７０％，经济效益显著，且对传统经济鱼虾类资源有一定保护作用。专家鉴定认为，本项目达到国内领先水平 。     

利用咸井水进行罗氏沼虾育苗技术研究

滨海盐碱地盐度为34．89的咸井水,经沉淀、曝晒、充气、消毒。施用EDTA2～3～106络合重金属离子,再用淡水调成盐度12的半咸水,进行罗氏沼虾育苗试验。当卵子由淡黄变为浅灰时,移至半咸水中孵化,每天5：00用120目筛绢网将孵出的蚤状幼体捞入幼体培育池,布他密度8～12万尾／m3。幼体在动期前,每天投喂卤虫无节幼体2～3次,Z6期后改投蛋黄、蛋羹,口喂8次。4000尾亲虾在290m3水体中,育出虾苗571．9万尾,幼体成活率25％以上。专家鉴定认为,在同类研究中居国内领先水平。     

纤维素酶法提取浒苔多糖的工艺条件

实验研究了纤维素酶法提取浒苔多糖的工艺条件 ,通过单因素试验和正交实验 ,确定了最适提取工艺条件为 :提取时间为 2 .5h ,温度为 4 0℃ ,pH值为 5 .0 ,加酶量为 8% ,浒苔多糖的提取率为 2 0 .2 2 %。     

齐口裂腹鱼幼鱼对蛋白质、脂肪和碳水化合物需要量研究

试验设21个日粮组, 蛋白质、脂肪、碳水化合物梯度变化范围分别在33% ~ 51%、3% ~ 18%、23% ~ 32%。在水温( 25. 25 ? 1. 91) e 条件下, 在水泥池中对平均体重为( 2. 01 ? 0. 04) g的360尾齐口裂腹鱼进行了60 d的生长试验, 研究日粮中蛋白质、脂肪和碳水化合物对齐口裂腹鱼生长、体组成和肝脏组织的影响。结果表明: 各组鱼特定生长率随着日粮蛋白质水平的增加而增加; 体蛋白含量不受日粮组成的影响, 体脂肪随着日粮脂肪水平的增加而增加, 体碳水化合物受日粮碳水化合物的影响极显著, 而不受日粮蛋白质和脂肪的影响。齐口裂腹鱼幼鱼能耐忍23% ~ 26%的碳水化合物水平, 且能利用6% ~ 12%的日粮脂肪。基于齐口裂腹鱼幼鱼对日粮碳水化合物和脂肪含量需求分别为23% ~ 26%和6% ~ 12%时, 蛋白质需求量为42% ~ 48%, 能蛋比为41. 3 kJ/g。