液相色谱串联质谱法检测草铵膦、草甘膦及其代谢物在水和土壤中的残留

利用超高效液相色谱-串联质谱仪(UHPLC-MS/MS),结合固相萃取净化建立了在水和土壤中同时快速测定草甘膦、草铵膦及其6种代谢物的多残留分析方法。前处理采用Oasis MCX和Oasis MAX固相萃取柱提取,2%甲酸甲醇-水(体积比为1∶1)洗脱,旋干后0.1%氨水定容,UHPLC-MS/MS检测。方法的线性范围为0.02～0.5 mg/L;在水中添加水平为0.000 1 mg/L和0.001 mg/L时,草甘膦、草铵膦及其代谢物的回收率为72.8%~94.2%,RSD为2.3%~16.1%;土壤中添加水平为0.001 mg/kg和0.01 mg/kg时,草甘膦、草铵膦及其代谢物的回收率为70.6%~88.5%,RSD为3.6%~12.8%。本方法准确、灵敏、全面,适用于草甘膦、草铵膦及其代谢物在水土环境中的残留检测及监测。     

高效液相色谱柱后衍生法测定农田沟渠水中草甘膦残留

为了准确评价草甘膦在农田沟渠水中使用后其对生态环境的安全性,建立了高效液相色谱(HPLC)-柱后衍生法对农田沟渠水中草甘膦残留量的检测方法。将田间沟渠水样中草甘膦经次氯酸钠和邻苯二甲醛、巯基乙醇衍生化后,采用荧光检测器检测。衍生剂1(5%)次氯酸钠添加量100μL/L;衍生剂2硼酸钾和OPA添加量分别是130g/L和100mg/950mL。草甘膦在0.05～2mg/L范围内线性良好,相关系数为0.999 9。在农田沟渠水中,草甘膦3个添加水平(0.05、0.5、1mg/L)的平均回收率(n=5)为98.2%～104.4%,5次测量的相对标准偏差为2.1%～3.6%,方法检出限为0.05mg/L。该方法灵敏、简便、快速,适合于农田沟渠水中草甘膦残留量的检测。     

柱前衍生HPLC法测定草铵膦铵盐含量

建立一种经济、方便测定草铵膦铵盐的高效液相色谱检测方法。在碱性条件下草铵膦与氯甲酸-9-芴甲酯(FMOC-Cl)反应,对衍生物进行液相色谱分离和测定。以甲醇+乙腈+水=25+25+50为流动相,C18为分离柱,在波长265nm下检测。本法衍生反应快,衍生产物稳定,铵离子不影响,在0.010 18-0.203 6mg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 9)。方法的标准偏差为0.555,变异系数为0.768%,添加回收率98.9%-100.6%,检测限为0.4μg/mL。本方法使用C18柱较耐用,检测灵敏度高,适合于草铵膦原药及制剂的测定。     

柱前衍生高效液相色谱-串联质谱法测定土壤中草甘膦及其主要代谢物氨甲基膦酸

建立了土壤中草甘膦及其主要代谢物氨甲基膦酸高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/M S)残留检测方法。样品经0.6 mol/L的氢氧化钾溶液提取、C18固相萃取柱过滤净化、9-芴基甲基三氯甲烷(FMOC-Cl)柱前衍生,以乙腈和5 mmol/L的乙酸铵为流动相,C18反相色谱梯度洗脱,电喷雾负离子多反应监测模式(MRM)HPLC-MS/MS检测。结果表明:草甘膦和氨甲基膦酸在1.6~200μg/L范围内线性关系良好,检出限(以信噪比S/N=3计)分别为0.80和0.94μg/kg,定量限(以S/N=10计)分别为2.6和3.0μg/kg;不同类型土壤样品中两种目标物3个水平的平均添加回收率在84%~104%之间,相对标准偏差(RSD)为2.8%~7.5%。应用本方法对部分供试土壤样品进行分析,结果发现所检样品中草甘膦和氨甲基膦酸的检出率较高,分别为38.9%和61.1%,两种物质土壤残留行为较为普遍。     

基于叶绿素荧光比较草铵膦和草甘膦对柑橘的安全性

比较了低于推荐浓度的草铵膦和草甘膦喷雾对柑橘叶片叶绿素荧光参数和叶绿素含量的影响。结果表明,喷施0.1、1.0 mmol/L草铵膦和草甘膦后,柑橘叶片的荧光参数Y(Ⅱ)、Y(Ⅰ)、Y(NA)均较对照呈现不同程度降低趋势,且总体随着处理时间的延长下降幅度增大;Y(ND)较对照呈现上升趋势,随着处理时间的延长上升幅度增大;Y(NPQ)保持相对稳定,但始终大于对照。喷施1.0 mmol/L草铵膦7 d后,柑橘叶片荧光参数F_v/F_m、P_m、Y(Ⅱ)、Y(Ⅰ)及叶绿素含量(SPAD值)小于喷施相同浓度的草甘膦,表明柑橘叶片对草铵膦耐药性弱于草甘膦。因此,橘园施用草铵膦通过茎叶途径对柑橘造成的药害风险高于草甘膦。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定咖啡鲜果中草铵膦及其代谢产物残留

建立了咖啡鲜果中草铵膦(glufosinate-ammonium)及其代谢产物N-乙酰草铵磷(N-acetylglufosinate)和3-(甲基膦基)丙酸(3-[hydroxy(methyl)phosphinoyl])的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。样品经0.1 mol/L的氨水匀浆、超声提取、离心后,取上清液于40℃下减压浓缩,以V(甲醇)∶V(水)=1∶1的混合溶剂定容,经ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液混合溶剂为流动相梯度洗脱,采用多离子反应监测(MRM)模式扫描,外标法定量。结果表明:在0.1~2.0 mg/L质量浓度范围内,3种化合物的进样浓度与其峰面积之间呈良好线性相关,相关系数(r)分别为0.997、0.998和0.991;在0.05~0.5 mg/kg水平下进行添加回收试验,3种化合物的回收率在92%~107%之间,相对标准偏差(RSD)在2.0%~4.9%之间,定量限(LOQ)均为0.05 mg/kg。该方法简化了样品前处理,提高了回收率,适用于草铵膦的残留检测。     

草铵膦对斑马鱼胚胎及仔鱼的毒性研究

草铵膦(glufosinate-ammonium,GLA)是一种广谱触杀型非选择性除草剂,随着在生产中应用的不断增加,其生物安全性也越来越受到人们的重视。试验以斑马鱼Danio rerio胚胎为动物模型,用不同剂量的草铵膦染毒受精后2h的斑马鱼胚胎,观察其死亡率和形态学变化,并应用原位杂交和QRT-PCR技术检测了Vasa基因表达情况,以分析草铵膦的毒性作用。结果表明:1.6μg/L的草铵膦对斑马鱼胚胎有显著致死作用、1.3μg/L的草铵膦有显著致畸作用,其中畸形表现为尾部弯曲和阻碍黑色素沉着。原位杂交结果显示:1.3μg/L的草铵膦可引起Vasa表达的部分缺失,QRT-PCR定量分析发现,草铵膦可引起斑马鱼胚胎Vasa基因表达水平下调3.8倍。表明草铵膦对斑马鱼胚胎有较强的致死毒性、致畸作用和潜在的生殖毒性。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定柑橘中的草甘膦及其代谢物残留

本研究首次建立了一种超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定柑橘中草甘膦及其代谢物N-乙酰草甘膦?氨甲基磷酸(AMPA)和N-乙酰AMPA?样品经过0.5%甲酸水提取, 以十八烷基硅烷键合硅胶柱(C18)净化, 利用水和200 mmol/L碳酸氢铵溶液(含0.1%氨水)作为流动相梯度洗脱, 在多反应监测模式下定量分析?结果表明, 草甘膦及其代谢物在0.05~1 mg/kg范围内线性关系良好, 相关系数均大于0.99; 草甘膦及其3个代谢物在柑橘全果和果肉基质中3个加标水平下回收率为 70.5%~109.5%, 相对标准偏差(RSD)为0.6%~10.1%, 定量限为0.05 mg/kg?本方法的前处理样品无需衍生, 简便?快捷?高效?准确可靠, 可用于柑橘中草甘膦及其代谢物N-乙酰草甘膦?AMPA和N-乙酰AMPA的定量检测?     

3个草甘膦复配组合对非耕地杂草的防除效果

采用室内盆栽喷雾法和田间茎叶喷雾法,研究草甘膦的复配应用技术。室内测试结果表明:草甘膦与麦草畏配比为(0.5~512)∶1对旱稗和空心莲子草均表现为相加作用;草甘膦与2甲4氯配比为(2.85~5.24)∶1对旱稗和藜均表现为相加作用;草甘膦与草铵膦配比为(0.90~10.32)∶1对旱稗表现为相加作用,对藜表现为增效作用。田间药效结果表明:药后30 d,35%麦草·草甘膦水剂在1 200~1 500 g/hm2剂量下,总草株防效和鲜质量防效分别为93.16%~97.96%和95.24%~99.42%;36%2甲·草甘膦水剂在1 296~2 592 g/hm2剂量下,对总草株防效和鲜质量防效分别为91.09%~94.77%和90.04%~95.07%;36%草甘膦·草铵膦水剂在1 404~2 808 g/hm2剂量下,总草株防效和鲜质量防效分别为92.30%~97.66%和93.08%~97.65%。3个复配剂均能有效防除非耕地杂草,持效期达30 d以上。草甘膦与除草剂复配具有较好的配伍性,与麦草畏、2甲4氯或草铵膦复配均表现为相加或增效作用,室内复配筛选结果与田间药效结果一致。3个复配剂与单剂相比,既增加了药效又提高了速效性。     

苏门白酒草对草甘膦等除草剂的多抗性检测及防治药剂筛选

苏门白酒草Conyza sumatrensis是中国华南地区常见的阔叶杂草,在果园和非耕地常造成严重危害。本研究采用整株剂量反应法,明确了采自广东省广州市的苏门白酒草疑似抗性种群 (GZ-R) 对草甘膦、百草枯和敌草快的抗性水平,比对了GZ-R种群和采自广东省清远市的敏感对照种群 (QY-S) 的草甘膦靶标酶基因EPSPS2片段的差异,并测定了灭草松、氯氟吡氧乙酸等5种茎叶处理剂对不同叶龄苏门白酒草的室内防除效果。结果表明:GZ-R种群对草甘膦和百草枯分别产生了中等水平和高水平抗性,并已对敌草快产生交互抗性,3种药剂对GZ-R种群的LD₅₀值分别是对QY-S种群LD₅₀值的7.2、72.3和6.6倍;与QY-S种群相比,GZ-R种群的EPSPS2基因106位由脯氨酸突变为苏氨酸。在灭草松、氯氟吡氧乙酸或2甲4氯钠推荐剂量下,于4~5叶期施药,苏门白酒草死亡率均为100%,但于6~7叶期和10~12叶期施药,苏门白酒草死亡率显著下降至44.4%~91.7%;而在草铵膦或苯嘧磺草胺推荐剂量下,不同叶龄期施药苏门白酒草的死亡率均为100%,因此在植株生长早期可使用草铵膦和苯嘧磺草胺防除已对草甘膦和百草枯等除草剂产生抗性的苏门白酒草。     

三甲基硅重氮甲烷衍生化-气相色谱法测定水果蔬菜中乙烯利的残留

针对水果蔬菜中乙烯利的残留,建立了三甲基硅重氮甲烷衍生化-气相色谱的分析方法。样品用 V (甲醇) : V (盐酸) = 9:1的溶液提取,无水乙醚萃取,三甲基硅重氮甲烷衍生化15 min,采用气相色谱-质谱法定性,气相色谱仪-火焰光度检测器 (GC-FPD) 检测,外标法定量。结果显示:在0.01~2 mg/L范围内,乙烯利的质量浓度与其对应的峰面积间线性关系良好,相关系数大于0.999 6;此方法检出限为0.01 mg/kg,定量限为0.03 mg/kg;在辣椒、番茄、香蕉、苹果和梨的空白果蔬样品中分别添加0.01、0.1和1 mg/kg 3 个水平下,回收率为93%~102%,相对标准偏差为4.2%~7.3%。该方法准确度和灵敏度高,抗干扰能力强,能准确并快速测定出水果、蔬菜中乙烯利的残留量。     

气相色谱-质谱法测定水-沉积物系统中39种农药残留

建立了气相色谱-质谱(GC-MS)同时测定水体和沉积物中39种农药残留的检测方法。水体样品由乙酸乙酯萃取,无水硫酸钠干燥;沉积物样品经乙腈超声提取,采用N-丙基乙二胺(PSA)和石墨化碳黑(GCB)净化,选择离子监测模式(SIM)进行检测,外标法定量。结果表明：39种农药在10～1 000μg/L范围内线性关系良好,决定系数(R2)均大于0.995 0。空白水样在0.25、0.5、5.0μg/L 3个添加水平下的平均回收率在72%～111%之间,相对标准偏差(RSD,n=5)在1.1%～10%之间,检出限(LOD)为0.02～0.06μg/L,定量限(LOQ)为0.04～0.18μg/L;空白沉积物在5.0、20.0、100.0μg/kg 3个添加水平下的回收率在65%～119%之间,RSD (n=5)在2.1%～12%之间,LOD为0.7～1.5μg/kg,LOQ为2.1～4.3μg/kg。该方法灵敏、准确,结果可靠,可满足水体和沉积物中39种目标农药的残留分析要求。     

Joint action of amino acid biosynthesis-inhibiting herbicides

The joint action of binary mixtures of the amino acid biosynthesis‐inhibiting herbicides glyphosate, glufosinate‐ammonium, metsulfuron‐methyl and imazapyr was assessed in pot experiments applying the Additive Dose Model (ADM). Plants of Sinapis arvensis or S. alba were sprayed with seven doses of the herbicides alone and binary fixed‐ratio mixtures of the four herbicides. In total, 73 binary mixtures were studied in six separate experiments. Mixtures of glyphosate and glufosinate‐ammonium were less phytotoxic than predicted by ADM whether commercial formulations or technical grade products were applied. In contrast, mixtures of glyphosate and metsulfuron‐methyl, glyphosate and imazapyr, glufosinate‐ammonium and metsulfuron‐methyl, glufosinate‐ammonium and imazapyr, and metsulfuron‐methyl and imazapyr either followed ADM or were synergistic. Synergism was observed most frequently for mixtures of glyphosate or glufosinate‐ammonium with metsulfuron‐methyl. Synergism was also more pronounced for commercial formulations of glyphosate and glufosinate‐ammonium than for the corresponding technical grade formulations, implying that synergism was caused by the presence of the formulation constituents of the commercial glyphosate and glufosinate‐ammonium formulations in the spray solution.     

QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定大米、小麦和动物源食品中异丙隆及其代谢物脱甲基异丙隆残留

本研究建立了超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定异丙隆及其代谢物脱甲基异丙隆在大米、小麦、牛肉、牛奶、鸡肉和鸡蛋的残留检测方法。样品经2%甲酸乙腈提取,以N-丙基乙二胺(PSA)净化,利用乙腈和0.2%甲酸水作为流动相梯度洗脱,T3色谱柱分离,在多反应监测模式下定量分析,基质外标法定量。结果表明:异丙隆及其代谢物脱甲基异丙隆溶剂标准曲线和基质标准曲线在1~1 000μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99。在4个加标水平下,异丙隆日内平均回收率为74.0%~107.0%,相对标准偏差0.7%~12.9%;日间平均回收率为76.2%~108.7%,相对标准偏差1.1%~19.8%。脱甲基异丙隆日内平均回收率为76.9%~113.5%,相对标准偏差0.6%~13.9%;日间平均回收率为77.7%~107.4%,相对标准偏差2.2%~17.4%。异丙隆和脱甲基异丙隆的定量限均为1.0μg/kg。该方法简便、快捷、准确、灵敏度高,适用于异丙隆和脱甲基异丙隆在大米、小麦、牛肉、牛奶、鸡肉和鸡蛋6种基质中残留的检测,为解决异丙隆和脱甲基异丙隆在食品中残留的安全问题提供技术方法。     

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定沉积物中二甲四氯残留

针对沉积物性质特殊以及二甲四氯 (MCPA) 在其中环境风险大等问题,建立了超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱 (UPLC-MS/MS) 快速测定沉积物中MCPA残留的方法。样品先经酸化的乙腈溶液超声萃取后,以石墨化碳黑-氨基串联固相萃取柱净化,再以硅烷醇基部分裸露的HSS T3柱为分离柱,采用乙腈-水溶液为洗脱液进行梯度洗脱,将MCPA与杂质分离,后经电喷雾离子源负离子扫描 (ESI?)、多反应监测模式 (MRM),基质匹配标准溶液外标法定量。结果表明:在1~100 μg/L范围内,MCPA的质量浓度与对应的色谱峰面积间呈良好的线性关系,R2 = 0.9997,定量限为0.1 μg/kg。在0.1~5 μg/kg添加水平下,MCPA在沉积物中的回收率在80%~108%之间,相对标准偏差在3.6%~8.2%之间。该方法通过增强色谱柱对MCPA的吸附作用,均衡了UPLC-MS/MS法建立过程中MCPA的“色谱柱保留”同“质谱离子化”互相矛盾的问题,具有分析时间短、准确度好和灵敏度高等优点,适用于沉积物中MCPA残留的痕量分析。     

A modified clean-up for the determination of glyphosate and its metabolite residues in lentils using high pressure liquid chromatography and post-column fluorogenic labelling

An analytical method is presented for the analysis of glyphosate and its metabolite (aminomethyl)phosphonic acid (AMPA), in lentil samples. They were extracted from powdered samples with water and chloroform. The aqueous layer was acidified and passed through a cation exchange column. The eluate was made basic, passed through an anion exchange column in the hydroxide form and discarded. The latter column was eluted with hydrochloric acid (0.3 M) which was collected, evaporated under vacuum to 1 ml, diluted with water to 10 ml, filtered and analysed for glyphosate and metabolite using a liquid chromatograph with a post-column reactor and a fluorescence detector. The limit of detection, average recovery and coefficient of variation (CV) were 0.08 μg g^?1, 92.5% and 7.3% for glyphosate and 0.1 μg g^?1, 92.5% and 8.3% for AMP A. The detector response was found to be linear within the range 20–400 ng.     

分子印迹-基质固相分散萃取-高效液相色谱法测定土壤中4种硫代磷酸酯类农药残留量

建立了一种高效、选择性强的分子印迹-基质固相分散萃取结合高效液相色谱测定土壤中4种硫代磷酸酯类农药(毒死蜱、甲基立枯磷、甲基毒死蜱、甲基对硫磷)残留量的方法;并以甲基立枯磷为模板分子,以甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,且n(模板分子)∶n(功能单体)=1∶4,以乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,以偶氮二异丁腈为引发剂,采用沉淀印迹聚合方法,合成了甲基立枯磷高分子印迹聚合微球(MIPs);以MIPs作为土壤样品提取液的基质固相分散吸附剂,采用HPLC检测处理后的样品,流动相为V(乙睛)∶V(0.1%乙酸水溶液)=3∶1,流速0.8 m L/min,进样量20μL,检测波长210 nm,采用Agilent Eclipse XDB-C8色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃。结果显示:MIPs对甲基立枯磷有特异性吸附,对其结构相似物毒死蜱、甲基对硫磷和甲基毒死蜱也具有一定的吸附性能;在0.01~5.0 mg/kg范围内,各药剂的质量浓度与相应的峰面积间呈良好的线性关系,相关系数r为0.997 5~0.999 8;4种硫代磷酸酯类有机磷杀虫剂的检出限(LOD)为0.452~1.226μg/kg;添加回收率为76%~96%,相对标准偏差(RSD)为2.8%~7.3%。该方法可用于土壤中硫代磷酸酯类有机磷杀虫剂残留量的测定。     

全自动在线顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用检测水样中24种常见农药

为提高环境水体中微量农药检测方法的效率和灵敏度,建立了全自动在线顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用(HS-SPME-GC/MS)检测水中24种常见农药的方法,考察了萃取针涂层材料、最佳萃取温度、萃取时间和解吸时间对萃取效果的影响,优化了固相微萃取基质中离子浓度等条件。结果显示：24种目标农药的浓度-响应线性关系良好,决定系数(R2)均大于0.995 0,方法检出限(LOD)为0.25～5.0μg/L,定量限(LOQ)为0.5～10μg/L,回收率为86%～117%,相对标准偏差(RSD)均小于18%。本方法适用于水样中微量有机磷、氨基甲酸酯、有机氯及菊酯等类型常见农药的快速定性定量检测,具有便捷高效、灵敏度高等优点,可用于环境水体中农药投毒案件物证的检验鉴定。