猪未成熟卵的体外受精

日本农林水产省畜牧研究所和静冈大学的研究人员成功地对猪的未成熟卵进行了体外受精，并产下小猪。由于未成熟卵可进行冷冻保存，因此可望在培育新猪种方面发挥作用。 　　研究人员从大型约克夏猪的卵巢中取出未成熟的卵子，置于培养器内36h，使之成熟，使之受精后，在良好状态下发育的75个卵子移植到猪的输卵管内，后来成功地产下了3头小猪。发育初期阶段卵裂的卵子约为53％。 　　过去采用的猪人工授精技术，即使精子到达卵子，也难以良好地发育。而这次研究人员采用了由牛的血清和猪的卵泡制成的培养液，并添加了半胱氨酸(氨基酸的一种)，从而促进了发育。(李兵译自俄《畜牧业》     

猪未成熟卵的体外受精

日本农林水产省畜牧研究所和静冈大学的研究人员成功地对猪的未成熟卵进行了体外受精，并产下小猪。由于未成熟卵可进行冷冻保存，因此可望在培育新猪种方面发挥作用。     

猪卵体外成熟和体外受精

牛和绵羊的体外成熟卵体外受精已获成功。猪已获得体内成熟卵子体外受精后代,但体外成熟的猪卵子受精后胚胎发育异常,常见报道的是不能形成雄原核或形成不完全。我们最近的试验表明,若将猪卵与外翻的整个卵泡壁共同培养,则能形成正常的雄原核并有较高的受精率。材料与方法卵子的成熟从屠宰场屠宰的初情期前母猪收集卵巢。预备试验结果表明,成熟和未成熟母猪的卵子的发育能力无显著差异。收集到的     

新鲜和冷冻猪卵子体外成熟培养对纤溶酶原激活物存在的影响

对体外成熟培养不同时间段猪的新鲜和冷冻的卵子中是否能够释放纤溶酶原激活物(PAs)的情况进行了研究。被卵丘细胞包裹的卵子取自于囊状卵泡,用NUSU-23培养液进行体外培养。OPS冷冻法冷冻卵子。在成熟培养液的卵丘细胞通过用细管不断地吸吐的方法去除。用SDS和酶谱法对猪的卵丘卵母细胞和裸卵里的纤溶酶原激活物进行密度测定。结果显示:在猪新鲜的卵丘卵母细胞中能够检测出Upa、tPA和tPA-PAI。体外培养24h后,在裸卵中也可以检测出uPA的活性;体外成熟培养48h后,在卵丘卵母细胞中能够检测出tPA和tPA-PAI,但在裸卵中没有检测出PAs。在所有冷冻组的试验中,没有检测出PAs活性。     

猪卵子体外成熟方法研究

本文根据猪卵子带卵丘细胞不同,将卵子分为 A—D4级。实验表明,使用不同成熟培养时间和多次受精法,可以使处于不同发情期的卵子获得较高的体外受精率。B、C、D 级卵子(完整、部分完整或无卵丘)培养32—36小时后受精,体外受精率(2细胞率)25.60％,17.61％和15.78％。A 级卵(放射状卵丘)培养4—15小时后受精,体外受精率62.50～66.67％。在m—KRB 和 m—TCM 199培养液中添加卵泡液和 FSH 或 PMSG 可以促进卵子体外成熟,卵丘扩散成放射状。特别是用即将排卵的猪的大卵泡液和发情黄牛卵泡液,其效果更优。使用这两种培养液的平均受精率分别是19.78％和29.58％,最高30.23％和43.48％。将猪卵子移入小鼠和大鼠子宫角以及兔输卵管中进行卵子成熟培养获得成功,体外受精率分别是10.42％、28.45％和36.36％。     

钙离子载体诱导猪冷冻精子体外获能的研究

本研究首次报道了猪冷冻精子的体外获能。用 I—A 诱导猪冷冻精子体外获能,可穿透去透明带仓鼠卵。I—A 浓度以0.3μM 为宜,穿透率为60%,有原核卵百分率为39.2%。咖啡因可促进 I—A 的作用,并能促进卵内原核的发育。I—A 可诱导猪冷冻精子的顶体反应,有顶体反应活精子百分率与穿透率呈强正相关(r=0.968,P<0.01,n=12)。结果说明,用 I—A 诱导获能的猪冻精可用于猪的卵子的体外受精。猪冻精在卵内的发育能力较低,推测这是猪冷冻精子受胎率低的一个主要原因。     

猪的胚胎(受精卵)移植

猪在家畜中繁殖力最高,因此胚胎移植技术对于提高猪个体繁殖能力的价值就不如对繁殖力较低的牛和羊等大。但从育种方面来说,用卵移植法在短时期内使个体母猪产生大量后代或从未成熟母猪得到受精卵以缩短世代间隔却仍然是有价值的。卵移植在猪育种工作中实     

猪卵子体外受精方法研究

本试验分析研究了：（1）猪卵子体外成熟所需要的培养时间；（2）促性腺激素和猪卵泡液对猪卵子体外成熟的作用；（3）不同体外受精次数对猪卵子体受精率的影响；（4）不同精子获能辅助剂对猪精子体外获能的作用；（5）不同种类猪精液的体外受精能力。研究结果表明，猪卵子体外成熟所需培养时间是32－36小时，在体外成熟培养液中加入0.25IU/ml PMSG（或FSH）和10％猪卵泡液可以促进猪卵子体外成熟，在精子体外获能培养液中加入0.05mg/ml肝素，在体外受精培养液中加入2mg/ml咖啡因可以促进猪精子体外获能并可提高体外受精率，体外成熟后的猪卵子进行2次受精可以获得较高的体外受精率，本试验用新鲜射出精子，冷冻射出精子，新附睾精子，冷冻附睾精子对体外成熟猪卵子进行体外受精，受精后卵裂率（2－4细胞期）分别是24.26％、23.40%,22.65%和24.24%。     

牛活体采卵技术的研究进展

活体采卵技术是胚胎移植体系中重要组成成分,因其能在不影响个体正常生产的情况下重复提供可利用卵子而被人们广泛应用于生产实践。本文对近几年该技术及其影响因素等相关研究进行分析,以供相关人员借鉴和参考。     

母牛卵巢的卵母细胞及卵泡的生长和发育

有关卵子发生的现有文献是十分丰富的,但主要是试验动物的材料。对人、猪和骆驼的卵子发生及母牛卵子发生的某些阶段做了研究。在哺乳动物界里,甚至连卵巢组织结构也具有特殊性。对卵母细胞和卵泡进行体外培养时,应对正常发育的卵巢进行全面的形态生理学过程的分析。我们的工作是专门研究母牛卵巢上的卵母细胞和卵泡的生长。其卵巢是来自肉联加工厂屠宰的母牛,挑出病理性卵巢(囊肿,出血多的卵泡以及卵泡数量较少者等)。卵巢上的卵泡和卵母细胞的活动性闭锁及排卵后和妊娠时的卵巢也除去。余下的卵巢,即能够供给卵母细胞及卵泡在体外培养的卵巢作研究用。曾研究了五个卵     

显微注射针对猪ICSI胚胎的发育和EGFP表达效率的影响

本实验以猪体外成熟卵子以及冷冻解冻后失活的精子为材料,以无BSA且成分明确的TL-HEPES溶液为操作液,探讨显微注射过程中分别使用钝口针和磨口针进行注射,对猪卵子的激活、ICSI胚胎的发育及EGFP表达效率的影响。结果表明:成熟后的猪卵子在不进行精子注射和电激活的情况下,使用钝口针空注射后,卵裂率显著高于磨口针(P<0.05)。分别使用钝口针和磨口针对成熟后的猪卵子进行精子注射,不论进行或不进行电激活,使用钝口针注射,卵子的卵裂率、囊胚率和胚胎EGFP的表达效率均显著高于磨口针(P<0.05)。本实验研究发现,使用钝口针进行注射有利于猪ICSI卵子的激活,胚胎的发育以及胚胎中EGFP表达效率。     

发情母猪什么时候配种最适宜

为了让母猪能及时配种获得多而壮实的仔猪,最好使精子和卵子都在生活力最旺盛的时候相遇受精。要使母猪配准,要选择在母猪排卵前2～3小时进行交配或输精。实践证明,当发情母猪允许公猪爬跨后平均31小时(24～36小时)时开始排卵。发情期短的猪,排卵较早;发情期长的猪,排卵较晚。母猪陆续排卵的时间能持续10～15小时甚至更长。如交配过早,卵子尚未排出,等卵子排出,精子已死亡(精子在母猪生殖道内一般能保持10～20小时的受精能力),便达不到受胎的目的。相反如交配过迟,卵子排出很久,精子才进去,这时卵子衰老失去受精能力(卵子在生殖道内保持受精…     

高产奶牛连续活体采卵及卵母细胞体外受精研究

在超声波扫描仪的指导下,用双孔型采卵针以11.3～12.0kPa抽吸压经阴道对8头高产奶牛分别连续实施7次活体采卵,每4d1次,共采集卵子340个,占可见卵泡数的53.5%.每次头均采集卵子6.1个.卵子经过体外培养、体外受精、体外受精胚体外发育培养,于体外受精后48h、168h统计的卵裂率、囊胚发育率分别为75.0%和29.7%.研究结果表明,在超声波扫描仪指导下对奶牛连续进行活体采卵,将所得卵子进行体外成熟、体外受精、体外培养,在生产中是可行的.     

利用亮甲酚蓝染色法预测牛卵母细胞发育潜能的研究

利用亮甲酚蓝(Brilliant cresyl blue,BCB)对牛未成熟卵母细胞进行染色,根据染色结果的不同对牛未成熟卵母细胞进行分组培养,观察不同组间卵母细胞发育潜能与细胞凋亡的差异,探讨以BCB着色判定牛卵质量的可行性.本试验在牛卵母细胞成熟培养前用26μmol·L-1BCB染色90 min作为处理组(BCB+和BCB-),以未染色卵母细胞作为对照组;以卵内谷胱甘肽的浓度作为胞质成熟的判定指标,以卵母细胞体外受精后囊胚率作为卵子发育能力的判定指标,同时参照卵母细胞的凋亡检测,综合评定卵子的质量.结果表明:(1)着色组(BCB+)卵母细胞成熟率与对照组和无色组(BCB-)间差异显著(P＜0.05);(2)成熟卵母细胞中谷胱甘肽的浓度较培养前差异显著(P＜0.05);(3)经BCB染色,卵母细胞在成熟后,BCB+组的成熟率、凋亡率较对照组、BCB-组差异显著(P＜0.05);(4)体外受精后,BCB+组的囊胚率和囊胚细胞数较对照组和BCB-组差异显著(P＜0.05).由此可见,牛卵母细胞经BCB的染色选择可以作为判断卵母细胞未来发育潜能的一个标记.     

奶牛活体采卵与屠宰场卵巢卵子体外生产胚胎的效果比较

先利用屠宰场卵巢获得的卵母细胞进行体外培养试验.在建立了培养体系获得较稳定的囊胚率的基础上,再利用具有优良乳用遗传性状的老龄奶牛进行活体采卵(OPU),获得的卵子进行体外胚胎生产,对奶牛活体采卵与屠宰场卵巢卵子体外生产胚胎的效果进行了比较.同时对奶牛重复OPU的效果及OPU卵子的培养天数对妊娠率的影响因素等进行探讨,试图为研究和生产建立一个高效的活体采卵体外胚胎生产方法.结果表明:(1)活体采卵获得的卵母细胞从形态以及后期的发育情况均明显差于屠宰场卵巢获得的卵子;OPU法的卵裂率、囊胚率(70.5%、18.3%)明显低于从屠宰场卵巢获得的卵子的卵裂率、囊胚率(75.1%、34.8%)(P＜0.01).(2)不同个体采集卵子数量差异明显(5.92枚/头与1.4枚/头)(P＜0.05).(3)同一头奶牛每次采卵数之间无显著差异,但有波动性变化.(4)奶牛OPU卵子经培养在第6 d或第7 d发育至囊胚的胚胎移植妊娠率高于第8 d发育至囊胚的胚胎.     

猪卵母细胞的体外成熟与体外受精的研究现状

<正> 自从张明宽(1958)首次报道兔卵子体外受精获得成功,并产下仔兔以来,30多年中,有关哺乳动物的体外受精研究已取得进展。但猪的体外受精研究较晚,直到1986年,台湾郑登贵才首次报道“试管猪”。现在我国许多教学和科研单位也在从事此项课题的研究。本文拟从猪卵母细胞的体外成熟培养、精子的体外获能和体外受精等方面,简述其研究现状。一、猪卵母细胞的体外成熟培养 1.卵子的收集母猪在宰后半小时内摘取卵巢,放入加有抗菌素的生理盐水(35～37℃),2小时内带回实验室。用2.5ml注射器从卵巢中吸取直径为2～8mm卵泡     

日本开辟母牛多产捷径

日本农林水产省畜产试验场从屠宰母牛卵巢中摘取未成熟的卵子,体外培养到成熟阶段后进行体外受精。将3粒受精卵置于母兔输卵管内培养至适于移植阶段,移植于霍斯坦种母牛子宫内,顺利产下了3头3胞胎小牛。首创母牛多产世界纪录。     

高产奶牛连续活体采卵及卵母细胞体外受精

在超声波扫描仪的指导下,用双孔型采卵针以 １４．７ ｋ Ｐａ 抽吸压经阴道对 ５ 头高产奶牛分别连续实施 ７ 次活体采卵,每 ７ ｄ １ 次,共采集卵子 ２１４ 个,占可见卵泡数的 ５３．９％ ,每次头均采集卵子 ６．１ 个。卵子经过体外培养、体外受精、体外受精胚体外发育培养,于体外受精后 ４８ ｈ 、１６８ ｈ 统计的卵裂率、囊胚发育率分别为 ７５．２％ 和 ２９．７％ 。研究结果表明,在超声波扫描仪指导下对奶牛连续进行活体采卵是可行的,所得卵子应用体外成熟、体外受精、体外培养技术,可生产用于冷冻或移植的胚胎。     

超声检测技术在鱼类人工繁殖的应用价值分析

本文旨在探究超声检测技术在鱼类人工繁殖的应用价值。选取黄颡鱼、黄鳝、斑点叉尾鮰、泥鳅、施氏鲟和南方大口鲶6种无磷亲鱼,经超声检测,分别对其性腺发育不同阶段卵径进行横向和纵向比较。结果显示:6种鱼类的卵径的超声检测测量值与卵子发育呈正相关;在卵巢成熟期内,超声检测可通过检测卵径及卵子在影像中是否具有游动性这2项指标来判断是否具有催产条件,其超声检测符合率达98.90%以上。表明对于无鳞鱼或珍稀鱼类应用超声检测卵巢发育,其分辨率和诊断符合率比较高,可作为人工繁殖诊断卵子发育情况的首选方法,具有重要的临床应用价值。     

猪蠕虫病调查及防治措施

在5个养殖场取60份粪便,先后采取4种集卵法收集虫卵,结果检查出6种线虫卵,无绦虫卵或蛔虫卵。针对这种情况我们选用能杀灭未成熟的虫体或移行幼虫的药物,并结合其他预防措施,使生猪寄生虫感染率大大降低,肥育猪提前23～25d出栏。并根据试验情况制定了预防性驱虫程序。