适合虫草素积累的蛹虫草液体培养条件的优化

为了探索蛹虫草液体发酵中适合虫草素积累的培养基和发酵培养条件,以半定量薄层色谱法为检测手段,以虫草素含量为指标,通过单因素试验及正交试验优选的方法,最终优选出的培养基配方为蛋白胨15 g·L-1、葡萄糖20 g·L-1、磷酸二氢钾1 g·L-1、七水合硫酸镁0.5 g·L-1、维生素B110 mg·L-1、荼乙酸2 mg·L-1.优选出的培养条件为发酵液pH7,培养温度25℃,光照时间12h.     

蛹虫草固体发酵生产虫草素的条件优化

用直径6 cm,高10 cm聚乙烯培养罐固体发酵蛹虫草(Cordyceps militaris),以固体发酵产物中虫草素含量为指标,从16个蛹虫草菌株中筛选出虫草素含量最高的菌株,考察固体发酵该菌株的培养基组成、培养时间、培养基装量、料液比、培养温度、接种量和添加物对虫草素含量的影响,得到了有利于蛹虫草固体发酵产虫草素的培养条件:培养罐装20 g小麦,按小麦干重6％的量分别加入玉米粉和黄豆粉,按料液比1∶1.4(w∶v,以小麦干重为基准)加入营养液(g/L:2.0 K2HPO4·3H2O,0.5 MgSO4·7H2O,16甘氨酸),培养温度为26℃,时间46 d,接种量10％.     

蛹虫草菌丝体培养特性的研究

从碳源、氮源、碳氮比、微量元素、温度、培养基初始pH值、光照强度等方面探讨了蛹虫草C．M．203菌丝体培养特性。结果表明：最适碳源为玉米粉,最适氮源为黄豆饼粉,最适碳氮比为20：1;K^＋、Mg^2＋、Zn^2＋、Fe^2＋、Cu^2＋、Ca^2＋和VB1对蛹虫草菌丝生长影响不大;最适温度为25℃,最适pH值为7,光照强度对菌丝的生长速度有抑制作用。     

蛹虫草液体深层发酵的研究

以蛹虫草菌丝体生物量为指标,运用单因素对比试验和正交实验,对蛹虫草液体培养基的碳、氮营养源以及最佳配方和培养条件进行了优化研究。结果表明:筛选出蛹虫草液体培养基最佳碳源为蔗糖,其次为麦芽糖;最佳氮源为酵母膏,其次为蛋白胨。筛选出蛹虫草液体培养基适宜配方为:蔗糖3%、酵母膏3%、KH2PO40.1%、MgSO40.15%;液体培养适宜条件的温度为24℃,pH 5.5,接种量为15%,摇瓶转速为140 r/min,发酵罐通气量为1∶1.2~1∶1.6V/(V.min)。     

高效液相色谱法检测蛹虫草中的虫草素含量

对蛹虫草固体培养物中的虫草素进行微波提取,建立了HPLC法测定虫草素含量的方法。采用Venusil MP—C18。色谱柱（5μm,4．6mm×150mm）,以甲醇和蒸馏水为流动相进行等梯度洗脱,流速1mL/min,检测波长260nm。结果表明,峰面积与虫草素浓度呈良好的线性关系（0．9997）,精密度高,稳定性好。经测定,试验所采用的蛹虫草中虫草素的含量为3．123mg／g。该法操作简便,灵敏度高,所需时间短,为虫草素快速分析提供了可靠依据。     

固体培养基上蛹虫草菌丝体生长情况的观察

采用固体培养基对多个蛹虫草菌株的菌丝体进行培养,观察菌株差别、温度高低和培养基成分对菌丝体生长的影响。结果表明,(24±1)℃培养的菌丝长势比较好;菌株间的菌丝萌发时间和萌发后的菌丝浓密程度差别较大;菌丝萌发后的一段时间内,菌落直径增长速度呈逐步加快的趋势;培养基间、菌株间的菌丝长满培养皿所需时间差异显著;PDA培养基中添加蛋白胨等附加成分有利于菌丝的生长,其中添加配比为蛋白胨3.00g·L-1、鸡蛋15.00g·L-1、KH2PO41.00g·L-1、MgSO41.00g·L-1和复合维生素0.04g·L-1的培养效果最好。     

人工蛹虫草子实体及大米培养基残基中虫草素的提取纯化方法

本实验主要对人工蛹虫草子实体及培养基中虫草素(3‘-脱氧腺嘌呤核苷)进行提取、纯化及纯度鉴定。结果表明：经过对蛹虫草子实体及培养基的粉碎、石油醚脱脂、80-85℃水浴12小时、调节等电点沉淀、732-NH4离子交换树脂的分离、浓缩、4℃下低温结晶，可得到一定纯度的虫草素晶体。     

我国蛹虫草人工栽培培养基的现状调查

调查了国内7个较大型栽培蛹虫草的产业化基地,深入直观地调查了蛹虫草常用培养基的种类、配方成分、制作技术、生产性能等方面的内容,并重点收集了不同产业化栽培培养基上蛹虫草子实体生长特征,以期在保证蛹虫草品质的前提下,得到最优的产业化栽培蛹虫草的培养基,为进一步扩大蛹虫草产业化栽培奠定基础。     

蛹虫草高产优良菌株的选育

探索了尖头及圆头蛹虫草组织分离和孢子分离选育方法,分离的不同部位、酒精消毒等对蛹虫草菌株的性状影响;通过直接观察法、镜检法、出草试验等对分离筛选优良菌株进行确认。     

两个蛹虫草菌株的人工栽培试验比较

采用人工栽培法,比较2个蛹虫草菌株在生物转化率、多糖含量、虫草酸含量等方面的差异,以及蚕蛹粉添加量对培养效果的影响。结果表明,供试的4个处理在生物转化率、多糖含量及虫草酸含量方面均存在极显著差异。蚕蛹粉的加入量与蛹虫草子实体、培养料中多糖及虫草酸的含量没有显著的相关性。综合各项数据,得出2号蛹虫草菌株与培养基A的组合具有明显优势的结论。     

蛹虫草深层发酵产虫草素培养基的优化

以蛹虫草(Cordyceps militaris(L.)Link)NS-810为菌种,通过对接种量的考察,探索不同孢子浓度对蛹虫草液体一级种制作效果的影响;通过单次单因子试验和正交实验,优化深层发酵产虫草素的最佳培养基,筛选制备蛹虫草液体一级种和液体发酵生产虫草素的最佳工艺。结果表明:孢子浓度3.0×10~8 cfu·mL~(-1)时制作的母种最适合作为蛹虫草菌种扩大培养中的一级种子液;深层发酵的最佳培养基配方为葡萄糖25g·L~(-1)、土豆100g·L~(-1)、鱼蛋白胨18g·L~(-1)、(NH_4)_2SO_40.8g·L~(-1)、KH_2PO_41.0g·L~(-1)、MgSO_4·7H_2O 0.5g·L~(-1)、蚕蛹粉5.0g·L~(-1)、维生素B118mg·L~(-1)、水1L。优化后虫草素的总产量为1 144.31mg·L~(-1),较基础培养基提高了1.46倍。分别以价格低廉葡萄糖和鱼蛋白胨作为发酵培养基的碳源和有机氮源,利于蛹虫草产业化发酵生产虫草素。     

蛹虫草液体发酵过程中虫草素含量的分析

以2个蛹虫草菌株2014072503-1和2014072301-1为试材,采用高效液相色谱(HPLC)法,分析蛹虫草40d液体发酵过程中其发酵液中的虫草素产量,研究了蛹虫草发酵时间对虫草素产量的影响,旨在确定虫草素开始产生、产量迅速升高、产量最高的3个关键时间点,为下一步对以上时间节点的菌丝样品进行转录组测序分析,进而挖掘与虫草素产量密切相关的候选基因奠定基础。结果表明:2个蛹虫草菌株发酵过程中产虫草素的起始时间点为发酵后3d,迅速升高的时间点是12d,虫草素产量最高的时间点2014072503-1号菌株为发酵后37d,而2014072301-1号菌株为发酵后34d。2014072301-1号菌株发酵产生的虫草素含量高(382.43μg·mL~(-1)),时间短(34d),更适于作为生产虫草素的菌株。     

人工培育蛹虫草优质高产的技术环节

人工培育蛹虫草优质高产的技术环节任士升（江苏省铜山县七庙虫草真菌厂棠张镇２２１１１３蛹虫草菌为兼性寄生菌,其生长基质及生态环境较一般食用菌特殊,故人工培育成功率不高;且在产量和质量上都较不稳定。我厂自１９９０年投入对该菌株的人工驯化,１９９３年投入...     

蛹虫草高产菌株人工栽培条件的优化

采用单因素试验考察了蛹虫草诱变菌株Z9人工栽培的最佳条件,并探索植物生长激素对诱变菌株生长的影响。试验结果表明：蛹虫草诱变菌株栽培的最佳的原料一大米蛹粉比（g/g）为100：15,原料含水量以65％为佳,最适子实体生长温度为23℃,最适pH为7．5,在500lx的散射光照时产量最高为5．13g;喷洒赤霉素能有效促进蛹虫草诱变菌株Z9的生长,培养26d子实体产量比未喷洒赤霉素提高7．7％。     

北虫草高产菌株在改良人工培养基生长的研究

利用本实验室选育的北虫草菌种S-6,试验使用改良的人工瓶栽的培养基,同对照虫草菌种做比较试验,跟踪观察菌株在培养基中的生长状况;对比结果表明,S-6菌种在改良的人工培养基上生长良好,生长速度和质量均超过对照菌株,此外,改良培养基的原材料成本较低,因些,这种北虫草菌种和改良的培养基很适合人工栽培和工业化生产。     

虫草液体深层发酵富硒的研究

研究了不同硒浓度、培养时间、pH、培养基种类等因素对虫草菌丝体生长量、富硒量、有机硒转化率的影响，探讨了虫草菌富硒的最优培养条件。结果表明其最优富硒培养条件为：培养基硒浓度60μg／mL，培养时间5d，pH6，培养基为麸皮培养基（％）：蔗糖3，麸皮2，NaN030．2，KH2V040．5。菌丝生长量最高可达1．916g/100mL，有机硒含量可达509．026μg／100mL。虫草有机硒转化率最佳培养条件为：培养基硒浓度20μg／mL，培养时间5d，pH7，培养基为马铃薯培养基（％）：蔗糖3，马铃薯20，NaNCh0．2，KH2PO40．5。其有机硒转化率最高可达18．44％。低浓度的硒可以刺激菌丝体生长，高浓度的硒对菌丝体生长有抑制作用，使有机硒转化率降低。     

深层发酵灰树花菌株的选育

通过固体斜面培养和液体摇瓶培养，对收集的四个灰树花菌株进行了比较试验。结果表明。灰3和灰4在固体斜面培养基上菌丝长速快、长势致密；灰3在液体摇瓶培养时菌球密度高、菌球直径小、菌丝生物量多、粗多糖含量高。     

纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A培养条件的优化

为优化纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的固体培养和液体培养条件,采用高效液相色谱法,测定分析固体培养培养料不同棉籽壳与麦麸比例配方,及液体培养不同碳源、氮源和培养时间的环肽Xylastriamide A含量差异。结果:固体培养,以培养料中的棉籽壳/麦麸比为70/30时,子实体的环肽Xylastriamide A含量较高,达578.20μg/g;液体培养,最佳碳源和最佳氮源分别为麦芽糖和酵母浸出粉,培养14天得到的菌丝球环肽Xylastriamide A含量分别达到9.77μg/g和19.95μg/g。     

内蒙古地区北虫草盆栽立体高产栽培技术

导读：北虫草是集食药功能于一体的珍稀食用菌，其近年栽培量逐年增加。高产栽培中，应选择适合品种，搭培养架进行盆栽立体栽培，使用纯小麦作培养基，采用液体菌种接种，加强发菌期、转色期、出草期管理，适时采收，采收前半个月不再浇水。