母牛抗精子抗体与精细胞GOT的释放

母牛因为反复无效的输精可能使血液中抗精子抗体不断升高而导致不孕。目前对牛精液品质的鉴定常常以谷—草转氨酶(GOT)的释放量作为鉴别精细胞完整性的可靠指标。 抗精子抗体引起了精子凝集,是否损伤了顶体,破坏了精细胞的完整?本试验以GOT的释放为指标来检测抗精子抗体对精细胞及顶体完整性的影响。     

母牛抗精子抗体与繁殖性能的关系

本试验用Kibrick和F-D试验法分别测定了母牛体内抗精子抗体的效价,结果处女牛普遍低;屡配不孕牛高;而怀孕牛中只有少数偏高。一些不孕牛经两种方法同时测定,其结果相似。对一组不孕牛同时测定了发情时子宫粘液和血液中的抗精子抗体,发现子宫粘膜(液)中同样可产生和存在着类似抗体。5头阳性不孕牛,分别用4头无血缘关系的公牛精液进行试验,其结果相似,没有发现精液的来源不同(公牛的血型)与这些牛的不孕有什么相关。     

不同品种公牛精液品质比较

试验选择体态状况良好能正常采精的西门塔尔牛、红安格斯牛、日本和牛种公牛各5头,分别对上述种公牛精液冷冻前后的密度、精子存活指数、精子顶体完整率、精子的畸形率等指标进行检测,探讨现行精液冷冻技术对不同品种公牛精液品质的影响。结果表明,西门塔尔牛的精液密度最大,红安格斯牛次之,日本和牛的精液密度最小,不同品种公牛精液密度之间差异极显著(P<0.01);原精存活率西门塔尔牛高于红安格斯牛和日本和牛,差异极显著(P<0.01),红安格斯牛和日本和牛之间差异不显著(P>0.05);鲜精精子畸形率、顶体完整率,西门塔尔牛、红安格斯牛和日本和牛之间差异均不显著(P>0.05)。西门塔尔牛的精子冻后存活率最低,红安格斯牛次之,日本和牛最高,3个品种公牛精子冻后存活率之间差异极显著(P<0.01)。     

热应激对西门塔尔牛精液品质及顶体反应相关酶活力的影响

为探讨夏季高温环境对西门塔尔种公牛精液品质和顶体反应相关酶活力的影响,选取年龄和健康状况相近,采精正常的西门塔尔成年种公牛30头,对其精液品质和顶体反应相关酶活力等指标按照春(3月-5月),夏(6月-8月),秋(9月-11月),冬(12月-2月)4个季节进行分组实验,并进行统计分析。结果表明:(1)夏季热应激可造成西门塔尔种公牛精液品质显著下降。采精量略有增加但随季节变化不明显(p>0.05);精子活力在夏季显著低于秋季(p<0.05),极显著低于春季和冬季(p<0.01);精液的密度夏季与秋、冬两季差异显著,极显著低于春季(p<0.01);夏季精子的顶体完整率和畸形率与春季、秋季和冬季存在显著差异,说明季节温度变化对西门塔尔种公牛精子顶体完整性和精子畸形有明显的影响。(2)夏季热应激可以使西门塔尔种公牛的几种重要顶体反应相关酶的活力降低。     

日粮中添加二氢吡啶对种公牛精液品质的影响

在种公牛日粮中添加二氢吡啶,饲喂量按每千克体重５计算。试验结果表明,试验组精子的活力、呼吸、３２ｐｉ摄入量、顶体完整率极显著地高于对照组（Ｐ＜００１）,而精子的畸形率极显著地低于对照组（Ｐ＜００１）,说明二氢吡啶可以提高精细胞质膜的完整性,促进精子的代谢和能量转化过程,从而改善了种公牛的精液品质。     

日粮中添加二氢吡啶对种公牛精液品质的影响

在种公牛日粮中添加二氢吡啶 ,饲喂量按每千克体重 5毫克计算。试验结果表明 ,试验组精子的活力、呼吸、32 Pi摄入量、顶体完整率极显著地高于对照组 (P <0 0 1) ,而精子的畸形率极显著地低于对照组 (P <0 0 1) ,说明二氢吡啶可以提高精细胞质膜的完整性 ,促进精子的代谢和能量转化过程 ,从而改善了种公牛的精液品质     

丝胶蛋白对牛精液冷冻效果的影响

精液在冷冻保存过程中易受氧化应激的影响,从而导致精液品质下降,丝胶蛋白具有抗氧化能力,可抑制由自由基产生的脂质过氧化。为研究精液稀释液中添加丝胶蛋白对牛精液冷冻效果的影响,采集4头公牛精液,将其分成5等份,在Optidyl稀释液中添加不同浓度丝胶蛋白(0,0.25%,0.5%,1.0%,2.0%),精液稀释后冷冻保存,使用计算机辅助精子分析系统检测解冻后精子的活力及运动参数,低渗肿胀试验检测质膜完整率,考马斯亮蓝染色法检测顶体完整率,分光光度计检测精浆中的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)等氧化应激指标。结果表明：与对照组相比,稀释液中添加0.5%的丝胶蛋白可显著提高解冻后牛精子的活力、运动参数、顶体完整率、质膜完整率及SOD含量,并显著降低ROS和MDA水平(P<0.05)。这表明在Optidyl稀释液中添加0.5%的丝胶蛋白可保护牛精子免受氧化应激损伤,有效提高冷冻后精液品质。     

添加V_(B_(12))、V_E、V_C对无角道塞特绵羊精液冷冻效果的影响

探讨在无角道塞特绵羊冷冻精液稀释液中添加VB12、VE、VC对精子冷冻品质的影响。在无角道塞特绵羊冷冻精液稀释液中添加不同质量浓度的VB12、VE、VC制作细管冻精,解冻后观察精子的成活率和顶体完整率等指标。结果显示,VB12添加0.003 g/L时能够显著提高解冻后的精子活率(P0.05)和精子顶体完整率(P0.05);VE添加2.5 g/L时,能够极显著提高解冻后的精子活率(P0.01)和顶体完整率(P0.01);VC的添加4.4 g/L时能够显著提高解冻后的精子活率(P0.05),但对冷冻后精子的顶体完整率无影响。在稀释液中添加VB12、VE和VC能使解冻后精子品质得到提高。VE添加后能够极显著提高冷冻精子的顶体完整率,应该优先考虑添加。     

富硒益生菌对种公猪精液品质的影响

在成年长白种公猪的饲料中,以0.3 mg/kg(以硒浓度计算)添加富硒益生菌,研究了富硒益牛菌对种公猪精液品质的影响.结果显示,试验组种公猪精液中的精子活率、顶体完整率、还原型谷胱甘肽过氧化物酶的活性均比对照组高,但精液中的精子畸形率比对照组低,说明富硒益生菌能明显改善种公猪的精液品质.     

除去精浆、添加维生素E及水浴平衡对莎能奶山羊精液冷冻效果的影响

主要探讨精液离心、添加VE及平衡方法对山羊细管冻精冷冻-解冻后活力、顶体完整率等的影响,为提高山羊精液冷冻保存效果提供依据.试验1:将鲜精稀释后分为3组,第1组为稀释精液1 000 r/min离心6 min,去掉一半的上清液;第2组用相同的方法反复离心3次,完全去掉精浆;第3组不离心,做为对照.试验2:在稀释液中添加15 g/L VE,以不添加组作为对照.试验3:采用纱布包裹和水浴平衡两种方法.试验结果表明,离心去掉部分精浆组和离心去精浆组精子冷冻-解冻后的活力比不离心组高,差异显著(P＜0.05).精子顶体完整率和畸形率有所下降,但与对照组相比较差异不显著(P＞0.05).离心去掉部分精浆组和离心完全去精浆组相比,精子冷冻一解冻后的活力、顶体完整率和畸形率差异不显著(P＞0.05).冷冻稀释液中添加VE组的顶体完整率显著提高(P＜0.05),畸形率变化与对照组无差异(P＞0.05),精子活力提高效果也不明显(P＞0.05).精液冷冻前平衡方法以水浴法为好,与纱布包裹平衡组相比,水浴平衡组的活力和顶体完整率高(P＜0.05),精子畸形率较低(P＜0.05).可见,精液离心后去掉适量精浆可显著提高冷冻后精子的活力;添加VE可显著提高精液冷冻后精子的顶体完整率;与纱布包裹平衡法相比,水浴平衡法可显著提高精液冷冻后精子的品质.     

HSP90蛋白表达量与牛精子抗冻性的关系

【目的】探索热应激蛋白90（HSP90）表达量与牛精液冷冻-解冻后品质的关系。【方法】采用假阴道法采集身体健康、年龄2～4岁的9头荷斯坦奶牛精液（编号1～9）,测定新鲜精液指标（活力、形态、活率和密度）,评定其品质,合格的精液样品经过冷冻解冻后检测其精子活率、质膜完整率和顶体完整率,并根据冻后品质将其分为HFTs(High freezing resistance teams)和LFTs（Low freezing resistance teams) 2组,对精子HSP90蛋白进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳和Western blot检测,分析其表达量与精子抗冻性的关系。【结果】不同牛个体精液冻后品质相差较大。SDS-PAGE电泳结果显示,HFTs组的分子质量约为90 ku的蛋白表达量显著高于LFTs组（P＜0.05）,经Western blot分析,该蛋白为HSP90。HSP90蛋白表达量与冷冻-解冻后的牛精子品质呈明显正相关,其与精子活率、顶体完整率、质膜完整率的相关系数分别为0.364,0.447和0.402。【结论】HSP90蛋白表达量可以作为判断牛精子抗冻性的指标之一。     

产蛋母鸡血循中记忆B细胞数量与卵黄中I_gY效价的关系

应用细胞化学法和精子凝集反应研究鸡血循中记忆B细胞数量与卵黄中抗鸡精子I_gY效价的关系。鸡血涂片按古德全改良法显示记忆B细胞(MBL)。卵黄I_gY用35％硫酸铵溶液提取。I_gY效价用精子凝集反应法检测。结果发现,随着卵黄I_gY效价的升高,血循中记忆B细胞数量也相应增加。这提示血循中MBL数量的增多可作为判断免疫效果的一个指标。     

他克林对猪精子冻后质量、抗氧化能力及糖代谢的影响

旨在研究他克林对猪精液冻后质量、抗氧化能力及糖代谢的影响机制.手握法采集12头18～24月龄健康杜洛克种公猪精液,在其冷冻保存稀释液中加0.10 mmol/L他克林并冷冻保存,检测冻后精子活率、质膜完整率、顶体完整率和畸形率、线粒体膜电位、DNA完整性,同时利用试剂盒检测总抗氧能力、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、总胆...     

超低温保存对藏獒犬精子质量及超微结构的研究(英文)

[目的]该研究旨在观察超低温保存对藏獒犬精子质量及超微结构的影响。[方法]通过精子运动度、膜完整率及顶体完整率评价4种冷冻保护剂、冷冻时距液氮面3种不同高度及添加物(SDS和Vc)对精子超低温冷冻效果的影响;在此基础上,在扫描电镜和透射电镜下观察超低温冷冻对精子超微结构的影响。[结果]试验1表明,EG作为冷冻保护剂获得了最好的冷冻效果,解冻后精子运动度、膜完整率及顶体完整率分别为36.3%、38.0%和42.0%。但EG和甘油作为冷冻保护剂并无显著差异存在(P>0.05)。试验2表明,距离液氮面5cm冷冻时冷冻效果最好。但除顶体完整率外,冷冻高度2和5cm间不存在显著差异(P>0.05)。试验3表明,稀释液中单独或共同添加十二烷基磺酸钠(SDS)和维生素C(Vc)均能改善精子冷冻-解冻效果。单独添加SDS或Vc时,除单独添加Vc组表现精子冷冻-解冻后运动度更低外(P<0.05),其它指标并无显著差异存在(P>0.05)。共同添加SDS和Vc时,精子冷冻效果最好,精子解冻后运动度、膜完整率和顶体完整率分别为44.1%、48.0%和48.2%。超微结构显示超低温保存引起藏獒犬精子不同程度的损伤,顶体损伤更严重,如顶体肿胀、囊泡化,甚至顶体消失。[结论]冷冻保护剂EG、距液氮面5cm高度及共同添加SDS和Vc可提高精子超低温保存效果,但超低温对精子超微结构仍具有一定损伤作用。     

热应激对肉用种公牛精液品质及血清生化指标的影响

用利木赞种公牛和夏洛来种公牛各5头为试验牛，研究了热应激对其精液品质及血清生化指标的影响。结果表明：（1）夏季热应激期原精活力、冻精活力、活精子百分数、顶体完整率均处于最低水平；（2）夏季肉用种公牛的血清睾酮、T3、LH、皮质醇的含量分别为4．15pg/mL、1．11pg/mL,48.12pg/mL，4．89pg/mL，极显著低于春、秋、冬3个非热应激季节（P＜0．01）；（3）肉用种公牛夏季血糖含量最低，与春、秋、冬3个非热应激季节相比分别下降38．3％（P＜0．01）、12．1％（P＜0．01）、19．9％（P＜0．01）；（4）夏季热应激期肉用种公牛血清钠、钾、钙、镁均处于最低水平，显著低于非热应激季节；（5）肉牛种公牛夏季血清GPT、GOT活性最高，分别为33．55U／L和75．39U／L，而血清CK则处于较低的水平。     

不同冷源对民猪精液冷冻保存效果的影响

用干冰和液氮作为冻源对民猪精液冷冻效果进行研究,包括对精子活率及顶体完整率的影响.结果表明,以干冰为冻源进行民猪精液冷冻,解冻后精子活率为43.5％,顶体完整率为52.2％;以液氮为冻源进行民猪精液冷冻,解冻后精子活率为41.8％,顶体完整率为51.5％,二者差异不显著.     

猪精液颗粒冷冻技术的研究

为提高猪冻精质量,加速猪冻精在生产上的应用,本试验以解冻后的精子活率、顶体完整率和体外受精(IVF)结果作为判定指标,探讨了冷源和Equex.STM对猪精液颗粒冷冻效果的影响。手握法采集成年、健康种公猪精液,分别采用含有Equex.STM的稀释液和普通稀释液进行两步法稀释,然后以干冰或液氮为冷源进行精液冷冻。结果表明,以干冰为冷源滴冻精液冻后活率为0.487833±0.046761,顶体完整率为0.782±0.039704,而以液氮为冷源的方法冻后活率为0.3334±0.055734、顶体完整率为0.5578±0.068482,前者在这两项指标上均显著优于后者(P<0.05)。另外,在稀释液中添加Equex.STM,以干冰为冷源进行滴冻,可使冻精顶体完整率极显著提高(P<0.01)。以含有Equex.STM的稀释液采用干冰滴冻的冻精进行IVF,胚胎卵裂率、囊胚率分别为0.5316±0.125582和0.216±0.053198。结果表明,采用Equex.STM作为冷冻保护剂并以干冰作为冷源可以获得高质量的猪冷冻精子。     

添加剂在猪精液冷冻保存中的应用

猪精液的冷冻保存显著影响猪精子的运动学参数,损伤精子质膜、顶体和DNA完整性,降低解冻后精子活率和受精能力.近年来,在以甘油和蛋黄作为冷冻保护剂的基础上,为了有效降低冷冻-解冻对精子的损伤,提高解冻精液的受精能力,研究人员将OEP、抗氧化剂(甲基黄嘌呤、丁羟基甲苯、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、褪黑素和维生素E等)、2-羟丙基β环糊精以及透明质酸等物质作为添加剂应用于猪精液的冷冻保存,结果表明这些物质在保护精子质膜和顶体完整性,提高解冻后精子活力、活率和受精能力等方面均有显著作用.     

碳氮管理措施对冬小麦/夏玉米轮作体系作物产量、 秸秆腐解、土壤CO2排放的影响

【目的】系统地研究华北平原冬小麦/夏玉米轮作体系对不同碳氮管理措施的响应,为作物增产、土壤培肥、环境友好的“三赢”局面提供数据支持和理论依据。【方法】分别采用Nmin测试法、尼龙网袋埋藏法、静态碱液吸收法研究不同碳氮管理对冬小麦/夏玉米不同时期0—1 m土层硝态氮累积量、秸秆腐解、土壤CO2排放的影响。【结果】基于Nmin测试法的优化碳氮（Nopt, C+Nopt）处理和平衡氮素的碳氮（C+M, C+W）处理在冬小麦产量上为传统碳氮（Ncon, C+Ncon）处理的100.8%—115.9%;在夏玉米产量上,为传统处理的96.0%—116.4%;且能够节省48.2%—70.4%的氮肥用量。传统处理0—1m土层硝态氮累积量最高可达456.7和419.8 kgN•hm-2,而优化处理和平衡处理最高仅为283.3和180.6 kgN•hm-2,传统处理土壤中的硝酸盐被淋洗的风险要远高于优化处理和平衡处理。在低温干燥的冬小麦季,玉米秸秆腐解较慢,最后秸秆腐解率为61.7%—70.1%;在高温多雨的夏玉米季,小麦秸秆腐解较快,最后秸秆腐解率为56.7%—79.3%。土壤CO2排放具有明显的季节性变化,冬小麦季的日平均CO2排放量为4.8—10.8 gC•m-2,而夏玉米季为12.7—20.7 gC•m-2。施有机肥处理的土壤CO2排放量最大,为3 844.2和4 642.3 gC•m-2,且显著高于其它处理。【结论】基于Nmin测试法的优化碳氮管理措施和平衡氮素的碳氮管理措施不仅能够减少氮肥投入,稳定作物产量,还能降低0—1 m土层硝态氮累积量,培肥土壤。     

番茄红素对山羊精液冷冻保存效果的影响

为研究番茄红素对山羊精液冷冻保存效果的影响,在山羊精液冷冻稀释液中添加不同质量浓度(0、0.5、1.0、2.0、4.0mg/mL)的番茄红素,检测冷冻-解冻后精子的活率、顶体完整率、质膜完整率、线粒体活性,并用试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果表明,1.0mg/mL组的冷冻保存效果最好,精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性分别达到52.04%、51.33%、53.57%和49.31%,显著高于对照组,且SOD、CAT、GSH-Px的活性也显著高于对照组;0.5mg/mL组与2.0mg/mL组的精子活率、顶体完整率、质膜完整率、线粒体活性及CAT和GSH-Px活性差异不显著;4.0mg/mL组的精子活率、顶体完整率、质膜完整率、线粒体活性及SOD和CAT活性与对照组差异不显著。因此,在山羊精液冷冻稀释液中加入1.0mg/mL的番茄红素对山羊精液具有显著的保护作用,能进一步提高山羊冻精品质。