慢性束缚与慢性不可预期温和应激抑郁模型小鼠的行为学比较及其发生机制研究

【目的】通过比较慢性束缚应激(Chronic restraint stress,CRS)与慢性不可预期温和应激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)对C57BL/6小鼠行为学指标及大脑海马区相关功能的影响,探讨抑郁症的发生机制。【方法】分别建立CRS及CUMS小鼠模型,通过旷场试验、强迫游泳试验和悬尾试验测定小鼠的行为学指标;取小鼠脑组织,制备常规石蜡切片,运用苏木素-伊红(HE)与免疫组化染色考察小鼠大脑海马区组织形态及5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)的表达情况,并运用荧光分光光度法测定小鼠海马组织单胺氧化酶活性的变化。【结果】与空白对照组相比,CRS组小鼠的水平穿格数、直立次数及体质量均显著减少,悬尾及强迫游泳试验累计不动时间百分比无明显变化(P>0.05);而CUMS组小鼠自发活动无明显改变(P>0.05),但悬尾及强迫游泳试验累计不动时间百分比极显著增加(P<0.01),体质量显著下降。脑组织形态学研究结果显示,CUMS组小鼠海马CA1、CA3区和齿状回均出现萎缩,而CRS组小鼠海马CA1区未受影响,CA3区和齿状回均发生萎缩。与对照组相比,CRS组与CUMS组小鼠大脑海马单胺氧化酶活性升高,5-HT1AR表达均减少,差异均分别达显著和极显著水平。【结论】CRS和CUMS均可不同程度地引起抑郁样症状,CRS对探索性行为的抑制较明显,CUMS则可引发典型的行为绝望状态;CRS与CUMS组小鼠的行为学差异可能与2组抑郁模型动物脑内海马区组织结构及功能变化的差异存在相关性。     

不同抗热应激添加剂对热应激小鼠精液品质的影响

为探讨抗热应激添加剂对热应激状态下小鼠精液品质的影响,选取年龄和健康状况相近的成年雄性鼠150只,按照常温、热应激、添加剂处理后热应激的方式进行分组试验,对各组精液品质等指标进行统计分析。结果表明,3组热应激添加剂在缓解热应激小鼠的精液品质的影响效果上存在显著差异,其中效果最好的为中药组,其次是电解质组,最后是维生素组。从Hsp70mRNA表达量上来看,抗热应激添加剂组明显高于常温对照组。但与热应激组比较,维生素组与电解质组表达量低,而中药组表达量高。     

热应激对小鼠精子发生及其性能的影响

摘要 取24只小鼠分为慢性热应激组(EGⅠ)、急性热应激组(EGⅡ)和空白对照组(CG)。EGⅠ组每天早上移入40℃(相对湿度为53％～56％)的热应激箱内热应激10min,连续9d,到第10d,EGⅠ和EGⅡ同上热应激15min。结果显示:在热环境下,EGⅠ、EGⅡ组动物的肛温均比CG组高,EGⅡ组又比EGⅠ组高;3组动物睾丸重量及指数无明显变化;EGⅠ、EGⅡ两组动物精子数量及活动率均比CG组明显低(P<0.01);畸形率比CG组均高,EGⅠ组的精子数量、活动率显著低于EGⅡ组,畸形率极显著地高于EGⅡ组(P<0.01);在畸形的精子中,CG组主要以头部缺失为主,而EGⅠ组却以尾部缺失为主,EGⅡ组头部、尾部缺失相近。结果表明:热应激对精子的发生过程有毒性作用,抑制精子的形成,降低精子的数量及活动性能。     

双峰驼自然发酵乳对小鼠抗应激能力的影响

为探讨双峰驼自然发酵乳对机体抗应激能力的影响,本试验以昆明种小白鼠为实验动物,采用经典抗应激试验方法和慢性热应激试验方法,研究了自然发酵驼乳对急性和慢性应激小鼠的影响.将试验小鼠随机分成空白对照组、自然发酵驼乳低剂量和高剂量组,给予不同剂量的自然发酵驼乳一定时间.观察双峰驼自然发酵乳对小鼠负重游泳时间、酎常压缺氧时间、耐高温时闻和酎低温时间的影响;定量检测对慢性热应激小鼠的日增重、饲料转化率、胸腺指数和脾脏指数以及血清葡萄糖、白蛋白和总蛋白含量、碱性磷酸酶(AKP)活力、肌酸激酶(CK)活力、乳酸脱氢酶(LDH)活力等的影响.结果表明,双峰驼自然发酵乳能显著延长小鼠负重游泳时间,耐缺氧、耐高温和耐低温存活时间(p<0.05);增加应激小鼠的日增重和饲料转化率,并提高脾脏指数(p<0.05);能极显著(p<0.01)增加血清葡萄糖含量和总蛋白含量;能极显著降低血清AKP和CK活力.因此,自然发酵驼乳对机体急性应激和慢性热应激均有显著的缓解作用.     

仙人掌提取物对糖尿病小鼠应激能力的影响

目的:探讨仙人掌提取物对糖尿病小鼠应激能力的影响。方法:小鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)溶液150mg/kg建立小鼠糖尿病模型。将小鼠分成4组:正常对照组、模型对照组、仙人掌小剂量组、仙人掌大剂量组。给药组灌胃分别给予仙人掌提取物1.0g/kg和2.0g/kg,1次/d,连续2周。各组进行耐常压缺氧试验、游泳试验、耐寒试验和耐高温试验。结果:仙人掌提取物能提高糖尿病小鼠在常压缺氧条件下的生存时间,显著延长糖尿病小鼠游泳时间和耐高温时间,降低小鼠在低温环境下的死亡率。结论:仙人掌提取物能提高糖尿病小鼠的应激能力。     

热应激对小鼠垂体前叶细胞构筑的影响

[目的]通过在急性热应激条件下对小鼠垂体前叶细胞构筑变化的观察与测量,确定热应激对小鼠垂体前叶细胞构筑的影响。[方法]采用恒温恒湿热应激箱(42℃,相对湿度35.4%)建立热应激模型。常规石蜡切片,HE染色,在光镜下对垂体前叶细胞构筑进行观察。[结果]热应激组Ⅰ、Ⅱ的细胞密度、嗜碱性细胞概率、嗜碱性细胞体面积以及热应激组Ⅱ嗜酸性细胞体面积与对照组差异极显著(P<0.001)。热应激组Ⅰ嗜酸性细胞概率、嗜酸性细胞体面积与对照组差异显著(P<0.05)。[结论]热应激可导致垂体前叶细胞快速增殖和正常形态发生改变,甚至引发细胞凋亡。     

热应激对小鼠血液理化指标的影响

为了说明热应激对动物造成的影响,将20只昆明小鼠随机分成2组,一组为对照组,另一组为热应激组。其中热应激组在生化培养箱内饲养,以模拟夏季高温天气,致使应激发生。24h后小鼠眼底静脉丛采血,检测各种理化指标。结果表明,与对照组相比,热应激组的K＋、C1-、GOT、GPT浓度显著升高（P〈0.01）,Na＋、TP、ALB、HB、AKP和SOD的浓度显著降低（P〈0.05或P〈0.01）,从而将热应激的伤害具体化,以期引起人们对动物福利问题的关注。     

百事乐胶囊对慢性应激抑郁模型小鼠血清IL-1β和TNF-α的影响

目的探讨百事乐胶囊对慢性应激抑郁小鼠行为学及血清白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的影响。方法 60只雄性昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、百事乐胶囊高、中、低剂量组和氟西汀组。除正常组外,其他组给予21 d慢性不可预见性应激造模。每天造模前各组小鼠分别予以相应药物灌胃治疗,模型组以等量蒸馏水灌胃。测定小鼠体质量,通过敞箱实验和悬尾不动实验检测小鼠行为学变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清IL-1β和TNF-α的含量。结果模型组小鼠发生明显的行为学改变,水平和垂直活动明显减少,悬尾不动时间明显延长;百事乐胶囊高、中、低剂量组能显著增加小鼠体质量(P<0.05),改善小鼠的行为学指标(P<0.01),百事乐胶囊高、中剂量能降低血清IL-1β和TNF-α水平,与模型组比差异有统计学意义(P<0.05);与氟西汀组相比,百事乐胶囊高、中、低剂量组各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论百事乐胶囊能显著改善慢性应激抑郁小鼠的行为学变化,其作用可能与下调慢性应激所致的血清IL-1β和TNF-α水平有关。     

中药复方剂对小鼠抗应激作用的研究

以小鼠为研究对象,通过持续给药和应激处理,观察试验组与对照组在不同阶段小鼠体重和采食量等的变化。试验期为15d,试验结束后处死小鼠,称量体重和饲料消耗量,分析体增重、日增重和饲料转化率。结果表明:应激时,动物的体增重和饲料转化率等均不高,但服用中药复方剂的试验组反应明显要比对照组小。此为中药复方剂在临床生产中作为抗应激剂提供一定的理论指导和依据。     

刺蓝抗疲口服液对小鼠免疫及抗应激作用的影响

目的研究刺蓝抗疲口服液的抗应激作用及对免疫功能的影响。方法将小鼠分为6组:空白组,模型组,口服养生精组,刺蓝抗疲口服液低、中、高剂量组,采用小鼠注射环磷酰胺和腹部手术分别建立免疫抑制和创伤模型,观察刺蓝抗疲口服液对免疫低下小鼠碳粒廓清、血清溶血素、创伤小鼠负重游泳耗竭时间和常压耐缺氧存活时间的影响。结果与模型组比较,刺蓝抗疲口服液高剂组碳粒廓清指数、血清溶血素明显提高,差异有统计学意义(P<0.01);小鼠负重游泳时间和耐缺氧的生存时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论刺蓝抗疲口服液具有抗应激和增强小鼠非特异性免疫及体液免疫功能的作用。     

游泳应激对小鼠心肌和腿肌中抗氧化能力的影响

为探讨游泳应激对小鼠心肌和腿肌抗氧化能力的影响,试验选取50只小鼠进行游泳试验,分别于游泳前、游泳10、20、30、50 min后随机选取10只小鼠眼眶采血致死,采集心肌和腿肌,测定样品中MDA含量、SOD和GSH-Px活性.结果表明,10 min游泳应激后,小鼠心肌MDA含量显著增加(P＜0.05),20min和30 min后轻微下降,50 min后又显著上升(P＜0.05),游泳过程中小鼠心肌SOD和GSH-Px活性均无显著变化.游泳过程中小鼠腿肌MDA含量均无显著变化,10 min和20 min游泳应激后,腿肌SOD活性显著降低(P＜0.05),之后有所回升,50 min后SOD活性仍显著低于对照组(P＜0.05).游泳过程中腿肌GSH-Px活性持续升高,且40 min组显著升高(P＜0.05).     

急性热应激小鼠模型实验装置的改进

[目的]为研究急性热应激提供实用可靠的小鼠模型。[方法]采用恒温热水循环对自行设计的热应激舱进行加热,应用生物机能实验系统等数显工具对小鼠肛温、舱内温湿度进行测量,并对2种舱内温度对热应激的影响进行了对比研究。[结果]该改进模型可使小鼠在18～21min内肛温达到41℃并形成急性热应激,并且动物肛温与经受热应激的时间具有较好的线性关系（r=0．9896,r=0．9826）。当舱内温度为40℃,进行热应激时肛温升高时间延长,但与41℃舱内温度相比无差异显著性。[结论]该模型研究急性热应激科学、准确、可靠、易重复易操作,是开展急性热应激方面研究不可或缺的模型。     

运输应激对小鼠免疫器官结构及热休克蛋白表达的影响

采用苏木精–伊红(HE)染色、醋酸铀–枸橼酸铅染色和免疫组织化学染色,对模拟运输应激小鼠免疫器官(胸腺、淋巴结和脾脏)的结构和3种热休克蛋白(HSP27、HSP70和HSP90)的表达情况进行分析。结果表明：试验组小鼠的胸腺、淋巴结和脾脏结构均受到不同程度的损伤,胸腺髓质增大,皮质中血管充血,淋巴小结缩小,脾小结增大,中央动脉被破坏,细胞发生凋亡等;淋巴细胞核核膜呈锯齿状甚至碎裂,嗜酸性粒细胞胞核溶解消失,浆细胞破坏更为严重,线粒体肿胀,嵴断裂或消失等;HSP27在淋巴小结中的表达逐渐降低,在淋巴结髓质和脾脏中的表达有所增加,HSP70在淋巴结髓质中的表达逐渐降低,在淋巴小结和脾脏红髓中的表达升高,HSP90仅在淋巴结中有明显表达。综上可知,运输所引起的应激反应会对小鼠免疫器官的结构造成严重损伤,应激相关热休克蛋白HSP27、HSP70和HSP90的表达情况也会发生一定的变化,提示热休克蛋白与运输应激之间可能存在着某些调控关系。     

慢性冷应激对荷斯坦奶牛血清某些激素水平的影响

以健康荷斯坦奶牛为试验对象,研究慢性冷应激对血清内分泌激素水平的影响规律.结果表明:随着环境温度的季节性下降.血清T3、T4、ALD含量升高,其中-20.2℃时血清T3含量最高;血清T4、ALD含量均在-15.1℃和-20.2℃时较高;血清INS含量各组间差异不显著(p>0.05).表明慢性冷应激可能影响奶牛血清中某些...     

蓝莓提取物对老年小鼠学习记忆和抗应激能力的影响

目的:探讨蓝莓提取物对老龄小鼠学习记忆和抗应激能力的影响。方法:将12月龄小鼠随机分为4组:老龄对照组、维生素E组、蓝莓低剂量组和蓝莓高剂量组,蓝莓组给予不同剂量蓝莓提取物每日灌胃给药,老龄对照组给以相同体积的生理盐水,连续3周。利用Morriss水迷宫试验观察小鼠学习记忆能力,检测小鼠耐常压缺氧存活时间、游泳时间、耐寒存活数量和小鼠耐高温存活时间。结果:蓝莓组与老龄对照组比较,反应时间和潜伏期均缩短,错误次数减少,差异均有统计学意义(P0.05);蓝莓提取物能延长老龄小鼠缺氧存活时间、游泳时间、高温存活时间(P0.05),提高老龄小鼠耐寒能力(P0.05)。结论:蓝莓提取物可提高老龄小鼠学习记忆和抗应激能力。     

宁夏枸杞子对小白鼠抗应激能力的影响

给小白鼠腹腔注射宁夏枸杞子水煎液，从抗疲劳，耐缺氧和耐寒冷三个方面测试其对动物机体抗应激反应能力的影响。结果试验组小白鼠在不良环境中的生存时间延长，与对照组相比，差异显著。表明，宁夏枸杞子具有一定的抗应激作用。     

牛至香酚对LPS所致的免疫应激小鼠脾脏细胞因子及核转录因子mRNA表达的影响

将80只小鼠随机分成5组(空白对照组、模型组及牛至香酚低、中、高剂量组),牛至香酚低、中、高剂量组小鼠分别按25、50、100 mg·kg~(-1)的剂量灌胃牛至香酚,空白对照组、模型组灌胃相同体积的橄榄油,每日1次,连续14 d.第15天时,牛至香酚试验组、模型组小鼠腹腔注射8 mg·kg~(-1)脂多糖(LPS),6 h后采集脾脏组织,用qRT-PCR检测小鼠脾脏细胞因子(TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-1β)、NF-κB及核转录因子(T-bet、GATA-3)mRNA的表达量,研究牛至香酚对LPS所致的免疫应激小鼠脾脏细胞因子及核转录因子mRNA表达的影响.结果表明:与空白对照组相比,模型组小鼠TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-1β、NF-κB、T-bet mRNA的表达量提高(P<0.01),GATA-3 mRNA的表达量降低(P<0.01);与模型组相比,牛至香酚低、高剂量组IL-1β mRNA的表达量降低(P<0.01),低、中、高剂量组IL-6、TNF-α mRNA的表达量降低(P<0.01、P<0.05),低、中、高剂量组IFN-γ mRNA的表达量极显著或显著降低(P<0.01或P<0.05),高剂量组NF-κB mRNA的表达量降低(P<0.05),低、中、高剂量组T-bet mRNA的表达量降低(P<0.05),中剂量组GATA-3 mRNA的表达量提高(P<0.05).由本试验结果可知,牛至香酚通过提高或降低小鼠脾脏细胞因子、核转录因子的表达,调节免疫应激小鼠的免疫功能.     

热应激小鼠胚胎着床模型的建立

模拟夏季高温环境对孕鼠的应激作用,建立热应激影响昆明白小鼠胚胎着床的模型。试验设为对照组(23℃±2℃)、40℃和42℃应激组(小鼠妊娠1～4d,分别应激2h),比较观察妊娠5、6、7d小鼠胚胎着床数及子宫状况和产仔数。结果表明,与对照组相比40℃和42℃应激组妊娠5d(11.00±2.65、10.00±2.12vs15.00±1.58,P0.05)、6d(11.40±3.21、10.60±2.30vs 15.00±0.71,P0.05)、7d(11.00±2.55、11.00±1.58vs 15.60±1.67,P0.05)胚胎着床率显著下降,产仔数(8.60±1.14、8.40±1.82vs 11.40±1.82,P0.05)也显著下降;且相比对照组其着床位点均较少且分布失衡。40℃和42℃应激组之间无显著差异,以42℃应激组影响相对较大。可见,胚胎着床前孕鼠连续4d40℃、42℃应激2h,可显著影响小鼠的繁殖能力。42℃可作为影响小鼠胚胎着床的热应激模型。     

山药多糖对小鼠的抗应激作用研究

为探讨山药多糖的抗应激作用及其机制。将120只雄性SPF级昆明种小鼠随机分为4组,即对照组和山药多糖低、中、高剂量组,每只小鼠每天分别以0、100、200、400 mg/kg的剂量饲喂山药多糖,试验期30 d,测定小鼠力竭游泳时间及运动后肝糖原、血清尿素氮、血乳酸含量。结果显示,与对照组相比,山药多糖各剂量组小鼠力竭游泳时间和运动后肝糖原含量均提高,低剂量组与对照组差异不显著,中、高剂量组均极显著提高,力竭游泳时间分别提高99.03%、199.64%,运动后肝糖原含量分别提高73.44%、154.39%;运动后山药多糖各剂量组小鼠体内血清尿素氮、血乳酸含量均降低,低剂量组与对照组差异不显著,中、高剂量组均极显著降低,血清尿素氮含量分别降低28.44%、43.75%,血乳酸含量分别降低15.22%、24.29%。可见,山药多糖具有显著的抗应激作用,且有明显的量效关系。     

热应激条件下小鼠睾丸组织HSP70基因表达谱的研究

本试验建立了不同温度、不同时间热应激实验小鼠动物模型,采用Real-time PCR和Western-blot方法检测了小鼠睾丸组织热应激蛋白70(HSP70)在mRNA和蛋白质水平的表达规律。结果表明:25℃时,HSP70在mR-NA和蛋白质表达水平没有变化;在31℃、34℃和37℃时,随应激时间的延长,HSP70mRNA和蛋白质的表达均呈现先升高后下降的趋势;40℃时,HSP70mRNA和蛋白质始终持续高表达。结论:小鼠受热应激后,睾丸组织HSP70mRNA和蛋白质均随着温度和时间的增加呈规律性变化,本研究为探索HSP70对精液品质的影响奠定了基础。