Lrh-1基因在湖羊HPG轴中表达量变化研究

[目的]揭示湖羊发情周期不同阶段下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴组织中Lrh-1基因的表达变化规律。[方法]建立了湖羊Lrh-1基因的实时荧光定量(qRT-PCR)检测体系,测定其在发情前期、发情期、发情后期和间情期湖羊的下丘脑、垂体和卵巢间质组织中的表达量,分析Lrh-1基因在湖羊HPG轴的表达随发情周期变化的规律。[结果]建立的湖羊组织Lrh-1 mRNA检测体系扩增效率为92.44%,扩增效果良好。在湖羊的下丘脑、垂体和卵巢间质组织中均检测到Lrh-1基因mRNA的表达。其中,在发情后期下丘脑和卵巢间质组织中Lrh-1 mRNA相对表达量显著高于其他阶段的表达量(P0.05),垂体组织中Lrh-1 mRNA相对表达量在发情周期不同阶段间差异不显著(P0.05)。[结论]Lrh-1基因参与发情周期湖羊下丘脑、垂体和卵巢功能的行使,并且该基因的表达量变化可能与湖羊发情周期有关。     

营养水平对湖羊生长性能、血清生化指标、屠宰性能和肉品质的影响

[目的]本试验旨在探究不同营养(能量和蛋白)水平日粮对湖羊生长性能、血清生化指标、屠宰性能和肉品质的影响。[方法]选择40只体质量为(18.35±1.39)kg的湖羊公羔,随机分为4组,每组10只。设计4种日粮水平饲喂湖羊公羔,分别为对照组(代谢能8.40 MJ·kg~(-1),粗蛋白12.84%),高蛋白(HP)组(代谢能8.68 MJ·kg~(-1),粗蛋白15.33%),高能量(HE)组(代谢能9.70 MJ·kg~(-1),粗蛋白13.05%)和高能、高蛋白(HEP)组(代谢能9.66 MJ·kg~(-1),粗蛋白15.44%)。试验期60 d。在试验开始和结束时测定羔羊日增质量(ADG)、平均采食量(ADFI)和料重比(F/G)等生长性能指标,并采集血液样品分析总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、尿素氮(BUN)、血糖(GLU)和甘油三酯(TG)等血清生化指标,同时在试验结束时进行屠宰试验,测定活体、胴体、血液、头、蹄、皮毛、内脏及消化道质量等屠宰性能以及p H值、失水率和熟肉率等肉品质指标。[结果]3个试验组(HP、HE和HEP)的终末体质量和ADG均显著高于对照组(P0.05);F/G的变化规律为对照组显著高于HP组,HEP组显著高于HE组(P0.05)。血清TP含量从大到小依次为HEP组、HP组、HE组和对照组,BUN浓度从高到低为HP组、HEP组、HE组和对照组,差异显著(P0.05);HE组的GLU和TG浓度显著高于其他3组(P0.05)。3个试验组宰前活质量和胴体质量显著高于对照组(P0.05);HE组和HEP组的屠宰率和眼肌面积显著大于其他2组(P0.05);与对照组相比,3个试验组的头、蹄、皮毛、心脏、肝、肾和小肠的质量有增长趋势(P0.05);HP组瘤胃质量显著高于其他3组(P0.05)。3个试验组失水率显著低于对照组(P0.05)。[结论]提高日粮营养水平可改善湖羊公羔生长性能、屠宰性能与肉品质,并对血清中与蛋白代谢或能量代谢的相关指标产生影响;高能量水平日粮在湖羊公羔育肥阶段发挥更重要的作用。     

复合益生菌对肉仔鸡小肠形态和盲肠微生物菌群的影响

[目的]本试验旨在研究早期饲喂复合益生菌对肉仔鸡盲肠微生物组成、小肠上皮组织结构及紧密连接相关基因表达的影响.[方法]将144只1日龄健康青脚麻鸡随机分为3组,分别为对照组(CON)、低剂量(50 mg·d-1)益生菌组(LP)和高剂量(100 mg·d-1)益生菌组(HP),每组6个重复,每个重复8只鸡,从1日龄开始...     

TGF-β受体mRNA在湖羊机体组织中的表达水平及其与排卵数的关系

 【目的】通过分析TGF-β受体(TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ)mRNA组织表达谱及其表达水平与湖羊排卵数的关系,研究TGF-β受体对湖羊排卵数的影响。【方法】挑选16头经产母羊,其中8只产多羔的为高产组,8只产单羔作为对照组,使用氯前列醇钠法进行同期发情,发情后48～60 h内屠宰,测定排卵数;分离取高产组母羊的下丘脑、垂体等组织样进行组织表达谱分析,用实时荧光定量PCR法检测湖羊卵巢TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ基因mRNA表达水平,分析TGF-β受体表达水平与湖羊排卵数的关系。【结果】TGF-βRⅠ在生殖器官相对表达量极显著高于肺和肌肉(P＜0.01),TGF-βRⅡ在生殖器官相对表达量极显著高于其它组织(P＜0.01),是卵巢高表达基因;高产组湖羊卵巢组织TGF-βRⅠ与TGF-βRⅡ基因mRNA表达量分别极显著(P＜0.01)与显著(P＝0.011)高于对照组;湖羊卵巢组织TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ基因mRNA表达量与排卵数呈正相关,相关系数分别为0.562 (P＞0.05)和0.711(P＜0.05)。【结论】TGF-β受体在卵巢组织中表达高,其中高产组TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ基因mRNA表达量极显著或显著高于对照组,而且与排卵数呈正相关。     

羔羊断奶日龄对湖羊繁殖力的影响

本研究旨在探索母羊产后发情规律及羔羊不同断奶时间对湖羊母羊繁殖性能的影响。试验选择77只产后母羊,通过公羊试情判断母羊发情并记录发情时间,同时记录母羊产后失重情况。另选156只母羊,对照组为羊场常规70 d龄断奶,试验组分别在产后35、45、60 d对羔羊进行断奶。结果表明:湖羊母羊产后平均42.49 d发情。补饲条件下,产后45 d母羊共失重7.94 kg。35 d龄断奶母羊2 a可产3.57胎,显著高于其他3组;45 d龄断奶母羊2 a可产3.44胎,60 d龄断奶母羊2 a可产3.30胎,两者无差异,但显著高于对照组的3.02胎。综上所述,湖羊产后首次发情集中在30~50 d,通过对母羊产前产后的合理补饲可以缩短母羊产后恢复时间,有助于缩短繁殖周期。要达到2 a产3.5胎的目标,湖羊羔羊断奶需要早于45 d龄,且母羊和哺乳羔羊需要科学补饲。     

饲料磷真消化率不同的山羊空肠菌群结构差异研究

动物对饲料磷消化率的提高对于降低养殖成本和减少环境污染均具有重要意义。通过高通量测序技术比较饲料磷真消化率不同的山羊空肠微生物结构的差异。本研究选取24只10月龄,雌性,平均体质量(24.25±2.47)kg的努比亚黑山羊作为试验动物,通过代谢试验筛选出高(HP)、低(LP)饲料磷真消化率组,每组各6只。分别采集HP、LP组山羊空肠内容物,提取微生物总DNA,利用高通量测序平台对细菌16S rRNA基因的高可变区进行测序,使用QIIME等软件对测序数据进行生物信息学分析。研究表明,在门水平,厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)在两组山羊空肠微生物中均为优势菌门,其中HP组厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度极显著低于LP组(P<0.01),而拟杆菌门(Bacteroidetes)的相对丰度极显著高于LP组(P<0.01);在属水平上,HP组Prevotella、Fibrobacter、Ruminococcus_2和Clostridium_sensu_stricto_1的相对丰度显著高于LP组(P<0.05),而Desulfovibrio和Victivallis的相对丰度显著低于LP组(P<0.05)。饲料磷真消化率不同的山羊空肠菌群结构存在显著差异。     

微生物发酵秸秆日粮对湖羊育肥性能及其肠道微生物群落结构的影响

[目的]微生物发酵饲料具有提高饲料适口性和消化率以及促进动物肠道微生态平衡等作用.基于微生物发酵秸秆日粮系统分析断奶湖羊育肥性能及其肠道微生物群落结构,为揭示微生物发酵饲料促进湖羊肠道微生态平衡的机理及进一步促进秸秆利用提供科学依据.[方法]试验采用生物发酵方法发酵饲料,试验选取36只月龄一致、体质量相近的湖羊公羊,随...     

高能饲粮对湖羊肝脏能量与脂代谢相关基因表达的影响

[目的]本试验旨在探讨高能饲粮对湖羊肝脏组织细胞增殖、能量代谢和脂代谢相关基因表达的影响.[方法]选取36只体况良好、体质量相近的3月龄湖羊公羔,随机分为正常日粮组(CON)和高能日粮组(HE),每组3个重复,每个重复6只.CON组和HE组个体饲喂日粮的能量水平分别为10和11 MJ·kg-1.预饲14 d后正式饲喂6...     

麦秸对湖羊瘤胃发酵代谢及肠道组织形态的影响

为探讨麦秸作为粗饲料的可行性,以苜蓿作为对照,通过对湖羊的饲喂试验分析麦秸对瘤胃发酵代谢及肠道组织形态的影响,测定湖羊的消化道内容物pH及重量、血液及瘤胃液脂多糖含量、瘤胃液酶活力、挥发性脂肪酸含量及脏器指数,并观察肠道组织形态。结果表明:1)与苜蓿干草组相比,麦秸组瘤胃pH显著降低(P0.05),网胃、瓣胃、皱胃及肠道pH无显著差异;2)与苜蓿干草组相比,麦秸组瘤胃内容物重及占宰前活重比例极显著升高(P0.01);3)两组湖羊瘤胃内容物和血液中脂多糖浓度均无显著性差异;4)麦秸组瘤胃内容物中木聚糖酶活力显著高于苜蓿干草组(P0.01);5)两组湖羊瘤胃中挥发性脂肪酸含量无显著差异;6)两组湖羊脏器指数无显著差异;7)两组湖羊十二指肠、空肠和盲肠组织形态无病理性变化。综上,与苜蓿相比,饲喂麦秸在一定程度上减缓了湖羊瘤胃排空速率,显著提高瘤胃木聚糖酶活力,促进纤维水解;饲喂苜蓿或麦秸均不会改变湖羊瘤胃发酵类型,不会影响瘤胃代谢及肠道组织形态,为麦秸在反刍动物上的合理利用提供了基础数据。     

产后断奶时间对湖羊母羊日增质量、血清生殖激素水平和发情时间的影响

为筛选适宜的湖羊母羊断奶时间,将144只湖羊母羊随机分为产后30、45、60和75 d(对照)断奶组,研究断奶时间对其日增质量、血清生殖激素水平和发情时间的影响.结果 表明:断奶后0～15 d的日增质量,30 d断奶组高于其他3组;15～～30 d,30 d断奶组显著高于其他3组.30～45 d,30和45 d断奶组显...     

极低蛋白日粮补充不同形式氮营养素对生长猪回肠食糜菌群、代谢产物和屏障功能的影响

[目的]本试验旨在研究极低蛋白(ELP)日粮下,补充不同形式氮营养素(氨基酸或酪蛋白)对生长猪回肠微生物、代谢产物和屏障功能的影响。[方法]试验选用80头PIC阉公猪(体质量约15.57 kg,48日龄),随机分为4组:中等蛋白组(MP)、低蛋白组(LP)、极低蛋白+氨基酸组(ELP-AA)和极低蛋白+酪蛋白组(ELP-CAS),日粮粗蛋白(CP)水平分别为17%、15%、13%和13%。每个处理5个重复,每个重复4头仔猪。试验期28 d。MP和LP两组添加必需氨基酸(AA),ELP-AA组添加非必需AA以达到LP组日粮水平,ELP-CAS组使用3%酪蛋白部分替代ELP-AA组的单体AA,使其满足营养需要。于第29天每个重复挑选1头接近栏平均体质量的猪屠宰,采集回肠食糜和肠道组织样品,用于各项指标测定。[结果]与MP组相比,ELP-AA组回肠食糜中双歧杆菌属(Bifidobacterium)、乳酸杆菌属(Lactobacillus)和消化链球菌属(Peptostreptococcus)的数量显著降低(P0.05),短链脂肪酸、氨态氮和生物胺的含量均显著下降(P0.05),而补充酪蛋白后,乙酸、丁酸、氨态氮、腐胺和精胺的含量得到显著恢复(P0.05)。基因表达方面,与LP组相比,ELP-AA组部分肠道屏障功能相关基因(MUC-1、MUC-2和Occludin)的表达量均显著下调(P0.05),而MUC-1和Occludin的表达量在ELP-CAS组和MP或LP组之间无显著差异(P0.05)。相关性分析结果表明,Lactobacillus数量与丁酸和生物胺含量、MUC-1、MUC-2和Occludin基因表达量显著正相关。[结论]饲喂极低蛋白日粮补充单体氨基酸对回肠微生物数量、代谢以及肠道组织屏障均产生不利影响,而补充酪蛋白能部分改善回肠有益微生物的生长并恢复部分肠道屏障相关基因的表达,提示在极低蛋白质水平下,补充酪蛋白对维持机体正常氮利用、肠道微生物生长代谢和肠道屏障功能具有重要作用。     

家畜基因工程获新进展——山羊转基因喜获产羔

由江苏农学院和中科院上海细胞所合作研究的“山羊转基因研究”课题,日前受体已顺利产出第一批羔羊。应用本地山羊经同步发情、超排,在取得原核期卵后把P~(MSGHI)(人生长基因)经微注射导入雄原核,然后移入同步发情受体共14头,结果7头妊娠,其中1头流产、1头产4只、1头产3只(1只产出时     

不同尿素添加水平对育肥湖羊瘤胃发酵及微生物菌群结构的影响

[目的]本试验旨在研究低蛋白日粮添加不同水平尿素对育肥湖羊瘤胃发酵及微生物菌群结构的影响.[方法]70只育肥公湖羊(23.6～26.0 kg)随机分为5组,分别饲喂以下日粮:正常豆粕(SBM,170 g?kg-1),低豆粕(40 g?kg-1)基础上添加0、10、20和30 g?kg-1尿素(U0、U10、U20、U3...     

外源性L-Arg和Se对妊娠湖羊血清氨基酸及抗氧化性的影响

[目的]探讨外源性L-Arg和Se对妊娠湖羊血清氨基酸及抗氧化性的影响,为降低多胎母羊妊娠期的氧化应激,促进胎儿生长发育提供参考依据.[方法]选取体重相近、同期发情处理的已孕湖羊20只,随机分为4组(每组5只,饲喂相同的基础日粮),即:Se组(饲喂Se含量为0.3 mg/kg的日粮)、Arg组(静脉注射70 mg/kg BW·d的L-Arg)、AS组(饲喂Se含量为0.3mg/kg的日粮结合静脉注射70 mg/kg BW·d的L-Arg)、CK组(对照组).各组羊只于分娩后采集颈静脉血液,分析血清氨基酸组成、抗氧化性和生化指标的变化.[结果](1)与CK组比较,Se组和AS组血清SOD活力显著提高(P＜0.05),Arg组和AS组血清GSH-Px活力显著增加(P＜0.05),Se组血清GSH-Px活力极显著增加(P＜0.01).(2)AS组血清mg的水平显著高于Se组(P＜0.05),极显著的高于CK组(P＜0.01),Arg组血清的Arg水平显著高于CK组(P＜0.05),Arg组与AS组和Se组之间及CK组与Se组之间差异均不显著(P＞0.05);Arg组和AS组血清中的Om、Cys、Pro水平极显著的高于CK组和Se组(P＜0.01);Arg组血清Val水平显著低于CK组和Se组(P＜0.05).(3)Se组和AS组血清硒的含量极显著的高于Argg组和CK组(P＜0.01),Se组与AS组之间以及CK组与Arg组之间差异均不显著(P＞0.05).(4) Arg组的SUN显著低于CK组和Se组(P＜0.05).[结论]日粮添加Se与静脉注射L-Arg二者单独应用或联用均能够提高妊娠湖羊机体的抗氧化性,单独进行静脉注射L-Arg或与日粮添加Se合用能够显著提高妊娠湖羊血清中部分氨基酸的水平,这将有利于母体妊娠和胎儿的生长发育.     

补偿生长对湖羊肝脏组织中Hippo信号通路相关基因表达的影响

[目的]本试验旨在探究早期能量限饲与后期能量补偿对湖羊生长性能、肝脏组织中Hippo信号通路核心基因和AMPK蛋白表达的影响。[方法]选择32只系谱背景清楚、体质量相近的3月龄雄性湖羊羔羊,随机均分为对照组和补偿生长组。试验分为能量限饲(60 d)和补偿(90 d)2个阶段,能量限饲阶段对照组和试验组饲喂日粮的代谢能分别为11.64和6.84 MJ·kg~(-1),在能量补偿阶段日粮的代谢能均为12.86 MJ·kg~(-1)。饲养结束后屠宰,测定,再通过RT-qPCR和Western blot检测肝脏组织中Hippo通路核心基因和AMPK蛋白的表达变化。[结果]在能量限饲阶段,与对照组相比,能量限饲显著降低了补偿组湖羊的肝脏质量和体质量(P0.05),湖羊肝脏组织中Hippo通路核心基因和YAP1蛋白的表达量显著降低(P0.05),而AMPK的mRNA和蛋白磷酸化水平显著升高(P0.05)。在能量补偿阶段,补偿组湖羊的肝脏质量和体质量、湖羊肝脏组织中Hippo通路核心基因(除YAP1外)的表达量和AMPK蛋白的磷酸化水平均与对照组差异不显著。[结论]湖羊在适当水平的能量限饲后进行补偿处理具有补偿生长现象,Hippo通路和AMPK蛋白可能共同参与不同营养水平下对湖羊肝脏发育的调节。     

湖羊同期发情与杜泊绵羊人工授精技术

本试验设计了5种不同的同期发情方法对300只湖羊进行处理,对湖羊同期发情技术进行了系统研究。并采用杜泊绵羊鲜精人工授精技术对同期发情羊群进行集中杂交配种,对不同处理羊群的同期发情率、人工授精受胎率进行了统计分析与评价。     

不同试验条件对绵羊冲胚效果的影响

湖羊是江浙地区常见的绵羊品种之一，繁殖性能优越，肉质鲜嫩，营养丰富，为了进一步探索湖羊的繁殖潜力，采用CIDR+PMSG+PG+FSH法对湖羊进行同期发情和超数排卵，并在此基础上对发情母羊进行腹腔镜子宫角输精；采用相同输精密度、不同输精时间(撤栓后48、54、60 h)分别对发情母羊进行腹腔镜子宫角授精，通过冲胚进行卵子受精率和可用胚胎率检查，探究对湖羊进行腹腔镜子宫角输精时的最适输精密度与最适输精时间。结果表明，输精密度为2×10⁸个/mL组的卵子受精率和可用胚胎率显著低于其余4组(P<0.05),其余4组差异不显著(P>0.05);撤栓后48 h输精组与撤栓后54 h输精组可用胚胎率差异不显著(P>0.05),但均高于撤栓后60 h,且差异显著(P<0.05);不同输精密度的鲜精以及不同输精时间均会对湖羊卵子受精率和可用胚胎率产生一定的影响，输精密度为3×10⁸个/mL可以作为湖羊鲜精输精的最低有效密度，撤栓后48～54 h输精可以作为湖羊腹腔镜子宫角输精的最佳时间。     

PPARGC1A/NRF1/TFAM通路核心基因在湖羊睾丸发育过程中的表达变化

[目的]本试验旨在探究PPARGC1A/NRF1/TFAM通路核心基因在湖羊性成熟前后的表达变化。[方法]选取体况良好和系谱清楚的雄性湖羊18只(3和9月龄,各9只),颈静脉采血后进行阉割处理。ELISA检测血样中睾酮(T)、瘦素、胰岛素及胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)的浓度;免疫组化法检测睾丸组织中PPARGC1A/NRF1/TFAM通路相关蛋白的表达定位; RT-qPCR和Western blot检测睾丸组织中PPARGC1A/NRF1/TFAM通路相关基因与蛋白的表达变化。[结果]与3月龄湖羊相比,9月龄湖羊外周血中T、瘦素、胰岛素及IGF-Ⅰ的浓度显著升高(P0.05)。免疫组化法检测发现PPARGC1A、NRF1和TFAM蛋白在3月龄和9月龄湖羊睾丸组织的多种细胞内均呈时空特异性表达。此外,与3月龄湖羊相比,9月龄湖羊睾丸组织中PPARGC1A、NRF1和TFAM m RNA和蛋白表达水平均显著升高(P0.05)。[结论]PPARGC1A/RNF1/TFAM通路相关基因可能与湖羊睾丸发育和性成熟过程密切相关。     

利用氯前列烯醇诱导奶牛同期发情及定时输精效果分析

[目的]建立一套适合奶牛同情发情及定时输精配种的实用技术,以达到缩短产犊间隔,提高受胎率和牛群的繁殖力。[方法]采用不同给药方式对奶牛进行同期发情处理,并比较研究了定时输精技术对受胎率的影响。[结果]①采用注射2次氯前列烯醇的试验Ⅱ组、试验Ⅴ组的同期发情率极显著高于采用注射1次氯前列烯醇的试验Ⅰ(P<0.01)、Ⅳ组(P<0.01);②采用子宫颈内注入氯前列烯醇的效果较好,试验Ⅵ组(子宫颈内注入2次)的同期发情率和受胎率均高于试验Ⅱ组(肌肉注射2次)(P>0.05),试验Ⅳ组(子宫颈内注入1次)的同期发情率和受胎率也高于试验Ⅰ组(肌肉注射1次)(P>0.05);③采用定时输精方法的试验Ⅲ组、试验Ⅵ组的受胎率分别显著高于试验Ⅱ(P<0.05)、Ⅴ组的受胎率(P<0.05),试验Ⅲ和Ⅵ组的受胎率差异不显著(P>0.05),试验Ⅱ和Ⅴ组的受胎率差异不显著(P>0.05)。[结论]定时输精技术不仅可以省去观察发情,还可以减少因发情鉴定不及时和隐性发情造成的漏配,具有很高的推广应用价值。     

湖羊排卵相关基因表达水平与繁殖性能关系的研究

 【目的】研究湖羊卵巢组织COX2、HAS2、TSG6和PTX3的mRNA表达水平与湖羊繁殖性能的相关性,筛选影响湖羊高产的候选基因,为揭示湖羊高繁多胎分子遗传机理提供依据。【方法】选取16只经产湖羊母羊,分为低产组和高产组,于发情后24—36 h屠宰,应用RT-PCR技术检测COX2、HAS2、TSG6和PTX3的组织表达特征,进一步利用实时荧光定量PCR技术分析各基因mRNA在低产组和高产组湖羊卵巢组织中的表达差异。【结果】COX2、HAS2、TSG6和PTX3均在湖羊卵巢组织中表达,在卵巢组织,高产组TSG6和PTX3的mRNA表达极显著高于低产组(P＜0.01),低产组HAS2的mRNA表达极显著高于高产组(P＜0.01),而COX2的mRNA表达在高产组和低产组间无显著差异(P＞0.05)。【结论】HAS2、TSG6和PTX3的mRNA表达在高产组和低产组间差异极显著,可能与湖羊繁殖性能相关,可作为影响湖羊高产的候选基因。