江西铅山红芽芋抗病蛋白基因克隆和表达分析

对江西铅山红芽芋抗病蛋白基因进行克隆和表达分析，以期为解析江西铅山红芽芋的抗病机制奠定基础，同时为江西铅山红芽芋的遗传改良提供候选基因。通过江西铅山红芽芋试管苗转录组数据库筛选到江西铅山红芽芋抗病蛋白基因的核心片段，利用RT-PCR技术克隆江西铅山红芽芋抗病蛋白基因，并用生物信息学方法和实时定量PCR进行序列分析和器官表达分析。结果表明，江西铅山红芽芋抗病蛋白基因cDNA总长度为264 bp, G+C含量为46.59%;江西铅山红芽芋抗病蛋白由88个氨基酸组成，分子量为10 116.53 u,等电点为6.42,为亲水性蛋白；二级结构由α-螺旋(23.68%)、β-片层(14.77%)、无规则卷曲(61.36%)构成；三级结构为单体；江西铅山红芽芋抗病蛋白主要存在于叶绿体和细胞核中；江西铅山红芽芋抗病蛋白在进化上与芋(Colocasia esculenta)的亲缘关系较近，尤其是与芋的hypothetical peotein Taro＿046555(MQM13626.1)、hypothetical peotein Taro＿046554(MQM13625.1)和hypothetical ...     

红芽芋超低温疗法脱毒苗基因组DNA甲基化的MSAP分析

对红芽芋超低温疗法脱毒苗的基因组DNA甲基化进行MSAP分析。结果表明,红芽芋超低温疗法脱毒苗总甲基化率提高10.27%,全甲基化率提高12.98%,但半甲基化率下降2.71%。红芽芋超低温疗法脱毒苗去甲基化模式和甲基化模式并存,但去甲基化模式高于甲基化模式,说明较多基因被激活。     

江西铅山红芽芋TIFY9基因克隆与功能分析

为了深入探究江西铅山红芽芋TIFY 9基因的功能,通过江西铅山红芽芋试管苗转录组数据库筛选到江西铅山红芽芋TIFY 9基因的核心片段,利用RT-PCR技术克隆该基因,并采用生物信息学方法、转基因瞬时表达和实时定量PCR进行序列分析、亚细胞定位、器官表达分析和功能分析.结果表明:江西铅山红芽芋TIFY 9基因cDNA总长...     

江西铅山红芽芋再生苗遗传稳定性的RAPD分析和流式细胞术检测

通过RAPD分子标记和流式细胞术来分析和检测江西铅山红芽芋再生苗的遗传稳定性,为其种质资源的离体保存和试管苗的工厂化生产提供理论依据。结果表明,经流式细胞术检测,江西铅山红芽芋9种再生苗与对照组的第1个主峰对应的荧光强度值和第2个峰所对应的荧光强度无显著变化。通过20条随机引物对江西铅山红芽芋9种再生苗与对照组进行RAPD扩增。扩增出来的片段大小为200~3 000 bp,20条引物的扩增位点数分别为12,10,7,8,9,14,9,14,10,8,10,10,10,10,11,8,9,10,8,15,共获得202个位点,平均每个引物获得10.1个位点,其中160个为可重复的多态性位点,平均每个引物检测到的多态性位点数为8个,平均多态性位点百分率为79.21%。用NTsys2.10软件对9种再生苗与对照组进行聚类分析,9种再生苗与对照组分成了两类,一类只有1种,即愈伤组织再生苗,另一类包括8种再生苗和对照组。表明愈伤组织再生苗与其他8种再生苗和对照组比较具有显著差异,而其他8种再生苗和对照组之间差异不显著。     

红芽大戟组织培养条件的优化

优化红芽大戟组织培养快速繁殖技术,为保护红芽大戟的野生资源提供技术支撑。分别以MS和1/2MS为基本培养基,采用正交设计对影响红芽大戟组织培养的继代增殖和诱导生根进行了优化。结果表明,MS+1.5 mg/L6-BA+0.2 mg/L IAA+0.2 mg/L NAA+0.3 g/L活性炭有利于丛生芽继代增殖;1/2MS+0.75 mg/L IBA+0.2 mg/L PP333适于诱导生根获得再生植株;生根苗移栽于泥炭+珍珠岩(体积比1∶1)的混合基质上,成活率达92%。     

宁糯芋1号茎尖组培快繁及种芋生产

为调整福建省芋栽培品种结构,加快优良品种推广应用,以宁糯芋1号田间生长的块茎顶芽或侧芽为外植体,运用茎尖分生组织培养进行了不同TDZ浓度处理试验获得脱毒苗,结果发现,与6-BA相比,TDZ更适于芋茎尖诱导成芽,在MS培养基中附加0.1～0.2 mg/L的TDZ能显著促进芋茎尖的萌动,产生丛生芽。茎尖初代培养基为MS+TDZ 0.2 mg/L时成苗率达78%,继代增殖培养基MS+TDZ 0.3 mg/L繁殖系数达7.88,生根壮苗培养基1/2MS+NAA 0.5 mg/L+活性炭0.2 mg/L。脱毒芋种产量比对照原品种提高29.7%,达到极显著差异水平。     

芋芽继代培养中激素、水解乳蛋白、碳源的调节研究

在继代培养中,为提高芋组培苗的增殖效果,降低组培苗生产成本,获得健壮的芋头组培苗。实验从激素、水解乳蛋白、碳源三个方面研究了其对芋组培芽继代培养的调节作用。结果表明:BA 4.0 mg/L NAA 0.1~0.2 mg/L的激素配比有利于芋芽的增殖,但当NAA的浓度为0.1 mg/L时,可大大抑制多次继代后根的发生。不同浓度水解乳蛋白(LH)对芋芽的分化率无显著差异,但添加LH可提高芋芽的生长速度,当LH为500 mg/L时,芋苗最高。蔗糖、食用白糖、葡萄糖对芋芽的增殖和生根效果较好,麦芽糖稍差;从降低生产成本度考虑,可选用食用白糖作为芋芽继代培养的碳源。     

鄂西红豆离体培养及植株再生研究

【目的】对外植体采用特殊处理方法,并对不同培养时期的基本培养基进行调整,以建立高效、快速、繁殖系数高的鄂西红豆再生技术体系。【方法】以成熟度为80%的鄂西红豆种子为外植体,通过向培养基中添加不同质量浓度和配比的植物生长调节物质,筛选适宜的芽诱导培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基,并对诱导生根培养的试管苗进行炼苗移栽,观察其成活率。【结果】最适芽诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+KT0.5mg/L+NAA 0.5mg/L+维生素B10.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L,诱导率达85%;最适芽继代增殖培养基为WPM+6-BA 1.5 mg/L+KT 0.3 mg/L+TDZ 0.02 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L;无根苗壮苗培养基为WPM+NAA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+IAA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L。当无根苗生长到4~5cm时形成完整植株并转接到生根培养基上诱导生根,最适生根培养基为1/2WPM+IBA 0.5mg/L+NAA 1.5mg/L+新型基因诱导生根剂0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L。【结论】建立的鄂西红豆再生技术体系可获得75%~85%的正常萌芽,生根率达85%以上,瓶苗移栽成活率达90%。     

不同植物生长调节剂对脱毒红颊草莓组培快繁的影响

以红颊草莓脱毒无菌丛生苗为试材,以MS为基本培养基,研究了植物生长调节剂6-BA、KT、NAA、IBA不同浓度配比对芽增殖和生长的影响.结果表明,红颊草莓脱毒苗最适宜的培养基为MS+0.5 mg/L6-BA+0.3 mg/L IBA,增殖系数为5.8,平均株高1.04 cm,鲜重0.63 g,无玻璃化现象,再生苗颜色深绿,生长健壮.     

彩色马铃薯脱毒苗快繁技术研究

为确立马铃薯脱毒试管苗快繁速度衡量指标,筛选快繁培养基,试验以彩色马铃薯品种红美脱毒试管苗为供试材料,研究了MS培养基营养元素和琼脂含量对脱毒试管苗继代快繁繁殖系数和继代周期的影响,分析快繁理论产量与繁殖系数、继代周期和日均繁殖系数的相关性,并利用日平均繁殖系数作为衡量快繁速度的技术指标,筛选适宜红美快繁的培养基。结果表明:彩色马铃薯品种红美继代快繁最佳的培养基是营养元素浓度2MS,琼脂5.5 g/L;用日均繁殖系数作为马铃薯脱毒试管苗快繁培养基的评价指标比繁殖系数和继代周期更敏感。     

不同培养条件对香石竹组培苗玻璃化现象的影响

香石竹茎尖试管苗继代培养玻璃化现象是香石竹脱毒试管苗生产的一个主要障碍。为探讨不同培养条件对香石竹组培苗玻璃化的影响,以香石竹健壮组培苗为材料,以MS为基本培养基,研究了不同浓度6-BA、蔗糖和琼脂以及添加活性炭对防止香石竹组培苗玻璃化现象的作用。结果表明,降低6-BA的浓度,适当提高蔗糖和琼脂的浓度,组培苗增殖系数较高,玻璃化率低。其中,MS+蔗糖30.0 g+琼脂8.0 g+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L+活性炭4 g/L的培养基可以有效降低香石竹组织培养中的玻璃化现象。     

盐胁迫对酸柚苗光合作用和荧光特性的影响

以酸柚二年生实生苗为试验材料,进行0%、0.3%、0.6%、0.9%浓度的NaCl处理,研究在NaCl胁迫下酸柚苗光合作用和叶绿素荧光参数的变化。结果表明,盐胁迫使酸柚叶片叶绿素含量、蒸腾速率(T_r)、最大荧光(F_m)、PSⅡ最大光化学效率(F_v/F_m)、PSⅡ实际光化学效率(Φ_(PSⅡ))、PSⅡ有效光化学量子产量(F_v′/F_m′)、光化学反应猝灭系数(q_P)下降,初始荧光(F_o)和非光化学猝灭系数(NPQ)逐步上升,净光合速率(P_n)、气孔导度(G_s)、潜在光化学效率(F_v/F_o)先升高后降低,胞间CO_2浓度(C_i)先降低后升高。0.3%、0.6%NaCl处理对酸柚苗造成了光抑制,其净光合速率下降的原因主要是气孔限制;0.9%NaCl处理对酸柚苗的影响较大,其净光合速率下降的原因主要是非气孔限制,酸柚苗将能量转变为热量耗散掉,以缓解盐胁迫对光合作用的影响。由结果可以看出,在盐胁迫下,酸柚能保护内部的光合机构功能状态,从而提高对NaCl胁迫的适应能力。     

小花山奈的组培快繁

以小花山柰无菌苗的芽基部为外植体,对芽基部进行继代增殖、丛生芽诱导以及生根培养基的筛选,建立了小花山柰无菌苗芽基部的组培快繁体系。结果表明:小花山柰无菌苗芽基部继代增殖比较合适的培养基为MS+6-BA 8.0~10.0 mg/L+NAA 0~0.10 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L,最佳的继代增殖培养基为MS+6-BA 8.0 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L;丛生芽诱导比较合适的培养基为MS+6-BA 3.0~5.0 mg/L+NAA 0.05~0.10 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L,最佳的丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L;生根最佳的培养基为MS+NAA 0.10 mg/L+香蕉泥15%+活性炭1 g/L+白沙糖30 g/L+卡拉胶粉9.5 g/L。     

植物生长延缓剂B9对马铃薯种质资源离体保存的影响

以MS为基本培养基,以马铃薯(Solarium tuberosum L.)品种鄂马铃薯5号脱毒试管苗为试验材料,研究不同浓度B9对马铃薯试管苗离体保存的影响。结果表明,B9对马铃薯试管苗的生长有不同程度的抑制作用,延长了试管苗的保存时间,其中浓度为60 mg/L的B9的保存效果最为理想,可以使试管苗保存10个月以上,且生长健壮,成活率达76%,不影响试管苗继代。     

NaCl胁迫对一年生黑桑移栽苗光合作用及荧光特性的影响

[目的]分析NaCl处理下一年生黑桑移栽苗叶片的光合作用及叶绿素荧光参数的变化,研究一年生黑桑移栽苗的耐盐特性,为黑桑在盐碱地的推广应用提供理论依据.[方法]以一年生黑桑移栽苗为材料进行不同程度的NaCl处理,NaCl处理浓度为0、50、100、150、200、250、300 mmol/L,在加NaCl处理后的第12 d测定不同NaCl处理的黑桑叶片光合生理指标和叶绿素荧光参数,选择生长一致的一年生黑桑移栽苗并挂牌定株,统一选择植株的第4片完全叶(也挂牌做标记)进行测定,每个处理分别测定5株.[结果]低浓度盐分(NaCl为50 mmol/L)对一年生黑桑移栽苗的PSⅡ光化学量子效率(ФPSⅡ)、光化学猝灭系数(qP)、电子传递速率(ETR)和激发能捕获效率(Fv'/Fm')无显著影响;高浓度盐分(NaCl≥100 mmol/L)导致叶片净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、电子传递速率(ETR)、激发能捕获效率(Fv'/Fm')、PSⅡ光化学量子效率(ΦPSⅡ)、光化学猝灭系数(qP)均下降,胞间CO2浓度(Ci)的提高.[结论]一年生黑桑移栽苗在50 mmol/L NaCl处理下生长良好,其光合荧光特性没有受到影响.在100、150 mmol/L NaCl处理下,其光合荧光特性虽受到抑制,但仍维持有较高的光合净积累,一年生黑桑移栽苗受到的伤害较轻且仍能存活.在200、250、300 mmol/L NaCl处理下,一年生黑桑移栽苗受到的伤害较严重,尤其是250、300 mmol/L NaCl处理下,其叶片干枯萎蔫严重,并脱落.随着NaCl浓度的增加,引起一年生黑桑移栽苗光合速率下降的原因是逐渐由气孔限制转向非气孔限制,光合参数、叶绿素荧光参数的变化与黑桑的抗性及盐浓度密切相关.     

不同物质对唐菖蒲继代培养试管苗芽增殖的影响

[目的]探讨不同物质对唐菖蒲继代培养试管苗芽增殖的影响.[方法]在唐菖蒲试管苗芽增殖过程中,添加不同植物生长调节剂、碳源、活性炭,考察不同物质对芽增殖影响.[结果]浓度0.5 mg/L奈乙酸与浓度1.0 mg/L的6-苄基腺嘌呤植物生长调节剂组合下,苗增殖效果好而且苗较壮,增殖倍数为5.0.2％的活性炭,在30 d内有利于试管苗株高的增加,但对芽的诱导无明显作用.[结论]用50 g/L市售白糖代替40 g/L纯蔗糖作为培养基的碳源是可行的,这样降低了配制培养基的成本,而且对试管苗的增殖和质量无影响.     

培养基及培养条件对核桃试管芽苗继代增殖的影响

针对核桃试管芽苗继代培养玻璃化现象严重、试管芽苗易黄化或老化、继代增殖率低等问题, 本试验在固体培养条件下, 研究了不同培养基、pH值、培养温度及继代间隔时间等因子对核桃试管芽苗继代培养的影响。结果表明: ①新改良DKW培养基上的核桃试管芽苗较改良DKW培养基生长健壮, 增殖率高; ②核桃试管芽苗继代增殖的最适pH值为6 .2; ③变温培养(光照期25℃±3℃, 黑暗期18℃±2℃) 较恒温培养(25℃±3℃) 适于核桃试管芽苗的继代增殖; ④继代培养间隔20d, 试管芽苗生长健壮, 萌发新梢较多; ⑤不同激素组合中, 以BA05 +KT1. 0 +IBA0 001组合效果最好。核桃试管芽苗继代培养的最佳培养条件为: 芽苗在新改良DKW+BA05 +KT1. 0 +IBA0 001 +琼脂7g/L+蔗糖30g/L培养基上变温培养20d。     

金雀异黄素对蟠桃叶片叶绿素荧光特性和抗氧化酶活性的影响

研究了金雀异黄素(GNT)对‘早蟠桃’叶片色素、碳水化合物、叶绿素荧光特性和抗氧化酶活性的影响。结果表明,40μmol/L GNT可以提高叶片叶绿素a和叶绿素b、淀粉和可溶性糖含量。暗适应以及光照下叶片最大荧光(Fm和Fm′)和可变荧光(Fv和Fv′)下降,但PSⅡ实际光化学效率(ΦPSⅡ)、光化学荧光猝灭系数(qP)、非光化学荧光猝灭系数(NPQ)、表观光合电子传递速率(ETR)和光化学速率(PCR)提高,光合相对限制值(L(PFD))显著下降。就能量分配而言,GNT增加了用于光化学反应部分的光能(Pc)和天线热耗散部分(Hd),同时降低PSⅡ反应中心的过剩激发能耗散(Ex),表明GNT处理具有促进叶绿素荧光光化学猝灭和非光化学猝灭的双重特性。此外,GNT也提高了叶片抗氧化酶的活性。     

紫花山柰的组培快繁研究

以紫花山柰无菌苗的芽基部为外植体,对芽基部进行继代增殖、丛生芽诱导以及生根培养基的筛选,建立了紫花山柰无菌苗芽基部的组培快繁体系。结果表明:紫花山柰无菌苗芽基部继代增殖比较合适的培养基为MS+6-BA 8~12 mg/L+NAA 0~0.1 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L,最佳继代增殖培养基为MS+6-BA 8 mg/L+NAA 0.1 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L;丛生芽诱导较合适的培养基为MS+6-BA 3~5 mg/L+NAA 0.05~0.1 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L,最佳的丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.05 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L;生根较佳的培养基为MS+NAA0.1 mg/L+香蕉泥10~15%+活性炭0.5~1.0 g/L+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉9.5 g/L。     

野薄荷脱毒苗低成本组培快繁研究

[目的]探讨低成本下薄荷脱毒苗的快繁技术。[方法]以脱毒野薄荷试管苗为外植体,以1/2MS为基本培养基,配制不同培养基,对液体培养与固体培养的薄荷脱毒苗继代、生根及移栽过程进行了比较。[结果]浅层液体培养继代增殖系数、根长、根数、生根率均优于固体培养;来源于浅层液体培养生根的薄荷脱毒苗移栽成活率明显高于来源于固体培养基的脱毒苗;与固体培养基相比,采用浅层液体培养可节约成本57.44%,同时减少大量用工。[结论]以30 g/L食用白糖代替蔗糖、以凉开水代替蒸馏水的浅层液体培养更适合于脱毒薄荷种苗的大量繁殖。