北冬虫夏草的人工栽培条件及其子实体成分分析

采用大米合成培养基培养北冬虫夏草,获得了较高的产量及与野生北冬虫夏草形态一致的子实体,每50g培养基产鲜虫草子实体约25g。分析栽培虫草子实体的化学成分表明,北冬虫夏草在许多成分上与冬虫夏草相似,某些药用成分更优于冬虫夏草。     

1株分离自蛹虫草小麦培养基的粘质沙雷氏菌的鉴定及初步研究

从蛹虫草小麦培养基中筛选出1株产红色素的菌株,划线分离、纯化后命名为CD1,对其进行了16S rDNA ITS序列分析。同时将其接种于正常的蛹虫草小麦培养基上,接种后在蛹虫草子实体生长早期、中期、后期分别进行子实体湿质量、干质量、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性等生理生化指标测定,结果表明该菌为粘质沙雷氏菌,接种小麦培养基后可以显著提高蛹虫草子实体产量。     

北虫草子实体人工培养条件的研究

北虫草子实体人工培养条件试验表明,获得北虫草子实体生长的最适条件：温度22℃;培养基含水量60％最佳;pH值范围是5-7;光照,子实体分化形成要求光强在150lx以上,最适光强500lx,日光灯强光3000lx对子实体的生长发育没有不良影响。     

蛹虫草产量及主要活性物质的影响因素研究

以提高蛹虫草子实体产量、活性物质含量为研究目的。以小麦为基本培养基固体培养蛹虫草子实体,采用单因素、二因素试验研究碳源、氮源和菌种对蛹虫草实体产量、活性物质含量的影响。产量单因素实验结果表明,每瓶添加1 g蚕蛹粉、营养液中白砂糖浓度为20 g·L~(-1)的培养基培养子实体产量最高;但不同水平的蚕蛹粉、黄豆粉对子实体产量影响差异不显著。二因素实验结果表明,当培养基营养液中白砂糖浓度为20 g·L~(-1),蚕蛹粉添加量为2 g·瓶~(-1)时,子实体产量最高;碳源、氮源及碳源和氮源的互作对蛹虫草的产量有极显著的影响。活性物质单因素实验结果表明,培养基营养液中蔗糖浓度为10 g·L~(-1)时腺苷和虫草素含量最高;每瓶培养基中添加1 g土豆粉时,子实体多糖含量最高,与其他营养添加物质有显著差异;不同菌种对产量和主要活性物质含量的影响差异显著。     

不同培养基主料对北虫草生长的影响

通过对北虫草2种不同主料培养基及培养基不同主料与营养液比例进行对比试验,根据菌丝萌发时间、转色时间、出草时间、北虫草的产量和质量以及生长周期等指标进行对比分析,结果表明:以麦粒为主料、主料与营养液比例为1∶1.6的培养基培养出的北虫草出草快、生长周期短、产量高、品质优。     

TTC法细胞酶活力测试技术在北虫草选育种中应用

TTC法，即组织细胞产生的脱氢酶活力与细胞活力成正比，用紫外分光光度计可测定细胞组织脱氢酶含量。我们经过近两年对北虫草的反复测定试验，发现北虫草液体菌种脱氧酶含量高时，其子实体的产量亦高。即北虫草液体菌种菌龄在7d脱氢酶含量最高，菌丝转色快，子实体形成早且粗壮，子实体的产量高。     

蛹虫草对金属锌的耐受性与富集特征

以蛹虫草为试材,通过在培养基中添加不同浓度的锌,利用罗丹明B分光光度法测定菌丝体和子实体锌含量,蒽酮-硫酸法和DNS法测定子实体多糖和还原糖含量,探究了锌对蛹虫草菌丝体、子实体生长和生理活性的影响,以期为富锌蛹虫草培育提供参考依据。结果表明:锌对蛹虫草菌丝体、子实体均有一定的影响,适量浓度促进生长,过高则抑制生长,最适合蛹虫草生长的培养基锌浓度为678 mg·kg^-1,该浓度下蛹虫草子实体生长良好无退化现象,干质量出现最大值为3.56 g,多糖含量为7.32%,锌富集率达6.45%。     

啤酒糟栽培蛹虫草

利用啤酒糟栽培蛹虫草(Cordyceps militaris),通过单因素试验培考察培养基中啤酒糟与大米组成比例、培养基含水量、培养基起始pH、培养温度和光照对蛹虫草子实体产量和质量的影响,在此基础上设计正交试验,通过正交试验选出啤酒糟栽培蛹虫草最佳的栽培条件为培养基啤酒糟与大米比例1∶1,含水量65%,瓶底转色后于23℃,光照强度700lux下培养,在此条件下每瓶产量为3.24g(每瓶培养料30g)。     

北虫草子实体组织分离技术试验

北虫草菌种在保藏一段时间后,菌种会失去活力,衰老退化,造成产量下降,甚至绝产.因此,规模生产菌株遗传性状保持稳定是很重要的.试验用北虫草子实体的两个部位进行分离试验,优选出适合北虫草生产的分离菌种.试验结果:选取鲜嫩北虫草子实体顶端靠尖1～2 cm处,不去皮,结果表现性状优异,遗传性状稳定一致.而在子座以上部位,去皮移植,则表现生长力弱.     

蛹虫草子实体的人工培育及超氧化物歧化酶的活性测定

笔者在人工控制环境条件下,使接种在不同培养基上的蛹虫草菌长出了与野生蛹虫草一样的子实体,并测定了子实体及培养基-菌丝体混合物中超氧化物歧化酶(SOD)的活性。     

蛹虫草子实体的人工培养及超氧化物歧化酶的活性测定

笔者在人工控制环境条件下，使接种在不同培养基上的蛹虫草菌长出了与野生蛹虫草一样的子实体，并测定了子实体及培养基－菌丝体混合物中超氧化物歧酶酶的活性。     

北虫草商品化栽培技术的研究

对4个北虫草菌株、5个培养基配方和3种栽培容器进行了北虫草栽培试验研究,并从经济效益方面对其进行了估算分析.结果表明:金地一号菌株优质、高产、商品性好、经济效益高,可作为今后北方地区室内栽培的当家优良菌株进行推广种植;小麦培养基栽培北虫草,不仅产量高、质量好,而且成本低,故采用小麦培养基更具有优势;塑料瓶栽培北虫草,具有重量轻、利于灭菌、可多次重复使用等特点,可作为今后商品化、规模化、工厂化栽培北虫草之首选容器.     

食补佳品——新鲜北冬虫夏草子实体

冬虫夏草是我国医学宝库里的一味珍贵药材,在中医药史上把它与人参、鹿茸并列而成为三大补品,不但在国内受到重视,在国外也享有”东方传奇式珍宝”的美称。 世界上已报道过的虫草已有300多种、我国已报道过几十种,其中冬虫夏草（Cordyceps sinensis）和北冬虫夏草（Cordyceps militaris）是在我国分布较广的两个种。据中国著名医书记载,虫草具有保肺益肾,止血化痰,秘精益气等功效。现代中医用于调补身体,治头昏失眠、自汗贫血、呼吸道抵抗力低、阳萎遗精、腰腿酸软、肾功能衰竭、阴虚咳嗽、咳血、胸痛、治哮喘、肺气肿、神经衰弱等症。 虫草在自然界产量极少,采集困难,货源奇缺。虫草的每公斤售价达万元以上,使虫草的广泛应用受到限制。上海市农业科学院植物保护研究所吴畏研究员、崔星明教授、张大业副研究员、高新华硕士等经过两年的研究,现在已经利用生物高新技术,人工批量培养出北冬虫夏草子实体（子实体即冬虫夏草中的草,是虫草用药最有效的部分）。北冬虫夏草与冬虫夏草药理药性相同,它是用全天然培养基人工培养的新鲜北冬夏草子实体,经中国科学院理化分析测试中心化验分析,人工培养的北冬草夏草与天然冬虫夏草的各种成分如下。     

不同基质栽培北冬虫夏草试验

选择四种天然的动物培养基栽培北冬虫夏草试验,比较其生长状况及产量差异,结果表明,桑蚕蛹为基质的北冬虫夏草子座密度大,粗细均匀,无畸形虫草产生,子座鲜重及干重显著优于其他基质,生物学效率最高。     

人工蛹虫草子实体及大米培养基残基中虫草素的提取纯化方法

本实验主要对人工蛹虫草子实体及培养基中虫草素(3‘-脱氧腺嘌呤核苷)进行提取、纯化及纯度鉴定。结果表明：经过对蛹虫草子实体及培养基的粉碎、石油醚脱脂、80-85℃水浴12小时、调节等电点沉淀、732-NH4离子交换树脂的分离、浓缩、4℃下低温结晶，可得到一定纯度的虫草素晶体。     

不同料水比小麦培养基对北虫草产量的影响

通过不同料水比小麦培养基对北虫草产量的影响进行初步研究。结果表明:在5个配方中,1:1.7是最佳的料水比配方,每瓶平均干品产量最高,并呈现出随着培养基料水比的降低或升高,北虫草的产量逐渐降低的规律性。     

不同接种物对蛹虫草子实体营养成分的影响

以蛹虫草菌株母种的表层菌皮、母种基内菌丝和成熟的待分离的新鲜子实体顶端接种到液体培养基进行液体培养,分析比较栽培所获得不同蛹虫草子实体的有效成分得出:以母种表层菌皮接种液体培养所获得的子实体虫草素和硒元素含量最高;以母种培养基的基内菌丝接种培养栽培所获得子实体的虫草酸、腺苷、虫草多糖、SOD酶、蛋氨酸、酪氨酸含量较高。     

不同光照强度对蛹虫草菌丝及子实体生长的影响

以优质蛹虫草D1为试验菌种,分别对蛹虫草生长各主要阶段设置不同光照强度,对蛹虫草液体菌种制作、发菌及菌丝体生长、转色、原基分化、子实体生长等主要生长阶段进行单因子对照试验,通过比较各试验组菌丝及子实体形态、色泽、生长趋势、产量、质量等主要性能特征,以实际栽培产量及商品性能为主要指标,探索蛹虫草不同生长阶段适宜光照强度及规律。结果表明:当光照强度分别为0~50、0~10、300~500、200~300lx时,蛹虫草各生长阶段生长及发育性能良好,出草产量较高。说明对蛹虫草不同生长阶段实行不同光照强度管理是保证和提高蛹虫草产量与质量的重要措施之一。     

工厂化栽培北虫草培养基的优化

通过单因素试验和正交试验对北虫草栽培中最常用的两种培养基主料、蛹粉含量和营养液添加量进行了对比试验。根据出草时间、北虫草产量、质量以及生长周期各项指标对不同培养基配方进行了比较。得出以下结论：最适宜工厂化栽培北虫草的培养基为：每盘300g麦粒培养基,蛹粉15％和料液比为1：1．7。营养液配方：葡萄糖2％,磷酸二氢钾0．1％,硫酸镁0．05％,用自来水配制。     

不同类型菌种与栽培主料栽培蛹虫草对比试验

以温室大棚为栽培场地，研究固体菌种和液体菌种及不同栽培主料栽培蛹虫草对其产量和品质的影响。结果表明，液体菌种栽培蛹虫草比固体菌种栽培蛹虫草的产量高10%，且产量较稳定；以大米为栽培主料时蛹虫草子实体产量和质量均较好。