一氧化氮对小鼠胚胎附植影响的研究

采用子宫角注射方法研究了一氧化氮(N0)对小鼠胚胎植入的影响,并采用组织切片的方法,光镜观察了一氧化氮对小鼠子宫及其内膜形态变化及脱膜化的影响。结果表明,与对照侧相比,L-NAME 0.2 mg/只处理组植入胚胎数降低,在L-NAME中加入NO供体硝普钠(SNP)时,则不影响胚胎植入数;附植过程中,妊娠侧的子宫内膜发育明显,上皮细胞增高,腺体发达,间质疏松,间质细胞增大,发生明显的蜕膜样变。抑制侧子宫内膜柱状上皮细胞相对较低,腺体数少,子宫内膜在附植后期出现较明显退行性变化,基质变得紧密。一氧化氮作为一种内源性平滑肌松驰剂和血管扩张剂,对子宫内膜MMP-9mRNA的表达有着极为显著的调节作用,在附植过程中一氧化氮合酶受到抑制后能显著降低MMP-9基因的表达,并进一步影响子宫内膜发育和胚胎的附植。     

一氧化氮对小鼠胚胎发育的影响研究进展

一氧化氮(nitric oxide，NO)发挥信号传递作用的发现为研究机体细胞功能开辟了一个崭新的领域。动物胚胎的发育是个体发育的重要阶段，其发育过程受到体内各种因素的调节和影响，近几年人们对胚胎发育过程中NO的作用进行了许多的研究，明确了NO对小鼠胚胎发育的作用及其检测方法。     

NO对小鼠早期胚胎发育和附植的影响

一氧化氮（NO）是一种具有生物活性的信号分子和细胞毒性因子,它广泛参与体内的生理和病理过程。近年来,国内外的研究学者做了很多关于NO在胚胎附植过程中的作用机理的研究,结果表明：NO参与妊娠和胚胎附植的过程,并对早期胚胎的发育既有促进作用,也有抑制和毒性作用。     

维生素E对附植前小鼠胚胎发育与一氧化氮生成的影响

为了探讨维生素E对一氧化氮(NO)的产生及其对早期胚胎发育的影响，用Griess试剂法检测了附植前小鼠胚胎中一氧化氮的生成情况。结果表明，附植前胚胎中有NO的产生，且从第1天到第3天有逐渐上升的趋势，第4天有所下降，用抗氧化剂维生素E处理后，NO的生成量下降，表明在附植前小鼠胚胎发育中维生素E对NO的产生可能起到一定的抑制作用。     

干细胞因子对小鼠附植前胚胎体外发育的影响

为优化胚胎体外培养体系,提高胚胎体外培养发育率和发育质量,以昆明小鼠体内受精胚、体外受精胚和孤雌激活胚为研究对象,研究不同浓度干细胞因子对小鼠不同来源胚胎体外发育的影响。结果表明:在KSOM培养液中,小鼠自然受精胚、体外受精胚和孤雌激活胚的卵裂率和桑椹胚率均无显著差异(P0.05),但IVN胚和IVF胚的囊胚发育率及囊胚细胞总数显著高于孤雌激活胚;培养液中添加不同浓度的干细胞因子对小鼠自然受精胚和孤雌激活胚的卵裂率、桑椹胚率、囊胚发育率和囊胚细胞总数都没有显著的影响(P0.05),但干细胞因子浓度为100ng·mL-1时,小鼠体外受精胚的桑椹胚率和囊胚发育率显著高于对照(P0.05)。     

一氧化氮合酶与糖尿病小鼠视网膜细胞凋亡

取正常小鼠、糖尿病2周(DM1组)及20周(DM2组)小鼠的视网膜样本,TUNEL法检测细胞凋亡及存在的部位；免疫印迹法检测一氧化氮合酶( iNOS、nNOS)的表达；竞争性ELISA法测定硝基酪氨酸含量,检测视网膜损伤程度,探讨一氧化氮合酶与早期糖尿病小鼠(2、20周)视网膜细胞凋亡的关系.结果表明:对照组未发现凋亡...     

小鼠胚胎嵌合的研究

选用昆白.CI_(57)及B/L_(615)三个品系小鼠,对其8细胞期(8C),桑椹期(M)和囊胚期(B)的全胚和半胚(半)进行聚合,培养和移植试验。8细胞期及桑椹期胚胎的聚合发育率显著高于囊胚期(P<0.05),全胚聚合的发育率显著高于半胚(P<0.05)。将同品系和不同品系的8细胞期,桑椹期和囊胚期胚胎嵌合移植给27只受体,9只妊娠,妊娠率分别为17％(1/6),40％(6/15)及33％(2/6),平均为33％(9/27),共产仔35只,其中不同品系胚胎的嵌合胚移植,产仔15只,4只为皮毛嵌合体。     

小鼠胚胎冷冻保存条件研究

为探索在实验室条件下最佳的小鼠胚胎冷冻保存条件.对不同发育阶段小鼠胚胎按照同一个冷冻程序进行冷冻;两个不同的冷冻程序对同一个发育阶段的小鼠胚胎进行冷冻.结果表明,-7℃平衡10 min,然后以0.3℃/min的速率迅速降至-35℃,-35℃平衡5min后投入液氮中,此冷冻程序比较适合小鼠胚胎冷冻;冷冻保存对16细胞以上的小鼠胚胎影响较小.     

一氧化氮研究方法评析

本文介绍目前国内外研究一氧化氮(NO)的主要方法,包括电子顺磁共振成像技术(EPR Imaging technique)、液内分光光度检测法、NADPH-d 组织化学法、一氧化氮合酶—Ⅰ(NOS-Ⅰ)免疫细胞化学法及 NOS-Ⅰ免疫荧光技术等。     

激素对小鼠胚胎体外发育的影响

探讨小鼠胚胎体外发育过程中,2种激素(孕马血清促性腺激素PMSG、人绒毛膜促性腺激素HCG)对早期胚胎发育的影响。取原核期胚胎培养于不同的培养体系中,确定适合胚胎发育的最佳体外培养体系;在胚胎培养液中加入不同浓度的激素,观察激素对体外发育的影响。试验发现含10%胎牛血清的人输卵管液培养液(HTF)是该试验条件下小鼠早期胚胎发育的最佳培养液;在该培养液中添加不同浓度和不同种类的激素后,各发育阶段胚胎的发育率与未添加激素的对照组相比均有所下降,但未发现浓度依赖性。由此可认为,高浓度的PMSG和HCG对体外培养的胚胎发育有抑制作用,可降低胚胎发育到各阶段的比例,尤其是显著降低了囊胚的发生率。     

用酶分离小鼠早期胚胎的研究

用酶分离小白鼠２－－细胞、４－－细胞和８－－细胞胚胎,获取单个卵裂球,将其培养在含有牛血清蛋白质的ＣＺＢ培养基微滴内。培养的小白鼠胚胎发育情况有３种：（１）正常发育;（２）泡囊化;（３）不发育。在体外培养条件下２－－细胞单个卵裂球有８６．５％发育成２－－细胞;有３５．１％发育成４－－细胞,有８．１％发育到８－－细胞,有５．４％发育到桑椹胚;４－－细胞胚的单个卵裂球中有８３．３％发育到２－－细胞,３７．５％发育到４－－细胞,１２．５％发育到８－－细胞,８．３％发育到桑椹胚;在８－－细胞胚的单个卵裂球中有４６．７％发育到２－－细胞,２６．７％发育到４－－细胞,１３．３％发育到８－－细胞、６．７％发育到桑椹胚。实验结果表明用酶分离小白鼠早期胚胎,所获卵裂球具有一定的继续发育能力,而且没有透明带也能发育。     

猪苓多糖对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮生成、iNOS活性和细胞内还原型谷胱甘肽含量的影响

目的 :观察猪苓多糖 (PPS)对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮 (NO)生成及其免疫调节作用和抗肿瘤作用机制。方法 :采用Griess反应、荧光法和DTNB比色法分别测定不同剂量的PPS作用小鼠腹腔巨噬细胞的NO生成量、诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)活性及细胞内还原性谷胱甘肽 (GSH)含量的变化。结果 :PPS能使小鼠腹腔巨噬细胞NO生成增加 ,i NOS活性增高 ,并呈作用剂量依赖关系 ;PPS在刺激小鼠腹腔巨噬细胞NO合成同时 ,伴有细胞内GSH水平的降低 ,呈负相关 (P <0 .0 5 )。结论 :PPS能提高小鼠腹腔巨噬细胞iNOS活性 ,增加NO合成 ,消耗细胞内的GSH。提示细胞内GSH可能起到调节巨噬细胞NO生成和保护宿主细胞免受NO介导的细胞毒作用     

一氧化氮与心血管疾病

一氧化氮是体内的一种重要生理功能调节物质,在心血管系统中,一氧化氮具有调节血管张力、稳定血管容积、抑制平滑肌增生、对抗血小板聚集等作用.在高血压、动脉硬化、冠心病、心力衰竭的发病机制中扮演着重要角色.提高血液中内、外源性一氧化氮的浓度,有望成为治疗心血管疾病的新手段.     

壳寡糖对小鼠胚胎体外发育的影响

本研究旨在通过向小鼠体内受精和体外受精原核胚胎的培养基中添加壳寡糖(对照组:0μg·m L-1;试验组:5、10、50、100和200μg·m L-1),研究其对小鼠胚胎着床前发育效率(卵裂率、囊胚率)和囊胚质量(囊胚总细胞数、内细胞团数(ICM)与总细胞数的比率)的影响。结果表明,对于自然受精胚胎,添加10μg·m L-1壳寡糖组的囊胚总细胞数显著高于对照组(P0.05),添加200μg·m L-1壳寡糖组的卵裂率和囊胚率均显著低于对照组(P0.05)。对于体外受精胚胎,添加10μg·m L-1壳寡糖组的囊胚率显著高于对照组(P0.05),添加200μg·m L-1壳寡糖组的囊胚率显著低于对照组(P0.05)。本试验表明,在化学限定培养基中添加适量的壳寡糖有利于改善小鼠胚胎的质量,但高剂量的壳寡糖可能不利于小鼠胚胎的早期发育。     

一氧化氮对三角涡虫运动和摄食行为的影响

通过建立不同的培养条件,分别在含有外源性L-精氨酸(L-Arg)、一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N-硝基-L精氨酸甲酯(N-nitro-L-ar-ginine methyl ester,L-NAME)以及外源性亚硝基铁氰化钠的培养液中对三角涡虫进行阶段培养,运用图像分析技术对三角涡虫的摄食行为进行动态追踪。经各项数据的统计与分析,认为NO对三角涡虫的摄食以及运动等行为都有一定程度的影响。     

醋酸铅对小鼠胚胎体内发育毒性的研究

采用饮水染毒法研究碱式醋酸铅对小鼠早期胚胎体内发育的毒性。将体重 (1 5± 2 ) g的母鼠随机分为高剂量、中剂量、低剂量染毒组和对照组。从试验的第 1天起 ,染毒组小鼠分别于下午 1 7:0 0至次日上午 8:0 0自由饮用 5 .0 ,1 .0和 0 .2 g/L醋酸铅溶液 ,次日上午 8:0 0至下午 1 7:0 0更换为自来水 ,如此循环 ,持续 2 1 d;对照组小鼠一直自由饮用自来水。染毒结束后 ,进行正常饲喂、饮水至试验结束。从第 2 6天开始对小鼠进行超排 ,超排小鼠分别在注射 h CG后的 4 8,72和 96 h回收输卵管及 /或子宫胚胎。结果显示 ,在注射 h CG后 4 8h回收胚胎时 ,染毒各组超排小鼠正常 2～ 4 - C胚胎占回收总数的比率与对照组无显著差异 (P>0 .0 5 ) ;72 h回收胚胎时 ,高、低剂量组的桑葚胚比率极显著低于对照组 (P<0 .0 1 ) ,中剂量组则显著低于对照组 (P<0 .0 5 ) ;96 h回收胚胎时 ,高剂量组囊胚比率极显著低于对照组 (P<0 .0 1 ) ,中、低剂量组的囊胚比率与对照组差异不显著 (P>0 .0 5 ) ,且此时各染毒组的退化胚比率均极显著高于对照组 (P<0 .0 1 )。结论认为 ,铅能显著影响体内胚胎从 2 - C期进一步发育为桑葚胚和囊胚 ,并使胚胎发育延迟、停滞和退化     

昆明小鼠单细胞胚胎体外培养的研究

本试验研究了葡萄糖、EDTA和小鼠血清对昆明小鼠单细胞胚体外发育的影响.结果发现:不含葡萄糖HECM-1组桑椹率为40.05％,对照组为8.14％;含EDTA的CZB组桑椹率为61.18％,对照组为47.44％;小鼠血清对昆明小鼠单细胞胚体外发育无促进作用。可见,葡萄糖抑制昆明小鼠单细胞胚胎体外发育;在不含葡萄糖的条件下,EDTA支持小鼠早期胚胎体外发育;无论有无葡萄糖小鼠血清对小鼠早期胚体外发育无促进作用。     

高血压对大鼠脑内一氧化氮合酶表达量的影响

目的观察高血压对大鼠脑内一氧化氮合酶表达量的影响。方法分别取高血压大鼠和正常大鼠各3只,全身灌注,取脑,制成石蜡切片,分别用HE染色、亚甲基蓝染色、免疫组织化学方法观察高血压大鼠和正常大鼠脑内神经元形态及一氧化氮合酶的表达量。结果高血压大鼠脑内海马区、黑质区和纹状体区一氧化氮合酶表达量均低于正常大鼠,且差异显著,p0.05。结论高血压可导致大鼠脑内部分脑区一氧化氮合酶表达量下降。     

副溶血弧菌对九孔鲍血清中一氧化氮及一氧化氮合酶活力的影响

为了研究感染副溶血弧菌对杂色鲍体内一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)活力的影响,分别对九孔鲍足部注射浓度为5×105CFU/mL、5×106CFU/mL和5×107CFU/mL的副溶血弧菌悬浮液(剂量为0.1 mm/只),在注射前及注射后6 h、12 h、24 h、48 h9、6 h1、92 h和240 h足部取血,测定其血清中NO含量以及NOS活力的变化情况。结果表明,注射副溶血弧菌后九孔鲍血清中NO含量及NOS活力显著高于对照组,且NOS活力的最大值出现的较NO最大值早,证明注射副溶血弧菌可以诱导九孔鲍血清内NO含量和NOS活力的升高。为今后研究NO/NOS系统在软体类免疫中的作用提供一些理论依据。在生产实践中,可以通过诱导调节NO在鲍体内的含量,增强其自身的非特异性免疫功能,从而提高抵抗疾病的能力。