中华绒螯蟹长江天然群体遗传差异的AFLP初步分析

应用AFLP分子标记,对不同年代和地点采收集的长江中华绒螯蟹天然样本(1998年江苏镇江江段,2005年和2006年江苏南京江段,2004年、2005年及2006年长江口)的遗传变异进行了初步分析.结果发现:六个采集样本在等位基因平均数、有效等位基因数、 Nei's基因多样性指数、Shannon 信息指数等4项遗传多样性指标方面均未出现显著差异(P＞0.05),但长江口3个采集样本的这4个指标都略高于长江干流的3个采集样本;AMOVA分析显示,样本间的遗传变异仅为3.89%,而样本内的遗传差异却高达96.11%;UMPGA树分析显示,2004-2006采集样本与1998年采集样本之间有一定的遗传差异.研究结果初步表明,不同年代与地点的长江中华绒螯蟹天然群体的遗传变异没有出现显著分化;同20世纪90年代末的样本相比,本世纪初的样本产生了一定程度的遗传差异,但未达显著水平.     

中华绒螯蟹长江天然群体遗传差异的AFLP初步分析

应用AFLP分子标记,对不同年代和地点采收集的长江中华绒螯蟹天然样本(1998年江苏镇江江段,2005年和2006年江苏南京江段,2004年、2005年及2006年长江口)的遗传变异进行了初步分析.结果发现:六个采集样本在等位基因平均数、有效等位基因数、 Nei's基因多样性指数、Shannon 信息指数等4项遗传多样性指标方面均未出现显著差异(P＞0.05),但长江口3个采集样本的这4个指标都略高于长江干流的3个采集样本;AMOVA分析显示,样本间的遗传变异仅为3.89%,而样本内的遗传差异却高达96.11%;UMPGA树分析显示,2004-2006采集样本与1998年采集样本之间有一定的遗传差异.研究结果初步表明,不同年代与地点的长江中华绒螯蟹天然群体的遗传变异没有出现显著分化;同20世纪90年代末的样本相比,本世纪初的样本产生了一定程度的遗传差异,但未达显著水平.     

10个日本绒螯蟹群体与中华绒螯蟹形态的主成分分析

以10个日本绒螯蟹Eriocheir japonica群体和1个中华绒螯蟹E．sinensis群体为研究对象,分别测量了18个形态性状参数,数据经标准化后,对绒螯蟹群体形态差异进行了主成分分析。研究结果表明：1)冲绳以外的日本绒螯蟹群体的形态学特征存在较大的相似性,个体间有明显交叉;2)冲绳日本绒螯蟹群体与其它群体间形态差异较大,其多数个体与其它群体的个体分为两大支;3)中华绒螯蟹与日本绒螯蟹存在明显差异,可分为明显的两大支。     

中华绒螯蟹

中华绒螯蟹俗称河蟹、毛蟹、螃蟹、大闸蟹。主要分布在我国沿海省份。长江口是最主要的产卵场,沿江的五大湖泊是河蟹的育肥场所。河蟹肉味鲜美细嫩,蟹黄(肝脏)更是独具风味。活蟹是经济价值高的传统出口商品。蟹壳可提取甲壳素、壳聚糖和氨基葡萄糖盐酸盐等高新技术产品。它广泛应用于食品、轻工、医学、环保、农业等领域。河蟹头胸甲背面隆起、额宽,具4个额齿,均尖锐,居中一缺刻最深。前侧缘具4齿,第4齿小而明显。螯足掌部与指节基部内外表面均生绒毛。头胸部背面呈墨绿色,腹面灰白色。河蟹喜栖息在水质清晰、水草丰盛的湖泊、江河水域,营…     

中华绒螯蟹奇、偶年天然群体的遗传差异分析

中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）的生命周期通常为两年,繁殖结束生命也就终止。在理论上,相邻两个年份中华绒螯蟹群体间不存在遗传婚配或基因交流,而存在奇年与偶年两个系谱之分。为检验长江野生中华绒螯蟹奇、偶年份群体的遗传差异,应用18对微卫星引物,对2004-2011共7年采集的中华绒螯蟹长江口天然繁殖群体进行了遗传分析。结果表明：（1）偶年群体（2004、2006、2008、2010）的观测杂合度和期望杂合度显著高于奇年群体（2007、2009、2011）,P<0.05;（2）奇、偶年群体间的遗传分化差异显著（P=0.024）;（3）基于遗传距离的NJ聚类关系树表明：奇、偶年群体形成较为明显的两个遗传聚类;（4）主成分分析（PCA）和STRUCTURE遗传聚类分析均表明：奇、偶年类群的分化明显,但两群体间存在一定程度的遗传渐渗与基因交流;（5）两个偶年（2004、2006）和两个奇年（2007、2011）群体检测到显著的遗传瓶颈效应。研究结果综合表明：长江天然中华绒螯蟹群体存在较明显的奇年与偶年差异,但两者间也存在一定程度的基因交流。     

中华绒螯蟹幼蟹的维生素C摄取与克服性早熟

中华绒螯蟹人工培育幼蟹过程中,缺少必需的维生素C的添加,会导致约14％左右的雌性个体性早熟出现。正常幼蟹的肝胰脏、肌肉的维生素C含量高于早熟幼蟹1～2倍。性早熟现象与其体内Vc的含量不足存在着正相关。初步判断,Vc源的缺乏或不足是造成幼蟹性早熟的重要原因。饵料中Vc的添加,对幼蟹克服性早熟与促进生长有明显的作用,适宜的添加量为3000～5000mg·kg－1。     

中华绒螯蟹生殖调控研究进展

介绍了中华绒螯蟹繁殖生物学、繁殖影响因素、繁殖调控机制等方面的研究进展,旨在为今后更好指导河蟹养殖业生产奠定基础。     

中华绒螯蟹幼蟹对饲料中维生素A的适宜需要量

在室内条件下研究了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)幼蟹对维生素A的适宜需要量.在基础饲料中分别添加0、5 000、10 000、20 000、40 000、80 000、160 000和320 000 IU/kg的维生素A,得到8种等氮等能的半精制饲料,投喂体重为(1.54±0.45) g的幼蟹10周.结果表明,随着饲料中维生素A添加量的提高,幼蟹的增重率和特定生长率先升高后降低,当维生素A添加量为80 000 IU/kg时,幼蟹的增重率和特定生长率最高,分别为82.23%和0.86%;饲料效率随着饲料中维生素A添加量的升高先升高后降低,当添加量为40 000 IU/kg时饲料效率最高;饲料中维生素A添加量为320 000 IU/kg时,蟹体粗脂肪的含量达到最高,并显著高于其他各试验组(P<0.05);肝胰腺超氧化物歧化酶活性随着饲料中维生素A添加量的升高先在一定水平波动,而后明显下降并在较低水平波动;投喂不同维生素A添加量饲料对中华绒螯蟹眼中维生素A的含量没有显著的影响.结果提示,饲料中添加适量的维生素A,可以促进中华绒螯蟹的生长,降低饲料系数,并且可以在一定程度上提高非特异性免疫能力.采用Broken-line模型分析得出中华绒螯蟹幼蟹对维生素A的适宜需要量为69 740～70 770 IU/kg.     

中华绒螯蟹、日本绒螯蟹及其杂交种成体主要矿物质元素含量比较

研究了中华绒螯蟹、日本绒螯蟹及其杂交种成体肌肉、性腺和肝胰腺中的主要矿物质元素组成及含量,结果显示:(1)3种群绒螯蟹雄体肌肉中,K、P和Zn的含量无显著差异;中华绒螫蟹的Na、Mg和Cu含量显著高于其他两种,但Mn和Fe含量最低;日本绒螯蟹肌肉中的Ca含量最低.就精巢而言,3种群蟹精巢中的Na和Mg含量无显著差异;日本绒螯蟹的Mn和Fe含量最高,杂交种的K、P和Zn含量最低,而中华绒螯蟹的Ca和Cu含量最低.就肝胰腺而言,3种群蟹的Mg、Ca和P含量无显著差异;杂交蟹的Na、K和Mn含量显著高于其他两种蟹,但其Fe含量最低;中华绒螯蟹和日本绒螯蟹则分别具有最高的Cu和Zn含量.(2)3种群绒螯蟹雌体肌肉中,5种常量元素的含量均无显著差异;中华绒螯蟹的Cu、Zn和Mn元素含量最高,而日本绒螯蟹的上述微量元素含量最低.3种群绒螯蟹卵巢中的9种主要矿物质元素含量均存在显著差异,中华绒螯蟹卵巢中的Na、P、Mg和Zn含量高于其他种群,除杂交种的Na和中华绒螯蟹的K含量最低外,日本绒螯蟹卵巢中其他6种元素含量均最低.肝胰腺中,3种群绒螯蟹的矿物质整体含量排序为:日本绒螯蟹＞中华绒螯蟹＞杂交蟹.整体上,3种群绒螯蟹肌肉中的Na、Mg、Cu和Zn含量低于海水蟹类,但Ca、P和K含量高于大部分海水蟹;3种群绒螯蟹矿物质元素组成模式较为接近,但仍存在一定的种间差异.     

中华绒螯蟹与合浦绒螯蟹线粒体细胞色素b基因片段的DGGE分析

[目的]探讨利用DGGE技术对中华绒螯蟹和合浦绒螯蟹遗传多样性进行分析的可能性。[方法]对中华绒螯蟹5个群体和合浦绒螯蟹1个群体共180个个体的线粒体细胞色素b（cytb）基因片段进行了PCR扩增和变性梯度凝胶电泳（DGGE）分析。[结果]所有PCR产物在DGGE电泳时共有2种迁移速率,合浦绒螯蟹所有个体的PCR产物的迁移速率相同,且中华绒螯蟹江都群体46.7%、仪征群体23.3%以及温州群体20.0%的个体与合浦绒螯蟹的迁移速率一致;而以上3个中华绒螯蟹群体的其他个体以及南京、盘锦群体所有个体的PCR产物在DGGE电泳时的迁移速率均相同,均快于合浦绒螯蟹,表明在中华绒螯蟹中混杂有合浦绒螯蟹的遗传标记类型。[结论]DGGE方法可用于绒螯蟹的遗传多样性分析。     

利用RAPD分子标记对优良玉米种质的遗传分析和鉴定

利用RAPD技术，从26条引物中筛选出10条多态性好的引物对19个玉米材料进行遗传分析和鉴定。结果表明．S7、S461、S495、S506等4个引物的RAPD图谱可以明显区分开19个玉米材料．具有不同的特征谱带；并通过聚类分析获得了19个玉米材料的亲缘关系树状图，证明了亲本和子代的系谱关系。     

濒危植物香果树自然居群遗传多样性的RAPD分析

    利用随机扩增多态DNA(RAPD)标记,对国家二级重点保护植物香果树(Emmenopterys henryi)的遗传多样性和遗传分化进行了分析.12个随机引物对9个香果树居群173个个体的DNA样品进行扩增,共检测到182个扩增条带,其中100条为多态条带,多态位点百分率(PPB)为54.95%;香果树总的Shannon多样性指数(I)为0.2838,Nei指数(h)为 0.1900,表明种水平的遗传多样性较高.而居群水平的遗传多样性较低,PPB平均为16.48%,I平均为0.0914,h平均为0.0622.AMOVA分子差异分析表明香果树居群间遗传分化程度高,74.76%的变异存在于居群间,25.24%的变异存在于居群内.香果树居群间的基因流很低,为0.2434.9个居群间的平均遗传距离为0.1653,遗传距离与居群间的地理距离存在显著的相关性.利用算术加权平均数法(UPGMA)对香果树居群进行聚类,结果9个居群可分成浙江省内和省外两大类群.     

西蓝薹RAPD-PCR反应体系的建立与优化

以新型蔬菜西蓝薹为研究对象,采用改良的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取基因组DNA,并通过单因素多水平梯度试验,筛选了Taq酶、引物、DNA模板、Mg2+、dNTPs的浓度或用量,建立了西蓝薹RAPD-PCR的最佳反应体系:25 μL反应体系中含0.8 U Taq酶、0.40 μmol/L引物、30 ng DNA模板、1.6 mmol/L Mg2+、0.25 mmol/L dNTPs、2.5 μL 10×PCR buffer.利用优化的反应体系,对5个西蓝薹品种进行体系稳定性检测,结果表明该反应体系的重复性和稳定性良好.     

梨种质资源遗传多样性研究中的RAPD技术引物筛选

[研究目的]RAPD技术已广泛用于种质资源遗传多样性研究,中国梨属植物资源丰富,通过对RAPD多态性引物的筛选,为RAPD技术在梨属种质资源中的应用提供参考;[方法]以梨属44个种和品种为试验材料,通过RAPD扩增技术,筛选RAPD多态性引物;[结果]从50个随机引物中筛选出18个多态性引物,所选出的多态性引物每个引物扩增出的条带数在4～11之间,扩增出的DNA片段分子量大多在450～2000 bp之间,共扩增出118个条带,其中样品间相同的条带数有11条,呈现多态性的条带107条,所选引物的多态百分率达90.8%.[结论]所筛选的18个引物为梨属植物RAPD扩增多态性引物,可广泛用于梨属植物的RAPD扩增技术.     

利用RAPD技术进行杂交油菜杂油59品种鉴定和纯度分析

 研究建立了简便快速微量提取油菜DNA的方法 ,并从 370个随机引物中筛选出 5个可明显区分CMS杂交油菜品种杂油 5 9及其亲本系的引物。利用两个引物将杂油 5 9杂种和目前生产上应用或即将应用的 2 2个品种组合或自交系得以完全区别开 ,并用其中 1个引物对油菜杂交种的种子纯度进行了分析。结果表明 ,选择合适的引物进行RAPD分析 ,不仅是杂交品种种子纯度分析的有效手段 ,而且通过多种引物的交互使用 ,也是进行品种之间鉴别和资源保护的重要方法之一。     

高粱DNA导入普通小麦选育高产春小麦新品系研究

利用花粉管通道技术将供体高粱品种 6 A/ 115 DNA导入受体普通小麦品种陇春 13的研究结果表明 ,高粱的基因不仅被导入了普通小麦 ,而且得到了表达 ,通过外源 DNA导入育成的春小麦新品系 8912 2集矮秆、抗条锈病和高产于一体 ,其淀粉含量高出原受体品种 4 .0 4个百分点 ,光合速率提高 2 .6 4个百分点 ,抗盐碱能力增强 ,产量较标准对照品种高原 6 0 2等显著提高 ,该品系于 2 0 0 1年完成试验程序 ,现已进行生产试验和示范     

四川大头茶在不同生境中的遗传分化

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析了缙云山四川大头茶(Gordornia acuminata)在3个群落类型(针阔混交林、四川大头茶纯林和常绿阔叶林)中的遗传多样性和遗传分化.12个引物共扩增出108个产物,其中82个是多态性的,多态位点比率为74%.Shannon指数估算的3个种群的平均遗传多样性为2.2448,总遗传多样性为2.6353,在总遗传变异中,有89.35%存在于种群内,10.65%存在于种群间.对上述研究结果进行了分析和讨论.     

谢君魔芋DNA提取方法的比较及其变异的RAPD检测

试验在魔芋DNA不同提取方法比较的基础上,利用RAPD技术对谢君魔芋不同变异植株的DNA进行了检测。结果表明,利用改良的CTAB法可以得到纯度高的DNA样品,利用8条随机引物可以鉴定出谢君魔芋的变异。对9株谢君魔芋复叶分裂方式、气生球茎生成个数、叶柄色泽(斑纹)不同变异系的检测结果表明,其RAPD扩增结果均有差异,变异系间的相似性系数分布范围在0.440～0.800,平均相似性系数为0.714,其中植株1与植株8的相似系数最大,为0.800,植株1与植株3的相似系数最小,为0.440。采用UPGMA法进行聚类分析,9株谢君魔芋变异株归于3类,并建议在谢君魔芋变异株系选择上可将叶柄色泽(斑纹)作为主要选择指标。     

长江口日本鳗鲡群体遗传多样性RAPD初步分析

对2005年采集自长江口地区4个采样点、5批、共10尾性成熟前成鳗、82尾玻璃鳗的日本鳗鲡样本的遗传多样性进行了RAPD分析。在51条随机引物中筛选出具有稳定扩增、条带清晰的多态性引物16条，16条引物共检测到132个位点，其中多态位点114个（86．36％）。五个采样群体各自的平均杂合度（Hc）在0．2053～0．3150之间，平均基因多样性指数（Ho）在0．2974～0.4526之间；采样群体两两间的遗传分化指数几，在0．0508～0．1524之间。群体内遗传变异和群体间遗传变异对群体总遗传变异的贡献率分别为79．18％和20．82％；Nei的遗传距离在0．0593～0．1425之间；在玻璃鳗采样群体间未发现遗传差异同采样地点及月份有何显著关系，显示它们可能同属一个大混合群体。而遗传距离、遗传分化指数及NJ树分析结果一致表明：成鳗和玻璃鳗之间可能存在相当的遗传距离和遗传分化。     

新疆野生油菜与甘蓝型油菜属间杂交亲和性及杂种分子鉴定

采用蕾期剥蕾授粉的方法,研究了新疆野生油菜与甘蓝型油菜属间杂交亲和性．属间杂种F1植株形态表现一致,介于双亲之间,并且具有明显的杂种优势．从新疆野生油菜X湘油15号F1群体中选取9株进行RAPD分析,扩增出的带型完全一致,并且是父母本随机扩增DNA片段的综合,说明这9株全为真杂种．试验结果表明,蕾期授粉可以克服新疆野生油菜和甘蓝型油菜属间杂交的不亲和性,利用RAPD分子标记技术可以快速有效地鉴定远缘杂种．