贵州杜鹃花科4种植物新记录

为丰富和完善贵州杜鹃花科植物种类记录,通过对杜鹃科植物资源资料的整理和野外调查,发现贵州杜鹃花科杜鹃属4种新分布植物,分别是湖南杜鹃Rhododendron hunanense Chun ex Tam、睡莲叶杜鹃Rhododendron nymphaeoides W.K.Hu、红马银花Rhododendorn vialii Delavay et Franch和毛果长蕊杜鹃Rhododendron stamineum Franch.var.lasiocarpum R.C.Fang et C.H.Yang,初步描述了4个种在贵州所属亚属或组内与其他种类的区别及其生长环境特征。     

授粉方式对不同亚属杜鹃间远缘杂交结实的影响

为了克服杜鹃花属植物杂交授粉前障碍,以南京地区栽培的映山红(Rhododendron simsii)、满山红(R.mariesii)及马银花(R.ovatum)为母本,云锦杜鹃(R.fortunei)、猴头杜鹃(R.simiarum)、大白杜鹃(R.decorum)及马缨杜鹃(R.delavayi)花粉为父本,探讨延迟授粉、NAA涂抹柱头、花粉培养液涂抹柱头、食盐水涂抹柱头、正己烷涂抹柱头和加热花粉6种授粉方法对杂交结实的影响。结果表明:不同的杂交组合适宜的杂交授粉方法不同,在所配置的8个杂交组合中,延迟授粉显著提高了其中6个杂交组合的子房膨大率,是克服杜鹃亚属间远缘杂交障碍的有效方法;食盐水、花粉培养液涂抹柱头及加热花粉也提高部分杂交组合的子房膨大率;0.1%NAA处理仅对映山红×猴头杜鹃、映山红×马缨杜鹃及马银花×猴头杜鹃3个杂交组合有效;而正己烷处理则对大部分组合的结实有抑制作用。     

广东野生杜鹃花资源调查及园林开发探讨

为摸清广东省野生杜鹃花分布现状,加强杜鹃花在园林上的开发,通过野外实地调查与取样、查阅文献和标本相结合的方法,研究了广东省杜鹃花属植物资源现状、分布特征与原生土壤的理化性质。结果表明:广东省野生杜鹃花有53种,分布广泛且海拔低(500 m以下)的杜鹃花种类有紫花杜鹃、满山红、华丽杜鹃、毛棉杜鹃、岭南杜鹃、太平杜鹃、鹿角杜鹃、映山红、广东杜鹃等,土壤pH值在4.31~5.88之间,均值为4.85,Ec值在0.88~2.47 mS/cm之间,均值为1.57 mS/cm。在此基础上,对广东野生杜鹃花在园林的开发利用方面进行了探讨,并给出了建议。     

马雄杜鹃的繁育系统和杂交育种研究初探

【目的】为马雄杜鹃(Rhododendron maxiongense)的保护和园林应用提供理论依据。【方法】本研究对马雄杜鹃进行了开花物候和访花昆虫的观察,统计了杂交指数、花粉-胚珠比和人工控制授粉试验。【结果】马雄杜鹃花期为4月中旬到5月底;杂交指数(OCI)≥4,P/O值为422.48,主要的传粉者为东方蜜蜂;自然状态下马雄杜鹃的坐果率最高,为57.14%,同种同株异花授粉和同种异株异花授粉坐果率仅为24.28%和17.14%。以马雄杜鹃(R.maxiongense)为母本,马缨杜鹃(R.delavayi)、大白杜鹃(R.decorum)、露珠杜鹃(R.irroratum)和羊踯躅(R.molle)为父本的坐果率分别为11.43%、22.86%、2.86%和10%。【结论】马雄杜鹃花粉的最佳活性期与柱头的最佳可授期可能互不相遇;其繁育系统属于兼性异交且自交亲和,在传粉的过程需要传粉者;自然状态下传粉昆虫效率较高,而人工同种授粉和人工杂交授粉可能由于杂交亲和力不同导致坐果率较低。     

贵州百里杜鹃保护区杜鹃属植物及其园林应用

杜鹃花具有很高的观赏价值和园林应用价值,是我国十大传统名花之一。为加速贵州省利用野生杜鹃花资源,对贵州百里杜鹃保护区进行了杜鹃属植物的调查研究。经调查,保护区内有33种杜鹃花。同时,通过对杜鹃花叶片大小、花冠、花的大小、花序、花色、花期等方面的调查,简述了杜鹃花在园林绿化中的应用及存在的问题。     

兴安杜鹃播种育苗

兴安杜鹃又名映山红、尖叶杜鹃、金达莱（朝鲜族称法）,为杜鹃花科灌木。其为落叶灌木,高1～2m,多分枝。枝条、苞片、花柄及花等均有棕褐色扁平的糙伏毛;树皮浅灰色;     

高温胁迫对刺毛杜鹃生理特征和生长的影响

【目的】杜鹃花种类繁多,对高温的适应能力千差万别。为了分析刺毛杜鹃适应高温环境的能力和为刺毛杜鹃推广应用提供科学依据,对其进行高温胁迫,以分析其耐热能力。【方法】利用光照培养箱创造4种温度环境(25℃/21℃,32℃/25℃,38℃/28℃,42℃/31℃),研究其叶片生理指标变化及生长情况。【结果】(1)在38℃/28℃和42℃/31℃温度下,叶绿素a、类胡萝卜素和MDA等含量随时间推移呈先升后降趋势,而电导率和SOD活性呈不断上升,即刺毛杜鹃受到高温胁迫,但自身进行了积极的响应;(2)随处理时间延长,25℃/21℃、32℃/25℃和38℃/28℃条件下,净光合速率、气孔导度、蒸腾速率和胞间CO2浓度下降,光合作用受气孔限制;而在42℃/31℃温度下,胞间CO2浓度有所上升,光合作用是非气孔限制;水分利用效率和气孔限制值随温度升高和时间推移而降低。(3)在42℃/31℃高温下,第16天植株叶柄变褐,处理23 d后植株有部分死亡;但在其它各温度下,植株生长正常。【结论】高温能降低刺毛杜鹃的色素含量、光合能力及水分利用效率,改变细胞膜渗透性,但通过增强SOD的活性保护细胞膜的稳定性,以提高对高温逆境的抗性,在42℃/31℃高温环境下刺毛杜鹃可连续忍耐15 d,适合我国东南及中南部省份的低海拔地区城市栽培应用。     

丹东杜鹃花家庭式扦插育苗

丹东杜鹃已广泛应用于城乡绿化、美化、装点庭院与居室.为了省时省工、降低费用、简单易行、适合家庭快速繁殖杜鹃,现将丹东杜鹃花家庭式简易扦插育苗技术介绍如下:     

山西省杜鹃花属植物亲缘关系的RAPD分析

采用RAPD分子标记技术,对山西省2种野生杜鹃和6个省内常见园艺品种进行亲缘关系分析。从50条引物中筛选出4条多态性丰富的引物,对8种杜鹃花共11个样本的DNA进行PCR扩增,其产物用琼脂糖凝胶电泳进行检测。结果表明,共扩增出44条谱带,其中,多态性谱带28条,多态位点率63.64%。用NTSYS软件计算出遗传相似系数(GS)在0.238 8~0.970 2,平均值为0.540 6,说明各样本间遗传基础差异较大;当GS为0.78时,可将供试样本分为3大类群,第1类为照山白,第2类为迎红杜鹃、羊踯躅、刺毛杜鹃和马银花,第3类为满山红、锦绣杜鹃和皋月杜鹃;第2,3类群的聚类结果表现出样品在形态学上虽有差异,但在基因水平上却有很高的同源性。RAPD标记技术从分子水平展示了杜鹃花属8种植物的亲缘关系,可为今后山西省野生杜鹃的育种和开发提供依据。     

贵州梵净山世界自然遗产地旅游线路植物资源探讨

[目的]探索梵净山世界自然遗产地的原始森林植物物种。[方法]2019年5月在旅游淡季时沿旅游线路的万步云梯从步梯0步(鱼坳,海拔836 m)至金顶蘑菇石(海拔2 318 m),对总海拔跨度1 482 m的步梯沿途视野20 m处维管植物物种进行考察并拍照,室内结合《中国植物志》等资料鉴定植物物种。[结果]梵净山世界自然遗产地有穗花杉、伯乐树、粗榧、华西花楸、瓶尔小草、金发藓等植物达100种之多,并且总海拔跨度1 482 m的梵净山世界自然遗产地植被垂直带谱明显,其中836～1 300 m处为常绿阔叶林,第三纪古老孑遗的长柄水青冈群落分布在海拔1 114 m处;1 300～1 900 m处为三峡槭、贵州青冈、亮叶水青冈和米心水青冈等组成的常绿落叶阔叶混交林;1 900～2 100 m处为亮叶水青冈、多脉青冈等为优势种的落叶阔叶林,结构完整、自然更替良好的贵州青冈群落分布在海拔2 031 m处;2 100～2 200 m为雷山杜鹃、大钟杜鹃、吊钟花等杜鹃花科植物和木樨科的川滇蜡树等亚高山杜鹃矮林,林下层为箭竹、玉簪等草本,2 200～2 318 m为亚高山灌丛草甸,由紫药红荚蒾、西康绣线菊等...     

青稞转录因子HvnANT1基因的克隆与表达分析

为探究HvnANT1基因在青稞粒色形成过程中的基因表达模式,以紫粒青稞‘涅如姆扎’和白粒青稞‘昆仑10号’为试材,利用简化基因组GBS(Genotyping-by-Sequencing)对青稞紫粒进行基因定位,克隆到HvnANT1基因,对其进行生物信息学分析。结果表明：1）在7H染色体的84.30—86.00cM获得1个MYB类转录因子,命名为HvnANT1。2）该基因长1 033bp,其完整开放阅读框为762bp,编码253个氨基酸。HvnANT1蛋白分子量为27.14kU,是亲水性的不稳定碱性蛋白且不存在跨膜结构,无信号肽。该蛋白的二级结构主要是由无规卷曲、α-螺旋、延伸链和β-转角组成,具有2个SANT结构域（分别位于第13—第63个;第66—第114个氨基酸）。3）同源比对与系统进化分析表明：青稞HvnANT1蛋白与大麦、乌拉尔图小麦、高梁、玉米、二型花、小米、水稻、土瓶草、车轴草和杨梅10种植物的ANT1蛋白序列相似性分别为100.00%、88.85%、54.64%、60.95%、60.82%、58.46%、57.61%、37.76%、36.05%和36.33%;这些序列都具...     

乌梅等20种中药对胸膜肺炎放线杆菌的体外抗菌活性研究

【目的】观察乌梅Fructus mume等20种中药的体外抗胸膜肺炎放线杆菌Actinobacillus pleuropneumoniae活性.【方法】通过乙醇回流、水煎煮和超声波等方法对20种中药进行提取,采用二倍稀释法测定其对胸膜肺炎放线杆菌的体外抗菌活性;并研究抗菌活性较强的几味中药的体外联合抑菌活性.【结果和结论】乌梅、黄连Rhizoma coptidis、诃子Terminalia chebula、秦皮Cortex fraxini、地榆Sanguisorbae officinalis、虎杖Polygonum cuspidatum 6种中药提取物对胸膜肺炎放线杆菌的最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC)范围是6.25~50.00 mg/mL;大青叶Isatis indigotica、茵陈Artemisia capillaris、甘草Glycyrrhiza uralensis和白鲜皮Dictamnus dasycarpus 4种中药提取物的MIC范围是50.00~100.00 mg/mL;黄柏Phellodendron amurense、杜仲Eucommia ulmoides、金银花Lonicera japonica、柴胡Bupleurum chinense、蒲公英Taraxacum mongolicum、板蓝根Baphicacanthus cusia、栀子Gardenia jasminoides和黄芪Astragalus membranaceus等10种中药提取物的MIC100.00 mg/mL.联合抑菌试验结果表明,乌梅、黄连、诃子和虎杖两两联合抑菌指数(FICI)≤1,乌梅、虎杖分别与秦皮的FICI2.乌梅、黄连、诃子、虎杖、秦皮、地榆对胸膜肺炎放线杆菌均具有较好的体外抗菌活性;乌梅、黄连、诃子和虎杖两两联合为相加、协同作用;秦皮分别与乌梅、虎杖为拮抗作用.     

4种蝴蝶雄性生殖系统形态学研究

【目的】明确4种蝴蝶雄性生殖系统的形态学结构。【方法】将新鲜标本剪下腹部,在Motic SMZ168-BL型显微镜下观察解剖,用Q Imaging Retiga 2000R(CCD)显微成像系统照相,采用Montage图像叠加软件进行图像处理。【结果】描述了4种蝴蝶的雄性生殖系统,其中外生殖器的差异主要表现在囊形突、钩突、背兜、阳基轭片等上,而内生殖器的主要差异表现在精巢、复射精管、单射精管及附腺上。【结论】4种蝴蝶雄性生殖系统的各部分结构特征存在较大差异。     

岚皋魔芋软腐病病原细菌生物多样性研究

【目的】研究岚皋魔芋软腐病病原细菌生物多样性。【方法】采用组织分离法分离纯化魔芋软腐病球茎及叶柄中的致病菌,通过魔芋球茎、胡萝卜及马铃薯块的侵染试验初步确定其致病性,再利用魔芋球茎侵染致病及盆栽致病性试验确认其致病性;经菌落与细胞形态、生理生化特性及16SrRNA序列测定确定病原菌的类型。【结果】从魔芋软腐病球茎及叶柄中共分离获得16株细菌,侵染试验表明,其中CDS1-B1、CDS1-B2、CDS2-B1、CDS2-B2、CZS-B4和CZS-B6共6株细菌可使魔芋球茎表现软腐症状,并导致盆栽魔芋发病;6株细菌的菌落与细胞形态均存在差异;在魔芋、胡萝卜及马铃薯块上的侵染能力不同;16SrRNA序列分析表明,菌株CDS1-B1、CDS1-B2、CDS2-B1及CDS2-B2均与菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)亲缘关系最近,菌株CZS-B4与菊欧文氏菌(Dickeya dadantii)亲缘关系最近,相似度为98.8%,菌株CZS-B6与菊果胶杆菌(Pectobacterium chrysanthemi)的相似度达99.9%。【结论】导致岚皋县魔芋软腐病的致病细菌存在生物多样性,其致病性也存在差异,其中新发现的魔芋软腐病原菌菊果胶杆菌(Pecto-bacterium chrysanthemi)致病性最强,菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)和菊欧文氏菌(Dickeya dadantii)致病性较弱。     

细粒棘球蚴重组St-Eg 95-Eg.ferritin疫苗构建及生物学特性检测

构建表达细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白的重组口服减毒鼠伤寒沙门菌活载体疫苗株并评价其生物学特性。将细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合基因插入到表达载体pYA3341中,构建重组质粒pYA3341-Eg95-Eg.ferritin,将重组质粒分别电转入减毒鼠伤寒沙门菌X3770和X4550,获得重组疫苗菌株St-Eg95-Eg.ferritin,对重组菌的稳定性、生长状态及安全性进行分析。结果表明,经PCR和酶切鉴定成功构建重组质粒pYA3341-Eg95-Eg.ferritin,Western blot检测Eg95-Eg.ferritin蛋白在重组菌中获得表达;生物学特性研究结果表明,重组质粒可稳定存在,且不影响重组菌的生长状态,小鼠口服试验证实,重组菌安全无毒性。成功构建能稳定表达细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门菌活载体疫苗株,将为研究包虫病口服基因工程疫苗奠定基础。     

四川省食品动物源大肠杆菌mcr-1与ESBLs基因共转移分析

为了解四川省食品动物源大肠杆菌mcr-1耐药基因流行情况,及其与超广谱β-内酰胺酶基因(ESBLs)共存和共转移的特征,采用微量肉汤稀释法检测菌株对不同抗菌药物的敏感性;采用PCR检测菌株mcr-1,以及mcr-1阳性菌株中ESBLs基因类型;采用质粒接合转移试验分析了mcr-1与ESBLs基因共转移的耐药机制。结果显示:190株大肠杆菌的mcr-1检出率为36.84%,75.71% mcr-1阳性菌株中同时检出ESBLs基因,主要以blaTEM-1、blaCTX-M-55和blaCTX-M-14为优势基因;mcr-1阳性菌对氨曲南(ATM)、头孢噻肟(CTX)和多黏菌素E(COL)耐药率极显著高于mcr-1阴性菌(P<0.01);质粒转移率为47.14%,其中获得mcr-1和ESBLs基因共转移的接合子表现出与供体菌相同的耐药表型及耐药基因。综上,在四川省食品动物源大肠杆菌中,mcr-1与ESBLs基因共存现象广泛存在,且耐药基因易发生水平传播,对菌株多重耐药性的产生具有重要意义。     

绣线菊内生真菌的分离及对植物病原菌的抑制作用

采用组织分离法,以PDA培养基为分离培养基,从绣线菊的根、茎和叶中分离获得39株内生真菌。平板对峙结果表明, 21株活性菌株对6种植物病原菌（辣椒疫霉病原菌、番茄枯萎病原菌、苹果腐烂病原菌、苹果炭疽病原菌、葡萄灰霉病原菌、小麦赤霉病原菌）有不同程度的抑制作用,其中菌株XXT10对苹果腐烂病原菌、苹果炭疽病原菌、番茄枯萎病原菌、小麦赤霉病原菌的抑制率分别达到73.2%、72.5%、39.5%和42.7%。通过测得的ITS rDNA 序列与GenBank数据库中已知序列比对后该菌为链格孢属菌。生物学特性试验表明,该菌株在28～32℃时,选择PDA培养基,分别以乳糖和蛋白胨作为碳、氮源,酸碱度中性的条件下,菌落的生长状况最佳。     

摘除眼柄与注射眼柄粗提物对凡纳滨对虾性腺发育相关基因表达的影响

利用荧光定量PCR技术,检测了眼柄粗提物对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)性腺发育相关基因(DMC1、VASA和VTG)表达的影响,探讨性腺抑制激素(GIH)在性腺发育过程中的调控机制,结果表明:DMC1和VASA只在凡纳滨对虾精巢和卵巢中表达;摘除眼柄后,精巢和卵巢中DMC1表达量均显著性降低(P0.05),而注射眼柄粗提物后精巢和卵巢中DMC1表达显著增高(P0.05);相反,摘除眼柄后,精巢和卵巢中VASA以及卵巢中VTG基因表达量显著增高,但注射眼柄粗提物后性腺中的VASA和卵巢中的VTG表达量显著降低。结果表明眼柄粗提物通过影响生殖相关基因的表达影响凡纳滨对虾的性腺发育。     

扩展莫尼茨绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin部分片段克隆及不同体节mRNA转录水平分析

旨在初步了解丝氨酸蛋白酶抑制剂基因在扩展莫尼茨绦虫生长发育中的作用。采用分子克隆获得扩展莫尼茨绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin基因部分片段,应用MEGA软件对其进行进化分析。同时以beta-Tubulin基因作为内参基因,采用SYBR Green real-time RT-PCR技术检测该基因在扩展莫尼茨绦虫4个不同发育阶段即头节、幼节、成节、孕节中的表达差异,最终克隆获得749bp的serpin基因片段。进化分析表明,扩展莫尼茨绦虫serpin基因与多方棘球蚴serpin基因有较近的亲缘关系。标准曲线分析显示,serpin和beta-Tubulin基因的Ct值与阳性质粒的浓度均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99,熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰,具有较高的特异性。同时试验结果显示,serpin基因在虫体各发育阶段中的表达丰度存在差异,从高到低依次为孕节、头节、成节、幼节。由此初步推测,此基因可能在扩展莫尼茨绦虫虫卵发育为六钩蚴的过程中发挥一定作用。     

小立碗藓PpLBD20基因敲除载体的构建及功能研究

LBD(Lateral organ boundaries domain)是植物中特有的基因家族.前期研究发现灰霉菌处理小立碗藓导致配子体中的PpLBD20上调表达,但PpLBD20的功能尚不明确.因此提取小立碗藓DNA,PCR扩增PpLBD20基因的上下游片段,依次插入PTN182载体,利用同源重组原理构建敲除表达载体,酶切和测序验证插入序列的正确性.通过工作浓度为20％的PGE 6000介导小立碗藓原生质体转化,筛选鉴定得到敲除PpLBD20后的突变体植株,观察到敲除后小立碗藓不形成茎叶体结构且配子体成丝状.结果为深入探究PpLBD20在小立碗藓的形态建成调控病原菌侵染的抗性作用奠定基础.