“O”型口蹄疫正向间接血凝试验的操作体会

O型口蹄疫正向间接血凝试验是一种微量的体外免疫反应,主要利于抗原、抗体在一定条件的特异性反应形成抗原-抗体复合物,由于该复合物微小,所以采取先将抗原与红细胞结合,再让其与特异性抗体反应,使带有抗原的红细胞出现凝集现象,从而利用凝集现象进行免疫效果的判断。论述了O型口蹄疫正向间接血凝试验的操作体会。     

“O”型口蹄疫正向间接血凝试验的操作体会

<正>正向间接血凝试验是目前我国各地动物防疫监督机构对口蹄疫进行免疫抗体水平检测广泛采用的试验方法。该方法具有操作简易、快捷、特异、既可定性又可定量等优点,所需试验设备简单,具备一般条件的实验室即能完成实验操作。但是实验结果受操作技术影响很大,保证实验操作的细节是获取正确结果的关键所在。1原理抗原与其对应的抗体相遇时,在一定条件下会形成抗原抗体复合物,但这种复合物的分子团很     

如何把握间接血凝技术中的重要环节

间接血凝技术是本世纪40年代建立的一种血清学方法。它的原理是通过直接吸附或化学偶联的方法把抗原或抗体结合到动物的红细胞上,当其遇到相应的抗体或抗原时,即发生肉眼可见的红细胞凝集现象。把抗原联结到红细胞上检测抗体称之为正向间接血凝;把抗体联结到红细胞上检测抗原称为反向间接血凝。该法以其试剂制备简单、成本低廉、准确、快速、灵敏及操作简便等优点,在人医和兽医临床诊断和流行病学研究上得到广泛应用。     

2种不同红细胞悬液对鸽血清抗体监测的影响

本试验分别利用鸽红细胞悬液和鸡红细胞悬液进行血凝和血凝抑制试验,检测鸽血清中的禽流感H5抗体和新城疫抗体水平,比较两者检测结果的差异。结果表明,在血凝试验中,对于无论是禽流感抗原还是新城疫抗原,鸽红细胞检测的血凝价均小于鸡红细胞检测的结果。在血凝抑制试验中,鸽红细胞检测鸽血清中的抗体水平大于鸡红细胞检测。     

用弓形虫代谢分泌抗原制备间接血凝诊断试剂的研究

用弓形虫代谢分泌抗原(E／SA)致敏绵羊红细胞制备间接血凝诊断试剂，进行人和动物弓形虫病血清抗体检测，并用弓形虫虫体抗原致敏的红细胞间接血凝诊断试剂进行对照试验。结果表明，在弓形虫阴性、阳性血清检测中，弓形虫E／SA间接血凝诊断试剂与弓形虫虫体抗原间接血凝诊断试剂的符合率为100％；在人工感染兔血的检测中，E／SA致敏的间接血凝诊断试剂比虫体抗原致敏的间接血凝诊断试剂的阳性检出时间提前2d，显示弓形虫E／SA间接血凝诊断试剂具有早期诊断和生前诊断的应用价值。     

两种口蹄疫抗体检测方法的操作体会

正免疫抗体效价检测,已成为现代动物疫病防控科学评价动物免疫接种效果的有效方法之一。正向间接血凝试验通常只用于O型口蹄疫抗体检测,该方法主要利用口蹄疫抗原来检测血清中是否含有口蹄疫抗体或判定抗体滴度能否达到免疫保护标准。液相阻断ELISA适用于O型、亚洲I型和A型口蹄疫抗体检测,其操作较正向间接血凝试验相对繁琐,但该方法精准性和稳定性高,既能评价口蹄疫免疫情况,又能检测口蹄疫病毒     

液相阻断酶联免疫吸附法检测O型口蹄疫免疫抗体

1 原理 滴定好的固定量病毒抗原与被检血清首先在液相中反应,然后将抗原抗体复合物转移到包被好了的含口蹄疫（FMD）型特异性抗体的酶联免疫吸附（ELISA）板中,没有完全被血清抗体阻断的病毒抗原被ELISA板中的抗体捕获,亦与随后加入的豚鼠抗血清中的抗体结合。     

口蹄疫抗体免疫金标快速检测试纸法的建立

应用免疫学原理与胶体金层析技术，采用双抗原夹心ELISA建立了检测口蹄疫(O型)抗体水平的“口蹄疫抗体(O型)免疫胶体金快速检测试纸法”。应用该法与“口蹄疫正向间接血凝抗原法”对300份猪、鸡、鸭、牛、羊等血液或血清进行口蹄疫抗体水平检测试验，符合率达100％。试验结果显示，该法与间接血凝法一样，具有微量、特异、准确等优点，且操作简易，不需要任何仪器，检测时间短，结果直观，容易判定，适用于基层兽医站、养猪场使用和大面积口蹄疫抗体普查。     

影响血凝抑制试验的因素

多种病毒具有凝集相应红细胞的能力，如正粘病毒科、副粘病毒科、披膜病毒科、细小病毒科以及腺病毒科等的病毒，而且这种凝集红细胞的能力又可被特异性的抗体所抑制，基于这种现象所进行的试验分别称之为红细胞凝集试验和红细胞凝集抑制试验，习惯上又称为血凝试验和血凝抑制试验。作为一种经典的血清学反应，血凝抑制试验主要应用于两个方面：（１）应用标准病毒悬液或血凝素测定血清中的相应抗体；（２）应用特异性的抗体鉴定新分离的病毒。该试验具有以下优点：（１）敏感性强，可以检测到微量的抗体和抗原，是较敏感的血清学反应之一；…     

多头绦虫抗原特性的研究：应用IHA观察绵羊免疫及感染后的抗体？…

为了观察绵羊用多头蚴抗原免疫及感染后的抗体消长规律，为羊脑多头蚴病的免疫预防和免疫诊断提供依据，本试验应用多头蚴原头节可溶性抗原，囊壁可溶性抗原，囊液粗抗原致敏绵羊红细胞对绵羊免疫３次及虫卵攻击感染后的血清抗体进行间接血凝试验检测。结果表明，原头节抗原免疫组，囊壁抗原免疫组，囊液抗原免疫组及原头节ＥＳ抗原免疫组在首次免疫后１周，抗体滴度迅速升高，第３次免疫后１周达到峰值，虫卵感染后开始下降，到感染     

血凝抑制试验的影响因素及控制

正血凝抑制试验(HI试验)的原理是病毒在适宜条件下对鸡的红细胞具有凝集作用,这种凝集作用可以被特异性抗体所抑制,抗体与病毒结合后,可使血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,红细胞将进行自然下落,沉降到V形孔底部,利用这种特性检测血清中的病毒抗体的试验就叫血凝抑制试验。血凝抑制试验的方法是将     

禽流感血凝抑制试验的质量控制

禽流感血凝抑制试验（HI试验）的原理是禽流感病毒在适宜的条件下对鸡的红细胞具有凝集作用,这种凝集作用可被特异性抗体所抑制,抗体与病毒结合后,可使血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,红细胞将进行自然下落,利用这种特性检测血清中禽流感抗体的试验就叫禽流感血凝抑制试验。禽流感血凝抑制试验的方法是将受检血清与标定好的抗原发生充分反应,再加入红细胞作用,因为其快捷、成本较低、便于操作、能够处理大量的样品,所以成为基层动物疫病实验室对禽流感诊断及免疫状态监测的重要手段,但禽流感血凝抑制试验能否成功,影响因素很多,如果不加强质量控制,极易造成试验结果偏差,甚至误判,给禽流感的防止工作带来不便。笔者在长期的实验室检测中积累了一些经验,愿与大家分享探讨。 1试验器材的质量控制     

影响血凝抑制试验的因素

血凝抑制试验是诊断和鉴定一些病毒的常用方法，该试验与其他血清学反应以及分子生物学技术相比较，具有以下特点：敏感性强，可检测到微量的抗体和抗原；特异性强，病毒凝集相应的红细胞只能被特异的抗体所抑制；试验速度快，可在1—2小时内判断结果；试验使用的器材简单易得，实验操作过程也不繁琐。     

被动血凝(PHA)快速检测日本乙型脑炎抗体方法的建立

本文报道了快速检测日本乙型脑炎（乙脑）抗体的被动血凝方法。用PEG提纯乙脑BHK抗原致敏醛化绵羊红细胞可用于人、猪血清中乙脑抗体的检测．该方法具有较高的敏感性和特异性，实验结果表明：该方法与血凝抑制试验具有同等的敏感性，两者符合率为85．12％，与ELISA符合率为91．70％。     

被动血凝（PHA）快速检测日本乙型脑炎抗体方法的建立

本文报道了快速检测测日本乙型脑炎（乙脑）抗体的被动血凝方法。用ＰＥＧ提纯乙脑ＢＨＫ抗原致敏醛化绵羊红细胞可用于人，猪血清中乙脑抗体的检测，该方法具有较高的敏感性和特异性，实验结果表明：该方法与血凝抑制试验具有同等的敏感性，两者符合率为８５．１２％，与ＥＬＩＳＡ符合率为９１．７０％。     

病毒血凝抑制试验的应用及影响因素

多种病毒在其囊膜表面具有血凝素,能够凝集多种动物或人的红细胞,如正粘病毒科、副粘病毒科、披膜病毒科、细小病毒科及腺病毒科等的病毒。因此可以用病毒的红细胞凝集试验(简称病毒的血凝试验,HA)来检测相应的病毒。这种凝集红细胞的能力又可被特异性抗体所抑制,基于这种现象所进行的试验称之为病毒的红细胞凝集抑制试验(简称为病毒的血凝抑制试验,HI)。当前HA、HI已成为鉴定病毒和诊断病毒性疾病的重要方法之一。1病毒血凝抑制试验的优点1.1敏感性高HI可以检测微量的抗体和抗原,并且结果较为准确,是较敏感的血清学反应之一。1.2特异性…     

中等毒力鸡新城疫抗原抗体复合物疫苗的免疫效果

用中等毒力新城疫病毒Mukteswar株作为复合物疫苗抗原,与新城疫抗体配制不同比例的4种复合物疫苗,用1日龄SPF雏鸡进行免疫效果试验。试验1～4组分别免疫复合物疫苗,试验5组免疫常规新城疫活疫苗,试验6组为空白对照组。免疫后3周采血测定血凝抑制(HI)抗体效价,同时用新城疫强毒北京株F48E9攻击。试验1～6组HI抗体效价分别为28.38、29.0、25.5、23.85、28.43、22.14,攻毒后1～6组鸡的死亡率分别为0%、0%、20%、40%、0%及80%。结果表明,中等毒力新城疫病毒Mukteswar株与特异性抗体制备的复合物疫苗,可以减轻疫苗的毒副作用,提高疫苗的安全性,其免疫效果比常规活苗好。     

应用猪囊虫匀浆抗原间接血凝试验检测猪囊虫病抗体的研究

从囊虫匀浆浸提液中分离出一种抗原性与特异循环抗原相同的成分,以这种抗原成分通过间接血凝试验检测病、健猪的血清抗体,结果病猪抗体阳性率为93.2％(96/103),健猪阴性(?)合率为100％。     

微量血凝和血凝抑制试验常见问题探究

在疫苗生产中红细胞凝集试验(HA)是主要检测抗原血凝价是否符合要求的诊断方法,红细胞凝集抑制试验(HI)作为一项抗体监测技术,已在大中型养禽企业、兽医门诊和实验室工作中广泛应用。但是由于实验用材料不标准、操作不规范等因素,影响到试验结果的准确性,     

如何做好正向间接血凝试验

正向间接血凝试验的原理是将可溶性抗原吸附于与免疫无关的载体(红细胞)表面,此吸附抗原的红细胞与相应的抗体结合,在有电解质存在的适宜条件下发生的肉眼可见的凝集性反应.充分理解正向间接血凝试验的原理,对整个试验的操作和结果判定都具有很大的指导意义. 实验室正向间接血凝试验常在96孔110° V型血凝板上进行,操作步骤可简化为:①稀释液→②待检血清→③对倍稀释→④血凝抗原→⑤震荡静置→⑥结果判定六个环节.