植物切片的脱水、二色整染同步制作法

本文报道了植物石蜡切片在常规制片的脱水进程中同步完成了番红—固绿二重整染的尝试。浸蜡时,将常规法逐级浸蜡和在温箱中逐渐挥发二甲苯的方法,改为一次加蜡,在温箱中停放一段时间后,一次更换纯蜡的浸蜡方法。对通气组织发达的植物,可加长浸蜡时间,亦能获得完美的浸蜡效果。通过本法制片,染色效果好;与滴染相比,每制100片可节省酒精、二甲苯340—500毫升,提高工效8—10倍。     

槲树不同发育时期胚珠石蜡切片制备体系的优化

【目的】建立并优化适宜槲树子房或胚珠石蜡切片的制作体系,为后续槲树胚胎发育学研究提供技术支撑。【方法】以不同发育时期的槲树雌花为试验材料,将材料以60 d为界分为60 d前和60 d后两部分,对材料处理方式(授粉60 d前后的材料分别进行仅保留子房与胚珠处理)、浸蜡时间（18,24,36 h）与浸蜡条件（60 ℃烘箱内抽真空处理0,6,8,12 h）、切片厚度（6,8,10 μm）进行优化;在此基础上,以授粉70 d样品切片为材料,对染色方法（染色液分别为5 g/L苏木精、1 g/L甲苯胺蓝和10 g/L番红 固绿）及染色时间（1,2,5,10,15 min）进行优化,建立适合槲树胚珠的石蜡切片制备体系。【结果】授粉60 d前的样品仅保留子房部分,授粉60 d后的样品仅保留胚珠,两者在50 ℃烘箱经甘油乙醇浸泡48 h的软化处理后,所得切片效果最佳,可避免蜡带破裂等不良现象出现。将浸蜡时间延长至36 h,并于第1次浸纯蜡过程中在60 ℃烘箱内先进行12 h抽真空处理,可保证发育后期体积较大材料的充分浸蜡;脱蜡前将玻片进行3 h抽真空处理,可明显降低脱片率;授粉60 d前样品的切片厚度以8 μm为宜,授粉60 d及以后的样品以10 μm最佳。槲树胚株石蜡切片制备时,采用5 g/L苏木精染色5 min时的制片效果最好。【结论】建立并优化了槲树不同发育时期子房或胚珠石蜡切片的制备体系,采用该优化体系可获得蜡带连续、结构完整、染色均匀、背景清晰的槲树子房或胚珠切片。     

大叶藻胚的石蜡切片制作方法

研究固定方法、脱水及浸蜡时间、染色方式对大叶藻胚石蜡切片制作效果的影响。结果表明,采用标准固定液（FAA）固定48 h以上,脱水每级梯度时间2 h,分3次浸蜡（每次30 m in）,苏木精-伊红染色,可制作出染色清晰、组织结构完整的大叶藻胚切片。     

樟子松松针石蜡切片制备

[目的]以樟子松松针为材料,探索一套适合樟子松松针制备石蜡切片的条件。[方法]在传统植物石蜡切片技术的基础上,结合松针的结构特点,对固定、脱水、粘片、染色等环节进行了系列摸索。[结果]FAA固定剂配比中采用70%乙醇;粘片时材料置于40℃水浴锅中展开,用防脱载玻片捞取,置35℃烘箱24 h;松针切8μm厚度,染色条件为伊红5 min,苏木精1 min。[结论]获得的条件可强化固定和脱水效果,粘片操作简便,不易脱片,染色效果较好。     

不同脱水程序在乙型病毒性肝炎患者肝穿刺组织中应用的比较

目的 探讨乙型病毒性肝炎患者肝穿刺组织最合适的快速石蜡脱水程序.方法 随机选取乙型病毒性肝炎肝穿刺标本50例,每一例穿刺标本随机取三份新鲜组织,取材固定后,分为三组,A组为快速石蜡处理3 min组、B组为快速石蜡处理5 min组、C组为快速石蜡处理10 min组.快速石蜡切片应用超声波技术结合水浴加温及应用BT生物组织透明剂代替二甲苯作为透明剂.三组所做切片同时进行HE染色.结果 快速石蜡处理3 min组所制的片优良率为0%,快速石蜡处理5 min组、10 min组所制的片优良率为100%,χ2=150,P〈0.001,三组的优良率差异有统计学意义.结论 应用JYCL-2 超声组织处理仪＋BT 生物组织透明剂处理肝组织5-10 min就能满足肝组织快速临床病理诊断的需要,缩短了发报告的时间,同时也符合实验室环保的要求.     

小鼠部分组织器官石蜡切片制作方法的改良

为了克服小鼠组织器官传统石蜡切片制作方法存在组织易碎、结构不完整的缺点,对传统石蜡切片制作进行了改良.将浸蜡前的透明步骤改为异硬脂醇与石蜡混合液处理,替代苯类透明剂制作空肠、脾脏2种器官的石蜡切片,并以切片机切片时蜡带质量和HE染色后镜下质量为切片制作效果的评定指标.结果表明,2种器官在切片机上均能切出完整、较长的蜡带,组织块无硬化、不碎裂,展片平整;HE染色过程中不掉片,染色后光镜下细胞质与细胞核染色对比清晰,器官组织结构完整.就脾脏和空肠而言,应用异硬脂醇与石蜡混合液替代苯类透明剂能制作出优良的石蜡切片.     

西瓜果皮显微结构比较研究

以薄皮西瓜和厚皮果皮为材料,通过比较不同的脱水时间和浸蜡时间对石蜡切片效果的影响,得到西瓜果皮石蜡切片观察方法,以为研究不同西瓜果皮显微结构提供技术支持.同时,比较薄厚皮西瓜果皮显微结构的异同,为研究西瓜果皮结构与裂果的关系奠定基础.结果表明:西瓜果皮组织块在各级乙醇中的脱水时间均需约2h;大小不同的果皮组织块脱水时间可以通过西瓜果皮绿色部分的淡化程度来确认,绿色完全消失表明脱水完全;组织块透明时间在各级透明液中也需要约2h,当组织块下沉到底部且呈完全透明状时表明透明完全;浸纯蜡的时间可控制为6h.薄厚皮西瓜果皮结构比较表明:厚皮西瓜果皮细胞较薄皮的圆润;薄皮西瓜角质层上的细胞偏纵向生长,厚皮西瓜则偏横向生长;薄皮西瓜外果皮中的木质部(被染成红色的部分)类似于断带状,厚皮西瓜则是连续的直带状;薄皮西瓜石细胞团较厚皮西瓜的小一些;厚皮西瓜中果皮中的细胞要比薄皮西瓜的圆润且大.     

植物石蜡切片一步双重整体染色

本文报道植物标本制片工艺中的一种新的快速整体染色法。供试的材料经不同梯度脱水剂(乙醇—正丁醇)处理7～9h后,直接用正丁醇配制的番红—固绿混合染色液于40～42℃下恒温浸染24h左右,然后通过乙醇—正乙醇脱水3～4h。浸蜡过程相应作些改进。结果表明,所用的染料能一次性地同时进行双重染色,各组织着色均匀一致,红绿鲜明,分色效果好。该制片法,除染色时间外,自材料的洗涤到浸蜡完成,只需25～30h,提高了制片的效率,并能节省大量的药剂。     

Von Kossa钙组织切片的制作初探

本文主要针对一些特殊的组织进行钙的观察。采用的是特殊的染色方法,即VonKossa染色法。从组织的取材、固定、脱水、透蜡、浸蜡、包埋到切片、展片、贴片、烤片、染片以及封片,综述了整个切片制作的全过程。为关于钙方面的切片的制作提供了有力的依据,值得借鉴与共享。     

葛根总黄酮提取工艺比较研究

本研究采用乙醇浸提法和超声波辅助乙醇提取法对葛根黄酮进行提取,以期筛选出较佳的提取方法。通过试验对比,确定乙醇浸提法的工艺条件为乙醇浓度40%,固液比1:20(g/m L),提取温度50℃,提取时间30 min。超声波辅助提取法的工艺条件为超声功率200 W,乙醇浓度40%,固液比1:20(g/m L),提取温度50℃,超声时间20 min。在条件相近的前提下,超声波辅助提取法的葛根黄酮提取率为8.03%,比乙醇浸提法提取率提高了54%。可见,超声波辅助提取法提取效果较好,具有节时、简便、提取率高等优点。