鸡沙门氏菌分离株的分离鉴定

鸡沙门氏菌病是一种重要的蛋传疾病,污染十分严重,而且其耐药性的产生也越来越快,耐药谱越来越广。我们在发病鸡场内分离到1株耐药性异常严重的鸡白痢沙门氏菌,进行了以下鉴定。1材料与方法1.1参考菌株鸡沙门氏菌标准株(简称C株)和抑菌圈参考细菌为大肠杆菌(CVCC 1570)均购自中     

羊口疮病毒黑龙江省分离株的分离鉴定

为确定黑龙江大庆地区某羊场发生的疑似羊口疮(Orf)的病原,本研究采用MDBK细胞培养途径从病羊的口唇部位的痂皮病料中分离出1株病毒.通过电镜观察和IFA鉴定证明该分离株为Orf病毒,命名为OV/HLJ/04.其F1L基因核苷酸序列测定和进化分析显示,OV/HLJ/04与国内报道的山西株(HQ221964)的遗传关系密切,同源性达到98.2％.将该病毒分离株进行回归本动物试验,接种羔羊发生严重的羊口疮.     

牛病毒性腹泻病毒黑龙江分离株的分离鉴定

为分离牛病毒性腹泻病毒(BVDV)并分析其5'UTR序列和遗传特征,本研究于2010年对黑龙江某奶牛场采集的患有腹泻的牛病料样品进行病毒分离,通过理化特性试验及RT-PCR对两株分离株进行鉴定,并根据其5'UTR序列进行同源性分析。结果表明,两株分离株均能够产生典型的细胞空泡样细胞病变,对乙醚、氯仿、胰酶极其敏感,不耐热,Mg2+对其不具有保护力,对酸的抵抗力较弱;5'UTR序列分析显示两株分离株与BVDV-1b型5'UTR同源性较高。以上结果表明本研究分离获得的两株分离株为1b基因型的BVDV,为引起该牛群腹泻病的主要病原因素。本研究为BVDV感染机制和疫苗研制奠定了重要基础。     

塞内卡病毒广西分离株的初步分离与鉴定

为了确诊一例疑似SVA感染的临床病例,本试验将从广西地区某猪场母猪和肥育猪鼻及蹄部采集的出现典型水泡性病变的猪水泡液进行无菌处理后接种PK-15细胞,连续传代培养,通过细胞病变、RT-PCR扩增、基因序列测定、TCID₅₀和间接免疫荧光等方法对分离得到的病毒进行鉴定。结果显示：该病毒株在PK-15细胞上生长良好,可见明显细胞病变;接种PK-15细胞进行TCID₅₀测定,病毒滴度达到10^-6.75/mL;间接免疫荧光试验结果显示,接种第4代细胞培养物的BHK-21细胞出现特异的绿色荧光;扩增和测定了VP1基因序列后进行同源性及遗传进化分析,发现该毒株与Senecavirus病毒属中的病毒成员同源性最高,与之前2017年报道的广东分离株SVA-CH-GDYS02-2017和SVA-CH-GDLZ01-2017位于较近的进化分支内。以上结果表明,已成功从样品中分离到了SVA,且该毒株可以在PK-15和BHK-21细胞上进行增殖。本研究成功分离到一株SVA,为后续塞内卡病毒的诊断和疫苗研制提供试验材料。     

水貂肠炎病毒LN-10分离株的分离鉴定

为了解我国水貂肠炎病毒(MEV)的流行情况,本研究采用F81细胞从疑似患有肠炎的水貂粪便样品中分离出一株病毒,经形态学、血清学、动物回归试验和分子生物学鉴定,分离的病毒为MEV,命名为LN-10。对该病毒主要结构蛋白VP2基因进行克隆测序和基因进化分析表明,LN-10分离株VP2基因与GenBank中的其他18株MEV株核苷酸和氨基酸均有较高的同源性,分别为99.3%～100%和99%～100%,其中核苷酸同源性与ZYL-1株为100%,而氨基酸同源性与ZYL-1株和Manzhouli株均为100%。本研究为MEV分子流行病学调查和疫苗的研究奠定了基础。     

猪痘病毒江西分离株JX08的分离鉴定

采用PK15细胞培养,对江西省某猪场疑似猪痘的病猪皮肤丘疹进行病毒分离,分离到1株猪痘病毒,命名为SWPV JX08,。根据猪痘病毒基因组序列设计了5对引物,对分离毒株进行TK基因、P35基因、P23基因、TK基因上游和下游片段分别进行PCR扩增,扩增片段与GenBank收录的猪痘病毒(AF410153.1)的核苷酸序列的同源性分别为97.5%、98%、98.6%、98.2%和98%。该分离毒株不但能使PK15细胞产生稳定的细胞病变,还能适应非猪源性的Vero细胞,并产生细胞病变;电镜下可见感染的PK15细胞内形成椭圆形或圆形的包涵体,胞浆中有大量椭圆形、砖形的典型猪痘病毒粒子,病毒粒子中央为哑铃状芯髓,病毒粒子大小为(244³40)nm×(164340)nm×(164²63)nm。该毒株皮下或静脉接种25日龄仔猪,感染7263)nm。该毒株皮下或静脉接种25日龄仔猪,感染7¹1d后,表现典型猪痘的症状(皮肤出现丘疹),其血清中可检测到SWPV抗体。     

仔猪水肿病病原分离及其分离物生物学特性探讨

<正> 近年来江西省一些集约型养猪场因仔猪水肿病造成严重的经济损失。世界各国公认本病是由溶血性大肠杆菌引起。作者等自崇仁、进贤等地猪场典型发病例分离的溶血性大肠杆菌12株,就其一些生物学特性进行了探讨,现将结果报告如下。材料与方法1.病原材料与分离:6例典型发病仔猪来自崇仁(1例代号为 CR)与进贤(5例代号为 JW)两猪场,其中5例为发病死亡猪,1例为扑杀致死。取小肠内容物、肠     

鹅呼肠孤病毒江苏分离株的分离鉴定

2010年3月起,我国江苏、浙江等地鹅场相继发生一种以雏鹅瘫痪、不能行动为主要特征的传染病,发病率为10%-50%,死亡率一般为10%-40%.由于该病流行日趋严重,病因未明,因此该病的病原学研究备受关注.本文对病料进行病原的分离鉴定,证实该病例感染有鹅呼肠孤病毒,将其命名为JS10.     

动物精子分离技术及分离纯度检测方法研究进展

性别控制在畜禽生产中具有重要的应用价值。X、Y精子分离技术是目前实现动物性别控制的最有效手段。精子分离技术有多种方法,目前,最有效、最可靠的方法是应用改进后的流式细胞仪,它根据X、Y精子DNA含量的差异进行分离,其分离纯度可以达到90%以上。随着动物精子分离技术的发展,精子分离纯度检测方法也不断涌现,如重分析法、FISH法、PCR法等,但是这些检测方法的成本和准确性仍有待改进。本文主要对动物精子分离技术及精子分离纯度检测方法的研究现状和进展作以综述,供大家参考。     

鸡传染性喉气管炎病毒江苏分离株的分离鉴定

江苏某养殖场28周龄蛋鸡发生以呼吸困难、咳血和产蛋下降为主要症状的疾病。利用特异性引物,从发病鸡喉头及其分泌物中扩增出鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus,ILTV)TK基因的1.3 kb大小片段;发病鸡喉头及分泌物接种鸡胚后,在鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上形成痘斑,产生特征性的多核巨细胞和核内包涵体;第3代分离毒的毒价为10-6.2EID50/0.2 mL;分离毒株可被ILT标准阳性血清中和,中和价为1∶40;人工发病试验显示,接种鸡有ILT典型的呼吸道症状和病理变化。以上结果表明,分离病毒为ILTV,将此分离株命名为XZ09。     

NDV地方分离株的分离鉴定及生物学特性研究

从发病率为 100％、病死率为 97％的鸡群中分离到一株病毒。该病毒可凝集鸡的红细胞，血凝价为 28～ 10，且此凝集作用可被新城疫标准阳性血清所抑制，证明所分离的病毒为新城疫病毒。经回归试验、 MDT、 EID50、 ICPI等生物学特性研究表明，该病毒为 NDV强毒株，命名为 NL株。     

中药提取分离新技术

<正>l前言我国的中药生产水平与世界先进的天然药物提取水平差距甚大,影响了我国中药产品在世界药品市场的地位。中国已经加入WTO,国内中药和天然产物生产企业要想在竞争中赢得主动,必须采用先进的     

猪副粘病毒的分离

20 0 0年 4月 ,吉林省某猪场发生 6 0日龄左右的猪出现被毛粗乱 ,食欲减少 ,呼吸困难 ,逐渐消瘦 ,后期呼吸频数 ,行走困难 ,最后衰竭而死。病程长短不一 ,发病率 50 %,病死率达 1 5%。怀孕母猪于妊娠6 0～ 1 0 0 d之间流产 ,胎儿呈死胎或出现分解。死亡猪剖检可见实质脏器及淋巴结肿大 ,肺脏出血 ,充血 ,呈肉样变。取其肝、脾、肾等组织细菌学检查为阴性 ,电镜检查 ,肺、脾、肾组织有副粘病毒。取肾组织经处理后 ,分别接种于 SPF鸡胚和猪传代细胞 ,经盲传 5代后 ,将病毒培养物采用口服和肌肉注射等途径接种于 50日龄猪 6头 ,分别于接种后 …     

猪链球菌的分离鉴定

从豫北的安阳县、滑县等地猪场采集的病料中分离出了5株猪链球菌。经细菌分离培养、生化试验、兰氏分群A-G诊断试剂鉴定，其中E群链球菌2株，C群链球菌2株，D群链球菌1株。药敏试验结果表明，分离的链球菌对氨苄西林、头孢他啶和头孢曲松高度敏感，对青霉素、复方新诺明和土霉素等药物产生耐药性。     

硝化细菌的分离鉴定

应用硝化细菌选择性培养基,从南京的土壤和水体中筛选到6株硝化细菌,包括3株亚硝化菌和3株硝化菌,对其生理生化特性、温度敏感性、耐盐性、抗生素抗性、及硝化能力等生物学特性进行了测定。结果表明,6株细菌均为G-,菌体杆状或球状。生长缓慢,培养120 h以后才进入对数生长期,5 d左右形成菌落。最适生长温度为25~30℃。耐受偏碱环境。不耐盐,6株菌都能耐受的盐浓度范围是0.05%~0.3%。通气量对该菌的生长没有太大影响。6株菌株对不同的抗生素具有抗性。其中,菌株J2的抗药谱最窄,只抗卡那霉素。6株菌只能在以碳酸钠或者碳酸氢钠为唯一碳源、以硫酸铵或者亚硝酸盐为唯一氮源的培养基上生长良好。菌株硝化能力不同,其中菌株J2硝化能力较强,在基础培养基中200 h,该菌转化NO2-42%左右,可以作为降解鱼塘中和饲料中亚硝酸盐的硝化菌候选株。     

猪链球菌的分离鉴定

对禾自锦州市的疑似猪链球菌送检病料进行分离，结合培养特性和生化试验鉴定为猪链球菌，经血清学试验进一步鉴定为猪链球菌1／2及2型混合感染。毒力试验结果：病原株对小鼠有致死性；药敏试验结果：猪链球菌对头孢菌素敏感，对洁霉素和卡那霉素中度敏感，而对土霉素、链霉素、青霉素和庆大霉素不敏感。     

猪链球菌的分离鉴定

对来自锦州市的颖似猪链球菌送检病料进行分离,结合培养特性和生化试验鉴定为猪链球菌,经血清学试验进一步鉴定为猪链球菌1/2及2型混合感染.毒力试验结果:病原株对小鼠有致死性;药敏试验结果:猪链球菌对头孢菌素敏感,对洁霉素和卡那霉素中度敏感,而对土霉素、链霉素、青霉素和庆大霉素不敏感.     

精子的柱层析分离

一、文献综述 1.利用重量进行密度梯度离心分离 Benedict,Schumaker和Danies(1967)研究了11种不同梯度的溶液并将兔、公牛精子分离为两个具有不同密度的部分。他们报道,每个密度部分中的精子数因动物的成熟度、精子的化学和物理处理方式不同而异,分离的根据似乎是精子的渗透性。高密度部分中精子体     

好杂志 不分离

咨询内容：大棚蔬菜栽培与管理技术 咨询时间：2010年1月15日至2月15日 专家简介：王芳德。济南市历城蔬菜局技术推广站站长。推广研究员。多年来一直从事蔬菜生产技术的研究和新技术的推广工作，为济南市菜篮子工程做出了突出贡献。     

猪链球菌分离与鉴定

本研究无菌采取患关节炎猪的关节液和患败血症猪的肝、肺、脾及肠系膜淋巴结各8份,并对这16份病料进行病原菌分离培养、血清学鉴定、致病力试验、保护力试验、细菌回收试验。结果表明:该病原菌为2型猪链球菌,引起关节炎的猪链球菌较引起败血症的猪链球菌致病力弱。