小果甜柿组织培养快繁技术

【目的】建立小果甜柿组培快繁技术体系，实现小果甜柿组培苗的工厂化生产。【方法】以小果甜柿带芽嫩枝茎段为外植体，研究了外植体取材时间、灭菌方法、植物生长调节剂配比对其组织培养过程中外植体消毒、启动培养、继代培养、生根培养的影响。【结果】适宜小果甜柿外植体取材的时间为4月、6月；选择75%酒精10 s+0.1%氯化汞8 min的组合进行消毒，外植体成活率达76.67%；以(1/2N)MS+2.5 mg·L^-1ZT+0.1 mg·L^-1NAA为启动培养基，外植体萌芽率达78.33%；以(1/2N)MS+2.0 mg·L^-1ZT+0.1 mg·L^-1NAA为继代培养基，平均增殖系数在1.77以上；以1/2 MS+1.0 mg·L^-1IBA为生根培养基，生根率达74.73%，平均根数3.33条，平均根长2.60 cm。【结论】构建了小果甜柿组培快繁技术体系，为小果甜柿组培苗的工厂化生产提供参考依据。     

北美红杉组培快繁体系的建立与优化

以北美红杉1年生带芽茎段为外植体,通过基本培养基筛选和不同植物生长调节剂水平对比试验得到北美红杉组织培养的不定芽诱导、增殖、生根等生长阶段的优化配比培养基,以期建立北美红杉高效的快繁体系。结果表明:确定最佳消毒方法为75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,再用0.1%氯化汞消毒处理10 min,无菌水冲洗4次;最佳不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,不定芽诱导效果最好,诱导芽率高达2 153.3%,且芽生长健壮;最佳不定芽增殖培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,增殖系数高达15.8;最佳生根培养基配方为1/2MS+KT 1.5 mg·L^-1+IBA 1.0 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,其生根率达90.0%,根多且粗长,植株高大健壮;最佳移栽基质为V_炉渣∶V_原土∶V_腐殖土=1∶1∶1,植株成活率达91.7%。     

无刺刺梨茎段快繁体系的建立

以“无刺2号”当年生营养枝为外植体，采用不同浓度的植物生长调节剂进行组培试验，研究了不同消毒方式、激素浓度对外植体消毒效果、初代培养、增殖培养及生根培养的影响，以期建立较为成熟的无刺刺梨组织培养体系。结果表明：外植体经清水冲洗后用75%的酒精消毒15 s,以0.1%的升汞消毒8 min,存活率为85.28%;受污染后的植株在超声洗涤液中洗涤，洗涤液中添加多菌灵60 mg·L^-1和青霉素40 mg·L^-1,同时配置培养基时添加多菌灵60 mg·L^-1和青霉素40 mg·L^-1是最佳处理；适合“无刺2号”初代培养的培养基为MS+1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA,萌芽率达92.04%;增殖培养基为MS+0.2 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA,增殖系数为3.9;在1/2MS+0.1 mg·L^-1 IBA+20 g·L^-1蔗糖+0.5...     

亚洲百合‘穿梭’组培快繁体系的建立

以亚洲百合‘穿梭’为试材,采用植物组织培养的方法,研究了不同浓度激素对百合鳞片诱导、不定芽增殖、小鳞茎生根培养的影响,并筛选出适宜百合组培苗生长的移栽基质,以期为亚洲百合‘穿梭’的组培快繁体系的建立提供参考依据。结果表明：百合鳞片最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,诱导率最高可达74.44%,显著高于其他处理;最佳增殖培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,不定芽增殖数量最多,增殖系数为3.27;适合小鳞茎生根培养基为1/2MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.3 mg·L^-1 IBA+40 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,平均生根数量为14.33,是其他...     

秦岭石蝴蝶叶片离体组织培养技术

以秦岭石蝴蝶（Petrocosmea qinlingensis）幼嫩叶片为试材，采用离体组织培养方法，研究了外植体消毒、初代培养、愈伤组织继代分化、不定芽增殖、生根炼苗对秦岭石蝴蝶离体再生的影响，以期为建立秦岭石蝴蝶组织培养快繁体系提供参考依据。结果表明：0.1%氯化汞处理2 min+无菌水洗涤7～8次为最适灭菌方法；最适愈伤组织诱导与继代培养基为MS+2.0 mg·L^-1 IBA;愈伤组织分化的合适培养基为MS+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.2 mg·L^-1 NAA+0.1 mg·L^-1 IBA;正交实验结果表明MS+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 IBA+0.1 mg·L^-1 ZT为最适增殖培养基，最大增殖系数达14.06;最适生根炼苗条件为珍珠岩、蛭石和泥炭（2∶1∶1）基质+MS营养液1 mL+200 mg·L^-1 IBA 0.5 mL。     

报春石斛组培快繁技术体系的建立

以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+蔗糖20g·L^-1最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖20g·L^-1,继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L^-1+KT 0.5mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖30g·L^-1+活性碳1.0g·L^-1,培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。     

‘绿岭’核桃带芽茎段的组织培养和快速繁殖

以‘绿岭’核桃带芽茎段为试材，采用组织培养方法，研究了植物生长调节剂、珍珠岩对其快速繁殖、瓶内生根及移栽成活的影响，以期构建‘绿岭’核桃初代培养、继代增殖、瓶内生根和移栽驯化的完整体系，建立高效组培快繁体系。结果表明：茎段腋芽生长的最佳培养基为DKW+1.2 mg·L^-1 6-BA+0.012 mg·L^-1 K-IBA,培养30 d后初代苗高为31.48 mm;最佳继代增殖培养基为DKW+0.6 mg·L^-1 6-BA+0.010 mg·L^-1 K-IBA,增殖系数可达5.31;最佳瓶内生根培养基为1/2DKW+15 mg·L^-1 K-IBA,生根率51.85%;炼苗后移栽到培养土、珍珠岩(1∶1)+ABT 500 mg·L^-1混合基质中，成活率达33%以上。     

梨花药愈伤组织诱导和悬浮培养体系的建立及应用

【目的】建立梨悬浮细胞体系，并利用悬浮细胞体系获得高质量悬浮细胞，进行遗传转化和原生质体的分离。【方法】以新梨7号花药为试材，诱导获得梨花药愈伤组织，研究了细胞悬浮系建立和影响悬浮细胞增殖的主要因子。【结果】花药在1/2 MS+1.0 mg·L^-12,4-D+0.4 mg·L^-1NAA+30 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂(pH值为5.8～6.0)培养基上诱导的愈伤组织，经4～5次继代得到了黄白色、颗粒状，状态相对较好的愈伤组织；将愈伤组织接种于液体培养基中，于28℃，200 r·min^-1的黑暗条件下悬浮振荡培养，经4～5次悬浮继代培养建立了悬浮细胞系，适宜的启动和增殖培养基为：MS+1.5 mg·L^-12,4-D+1.0 mg·L^-16-BA+30 g·L^-1蔗糖，细胞生长曲线呈“S”型，活细胞率达81.98%，近圆细胞率达83.66%，可作为遗传转化的受体，转化率为20.00%。也可直接用于原生质体的分...     

秦岭石蝴蝶叶片离体组织培养技术

以秦岭石蝴蝶（Petrocosmea qinlingensis）幼嫩叶片为试材,采用离体组织培养方法,研究了外植体消毒、初代培养、愈伤组织继代分化、不定芽增殖、生根炼苗对秦岭石蝴蝶离体再生的影响,以期为建立秦岭石蝴蝶组织培养快繁体系提供参考依据。结果表明：0.1%氯化汞处理2 min+无菌水洗涤7～8次为最适灭菌方法;最适愈伤组织诱导与继代培养基为MS+2.0 mg·L^-1 IBA;愈伤组织分化的合适培养基为MS+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.2 mg·L^-1 NAA+0.1 mg·L^-1 IBA;正交实验结果表明MS+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 IBA+0.1 mg·L^-1 ZT为最适增殖培养基,最大增殖系数达14.06;最适生根炼苗条件为珍珠岩、蛭石和泥炭（2∶1∶1）基质+MS营养液1 mL+200 mg·L^-1 IBA 0.5 mL。     

‘云想容’海棠茎段组织培养技术

以‘云想容’海棠当年生单芽茎段为研究对象,采用组织培养法,研究了不同消毒剂、消毒时间、不同生长素和细胞分裂素浓度对‘云想容’海棠组织培养的影响,以期建立高效快速的‘云想容’海棠组培快繁体系。结果表明:最佳的消毒方法为用75%酒精消毒30 s后,用0.1%氯化汞处理8 min,该消毒方法能明显降低外植体的污染率,对外植体造成的伤害较小,成活率高达83.3%;最佳腋芽诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,芽生长健壮且诱导率高达90%;MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+TDZ 0.02 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1为最佳增殖培养基,增殖系数为8.63;一步生根法以培养基1/2MS+IBA 1.0 mg·L^-1较好,平均根长5.26 cm,生根率为73.3%,相比较而言,两步生根法可有效促进‘云想容’海棠的生根,生根率可达91.67%。     

赏食兼用百合京鹤高效组培再生体系的优化

百合是重要的高档蔬菜和观赏花卉,基于鳞片的高效组织培养再生体系是百合种球规模化生产繁育的基础。本试验首次使用草甘膦为诱导分化剂,优化赏食兼用百合品种京鹤鳞片外植体的组培再生体系。结果表明：京鹤鳞片不定芽最佳诱导培养基为MS + 1.0 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 2.5 mg · L^-1草甘膦 + 30 g · L^-1蔗糖,诱导系数为6.46,显著高于常规诱导培养;最佳继代增殖培养基为MS + 0.5 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,增殖系数为4.01;最佳鳞茎膨大培养基为MS + 90 g · L^-1蔗糖;最佳生根培养基为1/2MS + 0.3 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,生根系数为23.59。     

有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’的快速繁殖

以‘黄荷兰’试管苗为试材,采用组织培养快速繁殖方法,研究了影响有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’根状茎诱导、增殖、分化、生根壮苗和试管苗移栽的因素,以期建立‘黄荷兰’种苗工厂化生产技术体系。结果表明:横切茎尖的起始脱分化时间早于纵切,诱导率高于纵切。切割长度、外源激素、光照强度和有机附加物对根状茎的增殖影响显著,将根状茎切割成长0.50 cm接种到MS+6-BA 1.00 mg·L^-1+NAA 0.20 mg·L^-1+土豆80.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.30 g·L^-1培养基中培养40 d,根状茎增殖系数为3.18。外源激素对根状茎的分化影响显著,将根状茎掰成长1.00 cm接入MS+6-BA 1.00 mg·L^-1+NAA 0.20 mg·L^-1+蔗糖20.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.02 g·L^-1培养基中培养40 d,芽分化率和苗分化率分别为60.00%和57.50%。将4 cm高的苗转入1/2MS+6-BA 0.10 mg·L^-1+NAA 0.50 mg·L^-1+蔗糖20.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.50 g·L^-1中培养50 d,平均株高和根数分别为7.32 cm和3.56条。4月和10月用水草移栽,试管苗成活率分别为98.67%和99.67%。上述研究结果说明,利用组织培养快速繁殖技术工厂化生产‘黄荷兰’种苗是可行的。     

乌饭树组织培养技术

以乌饭树嫩枝作为外植体,对乌饭树组织培养技术中无菌外植体获得、不定芽产生、生根培养等步骤进行研究,以期建立乌饭树组培快繁技术。结果表明:最有效的消毒方法是用0.1%氯化汞浸泡外植体10 min。WPM基本培养基适合诱导乌饭树外植体不定芽的产生,MS基本培养基不适合诱导乌饭树外植体产生不定芽。WPM+ZT 2.0 mg·L^-1培养基上的不定芽诱导率最高,为97.7%。添加马铃薯切块的培养基明显促进了丛生不定芽的伸长,因此适合丛生不定芽伸长的培养基为WPM+ZT 1.0 mg·L^-1+马铃薯切块100 g·L^-1。已伸长的芽转移至1/2WPM+NAA 1.0 mg·L^-1+活性炭500 mg·L^-1培养基上生根效果较好,6周后可达到94.7%的生根率。     

基于二次回归正交旋转探究不同植物生长调节剂对3种葡萄砧木茎段快繁的影响

【目的】通过对5BB、1103P、SO4葡萄砧木在初代培养、继代培养、生根培养过程中不同培养基和植物生长调节剂的筛选，建立高效茎段快繁体系。【方法】以3种葡萄砧木的单芽茎段为材料，应用二次回归正交旋转组合设计的试验方案进行增殖培养，探究不同的植物生长调节剂对繁殖系数的影响。【结果】适用于3种葡萄砧木的初代培养的培养基均为MS培养基，并添加2.00 mg·L^-16-BA、0.20 mg·L^-1IBA、0.20 mg·L^-1GA3，萌发率均可达100%。影响5BB和1103P葡萄砧木增殖培养的3种植物生长调节剂的主次顺序为IBA>GA3>6-BA，最适宜的增殖培养配方为MS+2.00 mg·L^-16-BA+0.25 mg·L^-1IBA+0.50 mg·L^-1GA3；影响SO4葡萄砧木增殖培养的3种植物生长调节剂的主次顺序为6-BA>GA3>IBA，最适宜的增殖培养配方为MS+1.52 mg·L^-16-BA+0.25...     

大花蕙兰+豆瓣兰F1代原球茎和根状茎培养研究

以大花蕙兰‘大凤’(Cymbidium hybridium‘Dafeng’)与豆瓣兰‘太极圣梅’(C.serratum var.Goeringii‘Taijishengmei’)F₁代原球茎、根状茎为试材,采用在1/2MS培养基中添加不同植物激素的方法,研究了不同植物激素对大花蕙兰‘大凤’与豆瓣兰‘太极圣梅’F₁代原球茎与根状茎增殖和分化的影响,以期为兰属植物高效繁育提供参考依据。结果表明：以1/2MS+香蕉80.0 g·L^-1+碳粉0.5 g·L^-1为基本培养基,加入TDZ 1.0 mg·L^-1和NAA 0.2 mg·L^-1最有利于根状茎增殖,增殖率达到343.33%;基本培养基加6-BA 2.0 mg·L^-1和NAA 0.3 mg·L^-1有利于根状茎分化,分化率达到83.33%。原球茎的增殖最佳配方为基本培养基加TDZ 1.0 mg·L^-1和NAA 0.2 mg·L^-1     

钙、镁、钾浓度及光照、温度对西番莲花粉离体萌发的影响

【目的】探讨培养基中的钙、镁、钾浓度及光照、温度对西番莲花粉体外萌发及花粉管生长的影响。【方法】设置钙、镁、钾及光照、温度梯度,测量在该梯度下的花粉萌发率及花粉管延伸长度。【结果】钙、镁、钾非西番莲花粉离体萌发的必需培养基成分,钙对西番莲花粉离体萌发及花粉管生长具有显著影响,在质量浓度为0～300 mg·L^-1时,萌发率及花粉管长度均随浓度的增加而显著增加,在300～1200 mg·L^-1时最佳,大于1200 mg·L^-1时,萌发率及花粉管长度均显著降低。镁、钾对花粉萌发及花粉管生长均无显著影响。光照、温度对花粉萌发及花粉管生长均具有显著影响,黑暗条件下最佳,随着光照度的增加,萌发率及花粉管长度均显著降低;二次方程能较好地拟合温度对花粉萌发及花粉管生长的影响。【结论】培养基中钙浓度及光照、温度对西番莲花粉体外萌发及花粉管生长具有显著影响,镁、钾无显著影响,最适的C(aNO₃)₂·4H₂O质量浓度为300～1200 mg·L^-1,西番莲...     

不同植物生长调节剂对'阳光玫瑰'果实品质的影响

以五年生葡萄品种‘阳光玫瑰’为试材,采用赤霉素（GA₃）和氯吡脲（CPPU）搭配不同植物生长刺激物复合施用,研究了不同浓度处理对‘阳光玫瑰’果实品质的影响,以期筛选出适合‘阳光玫瑰’使用的植物生长调节剂组合配方。结果表明：GA₃ 25 mg·L^-1+CPPU 2.5 mg·L^-1处理可明显提高果实香味;GA₃ 25 mg·L^-1+CPPU 5.0 mg·L^-1处理果实无核率达到90%,显著提高果实的可溶性固形物及还原糖含量,但同时也伴随着果实空心现象增多;GA₃ 25 mg·L^-1+CPPU 5.0 mg·L^-1+壳寡糖800倍处理的果实无核化效果最好,并且空心率也较低。综合各指标,GA₃ 25 mg·L^-1+CPPU 5.0 mg·L^-1+壳寡糖800倍处理效果最好。     

嗜果刀孢菌的室内药剂筛选及拮抗菌的种类鉴定

【目的】由嗜果刀孢菌(Wilsonomyces carpophilus)引起的穿孔病对野杏、野生樱桃李、栽培杏和桃的叶片、果实造成了严重危害。对嗜果刀孢菌的室内药剂筛选及拮抗菌的种类鉴定可有效防治野杏真菌性穿孔病。【方法】采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定8种杀菌剂对嗜果刀孢菌的室内毒力；同时从野杏叶片上分离出1株拮抗细菌，结合形态学特征、生理生化特性和基于16S r DNA基因序列的系统发育分析开展拮抗菌株的鉴定。【结果】室内毒力测定结果表明，50%多菌灵对嗜果刀孢菌菌丝生长抑制效果较好，75%百菌清抑制效果较差，有效中浓度(ρ，median effective concentration,EC₅₀)为918.8 mg·L^-1;27%戊唑·噻霉酮对分生孢子萌发毒力较强，EC₅₀为0.060 5 mg·L^-1,75%百菌清对分生孢子萌发毒力较弱，EC₅₀为1103.0 mg·L^-1；拮抗菌株XHG-1-3m²对嗜果刀孢菌抑制率为88....     

兔眼蓝莓‘提夫蓝’组培快繁

以兔眼蓝莓‘提夫蓝’的幼嫩枝条为试材，采用不同浓度和种类的药剂、培养基及生长素进行组培的方法，研究了杀菌剂、培养基、生长激素对外植体灭菌、丛生芽诱发、组培苗继代繁殖、组培苗生根和组培苗移植的影响，以期为构建全面、高效的蓝莓快繁系统提供参考依据。结果表明：外植体最佳灭菌方法为10%NaClO溶液消毒15 min,污染量减少至17.34%,萌芽数为9.71个；蓝莓茎段中诱发形成丛生芽的最适宜培养基为1/2WPM+1.5 mg·L^-1ZT+0.2 mg·L^-1IBA,诱发成功率为68.36%;组培苗最适宜继代生长培养基为1/2WPM+0.1 mg·L^-1 NAA+1.5 mg·L^-1ZT,增殖倍数为5.53,平均株高达5.15 cm;而组培苗最适生根培养基为1/2WPM+0.5 mg·L^-1IBA+200 mg·L^-1活性炭（AC）,其生根率、有效生根率、根长和生根数量分别为87.16%、87.16%、4.39 cm和6.32条；组培苗最适移栽基质是苔藓，移栽成...     

太行菊组织培养技术研究

以太行菊叶片、叶柄、茎尖和茎段为试材,采用MS培养基,在其中添加不同的激素对太行菊的不同外植体进行培养,研究了濒临灭绝的太行菊再生植株的方法。结果表明:太行菊的叶片、叶柄作为外植体诱导出愈伤组织的诱导率分别为44.44%和44.11%,所需时间较长,而茎尖、茎段作为外植体诱导愈伤组织诱导率分别为48.44%和68.75%,培养时间较短。茎段最适合作为诱导愈伤组织的繁殖材料。为了使茎段能更好的诱导出愈伤组织,课题组又对诱导茎段愈伤组织的激素浓度组合进行了研究,A组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,B组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,C组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,D组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1。试验表明,C组激素浓度组合最适合太行菊茎段的愈伤组织诱导。35 d后愈伤组织不再增加后进行继代培养,45 d后将植株转移至生根培养基1/2MS+NAA 0.12 mg·L^-1中进行生根培养。