韭葱愈伤组织和不定芽诱导研究

以韭葱假茎和葱薹为外植体,进行离体培养。结果表明,在MS附加不同浓度的NAA和6-BA培养基上,韭葱假茎和葱薹均能诱导形成愈伤组织,但二者出愈率差异极显著。在MS+NAA1.0mg/L+6-BA2.0mg/L培养基上,韭葱假茎愈伤组织出愈率仅为27.09%,在MS+NAA2.0mg/L+6-BA1.0mg/L培养基上,韭葱葱薹愈伤组织出愈率高达77.09%。愈伤组织继代培养后,葱薹形成的愈伤组织不能分化形成芽,而假茎形成的愈伤组织可以诱导产生不定芽,在MS+NAA1.0mg/L+6-BA2.0mg/L培养基上,假茎芽的诱导率为20.83%,且假茎靠近茎基部处诱导产生的愈伤组织分化芽的能力最强。     

五种药用石斛快速繁殖的研究

为解决石斛的快速繁殖和提高组培苗的成活率,以MS为基本培养基,把<中华人民共和国药典(2000版)>(以下简称中国药典)收载的5种药用石斛的茎段作为外植体进行了组培和快繁,并根据石斛的生物学特性,配制了多种基质进行炼苗.结果表明:不同种类的石斛在诱导侧芽萌发时所需培养基不同,但是在增殖、壮苗生根以及炼苗移栽时所需基质却具有相似性.环草石斛、铁皮石斛、束花石斛、马鞭石斛和金钗石斛在诱导侧芽萌发时的最适培养基分别为:MS NAA 0.1 mg/L 6-BA 1.0mg/L、MS NAA 0.1 mg/L 6-BA 1.5 mg/L、MS NAA0.5 mg/L 6-BA 2.0mg/L、MS NAA1.0mg/L 6-BA 2.0 mg/L、MS NAA0.1 mg/L 6-BA 2.0 mg/L.这5种石斛增殖、壮苗生根的最适培养基分别为:MS NAA 0.1 mg/L 6-BA 3.0 mg/L、1/2MS NAA 0.7 mg/L.移栽最适基质为:碳酸盐小石子:木屑=1:2,再覆盖1 cm厚的苔藓,幼苗移栽成活率达95%以上.本文首次报道了在实验室里获得马鞭石斛和束花石斛这两个种的组培苗,并初步解决了石斛试管苗脱瓶移栽成活率低的问题,使下一步进行大面积人工栽培成为可能.     

珍稀药用植物金线莲研究现状与展望

金线莲为兰科珍稀名贵药用和观赏植物,因富含多种药用和营养成分深受人们青睐,近年来的市场需求也在不断递增。为了促进金线莲的产业发展和基础研究,总结了前人在金线莲研究方面的进展,比较了金线莲属植物的种系差异,重点讨论了金线莲基因组学（结构基因组学/功能基因组学）以及环境（生物/非生物互作）响应方面的研究进展,分析了金线莲品质影响的主要因素为加工方式、栽培模式、品系,针对目前并未深入展开的种质资源概况、基因组学、环境互作、品质差异和胚胎繁殖等方面的研究进行了系统综述,并对目前存在的主要问题及如何解决提出相应的策略和展望,为大数据时代名贵药用植物的分子生物学研究提供可行性参考。     

北沙参根茎不定芽诱导及生根的研究

摘要：【研究目的】研究北沙参试管繁殖的诱导、分化、生根、移栽等过程,筛选优良试管苗。【方法】以北沙参根茎为试材,通过筛选激素种类、浓度和光暗条件、 基质等因素找到不定芽诱导、分化、生根及移栽的最佳条件。【结论】根茎不定芽分化诱导适宜的培养基为MS+ NAA0.2mg?L-1 + 6-BA 2.2mg?L-1~2.4mg?L-1+蔗糖30g?L-1＋琼脂8g?L-1,适宜北沙参不定芽生根的培养基为1/2MS+ IBA 0.2 mg?L-1+蔗糖15g?L-1+琼脂6g?L-1,对不定芽带茎段切割可以显著提高转接芽的存活率,添加0.2 g?L-1活性炭有利于提高单株平均生根数,促进根毛发育。采用两步法半封闭炼苗{培养基覆沙法半封闭短期（2d）炼苗结合混合基质移栽长期(10d)半封闭炼苗}效果较好,适宜的移栽基质有两种,分别是：1/3园土+1/3草炭 +1/3细沙和1/3园土+1/3草炭+1/3蛭石。     

密纹片姜茎尖培养脱毒快繁技术研究

CMV和TMV病毒的侵染导致密纹片姜产量降低,品质下降,通过茎尖脱毒培养和筛选获得脱毒苗并建立快繁体系,以提高产量,改善品质。茎尖接种培养基为MS+6-BA1.0~3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,丛生芽快繁培养基为MS+6-BA2.0~4.0 mg/L,生根培养基为1/2MS。经过一年多的研究和培养,获得大量脱毒苗并应用于生产。本方法也适用于黄姜类其它品种的脱毒和快速繁殖。     

金叶杨不定芽诱导及增殖培养

本研究以金叶杨的叶片作为试验材料,对其不定芽诱导及增殖培养进行了研究。比较在不同消毒时间、基本培养基、激素配比的条件下,不定芽诱导及其增殖情况。结果表明:使用2%NaClO最佳消毒时间为9 min;金叶杨叶片诱导不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L,不定芽诱导率达到95.5%;金叶杨不定芽增殖的最佳培养基为6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.4 mg/L+GA30.2 mg/L,不定芽增殖系数达到4.53。本研究成功建立了金叶杨不定芽诱导及增殖培养体系,为其快速繁殖提供理论基础。     

柱状苹果组培外植体褐化控制与不定芽诱导方法探索

褐变是制约木本果树离体培养成功的重要因素,探讨苹果离体再生过程中经常遇到的外植体褐化问题,对苹果高效再生和遗传转化体系建立具有重要意义。本研究以柱状苹果‘润太一号’为试材,研究了遮光时间(0, 7 d, 14 d)、消毒时间(6 min, 7 min, 8 min, 9 min)、茎段长度和防褐化剂对外植体褐化率的影响,并用不同激素配比对不定芽进行诱导。结果表明,外植体的褐化率随遮光时间增加而有所降低,但外植体的生长势变弱,以遮光7 d的材料为宜,褐化率为25%。不同腋芽个数对褐化率的影响差异不显著。褐化率随着消毒时间的增加而增加,最佳的消毒时间为8 min,褐化率为23.33%。不同防褐化剂处理的结果发现以培养基中加入100 mg/L Cef褐化率最低。不定芽诱导的结果发现,不定芽诱导率随诱导天数增加而增加,以诱导50 d效果较好,最适宜的不定芽诱导培养基为MS+4.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA。本研究结果可为柱状苹果高效再生体系提供理论依据。     

外植体对甘薯茎尖培养与植株再生的影响

对甘薯茎尖外植体的取材大小，不同取材季节，不同消毒处理及不同生育时期的试验结果表明，外植体的大小对其茎尖离体培养的成苗率及脱毒率有显著差异，尤其是取材的季节和不同生育时期，对甘薯茎尖培养的效果具有明显的差异，本试验以1～4月份取薯块催芽的外植体材料是甘薯茎尖培养较为适宜的培养时间，其污染、死亡率为15%；茎尖成活率85%以上；品种成苗率可达86%。     

茶树不同组织体细胞胚、不定芽分化的研究

根据茶树子叶柄、叶柄断面离腋芽的距离,将外植体依次分为C1, C2, C3和L1, L2, L3。通过上述外植体和不同培养基的研究结果表明:子叶柄外植体在MT1和MT3培养基上培养,其不定芽及总分化率是C1>C2>C3;体细胞胚的分化率是C3>C2>C1。叶柄外植体只有L1在MT3培养基上培养分化了芽,MT1培养基的胚性愈伤组织诱导率比MT,培养基高,     

茄子花药愈伤诱导及不定芽分化研究

以4个茄子品种的花药为外植体,研究茄子诱导花药愈伤组织及不定芽分化.结果表明,西安绿茄,豫艺2号主要分化黄白色紧密型愈伤,这种类型的愈伤分化不定芽较多,翠绿二号,黑仙子分化黄白色松散型愈伤.松散型和紧密型愈伤组织均能分化出绿苗,但松散型愈伤分化的绿苗畸形率高,容易生长缓慢,玻璃化.豫艺2号和西安绿茄适合在F1培养基上分...     

金线莲人工种子制作技术及萌发研究

以金线莲为实验材料,通过液体悬浮培养建立原球茎悬浮系,并以原球茎为人工种子的繁殖体,研究了人工种皮基质、人工胚乳组分、贮藏条件、萌发基质等对人工种子萌发率和成苗率的影响。结果表明,以4%海藻酸钠 2?Cl2 2%壳聚糖为人工种皮基质,1/2MS液体培养基 0.2mg/LNAA 0.1mg/LGA3 0.5mg/LBA 0.4mg/L青霉素 0.3%多菌灵粉剂 0.2%苯甲酸钠 1.0%蔗糖 1.0%活性炭作为人工胚乳成分制作的人工种子,其萌发率和成苗率最高。这样的人工种子在4℃条件下贮藏20天后的萌发率及成苗率分别为58.3%和55.5%,随着贮藏温度的升高和贮藏时间的延长,人工种子的萌发率和成苗率均大幅度下降。     

菊花外植体分化诱导及植株再生研究初报

菊花是中国十大传统名花和世界四大切花之一,具有观赏、食用、药用等多种价值。笔者就菊花的再生途径、外植体选择、激素种类及配比进行了较为详尽的归纳和分析。结果表明,绝大多数研究者选择叶片或茎段作为外植体直接再生不定芽;常用激素浓度范围为：6-BA：0.5~3mg/L、NAA：0.1~1mg/L、2,4-D：0.5~1mg/L。最后,对目前存在的问题及今后的发展方向进行了探讨。     

金线莲应答高温胁迫的转录组学特征分析

为了研究高温胁迫下金线莲转录组表达特征，分析其热激响应机制。以正常培养和高温胁迫(45^oC)的金线莲(NYJ2)为材料，利用Illumina HiSeq^TM2000平台进行测序，通过Trinity软件进行De novo组装。结果共获得75688个unigene，有28323个unigene在Nr、KOG、KEGG和Swisspro数据库中得到功能注释，注释率为37.42%。其中，17532个unigene在KOG数据库中可归类到25个功能家族；10108个unigene被KEGG数据库注释到128个代谢途径中；17485个unigene被GO数据库的生物过程、分子功能和细胞组成三大功能注释到47个条目中。777个unigene在高温胁迫前后差异表达显著，其中胁迫后上调表达为362个，下调表达为415个，获得响应热胁迫的基因24个，包括热激蛋白的基因1个，PSⅠ和PSⅡ相关的基因15个、叶绿体rbcL基因3个、PLD基因2个，CAT编码基因、GAPDH基因、CYP编码基因各1个。本研究从转录组水平分析了金线莲对热胁迫的响应，这些数据将为功能基因的鉴定奠定基础，为培育耐高温金线莲品系提供了参考依据。     

刺梨叶片愈伤组织诱导及抗褐化研究

为进一步优化刺梨叶片愈伤组织诱导条件,本试验以‘贵农1号’、‘贵农2号’、‘贵农5号’、‘贵农7号’4个不同基因型刺梨叶片为试材,采用组织培养法研究预处理、取样时间、植物生长调节剂、抗褐化剂对叶片愈伤组织诱导及降低褐化率的影响。结果表明：100 mg/LVc浸泡12 h后,可显著提高4个基因型叶片愈伤组织诱导率,降低其褐化率,其中‘贵农1号’诱导率最高为97.44 %;春季是不同基因型叶片最佳取材时间,3月份叶片愈伤组织诱导率均达到最高值且褐化率最低;适合‘贵农1号’和‘贵农2号’叶片愈伤组织诱导的植物生长调节剂组合为1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA,而‘贵农5号’和‘贵农7号’叶片愈伤组织诱导最适宜的植物生长调节剂组合为1.0 mg/L6-BA+1.0 mg/LNAA+1.0 mg/LTDZ;3种抗褐化剂对4种基因型刺梨叶片愈伤组织增殖培养的效果大小为AgNO₃>柠檬酸>PVP;添加柠檬酸或AgNO₃可明显降低刺梨叶片愈伤组织褐化率,其中以2.0 g/L柠檬酸或0.4 g/LAgNO₃最为适宜,4个基因型叶片愈伤组织褐化率均达到最低值。该试验获得了4种基因型愈伤组织诱导的最适宜生长调节剂组合,降低了褐化率,为后续离体再生体系的建立奠定了基础。     

钙、钙调素在刺梨果实发育过程中的含量变化研究

为探讨Ca2 、CaM在刺梨果实发育过程中的含量变化,以贵农5号优系为试材,测定其果实发育过程中Ca2 和CaM的含量及可溶性总糖、还原糖、维生素C的含量.结果表明:刺梨果实发育过程中,Ca2 含量前期高后期低,呈逐渐下降的趋势;CaM含量呈波动状态,在果实发育的中前期,与果实发育状况之间成相互响应的曲线变化;果实发育的后期,CaM含量处于较高的水平,与此期可溶性总糖、还原糖、维生素C的高水平相对应.本文还对Ca2 、CaM在刺梨果实发育的不同阶段可能的调控机理进行了讨论.     

不同培养条件对金线莲多糖与总生物碱含量的影响

To investigate tissue culture conditions to increase certain medicinal ingredients in tissue culture seedlings of Anoectochilus formosanus, using its tissue culture seedlings as the material, set four sucrose concentrations 1%, 2%, 3%, 4% and four treatments of subculture 10, 30, 50, 70 days, and then measured the content of polysaccharide and total alkaloids from its tissue culture seedlings after culturing for some time. The results showed that 4% of sucrose concentration was the most suitable quantity on the accumulation of polysaccharide. Polysaccharide content showed an increase after the first reduction with subculture days. Total alkaloid content decreased with the increase of sucrose concentration, and it was the highest with 1% of sucrose concentration. The content of total alkaloids was the highest after 50 days of subculture.     

啤酒花不同外植体再生体系的研究

为了建立适用于基因工程培育抗病毒的啤酒花再生体系,筛选了‘于勒比特’啤酒花(Humulus lupulus L.)不同外植体、不同培养基、不同激素配比对愈伤组织形成、不定芽分化和不定根产生的影响。结果表明：叶盘、节间和腋芽都可以诱导形成愈伤组织,且叶盘在MS-B5培养基+葡萄糖20 g/L,含有6-BA 0.5 mg/L+IAA 1.5 mg/L,以7 g/L琼脂固化,pH 5.8的条件下,愈伤组织诱导率可达92.5%,愈伤组织形成不定芽可达56.0%,初步构建了‘于勒比特’啤酒花的再生体系。     

4个新品种玉簪愈伤组织的诱导及组培扩繁研究

为建立4个玉簪新品种的组培再生体系,以MS为基本培养基,添加不同质量浓度6-BA和2,4-D,研究其外植体组培苗的愈伤组织诱导以及继代扩繁的最适生长培养基。愈伤组织的诱导中,高浓度的6-BA(≥3.0mg/L)与低浓度的2,4-D(≤0.1mg/L)配比有利于愈伤组织的生成。MS+1.0mg/L6-BA+0.3mg/LNAA+35g/L蔗糖+12g/L琼脂的培养基可以使HostaBigDaddy（编号H1）和‘金鹰’（编号H2）的增殖倍数分别达2.54和2.78,而MS+1.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+30g/L蔗糖+11g/L琼脂可以使‘小黄金叶’（编号H6）的增殖倍数达3.01,而最适宜H15增殖的培养基则是MS+3.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+30g/L蔗糖+12g/L琼脂。研究结果为4个新品种玉簪愈伤组织的诱导及组培扩繁研究提供了有利数据依据,在此方法下愈伤组织诱导率最大,并且扩繁增殖倍数最大。     

刺梨气泡水配方优化及其抗氧化和抗疲劳活性研究

通过正交试验对刺梨气泡水的产品配方进行优化,测定产品对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除率,并通过小鼠负重游泳试验观察产品的抗疲劳活性。结果表明,优化后的产品配方为：果葡糖浆8%, 刺梨浓缩汁7%,二氧化碳0.4%, 牛磺酸0.05%,瓜拉纳提取物0.05%,柠檬酸0.006%,植酸钠0.005%,三氯蔗糖0.000 9%。根据该配方工艺制得的产品淡黄透亮,色泽均匀,酸甜适中,并有刺梨的香味和气泡饮料的清凉感,VC含量达290 mg/100 mL, 对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别达92.62%和82.84%,表现出较强的抗氧化活性。产品的小鼠负重游泳时间达26.25 s,表现出较强的抗疲劳活性。刺梨汁和牛磺酸、瓜拉纳提取物配合使用,可极显著提高产品的抗疲劳作用。     

营养液pH变化对刺梨苗吸收硝态氮和铵态氮的影响

研究介质pH变化条件下刺梨(Rosa roxburghii)对不同形态氮素吸收特性的影响,能为不同pH土壤上刺梨的合理施肥提供科学依据。本研究以‘贵农5号’刺梨实生苗为材料,采用营养液培养和离子耗竭法,在分别供给硝态氮和铵态氮的条件下,设置营养液分别为pH 4、5、6、7、8、9的6个处理,测定不同pH营养液培养的刺梨苗对NO₃^-、NH₄⁺的吸收动力学参数和刺梨苗的植株高度、干重生物量、氮含量及氮吸收量,分析营养液pH变化与NO₃^-、NH₄⁺的吸收动力学参数的相关性和营养液pH变化与刺梨苗植株高度、生物量、氮含量和氮素吸收量的相关性。研究结果表明,刺梨根系对硝态氮、铵态氮及总氮的吸收规律均符合Michaelis-Menten酶动力学方程。营养液的pH变化能够改变刺梨苗根系对NO₃^-和NH₄⁺的吸收特性。在营养液pH 4~9的范围内和供给硝态氮的条件下,刺梨实生苗的根系对NO₃^-的最大吸收速率(I_max)、根系与NO₃^-的亲和力、NO₃^-流入根系的速率(α)、植株高度、干重生物量、氮含量及氮的吸收量随营养液pH的增大而明显降低,营养液的pH变化与上述指标呈极显著负相关。在供给铵态氮的条件下,刺梨实生苗根系对NH₄⁺的上述指标随营养液pH的升高而明显增大,营养液的pH变化与上述指标呈极显著正相关。在酸性条件下有利于刺梨苗对硝态氮的吸收,升高营养液的pH不利于刺梨苗吸收硝态氮。碱性条件有利于刺梨苗对铵态氮的吸收,酸性条件对刺梨苗吸收铵态氮有不利影响。