提莫菲维小麦与二倍体野燕麦远缘杂交后代的DNA斑点杂交分析

为了鉴定提莫菲维小麦与二倍体野燕麦属间远缘杂交后代的真实性,以地高辛标记的二倍体野燕麦DNA为探针、提莫菲维小麦为封阻剂对其远缘杂交后代进行了DNA斑点杂交分析.结果表明:杂交液中使用的探针浓度为25 ng/mL,探针与封阻DNA比例为1∶100时可完全避免假阳性现象,杂交后代出现了蓝紫色斑点杂交信号.提莫菲维小麦与二倍体野燕麦杂交后代中含有二倍体野燕麦的遗传物质,在一定程度上证实了其远缘杂交后代的真实性.     

提莫菲维小麦与葡萄牙野燕麦远缘杂交后代的高分子量麦谷蛋白亚基组成分析

以提莫菲维小麦和葡萄牙野燕麦远缘杂交F2和F3代株系为试材,用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法鉴定分析了杂交后代的高分子量(HMW)麦谷蛋白亚基组成.结果表明,在GIu-AI,Glu-B1和Glu-DJ位点上分别检测到1,4和1种亚基类型,3位点结合共出现2种组合类型,其中在Glu-A1位点上出现的全是N亚基,Glu-BI位点上存在丰富的亚基变异类型:现了7,8,20和17 18四种亚基类型,它们出现的频率均为50%;Glu-DI,位点上出现了被世界公认的优质亚基5 10,其出现频率高达50%.     

小麦与野燕麦远缘杂交研究进展

野燕麦与小麦近缘种属直接杂交成功,从杂交后代中育成系列具有兼抗高产优质的普通小麦型资源和品种（系）,对小麦育种和生产具有重要意义。     

野生二粒小麦与二倍体野燕麦远缘杂交后代的核型分析及进化关系

对野生二粒小麦与二倍体野燕麦远缘杂交后代进行染色体核型分析。结果表明：杂交后代084株系的核型公式为2n=6x=42=36m(4SAT)+6sm，核型为1A，为极对称核型，属于原始类型；野生二粒小麦、二倍体野燕麦及084株系的进化指数分别为1、4和1，表明084株系的进化程度与野生二粒小麦一致，低于二倍体野燕麦；084株系的染色体相对长度较亲本大，且其平均臂比、核型不对称系数及臂比大于1.7的染色体比例均在野生二粒小麦与二倍体野燕麦之间，说明远缘杂交在一定程度上对加速小麦属的进化有重要意义；084株系染色体臂比与母本的相近，且存在4对染色体与父本的相对长度和臂比极为相近，核型分析结果从一定程度上证明了野生二粒小麦与二倍体野燕麦杂交后代的真实性。     

提莫菲维小麦核型分析

对提莫菲维小麦进行了染色体核型分析,结果表明:提莫菲维小麦的染色体数目为2n=28,其中包括8对中着丝粒染色体(m)和6对近中着丝粒染色体(sm),最长与最短染色体相对长度比为1.569,并在第2号和第13号染色体上发现了2对随体,核型公式为2n=4x=28=16m+12sm(4 SAT),核型类型为"2A".     

提莫菲维小麦高分子量谷蛋白亚基遗传多样性分析

为了给普通小麦的品质改良提供基础材料,并了解提莫菲维小麦的HMW-GS组成情况,利用SDS-PAGE技术对43份提莫菲维小麦高分子量谷蛋白亚基遗传多样性进行了分析,分别发现2、3、2和1种Ax、Ay、Gx和Gy亚基的等位变异类型和5种组合类型[Ax2*,Gx(A);Ax2*+Ay(C),Gx(B)+Gy;Ax1+Ay(B),Gx(B)+Gy;Ax1+Ay(A),Gx(A);Ay(A),Gx(B)]。其中Ax2*,Gx(A)的分布频率最高,达81.40%。在43份材料中,有12份材料(27.90%)的Ay亚基表达,Gx亚基几乎都表达,而只有部分Gy亚基可表达,但频率非常低,仅为6.98%。结果表明提莫菲维小麦Glu-A1的遗传多样性高于Glu-G1。文中对检测到的各种亚基的利用方式进行了讨论。     

一个提莫菲维小麦醇溶蛋白基因的克隆与序列分析

以提莫菲维小麦基因组DNA为模板,采用设计的小麦种子醇溶蛋白的保守引物进行PCR扩增,扩增产物插入pMD-18T载体,并转化到大肠杆菌DH5α中,对阳性克隆进行测序。结果表明,扩增产物长度为1 002 bp,包含一个完整的284个氨基酸的编码区,基因库登录号为DQ861428。序列比对表明,该序列为-αgliadin基因家系成员。利用-αgliadin基因的编码氨基酸序列建立系统树,分析表明该序列与栽培小麦供体物种一粒小麦的-αgliadin基因聚在一大类中,因而被定位在提莫菲维小麦的A染色体组上。     

对一粒小麦与野燕麦杂交后代的高分子量谷蛋白亚基组成分析

以一粒小麦与野燕麦杂交后代中入选遗传性基本稳定的66个株系为材料,用SDS—PAGE电泳方法鉴定分析其株系的高分子量麦谷蛋白亚基(HMW—GS)组成。结果表明,在后代材料中麦谷亚基组成类型丰富。在Glu-A1、Glu-B1和Glu-D1几个位点上分别检测到2种、6种和3种不同的亚基类型。其中,在Glu-A1位点上,1亚基出现频率最高,为87．88％;其次是null类型,为12．12％;在Glu-B1位点上20和7 9亚基出现频率较高,分别为42．42％和34．85％,同时出现14 15优质亚基类型,另外,还存在一些其它新的亚基组合类型(6* 8*、13 19);Glu-D1位点上2 12出现频率最高,为90．91％,并出现了被世界公认的优质亚基5 10类型。入选的66个株系,对条锈病和白粉病免疫。     

以色列野生二粒小麦和光稃野燕麦杂交亲本与后代核型分析

 对以色列野生二粒小麦（母本）和光稃野燕麦（父本）远缘杂交亲本与后代的核型及进化关系进行了分析。结果表明：母本的染色体长度比为1626,核型公式为2n=4x=28=18m（2SAT）+10sm（2SAT）,核型为1A。父本的染色体长度比为2526,核型公式为2n=6x=42=20m（2SAT）+22sm（4SAT）,核型类型为2B。以色列野生二粒小麦和光稃野燕麦杂交后代0878株系的染色体数目为42,染色体长度比为1.802,核型公式为2n=6x=42=22m（2SAT）+20sm（2SAT）,核型为2A。 0878-1株系的染色体数目为42,染色体长度比为2.057,核型公式为2n=6x=42=38m+4sm（4SAT）,核型为2B。由于光稃野燕麦遗传物质渗入到该杂交后代,获得了进化程度高于其母本的普通小麦型小麦新种质。     

利用SRAP技术分析海南野生兰属植物的亲缘关系

利用SRAP分子标记技术对8种海南野生兰属植物的遗传多样性和亲缘关系进行分析。结果显示：从30对引物中筛选出20对SRAP引物组合,共扩增出195条多态性条带,平均每个引物组合产生9．75个多态性条带。UPGMA聚类分析可将8种供试材料划分为4类：第Ⅰ类为冬凤兰;第Ⅱ类为纹瓣兰;第Ⅲ类为多花兰和独占春;第Ⅳ类为寒兰、建兰、墨兰和兔耳兰,这与传统的形态分类学结果基本一致。本研究可为兰属品种的鉴定和系统分类研究提供依据。     

大兴安岭地区野生黑木耳菌株SRAP的遗传多样性分析

 【目的】对大兴安岭地区野生黑木耳菌株进行遗传多样性分析。【方法】利用PCR-SRAP体系,选出9对SRAP引物对18个野生菌株和6个栽培菌株DNA进行扩增,通过NTSYSpc软件对遗传多样性进行分析。【结果】通过PCR扩增,9对引物共扩增到90条条带,其中78条多态性条带,多态性比率为87.0%。平均每条引物扩增的条带数和多态性条带数分别为10.00条和8.67条。多态性信息含量(PIC)变化在0.051—0.918,平均为0.683,所揭示的基因型数平均为15.78个。聚类分析结果表明,遗传相似系数在0.63水平上,可分为5个类群。【结论】SRAP标记技术在栽培与野生菌株间都表现出明显的遗传差异性,此技术可用于遗传多样性的分析研究。     

豌豆和玉米远缘杂交后代的SRAP分析

采用相关序列扩增多态性(SRAP)技术分析了豌豆和玉米远缘杂交后代的真实性。结果表明,10对SRAP引物中,共扩增出105条重复性高的清晰条带,其中有101条为多态,多态比率(PPB)为96.19%;聚类结果显示,后代与母本间呈现出并列关系,表明其基因组确实发生了改变;em1-me2e、m3-me1和em8-me4三对引物在杂交后代中都扩增出双亲特异带,说明这2个杂交后代具有双亲的遗传物质,该后代是豌豆和玉米成功远缘杂交的真实杂种后代。     

48份新疆野生狗牙根遗传多样性的SRAP分析

采用SRAP标记对48份新疆野生狗牙根材料进行遗传多样性分析,14对SRAP引物共扩增产生了133条带,其中123条显示多态性,因此SRAP标记可以有效地用于狗牙根野生资源遗传多样性评价。在物种水平上,多态位点百分率为77.83%,48份狗牙根材料的GS值为0.276～0.930,平均为0.700,各材料间差异明显,具有较为丰富的遗传多样性;居群间遗传分化系数为0.391 4,表明有39.14%的变异存在于居群间,60.86%的变异存在于居群内,居群内的遗传分化大于居群间的遗传分化;聚类分析表明,48份供试材料相似系数为0.58时可被聚为4类,聚类结果与地理来源有一定的相关性,但也有材料例外。     

桑树二倍体及人工诱导的同源四倍体遗传差异的SRAP分析

利用SRAP分子标记技术,对8份桑树二倍体品种和经秋水仙碱化学诱变得到的同源四倍体进行DNA遗传差异研究和聚类分析。结果表明:桑树不同材料二倍体及其同源四倍体间的SRAP多态性有明显差异。农桑8号、璜桑37号、湖桑197号、湖桑199号和国桑20号的二倍体及其同源四倍体间的扩增条带完全一致,无差异,而育71-1二倍体及其同源四倍体的SRAP多态性最高,达到1.41%,所有的二倍体及其同源四倍体材料均聚在一起,不同材料间亲缘关系近的聚为一大类。说明不同桑树材料经秋水仙素诱变后产生的遗传差异较大,桑树二倍体及其同源四倍体产生变异的原因可能是染色体上的等位基因积加效应造成DNA分子遗传结构的改变。     

枸杞品种SRAP分析

应用相关序列扩增多态性(SRAP)标记,对15个枸杞品种进行了遗传多样性分析。从36对引物组合中筛选8对引物组合用于PCR扩增,共获得39条谱带,多态性条带为37条,平均多态性百分率为94.8%,每对引物组合扩增出条带数3~9条不等,平均每对引物组合得到4.8条。15份材料之间遗传相似系数范围介于0.13~1.00之间,说明供试枸杞品种间存在丰富的遗传多样性。     

甜瓜品种不同杂交组合后代的表现

以甜瓜品种甜帅为父本的9个杂交组合的杂交一代为试验材料,对组合的各个性状进行评价.结果表明:葛星华泰×甜帅的单瓜产量最高,达到234.1g;精品白糖蜜×甜帅的杂交后代在果肉厚度最大,达到1.8cm,同时在VC含量表现中,该杂交组合也具有最大的表现值;运蜜一号×甜帅的后代在可溶性固型物指标中表现最大,达到15%;改良黄金道×甜帅的杂交后代具有最高比例的糖酸比;同时,可以看出甜瓜的杂交后代有偏母性遗传的特性.     

梨SRAP体系的优化及其在杂交后代中的分离方式

采用正交设计建立并优化了梨的SRAP-PCR分子标记技术体系，在20 μL的反应体系中含有DNA15 ng/mL，Primer o.5μmol/L，dNTPs 0.1 mmol/L，Mg2+2 mmol/L，Taq DNA聚合酶1.5 U。应用20对引物组合对SRAP标记在“红巴梨×南果梨”F1群体的多态性和分离方式进...     

中国枣属植物亲缘关系的SRAP分析

 【目的】从分子水平研究中国枣属植物的系统发育,探讨枣属属下种间及种下分类单元间的亲缘关系,为自然的中国枣属植物分类系统的建立提供新的分子证据,同时为中国枣种质资源的保护和利用提供科学依据。【方法】利用SRAP标记方法对原产中国的枣属全部14个种、11个枣品种和1个外类群的基因组DNA进行分析。【结果】筛选出的19对SRAP引物组合对26份供试材料共扩增出580条DNA带,其中570条为多态带（占98.28%）,平均每个引物扩增多态性带30条。26份材料间的遗传相似系数变化范围为0.22～0.99。UPGMA聚类表明,26份材料在相似系数0.38处被划分为6个类群。【结论】SRAP标记技术能很好地用于枣属植物亲缘关系的研究,枣和酸枣应该作为1个种处理,可进一步分为2个亚种,给予新学名为原亚种枣Ziziphus jujuba Mill. subsp. jujuba;亚种酸枣Ziziphus jujuba Mill. subsp. spinosa（Bunge）J.Y. Peng,X.Y.Li et L.Li;蜀枣、山枣和大果枣应该起源于一个较近的共同祖先,蜀枣和山枣应该归并为1个种,合并后以山枣学名为准;原亚种枣下不宜设变种。