外源细菌添加对红壤吸附病毒的影响

污水中病毒往往与一些可溶性有机物质、无机胶体及菌体细胞同时存在,但很少有研究考虑菌体细胞及其分泌物对环境中病毒去向的影响。从3株代表性菌株培养液中分别获取菌体细胞及其分泌的胞外聚合物(EPS),其目的是为了:(1)比较不同红壤的病毒吸附能力;(2)明确细菌存在对红壤吸附病毒的影响;(3)评估菌体细胞及EPS影响红壤吸附病毒的相对作用权重。结果表明,4种经过灭菌处理的红壤中,红黏土和赤红壤对病毒的吸附容量最大,其次为砖红壤,而红壤土的吸附能力最弱。菌体细胞对红壤吸附病毒的影响很小,在某种土壤中甚至有促进病毒吸附的趋势,但EPS或EPS与菌体细胞同时存在显著降低了红壤对病毒的吸附能力,其降低比例分别达36%和30%,表明细菌存在降低土壤吸附病毒的现象主要由其分泌物EPS导致。本研究结果表明在评估某一介质对病毒的吸附能力时必须同时考虑细菌存在的影响,否则有可能高估其吸附容量。     

离子注入对苹果酒酵母菌的影响

以野生型苹果酒酵母菌Y0 2 为出发菌株 ,利用 8× 1 0 15ion cm2 注入剂量对出发菌株Y0 2 进行诱变处理 ,得到 1株形态特征、部分生化特征、菌体蛋白质等发生明显变异的突变株IONⅡ 1 1dry ,该突变株的产酒率比出发菌株提高 2 2 4% ,表明离子注入诱变育种是行之有效的     

预处理方式对微紫青霉菌(Penicillium janthinellum)菌株GXCR吸附Zn2+影响的研究

研究了不同预处理方式对微紫青霉菌（Penicillium janthinellum）菌株GXCR的Zn^2＋吸附的影响。结果表明,匀浆化＋NaOH（0．5mol／L）预处理的菌体（匀浆碱化菌体）的吸附效果最好,Zn^2＋的吸附增加率达到39．74％;匀浆化＋酸化处理导致菌体的Zn^2＋吸附能力下降。匀浆碱化菌体吸附Zn^2＋的适宜pH为5～6,吸附是一个快速过程,在5min内基本趋于平衡。等温曲线和荧光检测表明,匀浆碱化菌体吸附Zn^2＋是一种表面吸附为主的单分子层吸附行为。经吸附-解吸-吸附循环使用4次后,碱化菌体的Zn^2＋吸附率仍可达到第一次吸附率的73．24％。     

高活性益生菌酵素粉的制备及工艺优化

为了提高酵素粉中益生菌的存活率以及产品的活性,该研究以植物乳杆菌Lactobacillus plantarum 1-33(Lp 1-33)为发酵菌株,高密度培养后对发酵上清液进行喷雾干燥;通过内源乳化法对菌体进行微胶囊包埋,再对微胶囊进行真空冷冻干燥,最后2部分产物经混匀造粒制得益生菌酵素粉;以包埋率、胃肠道存活率、释放率等为指标,考察多重保护技术对其活性的保护效果。结果表明:采用内源乳化法,乙二胺四乙酸钙为钙载体,质量分数1.5%海藻酸钠为壁材,质量分数0.3%壳聚糖-三聚磷酸钠为涂层材料效果最佳;此条件下制备的微胶囊包埋率≥80%,经模拟胃液处理2 h后其菌体存活率≥50%,模拟肠液处理2 h后释放率≥90%;最佳冷冻保护剂配方为质量分数10%脱脂奶粉、质量分数8%乳糖、质量分数1%抗坏血酸钠、质量分数1%谷氨酸钠,酵素粉与保护剂比例1:10;制备的酵素粉30℃保存3个月,活菌数仍≥9.5lg(CFU/g);与发酵前果汁相比,其清除自由基能力提高了近20%。通过上述多重活性保护技术,提高了菌体的存活率和抗逆境能力,获得高密度、高活性的益生菌酵素粉,为后续产业化的生产提供技术支撑。     

长期不同施肥对潮土磷素吸附特征的影响

土壤磷素是限制潮土生产力提高的重要营养元素。研究不同施肥处理磷素的吸附特征及其与土壤理化性质的关系,可以为提高潮土磷素有效性和合理施肥提供科学依据。本研究基于封丘长期定位施肥试验,选用七种处理：不施肥（CK）、氮钾施肥（NK）、氮磷施肥（NP）、磷钾施肥（PK）、氮磷钾施肥（NPK）、1/2有机肥+1/2氮磷钾（1/2OM）和有机肥（OM）,通过测定土壤理化性质和磷素吸附量,利用Langmuir和Freundlich等温吸附模型拟合了吸附曲线,并结合方程计算了最大吸附量（Qm）、亲和力常数（K）、最大缓冲能力（MBC）、吸附饱和强度（DPS）、Freundlich吸附常数（a）和吸附指数（b）;运用相关分析和冗余分析（RDA）探讨了影响土壤磷素吸附特征变化的主要因素。结果表明：随着平衡溶液磷浓度的增加,不同施肥处理的磷素吸附量均表现出先快速增加,后缓慢增加的趋势。与CK和NK处理相比,NP、PK和NPK处理的磷素吸附能力增强,Qm和MBC分别增加了15.62%~23.60%和2.94%~23.46%;而1/2OM和OM处理的磷素吸附能力下降,K和MBC分别降低了39.60%~49.57%和36.09%~56.15%。相关分析和RDA结果表明：有机质（SOM）、pH、游离氧化铝（Ald）和C/P是影响潮土磷素吸附特征的主要因素。此外,1/2OM处理的DPS值相较于OM处理降低了30.92%。长期有机无机肥料配施可以增加有机质含量,降低磷素吸附能力,且相较于单施有机肥可以减少磷素流失风险。     

烟草青枯病菌拮抗菌的筛选、鉴定及生防特性研究

烟草青枯病危害严重,以拮抗菌进行防病的生物防治手段成为研究热点。从不同烟田分离纯化出238株细菌菌株,首先经牙签接种初筛,选取对青枯病菌抑制效果较好的菌株制备其抑菌物质的粗提物,以牛津杯法复筛,最终获得3株对烟草青枯病菌有明显抑制作用的拮抗细菌。全细胞脂肪酸、16S rDNA及gyrB基因测序等分析结果表明,菌株H19、Y6为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),菌株H34为甲基营养型芽孢杆菌(B.methylotrophicus)。3株拮抗菌经CAS检测平板法和Salkowski比色法,发现均具有产铁载体和吲哚-3-乙酸(IAA)的能力,以菌株H19能力最强。温室促生试验结果表明,3株拮抗菌能显著促进烟草株高、鲜重及干重等指标,与对照相比,平均增长率分别达到70%~115%、40%~49%和32%~42%。温室控病试验结果表明,菌株H19、H34和Y6明显降低烟草青枯病的发病率,防效达76.57%、60.98%和69.83%,稍逊于农用链霉素处理的78.66%。     

青枯病生防菌N5的特性及其生物学效应

从土壤中分离筛选出一株对番茄青枯病病原菌有较强抑菌效果的菌株N5,经生理生化及16S rRNA基因序列分析,将菌株N5初步鉴定为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。菌株N5具有产生铁载体、β-1,3-葡聚糖酶、纤维素酶、蛋白酶以及多种脂肽类抗菌物质的能力。菌体发酵后与有机肥(猪粪︰氨基酸肥料 = 1︰1)混合后进行二次发酵制成生物有机肥,并用盆栽试验验证其生防和促生效果。结果表明：利用菌株N5制备的生物有机肥可以促进番茄的生长,提高根系的活力。生物有机肥可有效防治番茄青枯病,其中营养钵使用生物有机肥的处理其生防效果优于大盆使用生物有机肥的处理,特别是营养钵和大盆均使用生物有机肥的处理其生防效果达69%,而使用有机肥并不能有效防治番茄青枯病。使用生物有机肥显著增加根际土壤中细菌、放线菌的数量,减少真菌和青枯劳尔氏菌的数量。     

~(60)Coγ射线诱变选育热凝胶多糖高产菌株的研究

利用60 Coγ射线对产生热凝胶多糖 (Curdlan)出发菌株GM 2 4的菌体细胞与原生质体分别进行辐照处理 ,发现60 Coγ射线对GM 2 4原生质体的诱变效应明显优于对其菌体细胞的作用。对最终诱变筛选获得的 1株高产稳定的Curdlan生产突变株A81研究表明 :与GM 2 4相比 ,其Curdlan产量提高了 5 0 4%,发酵周期缩短了 1 8%,发酵终止后底物残糖由 1 5 3g L降至7 4g L。糖的转化率从 38 7%提高至 5 8 2 %。这说明在Curdlan生产菌株的筛选中60 Coγ辐照是一种有效的方法     

聚丙烯酰胺与几种强化剂联合作用对土壤氮素吸附-解吸和迁移释放的影响

通过等温吸附-解吸试验和模拟淹水试验,研究了聚丙烯酰胺(PAM)与几种强化剂协同作用对紫色土氮素的吸附-解吸和向水体迁移释放的影响.结果表明,PAM(CK1)可以有效提高土壤对铵氮的吸附容量,而PAM与强化剂联合施用可以进一步提高其吸附能力,除配施石灰处理外,配施强化剂处理其最大吸附量较单施PAM处理(CK1)增加37.5%～83.3%,差异均达显著水平(P<0.05).同时联合施用还提高吸持强度,降低解吸率,弥补单施PAM后土壤铵氮吸持强度下降的缺陷;经PAM和强化剂处理可以抑制土壤氨氮向硝态氮转化的速率,其中以PAM+柠檬酸的抑制效果最为明显,可使水体中的硝态氮浓度始终保持在较低的水平(0.11～2.10 μg/ml),同时与柠檬酸配合处理对水体TN的释放也有很好地抑制作用.     

一株耐盐解磷菌的解磷能力及对玉米敏感期生长的影响

从黄河三角洲盐碱化土壤中筛选了一株高效解磷真菌QL1501,经鉴定为草酸青霉菌,菌株QL1501对无机磷的解磷能力远大于对有机磷的解磷,解无机磷最大浓度达85.21 mg/L。菌株QL1501的最适生长pH值为8时菌体生长极好。当NaCl浓度为1%～5%时,菌株解磷能力变化不大,溶液中有效磷浓度为76.08～65.37 mg/L。当溶液中NaCl浓度高于7%时,菌体生长受到较大影响。接种解磷真菌QL1501处理的玉米株高、根干重和植株干重均显著高于未接种的对照处理,说明该解磷菌作为解磷生物肥料具有良好的效果。     

高产漆酶平菇的筛选及其在降解黄曲霉毒素B1中的应用

通过选择培养基平板培养法和液体发酵培养法筛选得到2株高产漆酶的平菇菌株P1和P2,并对平菇菌株产漆酶的培养基进行筛选,得到产漆酶的最适培养基为最低盐MSM培养基。菌株P1不仅产漆酶能力最高,而且降解黄曲霉毒素的能力也最好。在MSM培养基中培养10d时,产漆酶量高达769.44U/L,在800μl的反应体系中,790μl粗酶液可以将1000ng黄曲霉毒素B₁降解到222.62ng,降解率为77.74%,并且平菇粗酶液降解黄曲霉毒素B₁的能力与其中漆酶的含量呈一定的正相关性。     

食用菌SJ-1漆酶酶学性质及降解黄曲霉毒素B_1的研究

为了进一步掌握高效降解黄曲霉毒素B_1的食用菌SJ-1的特性,考察了温度、pH以及金属离子对食用菌SJ-1漆酶酶活的影响,同时研究了该漆酶降解黄曲霉毒素B_1的降解曲线和降解方程。结果表明,食用菌SJ-1漆酶的最适反应温度为35℃,最适pH值为3.0。Cu~(2+)对该漆酶酶活有一定的激活作用,而Fe~(2+)、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Na~+、K~+对其酶活都有较强的抑制作用。食用菌SJ-1漆酶降解黄曲霉毒素B_1的方程为y=-0.1712x~(2+)20.107x-76.587,其中x为反应时间,范围为0~48 h,y为黄曲霉毒素B_1降解量(ng),该方程在0~48 h内,能够推算出食用菌SJ-1漆酶降解黄曲霉毒素B_1的降解量。本研究结果为食用菌漆酶降解黄曲霉毒素的应用提供了理论指导和技术支持。     

羊骨酶解物的免疫调节活性研究

以羊骨粉为底物,用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶制备复合酶解物,用不同的剂量给小鼠灌胃(ig.),通过碳粒廓清试验、噻唑蓝法以及定量溶血法检测不同剂量酶解物对小鼠非特异性免疫、细胞免疫以及体液免疫功能的影响。结果表明:低剂量(0.5g/kg.d,ig,14d)可显著提高小鼠吞噬细胞清除碳颗粒的能力(P0.05),中剂量(1g/kg.d,ig,14d)和高剂量(3g/kg.d,ig,14d)组的吞噬能力与对照组无显著差异(P0.05)。但这2个剂量却使小鼠脾脏B淋巴细胞合成的抗体量显著高于对照组(P0.05),且中剂量组显著高于高剂量组(P0.05)。0.01mg/ml复合酶解物显著促进了T淋巴细胞对ConA的反应性(P0.05)。因此适当剂量的羊骨酶解物,能提高小鼠的非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫能力。     

草地早熟禾原生质体培养与融合

以草地早熟禾品种RugbyⅡ成熟种子诱导的松软胚性愈伤组织为材料,以酶解法分离出原生质体,进行了原生质体培养;利用PEG融合法对MidnightⅡ和Nuglade的原生质体进行了融合,获得了体细胞杂种愈伤组织。研究了不同酶液组成、酶解时间、愈伤组织继代时间和渗透压对草地早熟禾原生质体游离及生长的影响;预处理对亲本原生质体活力的影响和适宜的融合条件。结果表明:采用继代培养8～10d的胚性愈伤组织,在1.0%纤维素酶+1.0%离析酶+0.5%果胶酶+0.3%崩溃酶条件下,酶解14～17h可得到产量和活力较高的原生质体;原生质体在KM8P培养基中培养3d后出现第1次细胞分裂,2～3周后形成小细胞团,此时添换低渗培养基2～3次,有利于小细胞团持续分裂并形成愈伤组织;试验获得了草地早熟禾品种RugbyⅡ原生质体来源的愈伤组织;5mmol/ml碘乙酰胺处理Nuglade原生质体10min及40μg/ml罗丹明处理MidnightⅡ原生质体5min,能有效地使Nuglade和MidnightⅡ原生质体失活;两品种融合PEG(6000)适宜浓度35%,融合率为9.8%。     

具有拮抗作用的硅酸盐细菌的分离与筛选

从沈阳农业大学试验基地中分离出两株具有解钾能力的细菌C1和Y3,解钾量分别比对照提高44.8%和26.2%,对其生理生化特性分析,确定为芽孢杆菌属,其中C1对4株植物致病真菌有较强的抑制作用。在玉米盆栽试验中,C1和Y3对苗期玉米都有一定的促长作用,体现在植株高度和地上部干重,较对照分别提高了14.5%、31.9%和11.4%、26.7%,均达到显著水平。     

N~+注入诱变高自溶度的乳酸菌突变株

通过N+注入方式对乳酸菌唾液链球菌嗜热亚种GS1和德氏乳杆菌保加利亚亚种LD3进行诱变,获得自溶度较高的乳酸菌菌株。离子注入剂量为1×2.6×103～6×2.6×1013时,菌株的存活率曲线呈典型的"马鞍型"剂量-效应曲线,总突变率达到57%～74%。离子注入能量为50keV,最佳注入剂量为4×2.6×1013 ion/cm2,此时,菌体存活率为25%～33%。筛选得到的乳酸菌菌株,自溶度变化幅度在127.98%～-51.96%之间。得到2株自溶度显著提高的突变菌株,分别命名为LD3-A3和GS1-B13,与出发菌株相比其自溶度分别提高了127.98%和115.11%。经5次传代培养,突变株的自溶度和遗传性状比较稳定。结果表明离子注入诱变技术是一种理想的乳酸菌发酵剂菌种选育方法。     

不同产量水平小麦的氮吸收利用差异

在土培盆栽条件下,以130份小麦为材料,测定了不同生育时期小麦的干物质量、氮素含量和籽粒产量,将供试品种按籽粒产量由低到高低依次分为I、II、III、IV、V、VI等6类型,研究了各类型氮素吸收利用的差异。结果表明：（1）供试品种籽粒产量差异较大（CV=3316%）,氮素籽粒生产效率随籽粒产量水平提高呈增加的趋势(r=02740**),提高氮素吸收量和籽粒氮素利用效率均可提高籽粒产量。（2）不同生育时期,不同籽粒产量水平类型小麦植株含氮量存在显著或极显著差异,但与籽粒产量的相关性不密切。抽穗期和成熟期植株吸氮量与籽粒产量极显著相关(r=02890**、09175**)。（3）不同生育时期氮素干物质生产效率在类型间的差异均达到显著水平,但其与籽粒产量相关性不显著。提高氮素收获指数和拔节期氮素干物质生产效率均可提高籽粒产量。（4）拔节期-成熟期不同类型间小麦干物质量随籽粒产量的增加而增加,成熟期表现尤为突出。籽粒产量水平较高的品种在拔节期后有较强干物质和籽粒产量形成能力。（5）氮素吸收量和氮素籽粒生产效率是影响籽粒产量的重要因素。     

Binding of ferric iron to the cell walls and membranes of Bifidobacterium thermophilum: effect of free radicals.

Bifidobacterium thermophilum (ATCC 25866) was incubated with 100-120 microM (59)FeSO(4) and 300 microM excess of H(2)O(2) for up to 120 min in the presence and absence of glucose. Samples were withdrawn after 5, 30, 60, and 120 min. These were protoplasted and (59)Fe(III) measured in the supernatant fraction (cell walls) and protoplasts (cell membranes). These experiments were also repeated in the presence of 400 microM Al(III), which, in whole cells, caused an increase in Fe(III) binding. The amount of iron in the cell wall fraction was constant regardless of time of incubation, was unaffected by Al(III), and was reduced by approximately 20% by glucose. On the other hand, the amount of iron on the protoplasts increased with time and was affected by both Al(III) (upward) and glucose (downward). Scatchard plots indicated that the number of Fe(III) binding sites on the cell walls was 37.6 nmol/mg of dry cell weight at zero time, whereas that of cell membranes was (1)/(10) of that. It was concluded that Fe(III) binding by bifidobacterial cell walls was instantaneous and marginally dependent on free radical action. That of the cell membranes was time-dependent and was due to lipid peroxidation initiated by free radicals. Bifidobacteria can therefore function in the intestinal tract as probiotics by making Fe(OH)(3) unavailable to pathogens and by moderating free radical activity in the intestinal tract.     

Binding of methylmercury compounds by humic and fulvic acids

Humic and fulvic acids were isolated from Fawn Lake in Ontario and investigated by membrane dialysis for their ability to bind CH₃Hg⁺. By measuring the distribution of methylmercury compounds in and outside of the dialysis membrane, for the first time, binding capacities and conditional stability constants for CH₃Hg⁺ and humic acids could be calculated. Equilibrium between inner and outer dialysis solution was reached within 24 hours without losses of CH₃Hg⁺ in humic solution. The ratio of bound to unbound CH₃Hg⁺ increased with decreasing total CH₃Hg⁺ levels in the system. The percentage of free methylmercury compounds increased with decreasing pH. Fawn Lake humic acid showed two different binding sites. The conditional stability constant of the stronger site was calculated as 1.3 × 10¹². This site was able to bind 0.2 ng CH₃Hg⁺ per mg of humic acid.     

Occurrence of ochratoxin A- and aflatoxin B1-producing fungi in Lebanese grapes and ochratoxin a content in musts and finished wines during 2004

This paper reports the results of an extensive survey on the occurrence of filamentous fungi isolated from wine-grapes in Lebanon and to test their ability to produce ochratoxin A (OTA) and aflatoxin B1 (AFB1) on CYA culture medium, in order to assess their potential for producing these mycotoxins on grapes. From the 470 grapes samples taken during season 2004, 550 fungi strains were isolated with 490 belonging to Aspergillus spp. and 60 belonging to Penicillium spp. All these isolated fungi starins were tested for their ability to produce OTA and AFB1. Aspergillus carbonarius shows that it is the only species able to produce OTA with a production percentage reaching 100% and a maximum concentration of 52.8 microg/g of Czapek yeast extract agar (CYA). In its turn, Aspergillus flavus was considered as the only AFB1-producing species with production percentage of 45.3% and a maximum concentration reaching 40 microg/g CYA. A total of 47 handmade musts produced from the collected grapes were also analyzed in order to correlate the presence of OTA in must and the occurrence of filamentous fungi on grapes; 57.4% were contaminated with OTA at low level with concentrations ranging between 0.011 and 0.221 microg OTA L(-1). The analysis of these must samples was not performed with regard to AFB1. Seventy samples of finish red wine were also assayed for OTA content. The results showed that 42 of the tested samples (60%) were found to be positive for OTA with low levels (0.012-0.126 microg OTA L(-1)).