药用植物仙茅的组织培养及快繁体系的建立

[目的]针对仙茅市场需求量不断增长,野生资源受到严重破坏的情况,系统地研究了药用植物仙茅的组织培养及快繁体系的建立。[方法]以仙茅根茎上的幼叶为外植体,在MS培养基上添加不同的激素配比进行组织培养。[结果]外植体在MS＋6-BA0．50mg／L＋NAA0．05ms／L或MS＋6-BA1．00ms／L＋NAA0．05mg／L培养基中培养20d诱导产生愈伤组织;将诱导产生的愈伤组织转入不合激素的MS培养基中培养30d诱导产生芽,同时在芽的基部产生根;幼苗的移栽成活率高达95％以上。[结论]采用组织培养方式可进行仙茅的快速繁殖,为确保药用植物资源仙茅的保护和可持续利用提供有效途径,     

陵川板蓝根离体快繁体系的建立

实验选用山西省陵川县板蓝根种子幼苗为材料,取幼苗的茎段为外植体进行离体快繁。选用MS为基本培养基,添加不同浓度和种类的激素组合,使用控制单一变量的方法,筛选得到各阶段最佳的培养基配方。由实验可知:板蓝根茎段诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)2,4-D+1.0 mg·L~(-1)6-BA,愈伤组织最大诱导率为60.0%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+0.8 mg·L~(-1)NAA+1.0 mg·L~(-1)6-BA,最大分化率为53.3%;诱导生根的最佳培养基为1/2MS+0.2 mg·L~(-1)NAA+0.3 mg·L~(-1)IAA,根的最大诱导率为:75.3%。     

人参的组织培养及快繁体系的建立

[目的]建立人参的快繁体系。[方法]应用MS培养基添加激素培养法,对人参的茎尖、根尖和幼芽进行愈伤组织诱导,并进行芽分化、芽的继代增殖和生根培养。[结果]结果表明,对诱导芽分化较好的培养基是BA与NAA的组合,最佳培养基激素浓度是MS+BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L。愈伤组织诱导仅出现在MS+BA1.0 mg/L+2,4-D2.0 mg/L和MS+KT0.2 mg/L+2,4-D1.0 mg/L的培养基中,但这两种培养基对芽没有诱导。以MS+BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L的培养基,其继代培养效果较好。[结论]采用组织培养快速繁殖人参,可有效去除病毒,增加繁殖数,确保遗传性状的稳定。     

绞股蓝快繁技术的研究

以绞股蓝茎尖作为外植体,进行绞股蓝快繁技术的研究.试验表明:茎尖在MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 2.0mg/L中诱导效果最高,快繁的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 0.5 mg/L,生根培养以无激素的MS培养基较好.     

绞股蓝快繁技术的研究

以绞股蓝茎尖作为外植体,进行绞股蓝快繁技术的研究。试验表明:茎尖在MS NAA 0.2 mg/L 6-BA 2.0mg/L中诱导效果最高,快繁的最佳培养基为MS 6-BA 1.0 mg/L IAA 0.5 mg/L,生根培养以无激素的MS培养基较好。     

虎尾兰组培快繁技术研究

[目的]寻求虎尾兰组培快繁的最佳培养基。[方法]以虎尾兰幼叶为外植体,采用2种不同浓度的消毒剂进行处理,探讨外植体最佳消毒方法。以MS为基本培养基,研究添加不同浓度的2,4-D、6-BA和NAA对虎尾兰幼叶愈伤组织诱导、芽分化诱导及生根的影响,确定虎尾兰组培快繁的最佳培养基。[结果]虎尾兰外植体最佳消毒方式为70%酒精10 s＋0.1%升汞5 min,外植体污染率为7.7%;虎尾兰愈伤组织诱导最适宜培养基为MS＋0.25 mg/L 2,4-D,出愈率为100%;诱导芽分化的最适宜培养基为MS＋0.5 mg/L 2,4-D＋2.0 mg/L 6-BA,分化率为76%;根培养的最适宜培养基为MS＋4.0 mg/L NAA,生根率达到100%,试管苗成活率达95%。[结论]该研究为虎尾兰组培快繁的大规模工厂化生产提供了科学依据。     

番茄快繁体系的建立

为建立一套高效实用的番茄快繁体系,试验以中蔬四号番茄为材料,从成苗时间、成苗数量2个方面进行了研究。结果显示,胚培养5 d可获得无菌胚苗,子叶诱导出愈伤和不定芽需要25 d;不定芽伸长需要10 d;经过7 d就可以生根;组培室炼苗3 d后,在蛭石中生长3~6 d后即可移栽到土壤中。从种子培养到大棚移栽需要56 d,即通过组培大约56 d便可得到完整的再生植株;平均1粒种子可繁殖7株番茄苗。     

高山红景天的快繁引种技术

高山红景天(Rhodiola sachalinensis A.Bor.)又名库页红景天, 为景天科红景天属多年生草本植物, 具肉质根及根状茎, 有滋补强壮、活血化瘀、抗肿瘤、抗衰老等功能, 其有效成分红景天甙及其甙元具有"适应原"样作用, 具有抗疲劳、抗缺氧、增强体力、增加耐力的作用, 对航天、航海、高海拔工作者及运动员有良好作用, 尤其对老年心肌性衰竭、阳萎、糖尿病、贫血等有显著疗效. 它生长在海拔3,000～5,400m的雪域高原,生长环境高寒、低氧、干旱、紫外线照射强烈,其内含活性成分种类多而含量较高,是无污染的纯天然产物,其制品在免疫方面优于人参、刺五加,是很有竞争力的高档医疗及营养保健品(现未经深加工的西藏红景天原药材售价在1000元/kg以上).但由于野生红景天自然萌发率很低,采集后在短期内很难萌发出新株;因此,采用组织培养技术,快速繁育红景天植株幼苗,必然是扩大田间种植、解决国内外资源短缺的人工引种途径.     

绿萝组织培养与快繁技术

[目的]研究绿萝组培快繁技术要点,为绿萝再生体系建立和工厂化生产提供技术支持.[方法]以绿萝叶片和无节茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨不同浓度的激素组合(1.0~3.0 mg/L 6-BA、0.1~0.3 mg/L NAA、0.1~0.3mg/L IBA)对愈伤组织诱导及其分化、不定芽诱导、生根培养等的影响.[结果]两种外植体均能产生愈伤组织,但茎段产生愈伤组织较快,产生不定芽也快.叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L.茎段诱导愈伤组织及其分化的最适培养基均为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2 mg/L,最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L.[结论]绿萝叶片和茎段可作为愈伤组织培养的较好外植体,茎段培养效果优于叶片.     

新西兰麻离体快繁技术研究

通过筛选激素种类和浓度的配比,以及调整基本培养基中铁和钾的含量,成功建立了新西兰麻的初代培养.经过多个组合、不同批次的单因子对比试验研究.结果表明:改良MS+6-BA 0.5 mg/L+KT 2 mg/L+NAA0.2 mg/L配方为新西兰麻最佳增殖培养基;改良1/2 MS+NAA 0.2 mg/L为最适长根培养基;并在国内首次建立了新西兰麻快速繁殖体系.     

绞股蓝组培快繁培养基优化

以绞股蓝茎尖作为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的6-BA和NAA,筛选出适于绞股蓝叶芽丛生芽分化的培养基MS 6-BA1.0mg/L NAA0.02mg/L。     

HPLC快速测定绞股蓝中槲皮素的含量

[目的]建立绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum（Thunb.）Makino]中槲皮素含量的简便、快速、准确检测方法。[方法]用Microsorb-MV100-5C18色谱柱（4.6mm×250.0mm,5μm）,ProStar325紫外可见检测器,流动相为甲醇-混合液（乙氰∶1.0%醋酸∶0.4%磷酸=30∶35∶35,V/V/V）（37∶63,V/V）,流速为0.6ml/min,检测波长为372nm,柱温为室温,进样量为20μl。[结果]槲皮素在0.64~25.60μg/ml范围内与峰面积线性关系良好（r=0.9999）,方法平均回收率大于96%（n=9）。[结论]该研究建立的方法简便、快速、准确。     

甜味绞股蓝叶片中氨基酸含量及组成分析与评价

[目的]分析与评价甜味绞股蓝叶片中氨基酸含量及组成。[方法]以甜味绞股蓝叶片为原料,采用氨基酸自动分析仪对样品中各种氨基酸的含量进行检测,并对其组成成分进行比较与分析。[结果]绞股蓝叶片中总氨基酸含量较高,各种人体必需氨基酸种类齐全,且比例均衡,比值系数分(SRC)为71.61,营养价值较高。在各种人体必需氨基酸中,第一限制氨基酸为蛋氨酸+胱氨酸。[结论]甜味绞股蓝叶片具有较高的营养价值和保健作用,是有利于人体氨基酸营养平衡的天然绿色食品。     

绞股蓝的繁殖特性和育苗技术

绞股蓝是富含人参皂苷类物质的药食两用植物,其繁殖方式有无性繁殖、有性繁殖和组织培养。综述了绞股蓝的3种繁殖方式及其相应的育苗技术。自然营养繁殖和人工营养繁殖(地下茎分株、地上茎和叶的扦插及藤蔓压条)是绞股蓝无性繁殖的主要方式,有性繁殖即用种子进行繁殖,组织培养主要包括以茎尖、茎段和花芽为外植体的组培方式。绞股蓝的育苗技术为绞股蓝人工栽培提供了充足的种苗。     

绞股蓝叶龄变化规律及其应用

研究了绞股蓝(GynostemmapentaphyllumMakino)叶龄的变化规律,结果表明,绞股蓝叶龄的增加与茎叶生长和皂甙含量呈正相关。绞股蓝采收期应定在400叶龄以上为好。利用叶龄这一指标可以对绞股蓝的种植进行科学管理,其方法简单易行,对实际生产有很好的实用价值。     

绞股蓝有效成分的提取及抗氧化能力的研究

[目的]比较2种绞股蓝提取物的抗氧化能力。[方法]采用不同溶剂对2种绞股蓝进行有效成分的提取,对提取物中总黄酮进行鉴定,并对其含量进行测定,同时对不同提取物清除超氧阴离子自由基的能力进行研究。[结果]最优提取方案为无水乙醇于90℃回流提取2 h。据初步鉴定,绞股蓝提取物中含有黄酮以及其他黄酮类化合物。无论是Ⅰ型绞股蓝还是Ⅱ型绞股蓝,无水乙醇提取物对超氧阴离子自由基的清除作用强于其他溶剂提取物,且Ⅰ型绞股蓝中无水乙醇提取物清除能力较强,在浓度为0.6 mg/ml时反应30 min,对超氧阴离子自由基的清除率可达51.20%。无水乙醇、浓度75%乙醇和水的提取物对超氧阴离子自由基的清除能力均强于维生素C。[结论]野生绞股蓝提取物抗氧化性稍高于人工栽培的绞股蓝,但2种绞股蓝抗氧化效果差异并不大,说明南通地区的土壤等环境适合绞股蓝的生长。     

PCR方法快速鉴别绞股蓝与乌蔹莓

建立绞股蓝与乌蔹莓2种中药相互鉴别的特异性PCR方法,利用SYBR Green I染料法建立对绞股蓝与乌蔹莓的快速鉴别方法。采集不同产地的绞股蓝与乌蔹莓各9份,通过对其叶绿体DNA中trnL-F片段进行扩增、测序,进行多重序列比对后,根据其变异位点设计相互鉴别的特异性引物,建立特异PCR鉴别方法,并通过加入SYBR Green I染料法建立对2种中药进行快速检测方法,本研究建立了对绞股蓝与乌蔹莓2种中药进行分子鉴别方法,并建立了荧光快速检测方法。     

绞股蓝染色体调控黄瓜次级代谢产物的研究

[目的]探究绞股蓝染色体对黄瓜次级代谢产物的调控作用,为黄瓜的种质资源创新及育种提供理论依据。[方法]选取黄瓜子叶为材料分离制备原生质体作受体,绞股蓝愈伤组织为材料分离染色体作为供体,采用电击法将绞股蓝染色体转至黄瓜原生质体细胞中,经看护培养诱导出再生愈伤组织。采用分光光度法和高效液相色谱(HPLC)法测定再生愈伤组织次生代谢产物。[结果]再生愈伤组织总黄酮含量达到1.248,比对照组高出4.37%,同时在愈伤组织中可检测到人参皂苷Rb1。[结论]绞股蓝的某些成分对黄瓜次级代谢产物起了一定的调控作用。     

歙县绞股蓝总皂苷大孔树脂纯化研究

[目的]采用大孔树脂法研究歙县绞股蓝总皂苷的纯化工艺.[方法]以比吸附量和解吸率为指标,比较HP-20、D101、AB-8、DM130和HPD100 5种大孔吸附树脂的静态吸附与解吸特性.[结果]AB-8大孔树脂最佳,比吸附量为5.01 mg/g,解吸率为91.1％.动态吸附解吸试验表明,使用70％乙醇、流速为1 BV/h时对绞股蓝皂苷洗脱效果最佳,此条件下绞股蓝皂苷的回收率为92.33％,纯度由24.7％提高至78.6％.[结论]AB-8树脂适合歙县绞股蓝皂苷的分离纯化,吸附率、解吸率较高,且具有较好的再生性能.     

不同施肥水平对绞股蓝生长的影响

[目的]探究不同肥力对绞股蓝生长情况的影响。[方法]采用半控制试验生态学方法,对绞股蓝施以不同浓度水平的肥料。[结果]施肥水平在一定范围内的提高有利于绞股蓝的生长。其中,施有机肥45000 kg/hm2的官田坝2号地的长势最好,不施底肥的地块最差。在相同的施肥条件下,不同品系的生长情况不同。[结论]一定的施肥水平可以加强绞股蓝的生长。