利用琼脂免疫扩散试验检测小鹅瘟病毒抗原及抗体的研究

<正> 小鹅瘟自方定一(1956)在扬州发现以来,国内外已有大量报道。对小鹅瘟的研究也日益深入,但有关小鹅瘟病毒及抗体的实用、快速、有效的检测技术则尚少系统报道。一般都是应用鸭胚,鹅胚或鹅胚成纤维细胞进行中和试验,费时费事。Malkinson(1974)首先以琼扩试验检测小鹅瘟抗体,但敏感性不高。继后Бондарцнко(1982),R.H.Gough(1984),郑玉美(1986)也都先后报道了小鹅瘟的琼脂免疫扩散试验。我们在上述工作基础上,制备了小鹅瘟鸭胚组织尿囊液抗原与雏鹅组织抗原,并筛选出了配制凝胶板最适缓冲液及pH。成功地应用琼脂免疫扩散试验检测小鹅瘟抗体,并初步对四川省部份市县小鹅瘟疫情进行调查。现将实验方法及结果报道于后。     

应用琼脂扩散法检测小鹅瘟抗原抗体

近年来,养鹅业在我省发展十分迅速,但由于鹅种蛋来源复杂,使小鹅瘟在我省呈流行趋势,造成了严重的经济损失。为了更好地防制本病,建立快速、准确、方便的诊断方法十分重要。过去常以病毒分离鉴定和剖检的病理变化进行确诊,需要较长时间,操作也较复杂。另外,检测小鹅瘟免疫...     

小鹅瘟病毒卵黄抗体的保存期试验

正小鹅瘟(Goose parvovius,GP),是由鹅细小病毒(Goose parvovius,GPV)引起雏鹅急性肠炎及肝、肾、心实质脏器炎症,病原性强,死亡率高,该病主要感染1月龄以内的雏鹅,雏番鸭也很易感染,可经呼吸道和消化道感染,并能经卵垂直传播,发病率和死亡率可高达90%～100%,对养鹅业危害严重。为了有效的防控该病的发生,通过现地分离的病毒接种于鹅胚后,收获培养物,经     

用对流电泳试验检测小鹅瘟病毒

检测小鹅瘟的血清学方法有多种。其中以中和试验应用较广泛,但受产蛋季节限制。荧光抗体试验、反向间接血凝试验,效果良好,但难于普及应用。近几年来,国内对琼脂扩散试验进行了研究,其可行性和敏感性正在探索中,而对流电泳尚未见报道。为了寻求对小鹅瘟病毒的快速、简便、有效的检测技术,本研究利用对流电泳试验,检测了小鹅瘟病毒。     

小鹅瘟病毒卵黄抗体田间试验

在完成小鹅瘟病毒卵黄抗体实验室研究的基础上,于2015年中间试制5批卵黄抗体,经检验合格后,分别在3个鹅场,总计21 600只雏鹅进行了田间试验。结果表明,在实验观察期内,未发生小鹅瘟病毒感染,且无任何不良方应,3个鹅场的免疫组在生产性能方面与非免疫雏鹅均无显著差异;免疫攻毒组雏鹅攻毒保护率为98%。证明研制的小鹅瘟病毒卵黄抗体安全、有效。     

琼脂扩散试验法检测鸡痘病毒抗原及血清抗体

琼脂扩散试验法检测鸡痘病毒抗原及血清抗体徐春厚，吴凌，邵红，程葛，王伟臣（黑龙江八一农垦大学动物科技学院·密山·１５８３０８）鸡痘是由鸡痘病毒引起的一种急性、热性和高度接触性传染病，近二年在我省某些地区发生，给养鸡业造成较大的经济损失。作者用琼脂扩散...     

应用琼脂扩散试验检测新城疫抗原

应用ＰＥＧ平板进行琼脂扩散试验检测新城疫抗原,提高了对新城疫抗原的检出率。采用多器官检查和统一判定方法,即脾、胸腺、盲肠扁桃体、肠淋巴结和法氏囊等器官检出阳性时即可判为新城疫,对新城疫死鸡的检出率为１００％,解决了非典型新城疫诊断困难这一难题,方法简单准确,快速易行,值得推广和应用。     

应用琼脂扩散试验检测新城疫抗原

应用PEG平板进行琼脂扩散试验检测病禽组织器官中的新城疫抗原，采用抗原与兔抗ND高兔血清的点阵分析。确定了兔抗ND高兔血清诊断抗体的最佳稀释度为1：2，采用多器官检查和统一判定方法，即心、肝，脾、肺、肾，脑，盲肠扁桃体，法氏囊等器官检出阳性时即可判为新城疫。     

应用琼脂扩散试验检测新城疫抗原

应用ＰＥＧ平板进行琼脂扩散试验检测新城疫抗原,提高了对新城疫抗原的检出率。采用多器官统一判定方法,即脾、胸腺、盲肠扁桃体,肠淋巴结和法氏囊等器官检出阳性时即可判为新城疫,对新城疫死鸡的检出率为１００％,解决非典型新城疫诊断困难这一难题,方法简单准确,快速易行,值得推广和应用。     

小鹅瘟病毒卵黄抗体被动免疫期研究

本实验取3批实验室试制的卵黄抗体,琼扩效价为1∶16,按0.5 m L/只接种1、3日龄易感雏鹅,分别在注射抗体后1、3、5和7日攻毒,观察攻毒保护情况。结果显示:1日龄雏鹅注射抗体后1日攻毒保护率为96.67%,3日攻毒保护率为100%,5日攻毒保护率为86.67%,7日攻毒保护率为76.67%;3日龄雏鹅注射抗体后1日攻毒保护率为100%,3日攻毒保护率为96.67%,5日攻毒保护率为86.67%,7日攻毒保护率为80%。以免疫攻毒保护率不低于80%为标准,本研究确定小鹅瘟病毒卵黄抗体的被动免疫保护期为5日,随着时间的延长,保护作用逐渐减弱。     

小鹅瘟琼脂扩散试验的研究

用临床分离的小鹅瘟病毒,接种于健康的雏鹅,使其发病,取肝脾制成悬液接种于10日龄的鹅胚,收集尿囊液,制成抗原,并用尿囊液接种于健康的成年鹅,制得高免血清,其抗原与高免血清作琼脂扩散(AGID)试验,具有特异性反应,方法简便,灵敏度高,适应于基层的血清样品调查,疾病的定性和病毒分离鉴定试验。 小鹅瘟是由细小病毒科细小病毒属的小鹅瘟病毒感染所引起雏鹅的急性传染病。在临床上主要根据病理变化特征进行诊断。近年来,由于一些雏鹅感染后呈最急性死亡,发病年龄较大,临床无特征性的病理变化,而荧光抗体和反向间接血凝试验又不适于基层的应用,为此,笔者自1987年以来对小鹅瘟琼脂扩散试验进行了研究,现报告如下:     

直接荧光法快速检测小鹅瘟病毒

本试验利用直接荧光标记单克隆抗体对１１例自然病死的小鹅和正常小鹅内脏组织进行了检测。结果１１例自然死亡的小鹅的心、肝、脾、肺、肾、脑、十二指肠、盲肠、回肠、空肠十种脏器均出现阳性，而且以肠道的检出率最高，检出效果最好，鹅肝分离出的病毒经浓缩后进行琼脂扩散试验，均证明ＧＰＶ的存在，与试验结果一致。     

小鹅瘟病毒荧光抗体的制备与应用

将小鹅瘟病毒(GPV)分离毒xw株接种健康兔获得兔抗GPV超免疫血清，由此制备兔抗GPV荧光抗体。采用直接荧光抗体试验对人工感染雏鹅、鹅胚及自然病例进行了检测。结果表明，该方法可栓出患病组织中的病毒抗原，且肠和肝的含毒量高于尿囊细胞。     

琼脂扩散试验检测鸡新城疫抗体的研究

本文报告了用NDV—Lasota株经鸡胚增殖病毒,收集含毒的鸡胚尿囊液,用乙醚脱脂、透析浓缩制成琼扩(AGP)抗原,应用本抗原和HI试验同步检测435份待检血清,结果AGP与HI试验的阳性符合率为91.6％(241/202),阴性复合率为100％(114/114),     

琼脂扩散试验检测附红细胞体抗体

采用琼脂扩散试验检测自然感染猪附红细胞体抗体和兔抗猪附红细胞体抗体,结果表明,猪附红细胞体抗原与自然感染附红细胞体猪血清、首免和二次免疫后收集的兔抗血清的琼脂扩散试验结果均呈阴性,第3次免疫后的血清效价为1∶16。     

小鹅瘟病毒单抗的防治效果

小鹅瘟是严重危害养鹅业的主要疾病之一，自５０年代发现已来，世界各国都在探讨诊断和防治该病的安全有效而又经济方便的方法。我们利用淋巴细胞杂交瘤技术研制出１１株能稳定分泌小鹅瘟病毒单抗的杂交瘤细胞系，并在对其特异性鉴定、琼扩沉淀效价、鹅胚内及实验雏鹅的中和效果及实验性防治效果测定的基础上，选择其中２株高沉淀效价和中和效价的单抗（ＧＰＡ１和ＧＰＣ５）进行了较大规模的（计１３６３５只雏鹅）现地预防和治疗小鹅瘟试验，其存活率分别达到９８．２％和９０．５％，获得了良好的防治效果，具有很高的临床应用价值。