一株枯草芽胞杆菌产抑菌物质发酵条件及代谢产物稳定性研究

枯草芽胞杆菌L7是从牛粪中选出的,它的代谢产物中的抑菌物质对多种病原菌具有强烈的抑制作用。通过对其抑菌物质产生的发酵条件研究认为,最佳发酵条件为pH值7.0、接种量4%、30℃恒温振荡培养箱培养,发酵时间约60h。其代谢产物中的抑菌物质在80～121℃下30min稳定,pH值在6.0～10.0范围内稳定,光照2～6h后抑菌活性下降。结论：菌株L7的发酵产物具有较强稳定性,可置避光、pH值中性、常温环境中短期保存,经提高活性、纯化等处理后可能作为新型天然防腐剂应用于食品领域,或应用于抗感染微生态制剂的生产。     

巨大芽胞杆菌培养条件的研究

[目的]为了提高巨大芽胞杆菌的芽胞形成率及芽胞数量,为巨大芽胞杆菌芽胞制剂的产业化生产提供理论依据。[方法]通过单因子试验及正交试验对巨大芽胞杆菌JD-2发酵培养基和培养条件进行了研究。[结果]最适培养基组成为:玉米淀粉10.0g/L,蛋白胨5.0g/L,酵母膏5.0g/L,NaCl5.0g/L,CaCO31.0g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L。确定最佳培养条件为:接种后起始芽胞浓度控制在106CFU/mL,初始pH值为7.0,培养温度为30℃,200r/min摇瓶培养,250mL三角瓶中最适装液体积为25mL。在15L自动发酵罐中扩大培养,控制溶氧在30%以上,培养22h,菌体浓度可达3.50×109CFU/mL,芽胞数量可达3.40×109CFU/mL,芽胞率达97.2%。[结论]试验获得的最佳培养条件可进一步应用于生产实际。     

一株抑菌芽胞杆菌的分离鉴定及产细菌素性能检测

采用常规微生物学方法从新鲜鸡粪中分离得到1株抑菌效果较好的菌株BX-6。结合菌落形态特征、生理生化特性及菌株特异性序列分析等手段,确定其分类归属,并采用管碟法对所产细菌素的抑菌特性进行了检测。结果表明,菌株BX-6为枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）。菌株在发酵过程中产生一定量的H2O2类抑菌物质,其所产细菌素具有较好的热稳定性、pH值耐受性,对大部分蛋白酶敏感,对鸡白痢沙门氏菌C79—13、鸡大肠杆菌01和金黄色葡萄球菌C56011有较好的抑菌效果,具有作为畜禽饲料添加剂的潜力。     

解淀粉芽胞杆菌固态发酵当归培养基的研究

为筛选和优化解淀粉芽胞杆菌固态发酵当归培养基,以当归多糖含量为指标,采用单因素试验对当归固态发酵培养基成分筛选,采用响应面分析试验对培养基组分进行优化。结果显示,在所筛选成分中,最适宜菌株发酵的固态培养基成分为当归、黄豆粉、碳酸钙和水。优化的固态发酵培养基各组分含量分别为:当归320.914 g/L、黄豆粉109.918 g/L、碳酸钙1.532 g/L、水544.159 mL/L,37℃发酵培养72 h,固态发酵物中的多糖质量分数达24.91 mg/g。结果表明,优化的当归固态发酵培养基适宜解淀粉芽胞杆菌生长,易于多糖的释放,所筛选的发酵培养基原材料符合固态发酵产业化生产条件要求。     

16S rRNA测序分析枯草芽胞杆菌喷鼻对猪鼻腔菌群影响的研究

为了探究枯草芽胞杆菌对哺乳仔猪鼻腔中微生物多样性及其功能的影响,选用1株来源于猪鼻腔的枯草芽胞杆菌NS15对哺乳期仔猪进行喷鼻试验,于喷鼻后第7天采集鼻腔拭子,随后利用16S rRNA基因高通量测序技术检测分析鼻腔拭子样本菌群结构并进行功能预测。结果显示：猪鼻腔的优势菌门为厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)。喷鼻后不影响优势菌门的组成,但是各菌门的丰度发生变化,如厚壁菌门和放线菌门的丰度增加,其中厚壁菌门中的乳杆菌属(Lactobacillus)和放线菌门中的罗氏菌属(Rothia)等有益菌属丰度增加;而变形菌门和拟杆菌门等有害菌门的丰度下降,包括变形菌门中的不动杆菌属(Acinetobacter)、嗜麦芽窄食单胞菌属(Stenotrophomonas)和鲍特菌属(Bordetella)以及拟杆菌门中的黄杆菌属(Flavobacterium)等有害菌属丰度下降。进一步Tax4Fun功能预测结果显示,喷鼻枯草芽胞杆菌NS15后,猪鼻腔中能量、氨基酸和脂类等代谢通路显著...     

鹅源栗褐芽胞杆菌的分离和鉴定

为了鉴定从狮头鹅心血中分离到的芽胞杆菌.本研究进行了一系列生理生化试验和动物致病性试验,根据试验结果可鉴定该芽胞杆菌为栗褐芽胞杆茵.同时,提取了该芽胞杆菌的基因组DNA,用细菌16SrRNA基因的通用引物,经PCR方法成功扩增出其部分16S rRNA基因,克隆后测序表明其全长1 516 bp,G+C含量为55%.该序列GenBank登录号为EU717967.BLAST在线分析显示其与栗褐芽胞杆菌的16S rRNA基因序列一致性>99.5%,从分子水平进一步证实了该菌为栗褐芽胞杆菌.将其回归动物试验结果表明:以1×10~8CFU/只的接种剂量对鹧鸪、鹌鹑的致死率为60%,对狮头鹅的致死率70%.     

芽胞杆菌在不同发酵底料下产酶规律的研究

试验用液固两相方法制备芽孢杆菌培养物,目的是探讨不同发酵垫(底)料对芽孢杆菌产酶的影响,为生产提供依据.     

高寒草甸牧草内生解淀粉芽胞杆菌261MY6发酵工艺优化

为提高生防菌株解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）261MY6的生物量,本试验对高寒草地内生细菌解淀粉芽胞杆菌261MY6生长温度、pH和生长周期等进行测定,并结合单因素试验和正交设计试验对其发酵培养基和发酵条件进行优化。结果表明,菌株261MY6最高生长温度为56℃、最低温度为4℃、致死温度为95℃和最适温度为28~36℃,最适pH值为5~7,在5 h进入对数生长期,在10 h时进入稳定生长期。最优发酵培养基为：牛肉膏3 g,乳糖25 g,MgSO₄ 3 g,酵母膏7 g,水1000 mL。最优发酵条件为：温度32℃,接种量14%,装液量40 mL·（150 mL）^-1,摇床转速210 rpm,pH 7。最优条件下,发酵261MY6,最佳放罐时间为30 h,活菌数达2.37×10¹² CFU·mL^-1。该结果为菌株261MY6开发为微生物菌剂奠定了基础。     

产纤维素酶解淀粉芽胞杆菌分离株的生物学特性研究

对发酵黄芪样品中分离的1株产纤维素酶解淀粉芽胞杆菌的生物学特性进行了检测,试验结果表明,菌株在10℃~60℃环境均能生长,最适生长温度为35℃~40℃。pH5.0~8.0培养基均适宜菌株生长,其中最适pH为6.0。在37℃环境200r/min振荡培养的生长曲线在0~4h为延迟期,4h~12h为对数期,12h~24h为稳定期,24h以后为衰亡期。细菌37℃培养32h开始产生芽胞,在培养72h时芽胞形成率达到80.67%。菌株对多数抗菌药物敏感,且安全性良好。该菌株适应性强,生长条件较为宽松,这为其开发应用提供了依据。     

产乳酸芽胞杆菌分离以及生物学特性研究

一、材料和方法 1．土样。采自金华种猪场土样3份。2．培养基。（1）改良MRS培养基：α-甲基葡萄糖苷10．0克．酵母提取物5．0克．际胨10．0克．肉浸膏5．0克．乙酸钠5．0克．柠檬酸铵2．0克．磷酸氢二钠2．0克．山梨酸钾1．0克．硫酸镁0．1克．溴甲酚绿0．0224克．硫酸锰0．05克．蒸馏水1000毫升．pH5．5。     

16SrRNA寡核苷酸探针原位杂交法在粪便微生物研究中的应用

16SrRNA寡核苷酸探针（以下简称16SrRNA探针）原位杂交法，可简单、快速和准确地对粪便微生物进行定性和定量测定，本文对该方法及其应用作一综述。     

Studies on Preparation and Application of Fuzhengjiedusan Compound Preparation Fermentated by Lactic Acid Bacteria in Broilers

This study was aimed toproduce compound preparations of Fuzhengjiedusan fermented with Lactic acid bacteria and analyze its effectson growth performancesand immune organ growth of broilers. Firstly, to identify the influence of traditional Chinese medicine on the growth of Lactic acid bacteria, the medium for the growth of Lactic acid bacteria was filled with different proportions of Astragalusmembranaceus, Radix Isatidis, Epimedium and compound Chinese herbal medicine extracts by single factor test. Secondly, to confirm the optimum medium, orthogonal test was used to optimize the culture medium of compound medicine liquid. Finally, 450 one-day-old healthy AA broilers were randomized into three groups, each group had 3 repeats: control group (antibiotics), group Ⅰ(fermented preparation), group Ⅱ (unfermented preparation). The growth and immune organ index were determined in 21 and 42 days after administration. The results showed that the highest viable count of Astragalusmembranaceus, Radix Isatidis, Epimedium and compound medicine liquid groups were increased by 261.64%, 505.48%, 156.16% and 564.38%, respectively, compared with control group. The optimum medium composition was compound medicine liquid 100 mL, brown sugar 2.0 g, peptone 0.3 g, soybean meal 2.0 g. The viable count of fermentation liquid was 7.13×10⁹ CFU/mL.The production results showed that in period of 1~42 days, the daily weight gain of group Ⅰ and Ⅱ were separately increased by 17.84% and 8.22% (P<0.05) than that of the control. What's more, the feed conversion rate was reduced by 10.88% (P<0.05). The average daily feed intake was significantly higher than control group (P<0.05). At 21 and 42 days, the spleen index of group Ⅰ were improved by 11.04% and 13.58% (P<0.05), respectively. The bursal index were raised by 31.30% and 26.23% (P<0.05), respectively. However, the spleen index of group Ⅱ were improved by 7.79% and 7.41% (P<0.05), respectively. The bursal index were raised by 15.65% and 11.48% (P<0.05), respectively. On the basis of the above results, it could be suggested that Chinese herbal medicine extracts can promote lactic acid bacteria proliferation and compound fermentation liquid can improve growth performance in broilers, as well as immune organ development.     

乳酸菌发酵扶正解毒散复合制剂的制备及其在肉鸡上的应用研究

本研究旨在制备一种乳酸菌发酵的扶正解毒散复合制剂,并探索其对肉鸡生长性能和免疫器官发育的影响。首先,利用单因子试验法将不同比例的黄芪、板蓝根、淫羊藿及复合中药提取液添加至乳酸菌的培养基中,测定中药对乳酸菌生长的影响;其次,利用正交试验对复合药液培养基进行优化,确定最佳的培养基配方;最后,选取1日龄健康AA肉仔鸡450只,随机分为3组,每组3个重复:对照组(抗生素)、试验Ⅰ组(发酵制剂)、试验Ⅱ组(未发酵制剂),分别在试验的第21、42天测定肉鸡的生长及免疫器官指标。试验结果显示,黄芪、板蓝根、淫羊藿及复合药液组的最高活菌数与对照组相比分别提高了261.64%、505.48%、156.16%、564.38%。通过正交试验得到复合发酵液最适生产培养基配方:复合药液100 mL、红糖2.0 g、蛋白胨0.3 g、豆粕2.0 g,发酵液活菌数为7.13×10⁹ CFU/mL。肉鸡生长试验结果显示,1~42日龄阶段,Ⅰ、Ⅱ组的平均日增重分别比对照组提高了17.84%和8.22% (P<0.05),料肉比分别比对照组降低了10.88%和4.66% (P<0.05),平均日采食量明显高于对照组 (P<0.05);21、42日龄时,Ⅰ、Ⅱ组脾指数分别比对照组提高了11.04%和13.58% (P<0.05)、7.79%和7.41% (P<0.05),法氏囊指数分别比对照组提高了31.30%和26.23% (P<0.05)、15.65%和11.48% (P<0.05)。以上试验结果表明中药提取液能促进乳酸菌的增殖,复合发酵液能够提高肉鸡的生长性能并促进免疫器官的发育。     

16S~23SrRNA基因序列在细菌鉴定中的应用

近些年围绕16S~23S rRNA基因间隔区发展起来的分子生物学技术为细菌多样性的研究开辟了新的途径,使得人们在细菌多样性的研究中得以摆脱传统分离培养的束缚,进而使分析方法得以长足拓展,并为指导实践提供可靠的理论依据,作者就16S~23S rRNA基因间隔区序列的特点、应用及发展前景作一简述。     

银耳孢子发酵物与益生素对生长肥育猪生长性能及肉品质的影响

本试验旨在考察比较银耳孢子发酵物(TSF)、益生素对生长育肥猪不同阶段的促生长效果以及对猪肉品质的影响。采用单因素试验设计,将24头日龄相近,平均体重为(10.35±0.28)kg的"杜×太"杂交仔猪按照体重相近原则,随机分配到4个组,每个组6个重复,每个重复1头猪,4个组分别为对照组(饲喂基础饲粮)、抗生素组(在基础饲粮中添加0.15 g/kg土霉素+1.5 g/kg硫酸抗敌素)、TSF组(在基础饲粮中添加4 g/kg TSF)和益生素组(在基础饲粮中添加0.2 g/kg益生素)。试猪从10 kg饲喂到110 kg。结果表明:在10～20 kg阶段,TSF组、益生素组和抗生素组的生长性能无显著差异(P>0.05),但平均日采食量(ADFI)和平均日增重(ADG)均显著高于对照组(P<0.05);21～50 kg阶段,TSF作用效果开始逐渐增强,TSF组ADG和ADFI有高于益生素组和抗生素组的趋势(P>0.05);50 kg以后,TSF组ADG则显著高于益生素组(P<0.05),而益生素组显著高于抗生素组(P<0.05)。TSF组与益生素组血清胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)含量在20 kg时差异不显著(P>0.05),但显著高于抗生素组和对照组(P<0.05);110 kg时,TSF组显著高于益生素组(P<0.05)。血清免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白M(IgM)含量的变化规侓类似IGF-Ⅰ。较之抗生素组,TSF组和益生素组均能显著提高双歧杆菌与乳酸杆菌的数量(P<0.05)。TSF组较益生素组有提高眼肌面积、肌内脂肪和降低剪切力及滴水损失的趋势(P>0.05)。结果提示,在20 kg前,TSF、益生素和抗生素促生长效果相当,而在20 kg以后,TSF的作用加强,50 kg以后,则显著高于益生素;生长性能的改善与血清IGF-Ⅰ、IgG及IgM含量的提高以及肠道菌群的改善有关;TSF对肉品质的作用较之益生素和抗生素有更好的效果。     

Weed-Suppressive Bacteria Have No Effect on Exotic or Native Plants in Sagebrush-Steppe

Approaches and techniques for control of exotic annual grasses are a high priority in rangelands including sagebrush steppe. Strains of the soil bacterium Pseudomonas fluorescens have been proposed to be selectively pathogenic to multiple species of exotic annual grasses (“Pf,” weed-suppressive bacteria, “WSB”). However, defensible tests of the target and nontarget effects of these WSB strains in the field are needed. We evaluated the effects of D7 and MB906 strains of Pf WSB in sagebrush steppe invaded by cheatgrass (Bromus tectorum L), medusahead (Taeniatherum caput-medusae L. Nevski), and other exotic annual grasses. We evaluated the WSB strains with and without herbicides (imazapic, rimsulfuron) or discing to mix surface-spray of the WSB into deeper soils, and we replicated these tests in three ecoregions that differed in soils and climate. Over 3 yr after treatment, neither WSB strain affected cover of exotic annual grasses, perennial bunchgrasses, or the total community, either with WSB alone or in combination with herbicides or discing. WSB has received considerable attention and is being applied across large rangeland areas, but the WSB strains and methods applied here were ineffective. We recommend any future use of WSB be applied in an experimental fashion, with experimental design and measurement of responses, until its effects can be proven.     

用于肠道中的乳酸菌和双歧杆菌研究的分子生物学技术

综述了利用16S rRNA基因为靶基因的各种分子生物学技术来研究肠道中乳酸菌和双歧杆菌的方法，指出了肠道中乳酸菌和双歧杆菌的组成及其菌数。     

菌酶协同发酵菜籽粕在动物生产中的应用及存在问题

通过菌酶协同发酵技术提升菜籽粕类饲料质量和营养价值,改善适口性,降低饲料中植酸和硫苷含量,增加菜籽粕类饲料替换常规蛋白原料豆粕的比例,可在一定程度上缓解养殖业中大豆粕等蛋白饲料原料成本不断提高的问题。分析发酵菜籽粕处理常用方法——微生物发酵法和酶解法的优缺点,介绍制备菌酶协同发酵菜籽粕类饲料所需的菌种和酶制剂种类,综述菌酶协同发酵菜籽粕的功效,阐述其在动物生产中的应用现状及存在的问题,以期为菌酶协同发酵菜籽粕在畜禽生产中的科学应用提供参考。     

气象条件对牛奶产量及品质的影响研究

通过分析奶牛平均产奶量和牛奶品质与同期日气象资料,结果表明,奶牛平均产奶量和牛奶品质具有明显的季节变化,冬季产奶量最低,8月份最高;牛奶的脂肪含量与干物质含量极显著相关,且变化趋势一致;气温是影响牛奶单产和品质的主导气象因素;气压与奶牛平均单产呈负相关,与牛奶品质呈正相关;相对湿度升高,奶牛平均单产下降,而乳脂肪、乳蛋白和干物质含量增多;当天降水对牛奶产量不利。     

凝结芽孢杆菌芽孢高产固体发酵的研究

为研究凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）固体发酵大量生成芽孢的方法,就固体发酵的不同底物（麦麸、糠粉、玉米粉和谷草粉）、湿度、初始pH值和添加物质（碳源、氮源和盐类）等因子进行单因素试验,探索芽孢形成的最佳的培养条件;其次采用正交设计法对固体发酵培养基优化.结果表明底物的理化性质对固体发酵生产芽孢影响明显,其中以麦麸为底物进行固体发酵时,促进芽孢形成的能力最强.在以麦麸为底物,温度37℃,湿度为60％,初始pH7.5,添加外源物质为葡萄糖1.00％、蛋白胨2.00％,KH2PO40.50％,MnSO40.05％所形成的固体培养条件下进行48 h的发酵,芽孢生成进一步提高,优化验证试验结果表明凝结芽孢杆菌的芽孢产量可以达3.80×1010个/克以上,明显高于对照组2.98×109个/克.