原始生殖细胞与胚胎干细胞

原始生殖细胞用于哺乳动物胚干细胞的分离与培养,是进入９０年代以来胚胎干细胞研究领域内的重大技术成果。在小鼠、大鼠、牛和猪等动物上,人们已由ＰＧＣｓ成功地建立了类ＥＳ细胞系。囊胚注射不仅已生出嵌合小鼠,而且其中生殖系嵌合体也已繁殖出数量可观的后代。因此,来自ＰＧＣｓ的ＥＳ细胞,业已证明具有囊胚ＥＳ细胞的全部特性。在ＥＳ细胞培养中,用ＰＧＣｓ替代桑椹胚和囊胚在取材等方面是有优势的。     

基因突变检测技术进展

基因未知突变检测在生物学各研究领域占有突出的地位,特别是人类遗传性疾病的未知突变检测及诊断。本文综述了目前使用较多的基因未知突变检测技术的原理和应用方法,特别是直接测序法（ＤＳ）、错配的化学切割分析（ＣＣＭ）、单链构象多态分析（ＳＳＣＰ）、核糖核酸酶切法（ＲＮａｓｅ）,变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ）等的进展,综合评价了各种方法的优缺点,便于选择应用。     

应用杆状病毒系统高效表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GPS基因

将猪繁殖与呼吸综合征症病毒ＣＨ－ａｌ株囊膜糖蛋白（ＧＰ５）一向克隆到杆状病毒转移载体ｐＢｌｕｅＢａｃＨｉｓＢ中,与太毒线性ＤＮＡ（Ｂａｃ－Ｎ－Ｂｌｕｅ＾ＴＭＤＮＡ）共转染昆虫细胞ｓｆ９,经过三轮蚀斑纯化后,获得重组杆状病毒ｒＢａｃ＝ＧＰ５。用该重组病毒感染ｓｆ９细胞后,应用间接免疫荧光试验、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测表明,ＧＰ５基因在杆癍病毒系统中获得了高效表达,表达产物因糖基     

胰岛素样生长因子结合蛋白的研究进展

胰岛素样生长因子（ＩＧＦｓ）在动物机体中有着明显重要的生理功能,这些功能是由ＩＧＦｓ受体以及一部分胰岛素离态形式存在,绝大部分ＩＧＦｓ与一类具有高亲合力的特异性蛋白（ＩＧＦＢＰｓ）结合。这些ＩＧＦＢＰｓ将游离态的ＩＧＦｓ稳定在一个平衡水平,并且由于ＩＧＦＢＰｓ对ＩＧＦｓ的亲合力大于ＩＧＦｓ受体对ＩＧＦｓ的亲和力,ＩＧＦＢＰｓ可作为一种运输载体将ＩＧＦｓ定位于靶组织细胞并通过对ＩＧＦｓ与其受体的相互     

鸡毒支原体株间结构蛋白及其抗原性变异的比较研究

本研究以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ技术,应用鸡毒支原体国外强毒株Ｓ６、标准株ＰＧ３１,疫苗株Ｆ,北京分离 ＢＧ４４Ｔ、ＮＢ７２特异性多克隆抗血清对以上五株及疫苗株Ｖ、北京分离株Ｃ的结构及其抗原性进行了比较结果表明ＭＧ结构蛋白及其抗原性存在着株间的多样性和一定相似性,其中以Ｆ与Ｓ６、ＢＧ４４Ｔ与ＰＧ３１、ＮＢ７２与Ｃ更为接近,可能具有同源性。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示出了ＭＧ株间结构蛋白微     

国外科技文摘

豌豆的饲用价值（Ｐｉｓｕｍｓａｔｉｖｕｍ，Ｌ．）１ 在猪中的营养价值作者 :ＧｒｏｓｊｅａｎＦ，ＢａｓｔｉａｎｅｌｌｉＤ，Ｂｏｕｒｄｉｌｌｏｎ，ＣｅｒｎｅａｕＰ，ＪｏｎｄｒｅｖｉｌｌｅＣａｎｄＰｅｙｒｏｎｎｅｔＣ内容提要 :给育成猪饲喂１９种圆白饲用豌豆（ＦＰ）品种 ,６种有色花豌豆（ＣＰ）品种和４种皱褶白花豌豆（ＷＰ）品种以测定它们的饲用价值。同等含量的ＦＰ、ＣＰ和ＷＰ测量的表观消化率匀值相应的为０．８８６、０．８１２和０．８２３。可消化能的均值为１６．３４ＭＪ／ｋｇ、１５．０６ＭＪ／ｋｇ 和１５．６…     

用PCR技术从同一兔出血症病料扩增和检出2种病毒核酸

应用 Ｐ Ｃ Ｒ 和 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 技术，对兔出血症病毒核酸作了鉴定。分别设计合成 ２ 对 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增特异性引物，即按兔出血症病毒中国分离的 Ｎ Ｊ株核酸序列合成 １ 对引物（ Ｎ Ｊ引物），按德国分离的 Ｆ Ｒ Ｇ 株核酸序列合成另 １ 对引物（ Ｆ Ｒ Ｇ 引物），进行 Ｐ Ｃ Ｒ 和 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ。从纯化的病毒核酸样品和感染 Ｄ Ｊ Ｒ Ｋ 细胞的病毒核酸样品中，均扩增出 ２ 对引物范围内的特异性核酸片段， Ｎ Ｊ引物扩增产物为 ３６４ ｂｐ， Ｆ Ｒ Ｇ 引物扩增产物为 ５１３ｂｐ。模板用 Ｒ Ｎａｓｅ 消化后，仍出现 ３６４ ｂｐ 带，用 Ｄ Ｎａｓｅ Ｓ１ 消化，则此带消失；反之，用 Ｄ Ｎａｓｅ Ｓ１ 消化，出现５１３ ｂｐ 带，用 Ｒ Ｎａｓｅ 消化，则此带消失，证实前者模板为 Ｄ Ｎ Ａ，后者为 Ｒ Ｎ Ａ。 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交试验证实， Ｐ Ｃ Ｒ扩增出的核酸片段与各自的地高辛标记特异性探针发生强阳性杂交反应。由此认为，在兔出血症病毒感染中，同时存在着 ２ 种不同核酸型的病毒。     

扬子鳄无机元素的初步研究

本文用电感耦合等离子发射光谱法（ＩＣＰ－ＡＥＳ）测定了扬子鳄主要组织和器官中的２１种无机元素：Ｋ、Ｎａ、Ｃａ、Ｍｇ、Ｐ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｍｎ、Ｃｒ、Ｍｏ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｓｒ、Ａｓ、Ａｌ、Ｂａ、Ｌｉ、Ｃｄ、Ｐｂ、Ｂｅ。为研究扬子鳄生物学及保护学提供了生物无机化学领域方面的资料。     

类志贺氏菌毒素Ⅱ型变异体B亚单位基因的表达与鉴定

将由 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增并克隆在ｐ Ｕ Ｃ１８ 质粒载体中的ｓｌｔⅡｅ Ｂ基因切出,并按预定的阅读框架插入表达性质粒载体 ｐ Ｇ Ｅ Ｘ６ｐ１ 中的谷胱苷肽转移酶（ Ｇ Ｓ Ｔ）基因的下游。重组质粒 ｐｐｐｓｌｔⅡｅ Ｂ在大肠杆菌 Ｂ Ｌ２１ 中以融合蛋白的形式表达 Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ蛋白（命名为 Ｇ Ｓ Ｔ Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ）,即 Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ蛋白（７５６８ｋ Ｄ）与谷胱苷肽转移酶（２７３３５ｋ Ｄ）相连组成分子量为 ３４８８５ｋ Ｄ 的融合蛋白。通过对重组大肠杆菌 Ｐ Ｐ Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ的菌体裂解物的 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 电泳分析,以及根据抗原抗体结合反应的免疫学特性,通过 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ 鉴定,重组大肠杆菌 Ｐ Ｐ Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ（含有重组质粒 ｐｐｓｌｔⅡｅ Ｂ的大肠杆菌 Ｂ Ｌ２１）可以大量表达融合蛋白形式的 Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ。根据 Ｇ Ｓ Ｔ 可与其底物谷胱苷肽结合的特性,用谷胱苷肽结合的 Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４ Ｂ制备的亲和凝胶纯化表达产物,纯化的表达产物经 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ,可以鉴定到分子量约为 ３５ｋ Ｄ 的蛋白条带,这与融合蛋白形式的 Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ分子量（３４８８５ｋ Ｄ）相当。     

稳定性碳同位素比值分析法(SCIRA)最新发展与应用展望

(续 2 0 0 2年第 1期 )而其它一些酶 ,如ＮＡＤ(Ｐ) 苹果酸酶、ＮＡＤ(Ｐ) 苹果酸脱氢酶等在Ｃ3 植物普遍存在。因此 ,就酶系的研究来看 ,Ｃ3 植物中具备各种Ｃ4途径的酶已是不争的事实。另外 ,ＣＯ2 同化后的最初产物及转换等也通过14ＣＯ2 技术作了明确回答。Ｎｕｔｂｅａｍ等 ( 1 976 )证明 ,在Ｃ3 植物大麦种子中不仅有高活性ＰＥＰＣａｓｅ ,而且利用14 ＣＯ2 示踪还证明14 Ｃ的最初固定产物为四碳酸 Ｍａｌ,不是 3 ＰＧＡ。在Ｃ3 植物小麦穗中 ,也发现ＣＯ2 固定的最初产物为Ｍａｌ和Ａｓｐ。Ｉｍａｉｚｕｍｉ( 1 997)用ＣＯ2 示踪…     

应用PCR诊断隐孢子虫病

应用聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ）建立了一种诊断人及牛等哺乳动物隐孢子虫病的方法。试验采用甘油漂浮 Ｇ３ 耐酸漏斗过滤法纯化隐孢子虫卵囊,以液氮冻融法制备模板 Ｄ Ｎ Ａ,根据隐孢子虫 １８ Ｓｒ Ｒ Ｎ Ａ 序列设计 Ｐ Ｃ Ｒ 引物建立其诊断方法。该方法特异性强,可检出鼠隐孢子虫（ Ｃｒｙｐｔｏｓｐ ｏｒｉｄｉｕｍ ｍ ｕｒｉｓ）和小球隐孢子虫（ Ｃ．ｐａｒｖｕｍ ）卵囊;敏感性高,每克粪便可检出 ４００ 个卵囊。初步应用结果表明,所建立的 Ｐ Ｃ Ｒ 方法适合于人、牛等哺乳动物隐孢子虫病的临床诊断和流行病学调查。     

禽霍乱基因缺陷菌株双型联合免疫的研究

将禽源多杀性巴氏杆菌Ｃ４８－１株（血清型为５∶Ａ）用化学诱变剂亚硝基胍（ＮＴＧ）处理，从３０００多个克隆中筛选出９株链霉素依赖性基因缺陷型菌株（Ｃｓｔｄ株），经２０代连续回复突变测定，除１株外，其余８株表型稳定。将８株Ｃｓｔｄ株用小鼠做毒力比较试验，其中５株加注链霉素表现毒力，不加注链霉素则不表现毒力；用小鼠做免疫力测定，其中Ｃｓｔｄ－１和Ｃｓｔｄ－７能保护１０个最小致死量（ＭＬＤ）同型强毒菌的攻击。将Ｃｓｔｄ－１株与另一禽源多杀性巴氏杆菌Ｐ１０５９株（血清型为８∶Ａ）的链霉素依赖型菌株Ｐｓｔｄ－６混合，用小鼠做双型联合免疫试验，结果小鼠能抵抗Ｃ４８－１和Ｐ１０５９两株强毒菌混合培养物１０个ＭＬＤ的攻击，保护率达１００％。     

绿色荧光蛋白基因真核表达载体的构建与表达检测

拟构建绿色荧光蛋白（ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ, ＧＦＰ）基因的真核表达载体 ｐｃＤＮＡ_３ＧＦＰ,并观察其在 ＭＤＣＫ细胞（大肾细胞系）中的表达。以Ｎｏｔ　Ⅰ切取ＧＦＰ后插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ_3,以ＢａｍＨⅠ鉴定方向,以ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥＴＭ将ｐｃＤＮＡ３ＧＦＰ转染至培养的ＭＤＣ Ｋ,经Ｇ４１８筛选ｐｃＤＮＡ３ＧＦＰ阳性克隆,荧光显微镜下观察。结果证实成功构建了含ＧＦＰ ｃＤＮＡ的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３ＧＦＰ,并成功转染ＭＤＣＫ,在荧光显微镜下阳性克隆细胞呈绿色。 ＧＦＰ基因可在 ＭＤＣＫ细胞中成功表达,并发出绿色荧光,是一良好的报告基因和筛选标记。     

纤维素酶产生菌黑曲霉X-15的选育及其产酶条件

突变型黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｒｓ ｎｉｇｅｒ）Ｍ００１分别经紫外线（ＵＶ）、亚消基胍（ＮＴＧ）、ＴＤＰ辐射仪及空间微重力辐射（ＳＣ）等因素的多级循环处理，得到１株形态发生改变的变异菌株Ｘ－１５。其固体培养纤维素酶的滤纸分解酶活力（ＦＰＡ）为１９Ｕ／g，羟甲基纤维素酶（ＣＭＣａｓｅ）活力为４５３Ｕ／g，β－葡萄糖苷酶（β－ｇｌｕａｓｅ）活力为１５４Ｕ／g，与出发菌株Ｍ００１相比，分别为其２．８倍、     

杜大长猪IGF-I基因的克隆及其序列分析

采用ＴＲＩzol法从杜大长杂交猪的肝脏中提出总ＲＮＡ,将其纯化后作为ＰＣＲ扩增模板 ,以设计的Ｐ１（５′－ＣＴＡＣＡＴＴＣＴＧＴＡＧＴＴＣＴＴＧＴＴＴＣＣ－３′）为引物合成ＩＧＦ－Ｉ基因cＤＮＡ的第１链,再以Ｐ１和Ｐ２（５′－ＡＴＧＧＣＣＣＴＧＴＧＣＴＴＧＣＴＣＴＣＣＴＴ－３′）为引物扩增到大小约为３６０bp的产和,并将其达隆至pＧＥＭ－Ｔ载体上。经筛选、酶切、我分析,表明该片段为ＩＧＦ－Ｉ基因的cＤＮＡ     

国外蜂业集锦

国外蜂业集锦牛津大学研究蜂胶英国牛津大学最近刚完成一项蜂胶抗炎作用的科研项目。该研究是由牛津大学生物化学系的ＰｈｉｌｌｉｐＣａｌｄｅｒ博士主持的。结果显示：蜂胶的抗炎功效比传统抗炎药物阿斯匹林强。前列腺素（ｐｒｃｏｔａｇｌａｎｄｉｎｓ，缩写ＰＧｓ，分...     

猪sCD2对其天然配体及SRBC培养上清液促淋转效应的影响

以２、４、１６、３２倍稀释猪血清ｓＣＤ２或５、１０、１００、５００倍稀释猪ＰＢＭＣｓＣＤ２，分别替代最优水平组合中的ｓＣＤ２，进行淋转抑制试验。试验结果提示，２、４倍稀释猪血清ｓＣＤ２或５、１０倍稀释猪ＰＢＭＣｓＣＤ２，分别对猪血清ｓＣＤ２配体或ＳＲＢＣｓＣＤ２配体促淋转及协同ＰＨＡ－Ｐ促淋转效应有显著或极显著的掏作用（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。在ＳＲＢＣ培养上清液和猪血清中可能存在一定量的ｓ     

中国广东家蚕微粒子孢子在Antheraea eucalypti细胞系的感染增殖

将中国广东的Ｎｏｓｅｍａ ｂｏｍｂｙｃｉｓ ＣＧＳ,用０２ｍｏｌ／ＬＫＯＨ 处理后,接种感染Ａ．ｅｕｃａｌｙｐｔｉ 细胞系。孢子的发芽率达８７％ ,在Ａ．ｅｕｃａｌｙｐｔｉ 细胞初期感染率为２７ ％ 。发育各阶段具２ 核,可观察到短极丝孢子和二次感染体形成,孢子芽母细胞按二分裂形成２ 个双核的孢子芽,具典型 Ｎｏｓｅｍａ 属特征。Ｎｏｓｅｍａｂｏｍｂｙｃｉｓ ＣＧＳ 生物学特性、血清学类型与日本Ｎｏｓｅｍａ ｂｏｍｂｙｃｉｓ ＮＩＳ００１ 大致相同,但孢子大小、裂殖体的形态、在Ａ．ｅｕｃａｌｙｐｔｉ 细胞寄生的细胞感染率、每个细胞的产孢数,２ 种微孢子虫却有差异。     

世界兽医寄生虫学促进协会（WAAVP）对驱蠕虫药抗药性的检测方法

世界兽医寄生虫学促进协会（ＷＡＡＶＰ）对驱蠕虫药抗药性的检测方法Ｇ．Ｃ．Ｃｏｌｅｓ等ＷＡＡＶＰ已制订了评价反刍动物、猪和马等驱虫药的准则，目的在于使新药评价标准化和简易代。驱虫药的使用使某些线虫对广泛使用的一种或多种主要驱蠕虫药产生了抗药性。这些药物...     

猪原始生殖嵴（PGCs）细胞分离、建系培养

从五指山近交系 (ＷＺＳＰ)培育群中 ,先后选用自然或同期发情 1 1头 5 8月龄青年母猪 ,分别于授精后 2 5～ 2 9ｄ采集胎儿 75个 ,进行原始生殖嵴 (ＰＧＣｓ)细胞分离、培养等建系技术研究。培养液为ＤＭＥＭ Ｆ1 2 ( 1∶1 ) ,并含 1 5 %胎牛血清、0 1ｍｍｏｌ/Ｌ硫基乙醇、40ｎｇ/ｍｌｈＳＣＦ、2 0ｎｇ/ｍｌｈＬＩＦ、2 0ｍｍｏｌ/Ｌ谷胱甘肽 ,另添加或不添加 2 0ｎｇ/ｍｌｂＦＧＦ作为对比试验。用ＳＴＯ细胞作饲养层 ,在 37 5℃、5 0 %ＣＯ2和湿润的气相中进行培养。分别冷冻保存胚胎生殖嵴细胞 (ＥＧ)细胞系 1 1个 ,其中 2个ＥＧ…