2013~2017年江西省猪圆环病毒2型分子流行病学调查

为掌握江西地区猪圆环病毒2型（PCV2）的分子流行病学及其遗传变异情况,本研究运用实验室已建立的PCR方法对2013~2017年采集自江西省南昌市、宜春市、新余市、赣州市、吉安市、九江市、上饶市、抚州市、景德镇市、鹰潭市等10个地区的1 082份疑似PCV2感染猪病料组织进行病原学检测,并通过PCR扩增、克隆和基因测序对PCV2的全基因组序列进行分析。研究表明,1 082份病料中有610份为PCV2阳性,总阳性率为56.4%,其中2013~2017年阳性率分别为52.7%、48.8%、58.5%、71.0%和67.4%。共获得89株PCV2全基因组序列,其中有83株为PCV2b基因型,其中53株归类于PCV2b-1C基因亚群,30株归为PCV2b-1A/1B基因亚群;6株为PCV2a型。测序毒株与参考毒株ORF2基因核苷酸、氨基酸序列同源性分别为88.9%~100.0%和86.0%~100.0%;氨基酸序列分析表明,Cap蛋白存在20个氨基酸突变位点。本研究表明,江西地区猪群中PCV2的主导基因型为PCV2b,其中又以PCV2b-1C基因亚群占据主导地位,同时也存在少量PCV2a基因型。     

2015-2018年豫南地区猪圆环病毒2型分子流行病学调查

为了解豫南地区猪圆环病毒2型(PCV2)的流行情况及毒株的分子变异特征,采用PCR技术,对2015年—2018年豫南地区157份疑似PCV2感染的组织样品进行PCR检测,并对部分PCV2阳性样品进行了全基因组克隆测序和序列分析.结果显示,43份为PCV2阳性,阳性率为27.39％,对部分阳性样品进行克隆测序获得了13株...     

湖南省猪圆环病毒2型流行病学调查

为进一步摸清湖南省猪群中猪圆环病毒2型（PCV2）的感染情况和危害程度,控制该病在湖南省的流行,应用ELISA方法对湖南省8个地区的526份血样进行PCV2抗体检测,结果抗体阳性率为57.41%。其中母猪抗体阳性率为72.4%,公猪抗体阳性率为51.92%,育肥猪抗体阳性率为61.46%,仔猪抗体阳性率为47.34%。可见,PCV2在湖南省猪群已经普遍存在,应引起注意。     

猪圆环病毒2型分子流行病学及疫苗研究进展

猪圆环病毒2型(PCV2)在世界范围内广泛分布,主要以PCV2a和PCV2b两种基因型为主,PCV2b亚型为当前流行基因型。现有商品化疫苗主要针对PCV2a型病毒,也可对PCV2b型病毒产生部分交叉保护,但不能显著控制PCV2b型病毒在猪群中的传播。除此之外,由于已有的商品化疫苗以传统疫苗为主,存在种毒增殖难、疫苗生产周期长等缺点。因此,研发PCV2b新型疫苗可能成为未来PCV2疫苗研制的主要方向。对PCV2的分子流行病学及疫苗研究现状进行了综述,以期为PCV2疫苗的研究提供参考。     

2019年-2020年北京市部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学调查分析

为了解北京市种猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)的分子流行病学及遗传变异情况,采用荧光PCR方法对2019年-2020年采集自北京市4个区的种猪场7030份抗凝血进行了PCV2病原学检测,并对9份PCV2阳性样本进行了全基因组扩增、克隆与序列测定,应用DNAStar分析软件对所测定的9个毒株与国内外参考毒株的全基因组和O...     

西宁市猪圆环病毒2型感染的流行病学调查

为了解西宁市部分地区猪群中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)的感染状况。应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对采自西宁市3个县6个规模猪场的365份血清样品进行PCV2抗体检测,并运用荧光定量PCR技术同步进行PCV2核酸检测。结果显示:PCV2抗体检测的平均阳性率为71.23%,猪场PCV2抗体阳性率最高达95.83%。荧光定量PCR对样品进行病原检测,阳性率达49.94%,此次调查反映了西宁市部分地区PCV2的感染情况,为西宁市PCV2的防控工作提供理论依据和指导。     

江苏地区猪圆环病毒2型流行病学调查

应用复合PCR方法,对江苏地区的162份可疑病料进行了检测,结果72份病料为PCV2阳性,17份为PCV1阳性,其中7份同时感染PCV1和PCV2。从发病时间看,以9~11月发病最多,阳性率高达54.67%。样品较多的保育猪和育肥猪的阳性率分别是26.03%和68.12%。通过流行病学调查,表明该病已在江苏地区呈流行趋势。同时对18头PCV2阳性猪病料的心、肝、脾、肺、肾、脑、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、扁桃体进行PCV2检测,结果有7头PCV2阳性猪的各个脏器都能检测出PCV2;在这些脏器中,肺、腹股沟淋巴结、扁桃体的检出率都为100%,较其他受检脏器更适合作为PCV2的检测样品。     

肥西县2010年夏季猪圆环病毒2型血清流行病学调查

方法对全县14个县级以上规模猪场、六个乡镇的33个散养户共260份未免猪圆环病毒2型血样用ELI SA试验方法进行感染抗体检测及调查。结果260份猪血清样品,阳性数225份,阳性率86.5%;对合肥华杰畜禽有限公司圆环病毒2型未免场作圆环病毒2型感染血清横断面调查结果:种公猪血清数5、检验数5、阳性数5、阳性率100%;种母猪血清数5、检验数5、续阳性数5、阳性率100%;后备母猪血清数5、检验数5、阳性数5、阳性率100%;产房仔猪血清数5、检验数5、阳性数5、阳性率100%;断奶仔猪血清数5、检验数5、阳性数5、阳性率100%;生长中猪血清数20、检验数20、阳性数18、阳性率90%;育肥猪血清数5、检验数5、阳性数5、阳性率100%。结果表明猪圆环病毒2型已广泛分布全县各乡镇、各类型养殖场(户)、各层次的猪群(只)中,且感染率高、感染面广,呈地方流行趋势。     

猪圆环病毒2型的流行病学调查

自2002年1月份以来，笔者对安徽、江苏、江西、山东、湖北、上海等地17个集约化养猪场，进行了猪圆环病毒2型（PCV-2）感染的流行病学调查。此次调查，我们运用PCR方法，调查范围主要为断奶仔猪多系统衰竭综合症疑似发病猪场及正常猪群不同年龄阶段的猪。结果疑似猪群中，PCV-2检出率为60.6％（43／71），屠宰猪群的阳性率仅为6.7％（1／30），而初生仔猪（2-3日龄）的阳性率亦可达42.9％（15／35）。表明我国猪群中普遍存在PCV-2的感染。     

近两年我国猪圆环病毒Ⅱ型流行病学调查

猪圆环病毒（PCV）发现于1982年,属于圆环病毒科、圆环病毒属,是已知最小的动物病毒之一。根据猪圆环病毒的致病性、抗原性及核苷酸序列,将其分为PCV1和PCV2两个型,其中PCV1无致病性,而PCV2被认为是新生乳猪先天性颤抖的病原,     

江苏部分地区猪圆环病毒2型的分子流行病学检测

根据猪圆环病毒2型（PCV2）基因序列,设计1对特异性PCV2的鉴定引物,利用PCR方法对65份疑似PCV2感染的病料进行检测。PCR检测为阳性的病料经处理后,接种无PCV污染的Dulac细胞进行间接免疫荧光检测。对各分离毒株的全基因组进行PCR扩增、测序和基因型分析。结果表明：共分离鉴定21株PCV2,均属2b基因型,其中有16株为1C群,5株为1A/1B群。研究显示PCV2b 1C群已在江苏成为流行毒株。     

四川部分地区猪流行性腹泻的分子流行病学调查

本研究对四川猪流行性腹泻病毒(PEDV)开展了分子流行病学调查。参照毒株CV777的M基因序列,设计1对特异性引物(预期扩增大小为392bp),建立了快速检测PEDV的RT-PCR技术,对四川9个地区规模化猪场的75份仔猪腹泻病料进行检测与分析。再根据S基因的变异区域设计1对引物(扩增大小为947bp),选择扩增了四川9个地区的代表样品的S基因序列,并进行了进化与变异分析。结果显示,建立了检测PEDV的M基因的RT-PCR技术,并确定了最佳反应条件和反应体系,用该方法检测了四川75份腹泻病料,检出64份PEDV阳性,PEDV阳性检出率为86.67%,结果显示PEDV在四川地区发病季节除冬春季外,近年夏季也呈高发趋势。四川9株PEDV的S基因的核苷酸同源性为95.9%~100%,氨基酸同源性为95.1%~100%,四川毒株与14个国内外参考毒株的核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为84.6%~99.5%和84.2%~99.5%;四川流行毒株的S基因(S蛋白)存在碱基(氨基酸)缺失和插入现象。结果表明,本研究从分子流行病学角度证实了四川部分地区PEDV的流行与变异情况,为指导该地区PEDV科学防控提供了依据。     

Characterization of porcine circovirus type 2 in Taiwan

In an effort to understand the genetic diversity of porcine circovirus type 2 (PCV2) and the prevalence of PCV2 infection in Taiwanese herds, we have sequenced the complete genomes from PCV2-infected specimens and individually measured the antibody titer against PCV2 from pigs reared in Taiwan between the years 2000 and 2002. A total of 623 specimens originating from pigs displaying varied clinical signs were screened with the polymerase chain reaction (PCR). Results showed that 309 pigs (49.6%) tested positive for PCV2. Eight of the positive specimens were used for the amplification of the complete viral genome. Sequence comparison of the complete genomes indicated that the 8 Taiwanese PCV2 isolates shared 95-99% similarity. Phylogenetic analysis of all 40 PCV2 isolates from North America, Europe, Asia and Taiwan revealed that those isolates were grouped together in one large group containing two minor subgroups. The Taiwanese PCV2 isolates were classified into the two minor subgroups. The prevalence of serum antibodies to PCV2 in pigs was investigated, and results showed that approximately 83.5% of the pigs in Taiwan were seropositive. Finishing pigs possess the highest titers of antibodies, while 9-week-old pigs contained the lowest titers for specific antibodies. Our results suggest that PCV2 infections have become common in Taiwanese pig farms.     

猪圆环病毒2型毒株的分离鉴定

猪圆环病毒2型(PCV2)可引起断奶后仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎肾病综合征(PDNS)、繁殖障碍等相关疾病[1],其中以PMWS最为严重.该病主要侵害6～12周龄仔猪,引起渐进性消瘦、呼吸困难、腹泻和黄疸等,给世界养猪业造成了巨大的经济损失.     

猪圆环病毒2型的分离与鉴定

利用PCR方法,从疑似断奶猪多系统衰竭综合征(PMWS)的自然病例的淋巴结和脾脏中扩增出了预期长度的猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type 2,PCV2)的DNA片段,并用限制性内切酶对PCR产物进行了酶切鉴定。将经PCR扩增和酶切鉴定为PCV2阳性的组织样品匀浆液接种到无PCV污染的PK15细胞中传代,经间接免疫荧光检查,在接毒细胞内观察到了特异性免疫荧光;用接毒细胞制备超薄切片,在电镜下观察到了直径大约为17nm的圆形病毒样粒子和大量不同形态的胞浆内包涵体。由此表明分离出的病毒为猪圆环病毒2型。     

Molecular diversity of Brazilian strains of porcine circovirus type 2 (PCV-2)

Porcine circovirus 2 (PCV-2) is associated with a broad range of syndromes. In this study, eight pig tissue samples from two Brazilian states were analyzed using six PCR primer pairs amplifying a 1705-bp fragment of the PCV-2 genome. The NJ distance-based method was used for the phylogenetic analysis with the eight field strains herein, 15 GenBank sequences and using PCV-1 as an out-group. This yielded two major clusters (A and B) for this viral species, with the Brazilian strains segregating with European and Asian sequences. Nucleotide identity was 99.7 to 100% among the sequences. This information can be used in further studies of pathogenesis related to PCV-2 in Brazil.     

猪圆环病毒2型感染的检测与流行病学调查

根据GenBank上发表的PCV2 ORF2和PRRSV ORF7序列设计合成引物,建立分别用于检测PCV2和PRRSV的PCR和RT-PCR方法,并对2003年9月至2005年5月采自189个可疑发病猪场的389份病料进行了PCV2和PRRSV的检测。结果显示,来自33个猪场的35份样品为PCV2阳性,猪场PCV2阳性率为17.1%;PCV2与PRRSV混合感染率为5.1%,PCV2阳性猪场中PRRSV感染率为57.6%。流行病学统计结果表明,安徽省猪场PCV2阳性率最高;安徽省和广西省猪场PCV2和PRRSV的混合感染最严重;春夏季节PCV2阳性率明显高于秋冬;消瘦、被毛粗乱是PCV2感染的主要特征;淋巴结水肿或出血,肾脏肿大、出血或呈灰白色以及脾脏病变是PCV2感染的主要病理变化;仔猪7～8周龄发病率最高。     

Replication and transmission of porcine circovirus type 2 in mice

Little information is known about infection, replication and transmission of porcine circovirus type 2 (PCV2) in species other than swine. Two sets of animal experiments were carried out to investigate the susceptibility of mice to PCV2 and to study their possible role in maintaining and transmitting the virus. In the first experiment 14 mice were inoculated with PCV2 by the intraperitoneal route with 5 x 10(2) TCID50 of the PCV2-ROM strain (Cadar et al., 2007). In a second experiment 24 mice were divided into two groups (A and B); mice in Group A (n = 18) were inoculated orally with 1 x 10(5) TCID50 PCV2-ROM and mice in Group B (n = 6) were left uninoculated until day 12 post inoculation (p.i.), when they were mixed with Group A. The animals were sacrificed at intervals for postmortem investigation and virus genome detection by polymerase chain reaction (PCR). The PCR results indicated that PCV2 could replicate in mice infected intraperitoneally or by the oral route, and that the virus can be transmitted directly from mouse to mouse.     

猪圆环病毒2型SH毒株免疫原性

用D-氨基葡萄糖处理PK-15细胞,将PCV2-SH分离株增殖传代至第50代,测定病毒滴度TCID50均为10-6.25/mL.将第20代和第50代病毒液分别灭活乳化制成灭活疫苗,进行猪体免疫保护试验.结果显示,这2个不同代次的病毒制成的疫苗都能刺激机体产生较高水平的ELISA抗体,攻毒后2个免疫组的猪均没有明显的临床症状,相对日增重相似,同时病理变化和病毒血症程度明显减轻.结果表明,PCV2-SH株具有稳定的免疫原性,并可以提供有效的免疫保护作用.