牛膝多糖对炔雌醚致大鼠生精损伤的保护作用研究

为研究牛膝多糖对炔雌醚(Quinestrol)致雄性大鼠生殖损伤的保护作用,以20只8周龄成年雄性SD大鼠为研究对象。随机分为4组,分别进行炔雌醚与牛膝多糖处理。试验结束后,取睾丸、附睾、精囊腺和前列腺称重,取精子检测品质,测定睾丸抗氧化酶活性并观察睾丸形态与组织结构,检测Tunel表达。结果表明,炔雌醚引起大鼠生殖器官重量减少,形态萎缩,组织结构异常,精子数量和品质下降,抗氧化酶活性降低;Tunel表达增加。而炔雌醚+牛膝多糖处理组睾丸抗氧化酶活性升高,Tunel表达减少,降低精子畸形、提高精子数量和品质,缓解生精小管损伤,提高生殖器官重量,最终改善雄性大鼠生殖功能。与对照组相比,单独牛膝多糖处理组睾丸抗氧化酶活性、组织结构和精子质量均有一定程度提高。综上表明,牛膝多糖有效抑制了炔雌醚对生殖功能的破坏作用,对雄性生殖功能具有改善作用。     

辛基酚对小鼠附睾、精囊腺和前列腺发育及组织结构的影响

为研究辛基酚对成年小鼠附睾、精囊腺和前列腺组织结构的影响,将25只成年雄性昆明小鼠随机分为5组(5只/组),对照组腹腔注射橄榄油,试验组分别腹腔注射含0.1、1、10、100mg/kg剂量辛基酚的橄榄油,连续处理1周。试验结束后,取附睾、精囊腺及前列腺称重,并观察其组织结构的变化。结果显示,辛基酚处理后附睾、精囊腺及前列腺萎缩,重量下降。附睾管、精囊腺及前列腺管上皮细胞形态出现明显的改变,上皮细胞数量均减少并显示明显皱缩,附睾管管腔内少见成熟精子;精囊腺及前列腺官腔内分泌物明显减少。结果表明,辛基酚可诱发成年雄性动物附睾、精囊腺及前列腺发育异常,且造成其组织结构损伤。     

疏肝益阳胶囊对炔雌醚诱导大鼠生精紊乱和氧化应激的缓解作用

笔者拟探讨疏肝益阳胶囊(SGYY)对炔雌醚(QES)诱导大鼠生精紊乱和氧化应激的缓解作用及机制。将20只8周龄雄性SD大鼠随机分为4组,适应饲养1周后,进行药物灌胃处理,对照组:0.1mL生理盐水+0.1mL橄榄油;SGYY组:100 mg·kg-1 SGYY;QES组:0.1 mg·kg-1 QES;QES+SGYY组:0.1 mg·kg-1 QES+100mg·kg-1 SGYY。QES溶于橄榄油;SGYY溶于生理盐水;每天1次,连续2周。处理结束后,取睾丸、附睾、精囊腺和前列腺称重、测量长径与短径,并制备睾丸组织切片,通过HE染色,观察睾丸生精小管组织结构、生精细胞比例的变化;通过免疫组织化学方法检测睾丸生精细胞PCNA表达,Tunel法检测细胞凋亡;分离血浆,检测睾酮含量变化。取睾丸匀浆检测抗氧化酶活性。结果显示,QES处理后大鼠生殖器官的质量显著下降,附睾的精子数量显著减少;生精小管的面积、直径、生精上皮的高度和生精细胞数量均显著减少。而且,生精细胞的PCNA表达和血浆睾酮含量明显下降,Tunel阳性细胞数明显增加。睾丸SOD、GSH-Px和T-AOC活性显著下降,MDA含量显著升高。SGYY增加生殖器官质量、精子数量、睾丸睾酮含量、增殖的生精细胞数量和抗氧化酶活性,降低了MDA含量和Tunel的表达。结果表明,SGYY通过改善抗氧化功能、抑制氧化应激及促进睾酮分泌等途径增加了生精细胞数量并提高睾丸的生精功能。     

缺硒对幼年公猪生殖器官发育及精子发生影响的初步研究

为进一步探索硒在公猪繁殖中的确切作用,本试验观察了11头缺硒的(日粮的硒水平为0.01ppm)及8头补硒(日粮的硒水平为0.26ppm)的幼年公猪的生殖器官。观察到缺硒组睾丸、附睾、尿道球腺、精囊腺及前列腺的重量(克/每公斤体重)分别是:1.94、0.38、0.31、0.22及0.04,补硒组相应的各生殖器官的重量是:1.78、0.44、0.44、0.41及0.05,两组精囊腺重量差异显著。观察到7头缺硒组猪的曲精细管的生殖细胞层内有很多大小不一的空泡。并且,附睾尾的附睾管外径及附睾头和附睾尾的附睾管上皮细胞高度,都是补硒组显著比缺硒组高。缺硒组猪附睾尾精浆中精子密度比补硒组低,活率也较低、头部及尾部畸形率都较高,两组精子的尾部畸形率差异显著。测定了各试验猪睾丸及副性腺的硒含量,缺硒组猪的睾丸、尿道球腺、精囊腺及前列腺的硒含量(鲜样重,ppm)是:0.115、0.015、0.030及0.028,补硒组相应的硒含量为:0.222、0.069、0.114及0.118,两组副性腺的硒含量差异非常显著。     

双酚A对小鼠附睾和性腺肥大细胞数量和分布的影响

将18只8周龄雄性昆明小鼠随机分为3组,适应饲养1周后分别腹腔注射50μL、每千克体重含0(对照组)、10(试验1组)和100 mg(试验2组)双酚A的乙醇,每天1次,连续2周。处理结束,取附睾和性腺制备组织切片,通过改良甲苯胺蓝染色法测定附睾和性腺组织肥大细胞数量与分布的变化。结果:在附睾头被膜,试验2组增加到45.37个/mm2,在附睾头间质,试验1、2组每1 mm2分别增加到36.74、38.16个,显著高于对照组(P<0.05);在附睾尾被膜,试验2组增加到50.24个/mm2,在附睾尾间质,100 mg/kg组每1 mm2增加到43.22个(P<0.01);在精囊腺被膜,试验2组增加到56.25个/mm2,在精囊腺间质,对照组肥大细胞数为43.35个,试验1、2组每1 mm2分别增加到54.43、58.65个(P<0.01);在前列腺被膜,试验组与对照组相比,均无明显变化;在前列腺间质,试验2组每1 mm2增加到66.15个(P<0.01)。结果表明,双酚A暴露影响小鼠附睾和性腺肥大细胞数量和分布,可能对附睾中生精细胞的进一步发育成熟也有影响。     

酿酒葡萄皮渣对单栏饲养方式下公绵羊繁殖性能及睾丸抗氧化性的影响

旨在研究日粮中添加一定量的酿酒葡萄皮渣对绵羊繁殖性能及睾丸抗氧化性能的影响。试验选取30只5月龄,体重(25±1)kg的杜泊×小尾寒羊杂交公羊,采用完全随机设计平均分为5组。1组自由活动,其余4组单栏饲养,建立应激模型。自由活动绵羊饲喂未添加葡萄皮渣日粮,单栏饲养绵羊分别饲喂不同葡萄皮渣添加水平(0%、5%、10%、20%)日粮。试验期80d。试验结束后,屠宰取样,测定睾丸系数并作附睾精子分析,测定睾丸组织抗氧化水平,对睾丸组织中Cu-ZnSOD、CAT、GPx4及Nrf2mRNA和蛋白相对表达量进行研究。结果表明,与自由活动组相比,单栏组绵羊睾丸组织中MDA及ROS水平升高(P0.01),睾丸重量显著降低(P0.05),睾丸系数也表现出下降趋势(P=0.06),附睾精子密度及顶体完整率显著降低(P0.05),精子活动率极显著降低(P0.01),精子畸形率极显著升高(P0.01),表明单栏饲养方式对绵羊造成氧化应激,并在一定程度上影响绵羊繁殖性能。适量添加酿酒葡萄皮渣后,绵羊附睾精子密度和精子活动率均显著升高(P0.05),精子畸形率显著降低(P0.05),睾丸组织MDA含量显著下降(P0.01),SOD、CAT及GSH-Px活性均显著提高(P0.01,P0.05,P0.01);睾丸组织中Cu-ZnSOD mRNA相对表达量显著提高(P0.05),Cu-ZnSOD、CAT、GPx4蛋白相对表达量显著提高(P0.05)。综上表明,酿酒葡萄皮渣可以提高单栏饲养方式下绵羊睾丸组织抗氧化性,进而改善绵羊繁殖性能。     

家畜繁殖讲座——第二讲 家畜的精液

<正> 一、精液的组成 公畜射出的精液由精子和精清两部分组成。精子是由睾丸产生的,进而在附睾内成熟和贮存。射精时,精子经尿生殖道与副性腺的分泌物——精清混合,形成精液排出体外。精清的主要来源是精囊腺、前列腺、尿道球腺和输精管壶腹的分泌物(图1)。     

叶酸对炔雌醚致雄性大鼠生殖损伤的保护作用研究

旨在探讨叶酸对炔雌醚致雄性大鼠生殖损伤的保护作用。将20只8周龄成年雄性SD大鼠适应饲养1周后,随机分为4组。对照组:橄榄油+生理盐水;炔雌醚组:1.0mg·kg-1炔雌醚;炔雌醚+叶酸组:1.0mg·kg-1炔雌醚+1.1mg·kg-1叶酸;叶酸组:1.1mg·kg-1叶酸;灌胃处理,每天一次,连续2周。处理结束后,取生殖器官称重,检测精子质量,测定睾丸抗氧化功能,制作睾丸组织切片,观察睾丸组织结构,通过免疫组织化学染色检测Caspase-3与eNOS表达。结果显示,炔雌醚单独处理组造成大鼠生殖器官萎缩,重量下降,精子发生异常,精子质量下降,抗氧化酶活性下降,睾丸发生氧化应激;与之相反,凋亡效应酶Caspase-3与eNOS表达增加。炔雌醚+叶酸处理组通过减少eNOS表达降低氧化应激,抑制Caspase-3表达,降低精子畸形率、生精小管损伤,最终改善雄性大鼠生殖功能。与对照组相比,单独叶酸处理组睾丸抗氧化酶活性、组织结构和精子质量均有一定程度提高,无显著差异。本研究首次证实叶酸有效地抑制了炔雌醚对雄性大鼠生殖功能的破坏作用。     

PNPLA5基因敲除对大鼠睾丸形态学及精子运动能力的影响

旨在研究PNPLA5基因对雄性大鼠繁殖性能的影响。本研究以PNPLA5敲除型雄性大鼠(KO)为试验组,野生型大鼠(WT)为对照组,分别饲喂普通饲料,并采集大鼠附睾精子及睾丸组织。利用繁殖试验检测配种后雌鼠的妊娠率及平均产仔数,精子运动性能分析检测精子运动能力,Western blot检测精子中线粒体功能相关细胞色素C(cytochrome C,Cytc)与细胞色素C氧化酶亚基IV(cytochrome c oxidase subunit IV,COX IV)的表达水平,HE染色检测睾丸组织形态。结果表明:与野生型雄性大鼠相比,PNPLA5敲除型雄鼠与野生型雌鼠配种后,雌鼠的妊娠率极显著下降(P<0.01);精子的曲线运动速度显著降低(P<0.05)及渐进运动精子的百分率极显著降低(P<0.01);PNPLA5敲除型大鼠精子中细胞色素C表达量下调,细胞色素C氧化酶亚基IV表达量上调,但差异均不显著(P>0.05);PNPLA5基因缺失引起大鼠睾丸组织结构疏松,曲细精管中各阶段生精细胞排列紊乱,上皮细胞脱落至管腔。综上表明,本研究发现PNPLA5基因敲除能够引起雄性大鼠繁殖能力降低,为家畜繁殖研究提供重要的参考依据。     

毒性剂量纳米硒对SD雄性大鼠生殖功能的影响

本试验研究毒性剂量下纳米硒(SeNPs)对SD雄性大鼠睾丸损伤、精子活力及其运动参数的影响。选取6周龄SD大鼠40只分4组,每天分别灌胃剂量为0、2.0、4.0、8.0mg/kg体质量的SeNPs 1次,连续2周,试验结束取睾丸称重,做组织切片进行光镜和电镜观察,并取附睾中的精液上机分析。结果显示,8.0mg/kg体质量剂量的SeNPs使睾丸出现严重萎缩,4.0、8.0mg/kg体质量剂量组的睾丸组织都出现了不同程度的病理损伤,8.0 mg/kg体质量剂量组的睾丸细胞染色质浓染边聚,有细胞凋亡现象。另外4.0、8.0 mg/kg体质量剂量的SeNPs会显著降低精子浓度、精子活力以及精子的运动参数,2.0mg/kg体质量剂量的SeNPs对于精子浓度和精子活力无显著影响,却提高了精子的部分运动参数。本研究提示高于4.0mg/kg体质量的SeNPs对雄性SD大鼠的生殖功能有损害。