动物源耐甲氧西林金色葡萄球菌的耐药性分析

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)是一种人类共生菌,并引起全球感染。SA感染的高发率主要是由细菌很容易对抗生素产生耐药性导致的,而耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)产生特别是多药耐药SA的出现使得动物临床治疗变得异常困难。本文针对MRSA的耐药机制和其多药耐药机制以及耐药基因的传播作简要概述,旨在为兽医临床合理指导抗生素用药和控制细菌耐药性的发展提供理论依据。     

牛奶源金黄色葡萄球菌耐药基因分布特征的研究

研究旨在了解江苏省牛奶源金黄色葡萄球菌分离株中抗生素耐药基因的分布特征。经耐热核酸酶基因(nuc)和甲氧西林耐药决定子A基因(mec A)的PCR检测,78个牛奶源菌株中18株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),60株为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)。采用PCR方法检测了所有菌株中氨基糖苷类耐药基因aac(6')/aph(2″)、aph(3')-Ⅲ和ant(4',4″),大环内酯类耐药基因erm A、erm C和msr A,四环素类耐药基因tet M和tet K,上述8种耐药基因的检出率分别为32.1%、20.5%、41.0%、16.7%、44.9%、12.8%、29.5%和28.2%。除erm C在MSSA菌株中的检出率高于MRSA菌株之外,其余7种耐药基因的检出率均为MRSA菌株显著高于MSSA菌株。MRSA菌株携带2种及以上耐药基因的百分率较MSSA菌株高,MRSA菌株多重耐药情况更加普遍。     

湖南省奶牛源金黄色葡萄球菌分离鉴定与耐药性分析

为了掌握湖南省内奶牛源金黄色葡萄球菌的耐药情况,指导临床合理用药,抽取牛乳样品,通过对细菌的分离培养和纯化,采用基质辅助激光电离飞行时间质谱仪和全自动生化鉴定仪进行鉴定,并对分离菌株进行18种抗菌药物耐药性检测,结合耐药表型和mecA基因检测判定MRSA菌株。结果显示,2020-2021年从湖南地区257份牛乳样品中分离出金黄色葡萄球菌39株,89.74%的临床分离菌株表现为不同程度耐药,其中对青霉素耐药最为严重,耐药率达82.05%;对红霉素、克林霉素、替米考星、庆大霉素、头孢西丁耐药率在20%～35%之间;对多西环素及万古霉素绝对敏感,耐药率为0。38.46%分离菌株表现为多重耐药,以7重耐药最多。鉴定出19株MRSA,其中包含15株OS-MRSA和4株OR-MRSA。本研究可为湖南省内奶牛企业制定合理用药措施提供依据。     

牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测

本研究旨在了解甘肃地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的耐药性和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的感染情况,为奶牛乳房炎的防制提供理论依据。采用KB纸片扩散法,检测17株金黄色葡萄球菌对8种不同抗菌药物的敏感性;再用琼脂稀释法检测了苯唑西林、万古霉素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MICs);头孢西丁纸片扩散法和PCR扩增特异性mecA耐药基因对所有受试菌株进行全面的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测。结果表明,菌株对青霉素、磺胺异恶唑具有较强抗性,而对环丙沙星、头孢唑啉、万古霉素和苯唑西林全敏感;头孢西丁纸片扩散法未能检测出表型为MRSA的阳性菌株,而PCR方法却检测出8株mecA基因阳性菌株,且这些菌株的苯唑西林MIC均小于2 μg/mL。菌株的耐药情况较严重,对甲氧西林敏感而携带mecA基因的菌株高频存在于被调查地区的奶牛场中。     

宁夏地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌耐药性分析

为了解宁夏地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的耐药情况,采用药敏纸片扩散法,测定了50株奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌对常用的17种抗茵药物的耐药性.同时采用产色头孢菌素法进行β-内酰胺酶的检测,并采用苯唑西林纸片法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检测.结果表明,所有菌株除了对利福平、万古霉素100％敏感以外,对其他15...     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离鉴定及耐药基因检测

为了解动物源性金黄色葡萄球菌对市售常见的各种兽用抗生素药物的耐药情况,掌握并分析其耐药性,指导临床合理使用抗菌药物。本研究通过常规细菌分离鉴定患病动物炎性分泌物,对分离菌株进行生化试验、耐药性试验、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant S.aureus,MRSA)鉴定和耐药基因鉴定,获得4株耐药金黄色葡萄球菌,2株为MRSA,2株为甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(Methicillinsusceptible S.aureus,MSSA);4株金黄色葡萄球菌均检测出tetA、aac(6')/aph(2')、sul1耐药基因,其中2株MRSA检测出mecA。MRSA与MSSA均表现出了多重耐药现象,其中MRSA比MSSA的耐药现象更为广泛。因此,要更加关注MRSA的流行情况,制定规范的用药行为,严控抗生素药物的滥用。     

牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行特征和耐药性研究进展

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是WHO公布的重要的人医临床病原菌,同时也是重要的人畜共患病原菌,对其感染的治疗是临床上难题之一。目前,世界范围内牛源MRSA呈现多重耐药现象,部分相同分子分型的MRSA克隆株已在牛和猪等不同家畜中检出,提示存在通过携带者向社区人群和医院患者传播的风险。目前的报道显示我国牛源MRSA分离株已表现出多重耐药性和分子多样性,应引起我国公共卫生领域的重视。本文综述了欧美和亚洲国家牛源MRSA耐药性和分子流行特征相关的研究成果,以期为评估我国MRSA的流行传播风险提供参考依据。     

耐甲氧西林葡萄球菌的检测方法

本文对耐甲氧西林葡萄球菌的检测方法进行介绍,以期选择快速准确的检测方法,对防控该病起到一定作用。     

南京地区4株猪源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌多位点序列分型

应用多位点序列分型技术,研究4株猪源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)临床株的来源和遗传背景,了解其耐药状况、分子分型及遗传学特点。受检菌株31株,用PCR扩增mecA基因鉴定猪源MRSA;用K-B法对4株猪源MRSA进行抗生素耐药性检测;应用多位点测序分型(Multilocus Sequencing Typing,MLST)方法进行ST分型比较。结果:PCR法检出率为12.9%(4/31),检出的4株猪源MRSA均表现为多重耐药,同时对氨苄西林、头孢噻肟、庆大霉素、氯霉素、克林霉素和环丙沙星完全耐药。MLST分型显示4株猪源MRSA以ST9型为主(3/4),等位基因谱为3-3-1-1-1-1-10,1株等位基因谱为10-35-129-2-7-50,属新ST型。研究表明4株猪源MRSA呈多重耐药模式,这初步反映了抗生素在临床上广泛且不合理的应用。MLST作为一种可靠的分型方法为猪源MRSA的分型研究提供信息,对研究猪源MRSA的遗传背景和防治具有重要意义。     

广东省宠物源伪中间型葡萄球菌的耐药性调查研究

为调查广东省宠物源伪中间型葡萄球菌(Staphylococcus pseudintermedius)的携带和耐药情况,从小动物临床采集皮肤、耳部和鼻腔等部位的样品,分离鉴定伪中间型葡萄球菌,并采用琼脂稀释法和纸片扩散法对伪中间型葡萄球菌进行抗菌药物敏感性检测,采用PCR方法检测mecA基因。结果表明,从898个样品中共分离到144株伪中间型葡萄球菌,检出率为16.0%,皮肤、耳部和鼻腔的伪中间型葡萄球菌检出率分别为20%(64/319)、17.8%(64/359)和7.5%(3/40)。抗菌药物敏感性检测和mecA基因检测结果显示有89株(61.8%)为耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌(MRSP)。伪中间型葡萄球菌对氨苄西林、红霉素、阿奇霉素、克林霉素和四环素的耐药率均在80%以上,对利福平和阿米卡星的耐药率低于8%,对万古霉素、利奈唑胺、喹奴普汀/达福普汀和替考拉宁均敏感。大部分(>69%)MRSP对红霉素、克林霉素、泰乐菌素、阿奇霉素、复方新诺明、四环素、环丙沙星和恩诺沙星等抗菌药物表现耐药。本研究结果表明宠物源伪中间型葡萄球菌的耐药情况严重且MRSP的检出率高,应高度重视宠物源细菌耐药问题。     

家禽及其制品中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株的分子生物学和耐药性研究

近期,德国研究者开展了2项研究以期深入了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的流行情况及耐药特性.22个源自患病火鸡和鸡MRSA菌株以及32个源自火鸡和鸡肉/肉制品的MRSA菌株研究显示,分离菌株中,CC398为优势菌株,同时CC5和CC9的MRSA菌株也被检出;除了2个MRSA菌株外,其他所有菌株均具有多重耐药性,且至少对3类抗菌剂具有耐药性.采用DNA微阵列分析和分子分型来获得MRSA的分子生物学特征有助于追溯其在家禽及食物链中的传播.     

动物源性耐甲氧西林葡萄球菌耐药表型及基因型鉴定

通过耐药表型及基因型检测对临床分离的41株葡萄球菌进行了鉴定，鉴定出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）16株，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)4株。耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）阳性率达到48.8%，这提示兽医临床必须提高对MRS的重视，并为临床鉴定MRS提供了可借鉴的方法。     

动物源性金黄色葡萄球菌耐药性的检测

用K—B法对52株动物源性金黄色葡萄球菌进行了17种抗生素耐药性检测。结果，试验菌对16种抗生素的耐药率达19．2％～84．6％，耐药率最高的为氨苄青霉素，最低的为头孢曲松；其中对12种抗生素的耐药率在50．0％以上；在52株金黄色葡萄球菌中最少的耐2种抗生素，最多的耐15种抗生素，表明临床分离的金黄色葡萄球菌株均表现高水平耐药和多重耐药；受试菌均对万古霉素敏感。     

宁夏地区1株牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及毒力因子表达分析

家畜相关耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(livestock-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus,LA-MRSA)在畜牧业和动物性食品中多次被检测到,可以向人群传播,造成严重的公共卫生问题,因此研究其耐药性、毒力因子的表达与调控对LA-MRSA的防治及后续药物的开发具有重要意义。本研究以宁夏规模化奶牛养殖场乳腺炎患牛牛乳中分离出的9株LA-MRSA为试验对象,通过抗菌药物敏感性、生物被膜形成能力检测和细菌体外侵袭力试验筛选出具有高耐药、高毒力特征的LA-MRSA菌株,结合本实验室前期LA-MRSA分子分型结果,鉴定出1株具有高毒力特征的代表菌株,然后将代表菌株和标准菌株ATCC 33591进行转录组测序(RNA-seq)分析,最后通过RT-qPCR验证RNA-seq结果准确性。高毒力LA-MRSA鉴定结果显示,9株LA-MRSA中编号为D10的菌株对13种抗菌药物耐药,且生物被膜形成能力、体外侵袭力较强,具有高耐药、高毒力特征。RNA-seq分析结果显示,与标准菌株相比,D10株存在大量差异表达基因(differenti...     

兔源强毒力金黄色葡萄球菌荧光定量PCR检测方法的建立

为了建立一种快速、特异性强且敏感性高的兔源强毒力金黄色葡萄球菌检测方法,本试验根据金黄色葡萄球菌pvl基因的保守序列设计了特异性的引物和探针,通过反应条件的优化,建立了检测兔源强毒力金黄色葡萄球菌的荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法耗时短,仅需约50 min就能完成检测,较已报道的双重PCR方法和环介导等温扩增方法均省时;该方法特异性强,对兔源低毒力金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、肺炎克雷伯菌、魏氏梭菌、大肠杆菌和阴性对照(灭菌ddH₂O)均无交叉反应;该方法敏感性高,最低检测限为10拷贝/μL,分别是已报道的双重PCR方法和环介导等温扩增方法的1 000倍和10倍。此外,该方法重复性好,批内和批间重复性试验的变异系数均小于2%。应用该方法检测126份已知结果的临床样品,检测结果与已知结果、已报道的双重PCR方法和环介导等温扩增方法的检测结果完全一致。该方法的建立不仅丰富了兔源强毒力金黄色葡萄球菌的检测方法,也为该菌的快速检测提供了更有力的技术支持。     

兔源强毒力金黄色葡萄球菌环介导等温扩增快速检测方法的建立

为建立检测兔源强毒力金黄色葡萄球菌的快速检测方法,本实验根据GenBank中登录的金黄色葡萄球菌pvl基因保守序列设计了 2对引物,经反应条件优化,建立了检测兔源强毒力金黄色葡萄球菌的环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法.结果显示,该LAMP快速检测方法最优反应条件为:外引物和内引物的浓度比为1:7,反应温度为65℃...     

不同中药提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用和逆转机制

采用(K-B)药敏纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的药物敏感性,并用二倍稀释法分别测定10种中药提取物对MRSA的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),选取抑菌效果最好的中药提取物(黄芩)通过棋盘法测定其与5种常用抗生素的联合抑菌效果。观察黄芩不同亚抑菌浓度作用下对MRSA耐药性的逆转效果,并通过荧光实时定量PCR法检测耐药基因mec A在mRNA表达水平上的变化。结果表明,MRSA具有多重耐药性,10种中药提取物里黄芩的抑菌和杀菌效果最为显著,MIC和MBC均为156 mg/L,但其与5种抗生素没有显著的联合抗菌作用,在黄芩亚抑菌浓度130 mg/L作用20 h后,MRSA主要耐药基因mec A的表达量下调并恢复了对药物的相对敏感性。     

奶牛源MRSA菌株的分离鉴定和耐药性分析

本研究对部分奶牛场采集的502份隐性乳房炎试验（california mastitis test,CMT）检测呈阳性的奶样进行细菌分离、鉴定,运用多重PCR方法筛选出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）,并对分离出的MRSA用纸片扩散法进行药敏试验,检测其对19种抗菌药物的敏感性。结果显示,分离到细菌的奶样有452份,其中检出葡萄球菌338株,MRSA 89株;MRSA分离株主要对万古霉素、磷霉素、氯霉素和克拉霉素敏感,对青霉素、多黏菌素、大观霉素及头孢他啶具有较强的耐药性。本研究为指导奶牛乳房炎用药、MRSA菌株的快速鉴定及制定MRSA感染的防控措施提供参考。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药机制分析

葡萄球菌病是当前威胁畜牧业发展最常见的疾病之一,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的产生,使葡萄球菌病更难于治疗和控制。因此,深入了解MRSA的耐药机制,寻找新的药物作用靶位,是有效控制葡萄球菌病发展与蔓延的重要措施。     

动物源性耐甲氧西林葡萄球菌mecA的PCR检测及耐药性分析

耐甲氧西林葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus,MRS)包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-resistant coagulase-negative Staphylococci,MRCNS).