茄子小孢子培养技术研究

[目的]开展茄子小孢子培养技术研究,为茄子单倍体育种在生产实践上应用提供技术支持.[方法]以6个不同基因型茄子栽培品种为试材进行小孢子培养,探究基因型、花药预处理、花药壁组织及供体植株生长环境对茄子小孢子培养的影响.[结果]6个茄子栽培品种均能诱导出愈伤组织,但诱导频率差异明显,其中,37号和128号品种的小孢子愈伤组织诱导频率极显著高于其他品种(P< 0.01,下同);6个茄子品种中仅37号品种能形成再生植株,其中5株为单倍体植株,8株为双单倍体植株.茄子小孢子培养必需进行高温(36℃)热激处理,最佳处理时间6d;低温(4℃)预处理不能启动茄子小孢子脱分化形成愈伤组织,但能极大促进愈伤组织形成;花药预处理以低温(4℃)处理6d+高温(36℃)处理6d的效果最佳,愈伤组织的诱导频率达60.0个/花药;花药壁组织与小孢子共培养能促进愈伤组织形成,最佳处理时间8~12 d.供体植株在露地环境条件下小孢子愈伤组织诱导频率极显著高于温室环境条件.[结论]对露地环境条件下种植的37号和128号茄子的花药进行低温(4℃)处理6d+高温(36℃)处理6d,可获得最佳的小孢子愈伤组织诱导效果.     

基于小孢子培养的芥蓝单倍体育种技术研究

【目的】为提高芥蓝育种效率,对基于小孢子培养的芥蓝单倍体育种技术流程进行研究。【方法】利用离心管进行机械破碎替代手工研磨提取芥蓝游离小孢子,采用秋水仙素处理芥蓝再生苗,并对其他技术环节进行优化。【结果】机械破碎提取芥蓝小孢子的胚状体诱导率(11.96%)与手工研磨的胚状体诱导率(10.80%)无显著差异,可用于批量处理样品、提高芥蓝小孢子提取效率;两种方法采集芥蓝小孢子进行培养,共诱导产生胚状体255个,经继代、生根培养获得112个芥蓝再生株系;再生植株大多为单倍体,秋水仙素处理使其存活率和染色体加倍频率提高;再生株系单株自交获得芥蓝DH系41个,其中秋水仙素处理的DH成系率达56.45%,是未处理的4.07倍。【结论】建立了一套较完整有效的芥蓝单倍体育种技术流程,可在芥蓝育种实践中有推广应用,提高芥蓝育种效率。     

茄子游离小孢子培养获得愈伤组织的研究

应用游离小孢子培养技术,以茄子杂交种为试材,进行游离小孢子培养,旨在获得茄子愈伤组织。结果表明:单核靠边期小孢子是诱导愈伤组织发生的最佳时期;不同基因型之间小孢子愈伤组织诱导率差异显著;对花药进行变温预处理,其小孢子膨大率较对照高出6倍多;小孢子培养的适宜培养基为KM附加0.2 mg/L 2,4-D、0.5 mg/L ZT、1.0 mg/L NAA和7.5%的葡萄糖。     

春性甘蓝型油菜小孢子培养技术初探

通过小孢子培养，获得了了青油３３１的单位体植株。对甘蓝型油菜小孢子培养的初步研究表明，不同材料间小孢子的产胚量存在显著差异，春性材料的产胚量高于冬性材料。     

影响大白菜游离小孢子培养若干因素的研究

影响大白菜游离小孢子培养因素主要有遗传基因、环境条件、培养温度和培养基等因素,研究结果表明:遗传基因对小孢子培养起着决定性的作用;供体植株的营养水平对小孢子胚胎发生有一定的影响;气温稳定在12℃～28℃时,所取的花蕾小孢子胚胎发生正常;33℃±2℃高温预培养能促进胚状体诱导;80次/min低频振荡极大提高出胚数;培养基中13%蔗糖处理、ph值在5.5～6.3对胚状体诱导和发育有促进作用,加入谷氨酰胺,L-丝氨酸,谷胱甘肽对不同基因型胚状体诱导有明显的促进作用。     

基因型和活性炭对大白菜小孢子胚胎发生的影响

对7个不同来源不同类型的大白菜基因型进行了小孢子培养,筛选出4个较易出胚的基因型,它们是:HY、KF、BL和SZ;在NLN-13培养基中,产胚量最高的HY是产胚量最低的SZ的12.32倍,而ZX、QX和CQ 3个品种没有诱导出胚。在培养基中添加0.1mg.mL-1活性炭对大多数品种的大白菜小孢子培养的胚胎发生具有较明显的作用,能增加胚状体产量。其中活性炭对BL效果最明显,产胚量平均每蕾为14.58个,对照为0.67个,处理是对照的21.76倍;KF效果其次,产胚量平均每蕾为17.08个,对照为1.25个,处理是对照的13.66倍;HY产胚量平均每蕾为3.42个,对照为3.17个,处理仅是对照的1.08倍,效果不明显。     

植物游离小孢子培养的研究进展

游离小孢子培养是近年来育种上研究的热点,文章从6个方面阐述了植物游离小孢子培养的优势,综述了影响游离小孢子胚胎发生的重要因素,内因包括材料的基因型、花粉的发育时期,外因包括材料的前处理、培养方式、小孢子的培养条件和供试材料生长的外界环境等。提出了小孢子培养存在和需要解决的问题,从理论和实际意义上说明游离小孢子培养的发展前景。     

甘蓝型油菜小孢子秋水仙碱处理提高双单倍体频率研究

 以 2个对小孢子培养反应较好的甘蓝型冬油菜F1杂种为供体材料 ,研究了 3种不同时期秋水仙碱处理对小孢子胚胎发生、成苗与加倍率的影响。对分离小孢子直接进行 15h以及 0、5 0、5 0 0和 10 0 0mg/L秋水仙碱处理 ,在液体NLN培养基中胚胎发生好 ,培养 5周后获得大量正常胚体。将这些发育优异的胚体移入固体MS培养基、经过 10d低温 (2℃ )诱发 ,常温 (2 4℃ )下培养能很好地萌发 ,并迅速长成完全正常的再生植株。 5 0 0mg/L秋水仙碱处理 15h获得了 83%～ 92 %的高染色体加倍率 ,并且嵌合体和多倍体数很少。对正常胚体在移入固体培养基前用 0、2 5、5 0、2 5 0、5 0 0和 10 0 0mg/L秋水仙碱 15和 30h进行染色体加倍处理 ,或对再生植株在幼苗期进行 12 5mg/L秋水仙碱 2 0h浸根处理 ,其加倍效果均不及采用分离小孢子直接进行秋水仙碱处理 ,且其嵌合体的发生频率也较高 ;后者还产生大量待特殊处置的秋水仙碱废液 ,并推迟再生株的生育进程。因此 ,利用分离小孢子直接进行秋水仙碱加倍染色体更为安全、快速和有效     

低温预处理和基因型对甘蓝型油菜小孢子胚胎发生的影响

以生长在大田自然环境下的16个甘蓝型油菜品种(系)和杂交组合为材料进行游离小孢子培养,探讨材料的低温预处理方式、处理时间、花序长度及其基因型对油菜小孢子胚胎发生的影响。结果表明,冷冻处理的油菜花序,其小孢子无胚胎发生能力;30～40cm长的花序冷藏处理10d,小孢子仍有一定的胚胎发生能力;花序长度在0～40cm时,用于处理的花序越长,则能进行小孢子胚胎发生的花序的有效处理时间越长;但随着花序处理时间的延长,小孢子产胚率有下降的趋势。此外,材料的基因型对小孢子产胚率有重要影响。     

不同基因型亚麻花粉小孢子离体培养研究

[目的]研究不同基因型亚麻花粉小孢子离体培养,建立亚麻花粉小孢子离体培养再生体系,以期加快亚麻单倍体育种进程。[方法]以5种不同基因型亚麻的花粉小孢子为外植体,研究不同基因型亚麻愈伤组织诱导率、绿苗的分化率的差异,筛选适宜亚麻花粉小孢子培养基。[结果]不同基因型的亚麻花粉愈伤组织的诱导率、绿苗分化率差异显著,9601和9605愈伤组织的诱导率较高,分别为30.8%和28.6%;9601组合的花粉绿苗分化频率最高为14.5%。其次为9718和9712,分化率分别为11.5%和8.0%;筛选出亚麻花粉小孢子适宜的愈伤组织诱导培养基HF1、绿苗分化培养基HF2。[结论]初步建立了亚麻花粉小孢子离体培养再生体系,为亚麻单倍体育种、突变体筛选、转基因等研究奠定了基础。     

基因型和处理温度对芥菜型油菜游离小孢子培养的影响

通过游离小孢子培养快速获得芥菜型油菜纯合系,在芥菜型油菜杂交育种和遗传研究中有着非常重要的意义.该文以6个不同遗传基础的芥菜型油菜为研究材料,在NLN-13培养基上进行游离小孢子培养,研究成胚过程中材料的基因型、低温预处理、高温热击对其成胚效率的影响.结果表明:基因型是影响芥菜型油菜成胚的关键因子,不同基因型材料之间胚状体产量差异较大,在不考虑其他因素的情况下,每皿产胚量变化在0～48.5个之间;低温预处理24 h和高温热激时间长短因品种不同存在差异.     

用单倍体诱导系诱导糯玉米单倍体

采用从Stock6单倍体诱导系中选育出的3个诱导系对4个糯玉米杂交种进行诱导,通过对诱导子粒形态和细胞学鉴定,探索其在糯玉米单倍体育种应用的可能性。结果得出:3个单倍体诱导系的诱导率差异极显著,以Stock6-1诱导率最高为7.27%;4个糯玉米杂交种被诱导率差异极显著,以糯玉米杂交种199被诱导率最高为6.86%;对紫顶白胚的拟单倍体种子进行细胞学鉴定,染色体条数为10条的种子占57%,染色体条数为20条的种子占43%。研究表明,糯玉米单倍体育种能提高糯玉米育种效率,应加强这方面的研究并尽快应用于实践。     

番茄游离小孢子培养及胚状体诱导研究

[目的]探讨基因型、花粉发育时期对诱导胚状体的影响和胚状体形成过程中花粉粒的变化特性。[方法]以市场购买的"贼不偷""大黄888""中蔬四号""黄香蕉""顶心红""粉宝莲""宝石"7个番茄品种的花粉粒为材料,以B5为基本培养基,液体培养诱导胚状体。[结果]基因型是影响诱导胚状体的关键因素。供试的7个番茄品种中只有"贼不偷"品种的花粉粒对花粉培养有响应,其余品种无响应;花粉发育时期又是影响诱导胚状体的关键因素。"贼不偷"品种不同发育时期花粉粒对花粉培养的响应有差异,最佳时期是单核中期及单核靠边期;诱导出来的胚状体呈现带有胚柄、多细胞、球形或心形。[结论]试验结果为建立番茄游离小孢子培养体系及其相关机理研究提供了理论依据。     

油菜小孢子培养以有效产生纯合两倍体植株

SincehaploidembryoidswerefirstobtainedfrommicrosporecultureofBrassicanapustherehasbeenarapidprogressintheapplicationofthistechniqueingeneticstudiesandbreedingutilizationofrapeseed.Therelativesimplicityofthecultureprotocolandhigh-frequencyrecoveryofdoubledhap-loidplantsmakesmicrosporecultureapotentiallypowerfultechniqueforvarietaldevelopment.Never-theless,therearestillsomeobstaclesintheefficientuseofthistechniquesuchasrecalcitrantgeno-types,secondaryembryogenesisofembryoids,andthelackofefficien…     

不同处理对苜蓿小孢子离体培养存活率的影响

[目的]探讨不同处理对苜蓿小孢子培养的影响,为苜蓿游离小孢子培养体系的建立提供依据,也为今后苜蓿单倍体育种奠定基础.[方法]以杂花苜蓿新牧1号花蕾为材料进行小孢子离体培养,探讨预处理、培养基类型及接种密度对苜蓿小孢子离体培养前期存活率的影响.[结果]在预处理实验中,4℃低温处理24h存活率最高,达23.5;;33℃高温处理48 h后转入25℃暗培养,小孢子存活率最高,达26.58;;按1.5 ×105个/mL的密度接种,小孢子存活率最高,达28.2;;小孢子在B5液体培养基中培养优于其它培养基,存活率达30.1;.[结论]材料在4℃低温下处理24h,将游离小孢子按1.5 × 105个/mL的接种密度接种于B5液体培养基中,置于33℃高温下处理48 h后转入25℃恒温培养箱中暗培养,25 d后胚细胞诱导率最高,达30.1;.     

不同基因型对苎麻愈伤组织诱导及分化的影响

研究了11种基因型苎麻(Boehmeria nivea L.)的愈伤组织诱导效应及其分化间存在的差异.结果表明黄壳早和湘苎2号、华苎3号、巴西麻6号基因型较易脱分化,华苎1号较难脱分化,多数基因型在6-BA 0.5～2.5 mg/L NAA 0.5 mg/L 和6-BA 0.5～2.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L 的组合中有较高的出愈率,此两种组合适合于苎麻叶愈伤组织诱导.     

6种枸杞植物花药培养单倍体的诱导

[目的]获得6种枸杞花粉植物。[方法]以6种枸杞花药为材料,在含不同激素的9种MS培养基上分别进行光照和黑暗离体培养。[结果]6种材料都诱导出了愈伤组织,最高愈伤组织诱导率可达20％,愈伤组织转入培养基（MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L）分化出大量绿色小芽,转入生根培养基（MS＋NAA0．1mg／L）中,20d后得到完整植株。[结论]材料不同,在同一培养基上的诱导率不同,在光照培养下愈伤组织诱导率比暗培养条件下的诱导率高。     

玉米单倍体诱导系诱导率研究

利用3个玉米单倍体诱导系与4个F1代杂交材料进行杂交诱导,对3个诱导系的诱导率进行比较,结果表明不同诱导系的诱导率存在差异,H2的诱导率最高,平均诱导率6.41%,最高诱导率达9.52%。H1的诱导率最低,平均诱导率为5.07%,最低诱导率只有3.48%;分析同一诱导系对不同材料的诱导率,结果表明母本基因型对单倍体诱导效率的高低有很大影响;分析不同诱导系对同一材料的诱导率,结果表明诱导率的高低与诱导系的基因型有关。为单倍体的大批量获得及其育种效率的提高提供参考。     

不同因素对茄子花药愈伤组织诱导的影响

为了提高花药愈伤组织的诱导率,进一步优化培养条件,以西安绿茄为材料,研究了不同激素、碳源、氨基酸及AgNO3对花药愈伤组织诱导的影响.结果表明:1) 单一激素愈伤组织诱导率几乎均为零,生长素和细胞分裂素组合的总愈伤率(愈伤率1)均大于18.0%,花药中部愈伤率(愈伤率2)均大于4.00%;其中,以0.2mg/L 2,4-D+1.0mg/L NAA+0.25mg/L KT组合表现最好.2) 3种碳源中,2%蔗糖愈伤组织诱导率1为57.14%,表现最好;2%的蔗糖和6.5%的葡萄糖出愈率2均大于12%,无明显差异.3) 加入氨基酸及AgNO3的出愈率1和出愈率2均高于不加任何添加物的处理;100mg/L丝氨酸对于诱导花药中部出愈率效果最好.说明,单一激素愈伤组织诱导效果较差,生长素和细胞分裂素组合诱导效果较好,西安绿茄最适愈伤诱导培养基为MS+0.2mg/L 2,4-D+1.0mg/L NAA+0.25mg/L KT+2%蔗糖+100mg/L丝氨酸.