西瓜细菌性果斑病菌快速免疫PCR检测

对种子携带的西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp. citrulli)进行简单抽提和纯化,不经过DNA提取而以病原菌为模板进行PCR检测.结果显示,对带菌种子提取液采用直接PCR法最低检出限为3600个细菌/mL,而免疫PCR最低检出限可达到600个细菌/mL.免疫PCR法可以有效富集病原后再扩增,方便快速,成本低,灵敏度高,适用于种子携带微量的西瓜细菌性果斑病菌的快速鉴定.     

砀山梨黑斑病分子检测技术研究

黑斑病是砀山梨上最重要的病害之一,建立一套砀山梨黑斑病的分子检测技术对该病害的早期及时防治及口岸检验检疫具有重要的意义。本研究通过分析比较砀山梨黑斑病菌与其他19种不同真菌的ITS序列,设计了1对特异性引物,能够从该病菌中特异性地扩增出1条398 bp的条带,而其他测试真菌中不能扩增出该条带。在灵敏度检测中,该菌的基因组DNA检出限为10 pg/μL,同时在发病的砀山梨果实组织样品和接种梨黑斑病菌的梨果实组织样品中检测出梨黑斑病菌。因此,可以将该对引物用于梨黑斑病早期诊断及病菌的PCR检测,为指导果农及时进行药剂防治提供有效的技术支撑。     

PCR-DHPLC技术快速检测玉米细菌性枯萎病菌

本研究成功建立了玉米细菌性枯萎病菌的PCR检测方法.该方法根据细菌ITS序列的特异性,设计了对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定性点突变的特异性引物及探针,并对5株玉米细菌性枯萎病菌及18种植物原性细菌的DNA进行了PCR、实时荧光PCR及PCR结合变性高效液相色谱技术(PCR-DHPLC)检测.结果表明,几种方法特异性强,检测灵敏度均为菌液浓度102 cfu/mL,PCR-DHPLC技术具有检测成本较低、高通量、自动化程度高、污染风险小及鉴定结果准确等特点,能够满足快速、准确诊断玉米细菌性枯萎病菌的要求.     

道地中药材川贝母特异性PCR鉴别方法研究

为建立快速检测中药材川贝母成分的特异性PCR法,从NCBI数据库下载植物HMGR基因序列,根据同源性区域设计兼并引物,对川贝母及其易混品鳞茎基因组进行扩增。通过比对川贝母特异性DNA片段区域,设计引物扩增获得川贝母基原物种特异核酸片段。从川贝母基原鳞茎中提取DNA,设计特异引物对BMH-TF/BMH-TR,优化PCR扩增条件,通过特异性、灵敏度实验验证,建立特异性PCR检测体系。采用该方法从川贝母基原中扩增出一条120 bp左右条带,而非川贝母样品、空白对照在相同条件下无扩增条带,检测灵敏度为2 ng/μL,检测下限为4 ng。对10个市售药材的检测结果证明,该方法简便可行、重现性好。该PCR法可快速、准确鉴别川贝母基原,具有操作简便、快速、特异性高的优点。     

定量PCR快速检测动物食品中沙门菌污染

摘 要： 沙门氏菌是动物性食品中的重要食源性致病菌,建立其快速检测方法对动物性食品的质量控制具有重要作用。本研究根据沙门氏菌16srDNA、 dT fermentation等基因或DNA功能区序列设计PCR引物, 通过比较3种不同的基因组DNA提取方法,提取待检样品总DNA, 进行多基因定量PCR检测。结果表明,该方法简单快速且灵敏度高,在动物食品中的检测灵敏度可达10 CFU/g,整个检测时间在10h 以内。说明本方法对检测动物中沙门氏菌具有特异性高且灵敏、快速等特点,适用于快速、准确地检测动物中沙门氏菌的需要。     

番茄实用化PCR分子标记反应体系与程序优化

为了提高抗病性分子标记检测的效率,为番茄病害检测及多抗品种选育提供技术依据,本研究通过改良CTAB法、96孔深孔板快速提取番茄微量叶片DNA;利用抗根结线虫病Mi标记,在L16(45)正交设计试验基础上,采用直观量化分析和方差分析两种方法,对番茄实用化PCR分子标记PCR反应的5个因素(引物, Mg2+, dNTPs,模板DNA和Taq酶)进行优化;随后分别筛选黄化曲叶病毒病、烟草花叶病毒病、根结线虫病、枯萎病、叶霉病和颈腐根腐病6种病害的8个实用化PCR分子标记PCR程序的退火温度;并对循环次数进行筛选;最后利用优化后的PCR体系与程序对供试的1 442份番茄材料(包括番茄种质资源,群体材料,组合及品种)进行抗病性鉴定。结果表明番茄实用化PCR分子标记的PCR最佳反应体系(20μL)为引物0.5μmol/L、Mg2+1.5 mmol/L、dNTPs 0.3 mmol/L、DNA 480 ng DNA、聚合酶1.0 U Taq;PCR程序中8个分子标记共同最适退火温度为56℃,最佳循环次数为33次;筛选出585份多抗(含2种以上的抗病基因)番茄材料,可作为中间材料或亲本材料进行多抗品种选育。该实用化PCR分子标记的PCR体系的建立为番茄利用抗病基因分子标记检测与筛选多抗种质资源、品种或群体材料提供了标准化的程序。     

利用实时荧光PCR技术检测风信子黄腐病菌

风信子黄腐病菌是我国禁止入境的病原细菌之一,我国目前尚无该病的发病报道.本研究根据风信子黄腐病菌基因组16S-23S ribosomal RNA intergenic spacer保守序列,设计并合成了1对特异性引物和1条具有稳定点突变特异性探针进行实时荧光PCR检测,风信子黄腐病菌有很强的荧光信号,供试的其它7种病原细菌菌株均没有荧光产生.与常规PCR相比,实时荧光PCR检测特异性强,灵敏度高,适合病害的快速诊断和口岸检验检疫应用.经优化反应条件,建立了稳定的风信子黄腐病菌实时荧光PCR检测方法.     

一种适于PCR检测病毒诱导基因沉默番茄植株的微量DNA提取方法

【研究目的】为了寻找一种适用于病毒诱导的基因沉默番茄叶片PCR检测的快速、简单、成本低的DNA提取方法。【方法】笔者根据PCR反应的要求,用改良的CTAB法,实现了微量番茄叶片基因组DNA的快速提取。【结果】提取基因组DNA所用的组织量虽少,所得的DNA经过电泳检测虽有降解,但足以用于PCR检测,以其作模板扩增中国番茄黄化曲叶病毒诱导的硫黄素酶(Su)基因沉默植株中病毒组分中的DNAmβ和1.7A,片段大小分别为500bp、1300bp。测序结果证明是相应基因的部分片段。【结论】该方法的材料不需要使用液氮,可以单人大批量提取,并在基因沉默的番茄植株中能稳定而准确的规模化PCR检测。     

番茄青枯菌分离与三重PCR体系建立

由茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacea)引起的番茄青枯病在早期田间基本难以发现,当出现明显症状时通常已经难以治理。为了加强对番茄青枯病的早期诊断,首先对从海南桂林洋采集的番茄发病植株进行病原菌的分离和鉴定,其次对已报道的fliC-F/R、pehA#3/6和759/760这3对特异性引物进行特异性及其灵敏度的检验,创建并优化三重PCR体系,最后应用该体系对该植株及土壤中的病原菌进行检测与监测。结果表明,应用16SrRNA序列鉴定出分离的病原菌为番茄青枯菌,利用3对特异性引物建立的三重PCR体系验证其为茄科雷尔氏菌,且利用该体系可以精准的从植株与土壤中定性监测到该病原菌,而单一PCR只能当模版DNA浓度为5 ng/μL时才能检测出,优化后的三重PCR方法对青枯菌的模版DNA检测浓度最低为10~(-3)ng/μL。大大提高了土壤中青枯病病原菌的监测监控能力,并能有针对性地预防和控制番茄疾病为番茄产业可持续发展提供了强有力的技术支持。     

西瓜果腐病种子带菌的PCR检测研究

基于传统的PCR检测技术,研究了西瓜果腐病种子带菌的PCR检测方法。结果表明,磷酸缓冲液更适合于作为带菌种子的浸提液,PVPP可去除种子残留物,提高检测的灵敏度。使用本检测方法,摇培时间在2h以上时,其时间的长短不影响自然感染带菌种子的检测;能检测到的西瓜种子最低带菌率为1‰,即1000粒种子中存在1粒带菌的种子;而且能对自然感染的单粒种子进行检测,得到种子样品带菌率的数据。本研究所获得的检测方法简便实用,能有效应用于西瓜商品种子西瓜果腐病菌的检测。     

中国省级农科院网站域名使用现状调查

域名对于中国各省级农科院建立的政务网站具有重要作用。现有的各省级农科院网站域名缺乏规范,影响了公共服务和对内对外交流的质量。通过中国农科院官网搜集,并经过百度搜索核实了各省农科院网站域名共30个。详细分析了它们选择的域名后缀和域名命名方式等方面的混乱现状,并就此提出了一些域名规范措施：第一是域名后缀统一为“ac.cn”;第二是“农科院”一词英文缩写统一为“aas”,拼音缩写统一为“nky”;第三是域名主名命名方式统一为“[省名第一字拼音全拼]+[其后几字的拼音首字母缩写]”或“[省名的独特简称全拼]+[连字符“-”]+[省名拼音首字母缩写]”。     

南瓜降糖功能及其系列食品加工技术

阐述了南瓜在糖尿病辅助治疗方面的功能特性,介绍了南瓜降糖主要制品南瓜全粉、南瓜脆片、南瓜果酱和南瓜肉汁的工艺流程和操作要点。     

Revised calculation of the coefficient of parentage in plant breeding

The knowledge of the genetic similarity between two individuals has been useful for animal breeders for a long time, and one of the most common measures of similarity is the Coefficient of Parentage (COP). For two individuals X and Y, it is defined as the probability that an allele taken from a particular locus in individual X is equal by descent to another allele taken from the same locus in individual Y; thus, the COP between two individuals is the same as the expected inbreeding of their offspring, and it is now a routine calculation among plant breeders as part of crop improvement programmes. Nevertheless, plant breeders deal with the genealogy between strains or groups of individuals, and here, we provide a mathematical proof that in this case the application of standard formulae replicated from animal breeding may result in overestimation of the true amount of inbreeding between two strains.     

恒速干燥阶段对流传热系数的研究

应用因次分析和实验测定相结合的方法,对恒速干燥阶段的对流传热系数进行了研究。通过实验,较精确地确定了公式中的常数,得到了形式较简捷的求取α的准数关联式。     

农业龙头企业带动农户绩效的实证分析—以南京市为例

农业龙头企业作为产业化经营的载体和产业化链条中最关键的一环,一头联结市场,一头联结分散的农户,两者的连接机制决定了农业龙头企业和农户之间的利益分配,进而影响到农业产业化的进程和农民增收,分析将从农业龙头企业与农户连接机制的角度入手,以南京市为例,着重考察其对农户的影响,特别是在促进农户增收方面的效果,为政府有关部门制定促进农业龙头企业带动农户增收的政策,提供理论和现实依据。     

光合产物累积对大豆光合午休的影响

研究了大豆在开花期、结荚期和鼓粒期的光合日变化及叶片中淀粉和可溶性糖含量的日变化。结果表明,结荚期和鼓粒期大豆的光合作用有午休产生,而在开花期没有发现午休现象。但是在这三个不同生育期中叶片的可溶性糖和淀粉含量的日变化却表现出相同的趋势,它们的变化与大豆光合午休之间没有必然联系。用去荚和去叶方法改变大豆植株库源比后,对大豆光合午休产生与否没有影响。实验结果表明,大豆叶片中碳水化合物的累积不是造成光合午休的原因。     

Research on Bifurcation and Chaos Characteristics of Meso-Scopic Fracture Process of Rock

On the basis of test results of meso-scopic fracture process and evolution of microcracks of rock in uniaxial compression,the number and orientation of microcracks at each stress level are obtained.A mathematical model for describing the germination and evolution of microcracks is proposed.The bifurcation and chaos behaviours of the evolution of microcracks and meso-scopic fracture process are studied for the first time with the bifurcation and chaos theory of modern nonlinear science.When the characteristic values which represent the gernimation and closure effect of microcracks take certain values,the evolution of microcracks can be described by the Logistic equation.Therefore,the evolution of microcracks of rock has the bifurcation and chaos characteristics.[WT5HZ]     

Exploration on the Formula of Degree of Freedom of Space Mechanism

From the theory that four connecting rods mechanism has flexibility and any closed graphics of plane mechanism has three restrictions, the calculating formula of degree of freedom of mechanism is researched. The result of research indicate that the calculating formula of degree of freedom of space mechanism will be set up if the calculating formula of degree of freedom of plane and spherical surface mechanism are changed a little. The new formula could substitute for 29 traditional calculating formulas of degree of freedom of space mechanism but also the plane mechanism, the multiple rings space mechanism, the open chain space mechanism and mixed chain space mechanism and so on. Because that the new formula is easier and rapider in use than traditional formulas, it is a reliable theoretical calculating formula for calculating degree of freedom of space mechanism.     

浅议科技期刊的选题策划

剖析了影响科技期刊选题策划的三个主要因素:科技期刊二重性,办刊宗旨和读者的需求。指出为了提高科技期刊的质量,充分发挥科技期刊的作用,必须做好科技期刊的选题策划工作,并提出做好科技期刊选题策划工作要突出办刊特色,适应不同读者群体的阅读需要,走市场化的经营道路,选题突出科技期刊的特点,栏目策划要多样化。     

不同施钾处理对高产小麦地上部和土壤中钾素积累动态的影响

464000河南省信阳市农专路1号信阳农业高等专科学校农业科学系