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[目的]研究靶向PRRSV核衣壳蛋白N基因的siRNA表达载体的构建及鉴定:[方法]设计并人工合成靶向PRRSV核蛋白N基因的3个siRNA靶序列,将其插入CMV启动子下游,克隆到真核表达载体pSilencer4.1-CMV中,对该重组表达载体进行酶切鉴定及DNA测序。[结果]成功构建了靶向核蛋白基因表达的siRNA干扰重组质粒载体pSilencer—N。[结论]该研究为进一步运用RNA干扰技术进行PRRSV防治研究奠定了基础。 相似文献
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近年来,癌症已经成为世界死亡率最高的疾病之一,极大地威胁了人类的健康。白藜芦醇是从虎杖、藜芦等植物中提取出的活性成分,有多种生物学活性,尤其在抗肿瘤方面已经取得了令人瞩目的成就。白藜芦醇有很好的抗肿瘤活性,但是机体吸收差导致其生物利用度不高,使其在临床上的应用受到了限制。可以通过创新优化剂型的方式促进机体对白藜芦醇的吸收,以增强疗效。通过检索中外相关研究文献,概述了白藜芦醇固体脂质纳米粒、纳米脂质体、复合磷脂脂质体、聚合物胶束、纳米微球、立方液晶纳米粒等新型递药系统的一般情况;同时进一步介绍了白藜芦醇新型制剂在发挥抗肿瘤作用时具有的靶向性好、生物利用度高、缓释性好、半衰期长等优势,为白藜芦醇新型制剂抗肿瘤作用的进一步研究提供理论基础和试验依据。 相似文献
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RNAi技术在植物功能基因组学中的研究进展 总被引:4,自引:1,他引:4
文章主要综述了RNA干涉(RNAi)技术在植物功能基因组学中的研究策略及研究现状,包括RNA干涉的作用机制及技术特征,引发植物RNAi机制的转基因RNAi技术以及病毒介导的基因沉默技术。转基因RNAi技术方面,包括载体结构的优化策略、高通量载体的构建方法以及该技术的优缺点。病毒介导的基因沉默技术方面包括病毒载体及宿主种类,病毒感染方法,试验对照的建立、环境因素的影响以及该技术的优缺点。 相似文献
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石墨烯材料在药物递送等生物医学应用方面迅速发展。就目前这一研究领域的最新研究进展进行了概述。描述了氧化石墨烯的纳米载体的表面修饰方法并对其在药物载体方面的应用(靶向性、缓控释制剂、光热治疗)进行论述。对未来在这一领域的前景和挑战进行了总结。 相似文献
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目的:合成肝靶向药物载体半乳糖基人血清白蛋白.并探讨其生物学特性。方法:以半乳糖和人血清白蛋白为原料.合成半乳糖基人血清白蛋白.利用现代生物质谱技术,分析该药物载体的纯度和糖密度;并用^131I标记与模型药物5一氟脲啶偶联后的肝靶向药物载体.进行动物体内靶向性作用的研究。结果:合成的肝靶向药物载体具有较高的纯度,糖密度(即每分子人血清蛋白偶联半乳糖的分子数)达到了51:1.具有显著的趋肝性,肝脏摄取率达到75.0%。结论:合成的肝靶向药物载体半乳糖基人血清白蛋白是优良的受体介导的肝靶向药物载体。 相似文献
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为提高杀菌剂对香蕉枯萎病病灶部位的靶向积累,以苯丙氨酸(Phenylalanine, PHE)和聚琥珀酰亚胺(Polysuccinimide, PSI)为原料,构建靶向高分子纳米载体(PSI-PHE)负载咯菌腈(Fludioxonil, FLU),制备出苯丙氨酸介导的咯菌腈纳米杀菌剂(FLU@PSI-PHE).采用红外光谱、激光粒度仪、热重分析和X射线衍射手段等表征了原药与高分子载体之间的互作关系及载药率.研究结果表明,水合粒径约531 nm的FLU@PSI-PHE纳米颗粒载药率高达45.96%,其在蓖麻韧皮部的输导剂量为1.27μg/mL,显示出高效韧皮部输导效果.对比低剂量FLU原药,活性成分含量相同的FLU@PSI-PHE纳米颗粒对香蕉枯萎病的抑菌活性基本相当.氨基酸介导的咯菌腈纳米杀菌剂在植物维管组织中高效输导,为香蕉枯萎病的靶向治疗提供了新的技术手段. 相似文献
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喜树碱是一种具有抗肿瘤活性的生物碱,其水溶性差,在人体内易开环,会产生较大的毒副作用,目前临床应用的均为喜树碱衍生物。纳米制剂是大小为10~1 000 nm、具有良好溶解性和分散性的药物剂型。纳米制剂可改善喜树碱类药物溶解性,降低毒副作用,增强肿瘤靶向性,具有潜在应用价值。本文综述了喜树碱类药物纳米制剂的种类,概括了其在肿瘤治疗方面的研究进展及存在的问题,以期为进一步开发及临床应用提供参考。 相似文献
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【目的】猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种对养猪业造成巨大损失的高致死率的传染性疫病。CRISPR/Cas13b系统精准切割和编辑RNA的功能提供了一种靶向抑制RNA病毒的策略。本研究尝试利用CRISPR/Cas13b的RNA干扰功能对PEDV的基因组RNA进行切割,以探索一种新型的PEDV病毒抑制策略。【方法】设计了4对靶向PEDV基因组不同区域的CRISPR RNA(crRNA)位点,构建了CRISPR/Cas13b打靶载体,以打靶载体转染Vero细胞,并利用PEDV感染转染细胞,检测PEDV在CRISPR/Cas13b转染细胞内的增殖情况。【结果】CRISPR/Cas13b系统对PEDV在Vero细胞的增殖具有明显的抑制作用。打靶载体U6-crRNA3和U6-crRNA4转染组相较于正常细胞组,病毒免疫荧光试验中荧光团明显减少;定量PCR结果显示,打靶载体转染组在细胞水平抑制50%以上病毒增殖量。【结论】本研究构建的CRISPR/Cas13b系统能有效抑制PEDV增殖,为开发有效的RNA病毒防控手段、建立抗病动物模型提供了新的研究策略。 相似文献
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当前养殖环境下,畜禽细菌感染性疾病的频发及抗生素长期滥用的风险,使得高效广谱的抗菌药物创新研究迫在眉睫。药物递送系统可以将药物包裹于递送载体内部,于特定部位控制释放,具有提高药物靶向性、增加药物体内稳定性及提高药物治疗指数方面的优势,是解决当前抗菌药物耐药性、体内残留、体内不稳定等几大突出问题的有效途径之一。从细菌耐药性机制及抗菌药物递送系统的设计思路入手,总结纳米乳液、脂质体、聚合物纳米粒、固体脂质纳米粒等载体结构类型在抗菌药物递送中的最新研究进展,对兽用抗菌药物递送系统的研究与商品化开发起到借鉴作用。 相似文献
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超声微泡造影剂是一种新型的基因传输和转染载体,有望成为基因或药物靶向治疗肿瘤的高效特异载体。本文就超声触发微泡破坏增强基因或药物转染的机制及其在抗肿瘤中的作用作了综述。 相似文献
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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA分子在mRNA水平关闭相应序列基因表达或使其沉默的过程.RNA干扰技术作为新兴的基因阻断技术具有明显优势,已经广泛地被应用于基因功能研究、抗肿瘤和抗病毒等热门领域. 相似文献
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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA分子在mRNA水平关闭相应序列基因表达或使其沉默的过程。RNA干扰技术作为新兴的基因阻断技术具有明显优势,已经广泛地被应用于基因功能研究、抗肿瘤和抗病毒等热门领域。 相似文献
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新城疫病毒HN蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】应用酵母双杂交技术构建新城疫病毒的血凝素-神经氨酸酶(HN)蛋白线性中和表位区的诱饵载体pGBKT7-HN-neu,为筛选靶向新城疫病毒HN蛋白的中和性纳米抗体奠定基础。【方法】合成HN蛋白的线性中和表位区HN-neu,将其克隆至酵母双杂交系统诱饵载体pGBKT7中,构建诱饵载体pGBKT7-HN-neu,经酶切鉴定和测序验证正确后,将pGBKT7-HN-neu转化酵母菌Y2H Gold,检测其在酵母细胞中的毒性和自激活作用。【结果】成功合成了HN-neu,构建的pGBKT7-HN-neu在酵母细胞Y2H Gold中无毒性和自激活能力。【结论】成功构建了诱饵载体pGBKT7-HN-neu。 相似文献
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羊口疮(Orf)是由羊口疮病毒(ORFV)引起的人畜共患的一种急性、接触性和具有高度嗜上皮性传染病,主要感染绵羊、山羊和人。由于该病缺乏全身性感染症状,因此在防治上也缺乏有效的疫苗或抗体。RNA干扰技术是目前较为成熟的抑制目的基因表达生物技术。ORFV的DNA ploymerase是病毒复制的关键酶。研究运用RNA干扰技术针对ORFV的DNAploymerase基因进行体外基因沉默研究,通过网络自动筛选平台设计并合成3个short-hairpin RNAs(shRNAs)片段,并与含U6启动子的pLL3.7质粒构建重组载体,结果表明pLL3.7-D596为重组阳性,进一步测序结果正确。研究可以为靶向ORFV-DNAploymerase基因的体内基因沉默提供参考数据。 相似文献