绵羊胚胎冷冻保存及移植的研究

本研究的目的在于建立绵羊胚胎的慢速冷冻和玻璃化快速冷冻保存方法,为绵羊胚胎移植技术应用于生产提供保证。结果:慢速冷冻保存,解冻后正常胚胎占72％,移植受体的受胚率33％、产羔率66％。玻璃化快速冷冻保存,解冻后正常胚胎率亦达72％,移植受体3只,产羔4只。     

南阳黄牛与奶牛胚胎移植技术综合研究

<正> 本项研究从1986年11月起至1989年11月止,历时3年。主要研究了南阳黄牛与黑白花奶牛的超排程序;南阳黄牛胚胎移植南阳黄牛;南阳黄牛胚胎贮存技术保存南阳黄牛品种基因,利用胚胎移植使南阳黄牛繁殖奶牛,应用胚胎移植使已配黄牛产同胞异种(一黄一奶)双胎的方法,胚胎冷冻保存技术。     

奶牛胚胎冷冻保存技术的研究

<正> 自从Whittngham发现经超低温冷冻保存的小鼠胚胎可以成活后,超低温冷冻保存哺乳动物胚胎的方法取得很大进展。目前许多国家都在对不同的胚胎冷冻保护技术进行探讨,如加入冷冻保护剂的种类和浓度、冷冻程序的选择、脱除保护剂的方法等,试图寻找一个胚胎冷冻和解冻的最佳方案。我们从87年开始从事这方面的研究,其目的是探索胚胎冷冻的方法和步骤、寻找适宜于基层生产单位应用的解冻和脱除冷冻保护剂的简易方法。为今后胚胎移植的推广应用打下基础。     

奶牛胚胎移植关键技术及应用前景

奶牛胚胎移植是快速扩繁高产奶牛的最佳途径。介绍了牛胚胎移植的最新发展关键技术,并分析了牛的同期发情、胚胎冷冻保存等技术在动物育种上的应用前景。     

冷冻保护剂种类和胚胎发育阶段对绵羊冷冻胚胎移植受胎率的影响

对冷冻保护剂种类和胚胎发育阶段对绵羊冷冻胚胎受胎率的影响进行了研究。结果表明:分别以乙二醇、甘油为冷冻保护剂冷冻保存绵羊囊胚,解冻后移植受胎率差异不显著,表明冷冻保护剂种类对绵羊冷冻胚胎移植受胎率未有明显影响;以乙二醇为冷冻保护剂,冷冻绵羊不同发育阶段的胚胎,囊胚、扩张囊胚解冻后移植受胎率均明显高于桑椹胚的,囊胚和扩张囊胚之间差异不显著,表明胚胎发育阶段对绵羊冷冻胚胎移植受胎率有显著影响。     

牛胚胎移植技术产业化推广模式探索

正家畜胚胎移植技术(ET),尤其是牛胚胎移植技术经过几十年的研究日趋成熟并在生产中得到了广泛的应用,成为家畜育种和快速扩繁的重要技术方法。牛胚胎移植技术是加速遗传进展及在国家和国际上引种的重要工具。同时,将胚胎冷冻保存有助于保护现有的遗传资源。目前,可移植胚胎通过在体内超数排卵和胚胎采集(MOET)及活体采卵体外受精(OPU-IVF)获得。无论是MOET还是OPU-IVF技术,大量胚胎的产生依赖于对供体母牛使用促卵泡激素(FSH)进行卵巢超数排卵处理。世界上每年大约产生130万余枚胚胎,超过90%的经过基因选择模式获得的种公牛来自胚胎移植。     

体细胞克隆牛超排胚胎玻璃化冷冻及移植试验

 对体细胞克隆牛进行了超数排卵、胚胎玻璃化冷冻及胚胎移植试验。首先对体外受精卵进行了玻璃化冷冻保存试验,结果表明,体外受精囊胚经过EPS10和EPS20 的TCM-199液玻璃化冷冻-解冻后胚胎形态正常率和发育率各组间差异不显著,囊胚孵出率EPS20组为31.3% (35/112)极显著高于EPS10组的12.2% (13/107)（P＜0.01）,选择玻璃化冷冻液EPS20作为体细胞克隆牛超排采卵获得胚胎的冷冻保存液。本试验对体细胞克隆牛"康康"和"双双"进行了超排试验,分别获得6枚（4枚可用胚）和10枚（9枚可用胚）胚胎,各取2枚1级胚胎应用EPS20玻璃化液进行玻璃化冷冻,解冻后分别移植到4头同期发情处理的中国荷斯坦奶牛的黄体侧子宫角内,结果为1头9908号受体母牛妊娠,并且产下1头健康的体细胞克隆牛"双双"的胚胎移植后代。试验结果表明,①体细胞克隆牛与正常牛一样对外源激素（FSH）具有较好的应答能力和超数排卵的能力;②体细胞克隆牛的胚胎可用于玻璃化冷冻保存。     

南德温牛胚胎移植研究

为了研究适于大型肉牛———南德温牛的超数排卵及胚胎移植技术,选择11头适龄南德温牛为供体牛和9头南阳牛为受体牛,进行CIDR-FSH-PG超数排卵和胚胎移植试验。结果表明,供体牛均按时发情,反应率100%,共采胚99枚,获可用胚胎65枚,平均每头5.91枚,可用胚胎率65.0%,可用胚胎等级A、B、C级分别为38.5%、30.8%、30.7%,共移植受体9头,妊娠6头,受胎率66.67%,共产犊9头,其中产双犊3头,其余胚胎进行了冷冻保存。     

波尔山羊胚胎移植技术要点

胚胎移植技术在波尔山羊的繁殖应用上已较为成熟，在生产上得到了较大面积推广应用。但是，胚胎移植技术是一项复杂的、细致的、完整的系统工作．由许多环节构成．具体来说．主要包括以下环节：供体羊的选择和饲养管理、供体羊的超数排卵及人工授精、冲卵技术、胚胎质量鉴定、胚胎的冷冻保存及解冻技术、受体羊的选择及饲养管理、胚胎移植技术、妊娠受体羊的饲养管理等．任何一个环节出了问题，都会造成前功尽弃。其中胚胎移植环节是重中之重，现将这个环节的技术要点做如下介绍：     

影响山羊胚胎移植效果的因素初探

为探讨最佳的胚胎移植方案,提高胚胎移植效率,试验以不同受体山羊为研究对象,比较了不同受体品种、移植胚胎数目、不同季节等因素对胚胎移植效果的影响。结果表明:不同品种受体和移植季节对胚胎移植效果影响不显著(P>0.05);胚胎移植数目对妊娠率没有显著影响(P>0.05),但移植一枚胚胎的胚胎受孕率显著高于移植二枚和三枚胚胎(P<0.01)。     

低温层积过程中激素处理对北五味子种子贮藏物质的影响

在低温层积过程中,对北五味子种子进行激素处理,研究其胚率及可溶性蛋白、可溶性糖及总核酸含量变化。结果表明,激素处理可促进北五味子胚形态后熟、生理后熟及贮藏物质代谢,其中6-BA50mg/L+GA3200mg/L处理中,胚率、可溶性蛋白、总核酸和发芽率等指标极显著高于其他处理。     

银杏种核采后处理对氰化物含量的影响

以银杏核用主栽品种佛指和洞庭皇为试材,对采收的种核进行CaCl_2溶液浸泡、~(60)Co辐照处理后,贮藏于室内,期间每隔20 d测定种核氰化物的含量和种胚的长度变化.结果表明:银杏种核内氰化物含量随着贮藏时间的延长而上升,在148 d左右后逐渐下降,其最低值比贮藏前高出35%~55%;CaCl_2溶液浸泡和~(60)Co辐照均能明显降低种核氰化物的含量,且品种间存在一定差异;银杏种核氰化物含量与种胚的长度呈极显著相关.     

生物技术与畜牧业

本文扼要介绍了近十年生物技术在家畜保健、饲料生产、胚胎培育、基因工程和生理调节领域的进展。兽医方面,有诊断新法,生物防治与抗病免疫;饲料方面有细胞蛋白与氨基酸的生产工艺、纤维的微生物分解;胚胎方面,有超数排卵,合子分割与移植;道传工程有单克隆分离培养、基因重组与融合;生理调节有节约维持消耗、生长的促进与控制、泌乳的增产等。有些项目已用于生产,有的尚在开拓中。     

龙眼体细胞胚胎发生过程中特异表达蛋白的双向电泳分析

以龙眼品种红核子LC2胚性细胞系为材料,进行体细胞胚胎(简称体胚)发生及其同步化调控,获取体胚发生过程中各个主要发育阶段的培养物(胚性愈伤组织、球形胚、子叶形胚、早期成熟胚、中期成熟胚、晚期成熟胚),采用双向电泳对体胚发生过程中特异表达蛋白进行分析.结果表明:(1)龙眼胚性愈伤组织中,pI为4-5的酸性蛋白表达种类最多,在体胚发育的过程中逐渐消失,相反,pI为5-6的微酸性蛋白的表达逐渐增多;(2)体胚发育后期,尤其是成熟胚晚期,分子质量大的蛋白大量减少,分子质量较小的蛋白增多并逐渐积累;(3)虽然在各个发育阶段都会出现一些新的特异蛋白,但是没有改变蛋白质种类逐渐减少的趋势;(4)发现了一些有差异的特异蛋白点,尤其是成熟胚后期,有一系列大分子质量的蛋白消失,新出现了一部分分子质量较小的蛋白,其中几种表达量很大,可能与体胚发育有密切关系.     

不同贮藏年限对红砂种子生理特性及胚结构的影响

以室温贮藏条件下0~4 a的红砂（Reaumuria soongorica）种子为试验材料,通过测定不同贮藏年限红砂种子的萌发指标、生理指标及种胚显微结构,探究红砂种子在贮藏老化过程中种子活力及其生理和显微结构的变化特征。结果表明：随着贮藏年限的增加,红砂种子芽长、萌发率、萌发势、 发芽指数、活力指数和含水量逐渐降低,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、可溶性糖(soluble sugar,SS)和可溶性蛋白(soluble protein,SP)含量呈先升高后降低的趋势,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量逐渐上升。红砂种子萌发指标与MDA含量呈显著（P<0.05）负相关,与SS、SP呈正相关。当年采收的种子,胚部细胞排列紧密,贮藏3~4 a的种子胚部细胞排列散乱,木质化程度加深着色效果明显,并伴随子叶逐渐缩小的现象。综上认为,红砂种子含水量、MDA和SP含量可较为准确地反映其活力,且红砂种子活力变化的节点在2~3 a之间。在实际生产中,建议选择采收后室温贮藏1 a的种子为播种材料。     

合肥地区常绿景观树种冠层雨水截留能力研究

根据合肥地区景观植物现状,寻找10种常绿景观植物树种,测量各树种冠层雨水截留能力,分析对其影响较大的因素。以合肥地区10种常绿乔木树种冠层的雨水截留量作为研究对象,测定标准木的冠幅、叶面积指数、叶片面积、叶片储水能力,进而计算出植物的冠层雨水截留能力,分析植株各项指标对其冠层雨水截留能力的影响。结果表明:冠层储水总量较大的树种为雪松(87 529.42 g)、龙柏(23 572.04 g)和广玉兰(20 457.07 g);单位占地面积储水量较大的为龙柏(1 132.17 g/m²),雪松(1 061.30 g/m²)和杨梅(990.74g/m²)。植株冠幅与冠层储水总量呈显著正相关(P=0.815 0);叶片平均储水量(P=1.316 8)和叶面积指数(P=0.736 3)与植株单位占地面积储水量呈显著正相关。合肥地区在日后的城市景观常绿树种选择中,可以相对重点的使用雪松、龙柏、杨梅和广玉兰等树种,或者选择冠幅较大、叶面积指数较高的其他树种作为园林植物基础种植,从而获得更好的雨水拦蓄功能,以期初步实现海绵城市的目标。     

栓皮栎种胚发育过程中储藏物质积累变化研究

分析研究了栓皮栎种胚发育过程中几种主要储藏物质含量的变化,种胚储藏蛋白及其积累形式。结果表明:可溶性糖、还原糖、可溶性淀粉和可溶性蛋白含量变化趋势基本相同,随种胚的发育先上升后下降;蛋白电泳条带数随种胚发育也相应增加。     

高温对玉米种苗转化过程中贮藏物质降解的影响

高温下玉米种子中的主要贮藏物质淀粉、粗脂肪等降解迅速,明显快于常温处理,迅速转化成可溶性糖及可溶性蛋白供给正在生长的胚本体。在整个转化过程中无论是胚乳、盾片还是胚本体代谢活动旺盛,新生组织快速获得养分,比常温处理更有利于促进幼苗的早生快发。     

陕北黄土区不同林地土壤有机碳含量研究

为探究黄土高原植被恢复对深层土壤碳库的影响,选取退耕还林第一县陕北吴起县金佛坪流域5种植被恢复类型（山杏林（Armeniaca sibrica）,油松林（Pinus tabulaeformis）、沙棘林（Hippophae rhamnoides）、刺槐林（Robinia pseudoacacia）、小叶杨林（Populus simonii））和以自然恢复为主的荒草地为研究对象,通过调查0～1 000 cm土层土壤有机碳含量,并计算土壤有机碳储量,分析不同植被类型的土壤有机碳剖面分布和差异。结果表明：在总体上,土壤有机碳在0～60 cm出现快速下降,60～1 000 cm出现不明显的波动变化,其中40～260 cm土层,小叶杨林地土壤有机碳含量明显最高。不同植被恢复都具有固碳效益,且不同植被土壤有机碳含量差异显著（P＜0.05）。不同植被土壤有机碳储量：小叶杨（18年）（301.51 t·hm^-2）＞刺槐（19 年）（249.86 t·hm^-2）＞沙棘（18年）（242.14 t·hm^-2）＞山杏（8年）（226.08 t·hm^-2）＞油松（5年）（182.91 t·hm^-2）＞荒草地（160.45 t·hm^-2）,这可能是由于不同树龄和植被类型导致的结果。深层（100～1 000 cm）土壤有机碳储量占0～1 000 cm剖面有机碳储量的73%～84%。深层土壤有机碳含量颇丰,在今后碳汇评估中不容忽视。     

4种柱花草种子萌发过程中贮藏蛋白质的研究

[目的]研究4种柱花草种子在萌发过程中4种贮藏蛋白质含量的变化.[方法]用Bradford蛋白质定量检测试剂盒对提取的蛋白进行测定.[结果]4种柱花草胚中贮藏蛋白质含量的大小顺序为球蛋白＞白蛋白＞谷蛋白＞醇溶蛋白.球蛋白在胚生长时期大量降解,含量总体下降了43％;白蛋白在种子开始萌发时下降很快,下降幅度为39％;萌发后期种子胚芽长到4.3 cm时白蛋白含量降低了58％;在整个萌发过程中醇溶蛋白含量的变化与谷蛋白含量的变化相似,都呈波浪状变化,醇溶蛋白降解幅度最小.而总蛋白质含量在整个萌发阶段是随着萌发的进行而逐渐减少,其中有钩柱花草总蛋白含量的降解幅度最大,为49％;其余差异不明显.[结论]4种柱花草的种子萌发早期蛋白质的降解幅度大于萌发后期蛋白质的降解幅度.在种子萌发初期,柱花草种子中的贮藏蛋白质有不同程度的降解,为胚的生长发育提供需要的营养物质.在种子萌发后期,胚突破种皮形成幼芽,种子由异养逐渐向自养过渡,降解幅度减小.