掘氏疫霉卵孢子萌发研究

 掘氏疫霉(Phytophthora drechsleri)种内菌株直接交配产生的卵孢子分别用0.1% KMnO₄处理20分钟和0.3% H₂O₂处理2分钟在S+L培养基上(26℃)培养7天萌发率>70%。H₂O₂是本研究首次报道的一种刺激掘氏疫霉卵孢子萌发的处理剂,其效果略优于KMnO₄。用KMnO₄和H₂O₂处理均可有效地抑制卵孢子悬浮液中菌丝片段及菌丝膨大体的萌发生长。在一定时期内卵孢子萌发率随卵孢子保存时间的增加而增加,保存30天和45天的卵孢子分别用KMnO₄和H₂O₂处理萌发率最高。卵孢子保存期间有无光照对萌发率无显著影响,但卵孢子荫发时给予光照对萌发有明显的促进作用,保存30天的卵孢子在光照下萌发率为60-70%,在黑暗中仅0-16%。卵孢子萌发过程中的光照条件以黑光灯8小时,日光灯16小时交替连续照射7天效果最好,其次为黑光灯单独连续光照,以日光灯单独照射效果较差。所测定的6种培养基中以S+L培养基对卵孢子萌发的效果最好,其次为V₈+L和WA+L。蜗牛酶、纤维素酶、土壤浸出液和黄瓜果提取液对掘氏疫霉卵孢子萌发无明显刺激作用。     

棉铃疫病菌越冬卵孢子作为初侵染源的研究

棉铃疫病菌(Phytophthora boehmeriae Sawada)卵孢子经土壤埋存160天左右越冬,至少有16%～47%的卵孢子仍存活。卵孢子不依赖病残体可单独在土壤耕作层中越冬存活。越冬卵孢子萌发后可侵害棉苗。认为棉铃疫病菌卵孢子在土壤中可安全越冬作为次年病害的主要初侵染源。     

大豆疫霉卵孢子致死温度的测定

大豆疫霉根腐病是由大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)侵染引起的、危害极其严重的最具毁灭性的大豆病害之一.病原菌以卵孢子在土壤中越冬,在条件适宜时导致下一年大豆发生根茎腐烂.病原菌卵孢子也可以存在于患病种皮内,但其在病害循环中的作用还不清楚.卵孢子是大豆疫霉的主要传播方式.本研究中对大豆疫霉卵孢子的致死条件进行了筛选.结果表明,使用60℃湿热处理大豆疫霉卵孢子20min或80℃干热处理大豆疫霉卵孢子20min,其萌发率为0,且死亡率为100%.     

宁波局截获大豆疫病的体会

大豆疫病菌Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｓｏｊａｅ ,是我国禁止入境的一类危险性有害生物 ,自 1997年至今 ,大连、深圳、天津、上海等口岸已多次从美国进境大豆中截获该病菌。1　截获2 0 0 2年 3月初 ,一艘装载 5万ｔ美国大豆的“ＦＵＺＨＯＵＨＡＩ”轮驶入宁波北仑港 ,3月 11日 ,北仓局送来了样品。我们对送检的样品细心地挑选 ,并尽量挑稍大的土块 ,将其敲碎 ,经过 2ｍｍ孔径的筛网过筛后 ,预培养5天左右 ,使卵孢子萌发 ,产生孢子囊并释放游动孢子。接着 ,将易感豆苗的嫩叶消毒后剪成直径约 5ｍｍ叶碟进行诱集。诱集 6～2 4ｈ后取出置灭菌…     

大豆疫霉Phytophthora sojae卵孢子在黑龙江省土壤中的越冬存活率

为探究大豆疫霉Phytophthora sojae卵孢子在黑龙江省土壤中的越冬存活率及其与所处土壤深度和媒介的相关性,以增强型绿色荧光蛋白为报告基因,将培养基及病残体中的大豆疫霉卵孢子分别接种到试验田框栽土壤表层下不同深处,检测其卵孢子的越冬存活率,同时在框栽中定量播种不含任何已知抗疫霉根腐病基因的大豆品种Sloan(rps),苗期调查其发病率。结果表明,大豆疫霉卵孢子在黑龙江省土壤中的适生性较强,可在5~15 cm深度土壤中安全越冬,越冬存活率高达81.67%~96.33%。卵孢子越冬存活率与其所处的越冬媒介关系不大,而与土壤深度有关。在5~15 cm范围内,随着土壤深度的增加,卵孢子越冬存活率增加。处于深层土壤中的卵孢子更容易打破休眠,进入萌发前的萌动状态。各处理间卵孢子越冬存活率的显著性差异并未在发病率上表现出来,说明除了土壤深度外,还有其它因素影响发病率。     

土壤环境对大豆疫霉Phytophthora sojae卵孢子萌动的影响

为明确土壤环境对大豆疫霉Phytophthora sojae卵孢子萌动的影响,将增强型绿色荧光蛋白标记的大豆疫霉卵孢子以2 500个卵孢子/g干土的比例接种于无菌黑土中,荧光显微镜下计数卵孢子的萌动率以明确其最适宜的土壤温度和含水量;在此基础上,从5种类型土壤和5种轮作体系土壤中筛选适宜卵孢子萌动的土壤环境。结果表明,25℃土壤温度和30%土壤含水量最适合大豆疫霉卵孢子萌动,萌动率为95.78%;黑土和盐碱土分别是最适合和最不适合卵孢子萌动的土壤类型,萌动率分别为94.94%和14.67%;卵孢子萌动率与土壤有机质含量、p H值和Ca2+含量间无明显相关性。大豆连作田和玉米连作田土壤适合卵孢子萌动,萌动率为96.33%和95.00%,小麦连作田土壤不适合卵孢子萌动,萌动率仅为39.33%。     

甲霜灵抑制棉疫病菌卵孢子的产生

在离体和活体条件下,测定了甲霜灵抑制棉疫病菌(Phytophthora boehmeriae Sawada)卵孢子产生的作用。结果表明,在含甲霜灵0.04μg/ml的利马豆培养基(LBA)平板上,棉疫病菌的卵孢子产生量仅为对照的50％,0.10μg/ml条件下,病菌完全不能产生卵孢子。在接种的棉苗叶片上,喷施10～20μg/ml的甲霜灵可以明显抑制病菌在病组织内产生卵孢子,卵孢子产生量比对照下降了13～160倍,喷施40μg/ml的甲霜灵,受侵染子叶不发病。     

大雄疫霉与大豆疫病

前言大雄疫霉为藻菌纲、霜霉目、腐霉科、疫霉属真菌的一个种。在近代分类史上,真菌学家们虽根据其孢子形态和致病性等对此菌进行了多次分类与修订,在种内又区分出几种形态和致病性不同的类型,而大豆疫病菌仅是其中的一种。伴随着大雄疫霉菌的分类进展,致使大豆疫病菌的命名也发生了相应的变化:由Phvtophthora megasperma 发展为 P.     

大豆疫病的种子检验技术

大豆疫病是否可由种子带菌传病在国际上长期以来没有明确认识，种子检验技术更无研究报道。通过人工接菌和调查证实，大豆疫病可由种子带菌。提出大豆疫病的种子检验只需检查种皮，以ＫＯＨ浸泡种子，即可检查出种皮里的大豆疫霉菌卵孢子、藏卵器和菌丝体。在种子检验中，必须严格区别大豆疫霉菌与大豆霜霉菌     

土传大豆、南瓜疫病化学防治

本文介绍了土传大豆和南瓜疫病的发病特点及化学防治现状，评述了两种疫病化学防治存在的问题，提出了未来化学防治发展途径。     

大豆疫霉根腐病菌毒素产生条件的研究

 大豆疫霉根腐病(Phytophthora sojae)是大豆的重要病害之一,危害大,发展快。自1918年首次在美国印弟安那州发现此病以来、相继在澳大利亚、加拿大,匈牙利等国发生。     

Pathogenic diversity of Phytophthora sojae pathotypes from Brazil

Phytophthora root and stem rot has developed in commercial soybean fields since 2006 in Brazil, and cultivars with resistance to this disease have not been targeted for this region. Thus, the Phytophthora sojae pathotypes are expected to have virulence to few if any of the Rps genes. The objectives of this study were to characterize the pathotype diversity of P. sojae in Brazil, determine the distribution of the pathogen and predict which Rps genes will be effective and should be used in breeding programs. Isolates were collected in six states (Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Paraná, Mato Grosso do Sul, Minas Gerais, and Goiás). The virulence formulae were based on the response of a differential set with 14 Rps genes (1a, 1b, 1c, 1d, 1k, 2, 3a, 3b, 3c, 4, 5, 6, 7, and 8). None of the 17 pathotypes found was reported previously. The most common virulence formulas were: 1d, 2, 3c, 4, 5, 6, 7 (octal code 05471, representing 24 % of the occurrences); 1d, 2, 3b, 3c, 4, 5, 6, 7 (05671, 13 %); 1b, 1d, 2, 3a, 3c, 4, 5, 6, 7 (25571, 8 %); and 1d, 3a, 5, 7, 8 (01123, 8 %). Percentages of isolates with a susceptible interaction with each Rps gene was Rps1a (3 %), Rps1b (11 %), Rps1c (3 %), Rps1d (100 %), Rps1k (3 %), Rps2 (86 %), Rps3a (32 %), Rps3b (19 %), Rps3c (73 %), Rps4 (70 %), Rps5 (89 %), Rps6 (59 %), Rps7 (100 %), and Rps8 (22 %). There was apparently no relationship between pathotypes and origin. Stacking resistance genes Rps1a, Rps1b, Rps1c, and Rps1k with Rps3b or Rps8 would be highly effective for soybean cultivars targeted for Brazil.     

大豆和大豆疫霉菌共培养体系的构建

 本研究旨在建立一个适于分析大豆遭受大豆疫霉菌侵染后基因表达研究的互作体系。在比较了15个携带不同抗病基因的大豆基因型的组织培养情况和7个大豆疫霉菌分离物及其游动孢子单孢系的毒力变化的基础上,构建了大豆悬浮细胞和大豆疫霉菌游动孢子的共培养体系,进而分析了共培养过程中大豆细胞的活力和防御基因表达情况。结果表明,不同亲和力菌株的游动孢子引起的大豆细胞活力变化十分相似;非亲和菌株的游动孢子可诱导寄主防御基因的表达发生变化。此系统为深入开展大豆抗性机制研究提供了良好的平台。     

大豆疫霉菌对大豆下胚轴侵染过程的细胞学研究

 接种后1.5~24h,用光镜和电镜研究了2个大豆品种与大豆疫霉菌Ps411的亲和性和非亲和性互作。观察结果表明,大豆疫霉菌对大豆下胚轴的侵染过程可分为侵入前、侵入、皮层组织中的扩展和进入维管束组织4个连续阶段。大豆下胚轴接种后在25℃保湿培养,1.5h后游动孢子即形成休止孢并萌发产生附着孢,3h后侵入表皮细胞,6h后进入皮层组织,24h后进入维管束组织。病原菌主要以侵染菌丝直接侵入表皮,表皮细胞间隙是主要侵入部位。皮层细胞是病原菌定殖和发展的主要场所,胞间菌丝侵入皮层细胞并形成吸器。在菌丝与寄主细胞接触部位的寄主细胞壁与质膜之间常有胞壁沉积物的形成。在抗病品种上病菌的侵染事件与感病品种基本一致,但不能形成正常的吸器,胞壁沉积物明显多于感病品种,菌丝在寄主组织内的扩展明显受到抑制。利用β-1,3-葡聚糖免疫金标记单克隆抗体进行的免疫细胞化学的研究表明,胞壁沉积物内含有大量的β-1,3-葡聚糖,在大豆疫霉菌菌丝壁中也存在β-1,3-葡聚糖。以上结果表明,病原菌的侵染可诱导抗病寄主细胞内β-1,3-葡聚糖迅速的合成与积累、并形成胞壁沉积物,以抵御病菌的侵染与扩展。     

大豆疫霉菌单游动孢子囊的分离方法

对大豆疫霉菌单游动孢子囊的分离及游动孢子的获得技术进行了研究,成功获得了大豆疫霉菌单游动孢子囊及游动孢子,明确了该技术在实施过程中的注意事项。     

Race distribution of Phytophthora sojae on soybean in Hyogo, Japan

Since 1987, Phytophthora root and stem rot of soybean [Glycine max (L.) Merr. cv. Tanbakuro], caused by Phytophthora sojae Kaufman and Gerdemann, has been increasing in the Sasayama, Nishiwaki, and Kasai regions in Hyogo, the most famous soybean (cv. Tanbakuro)-producing areas in Japan. In 2002 to 2004, 51 isolates (one from each field) of P. sojae were recovered from 51 fields in Hyogo. These isolates were tested for virulence on six Japanese differential soybean cultivars used for race determination in Japan, and three additional ones containing four Rps genes used in Indiana, USA. Race E was the most prevalent from 2002 to 2004, followed by races A, C, D, and four new races (proposed as races K, L, M, and N). Interestingly, none of the new races had high virulence on the Japanese differential cultivars, compared with other races in each area. One (race N) was avirulent on all six soybean differentials. There was a difference in race distribution on each of three individual areas; race E seemed to be a major component of the P. sojae population in Sasayama, whereas race A and the new race M were the most prevalent in Nishiwaki and Kasai, respectively. Rps6 (cv. Altona) and Rps1a + Rps7 (cv. Harosoy 63) were infected by 90.2% and 33.3% of all isolates, respectively. However, Rps1d (cv. PI103091) was not susceptible to any of the 51 isolates, nor was cv. Gedenshirazu-1. These two soybean cultivars were considered to be potential sources of resistance to breed new resistant cultivars with the desirable characteristics of cv. Tanbakuro for this region.     

大豆疫霉菌部分生物学特性及其药剂筛选研究

采用大豆疫霉菌在不同条件下菌丝生长速度法研究了大豆疫霉菌的部分生物学特性,并应用杀菌剂室内生测、盆栽药剂防效对药效作了评价。研究结果表明,大豆疫霉菌营养生长的最适温度为25～30℃;最适pH为6;光暗交替有利于该菌营养体的生长,在Rye或CA培养基上生长最快。室内药效测定结果表明,烯酰吗啉EC₅₀为0.165 4μg/mL,抑菌效果最好,甲霜灵、甲霜灵.锰锌和氟吗啉.锰锌的EC_{50分别为0.261 00、.451 0和0.984 2μg/mL,效果次之。盆栽试验结果表明,几种药剂在活体条件下对大豆疫病的防治效果较好,并有较长持效期。}     

土壤中大豆疫霉菌诱捕方法的改进

 在大豆疫霉菌的土壤分离方法中,使用最广泛和最为经济的是Canaday等^[1]建立的大豆叶碟诱捕法,但该方法分离效率很低,而且对进口大豆中夹带的土样进行诱捕时,在土壤浸润阶段土样表面易长满杂菌菌丝,致使诱捕无法进行。朱振东^[2]等应用诱捕后的叶碟接种感病大豆,再对发病大豆植株进行组织分离,建立了一种分离土壤中大豆疫霉菌的方法,但该方法也无法解决由于杂菌的干扰而造成的分离率低的问题。