马传染性贫血补体结合反应的研究

在马传染性贫血血清学反应的研究工作中,以补体结合反应为最多,包括传贫病马的各种病理材料(肝、脾、红血球等)用无水乙醇、甲醇和食盐水等制成的浸出液作为抗原,和Altara 氏抗原,但结果都不够满意,因为所制的抗原并不能排除特异的反应性。近年来随着传贫病毒的提纯或精制工作的进展,对用精制病毒作抗原,引起了人们的注意。大木与志雄等用生化方法从传贫病马脾脏中提取了铁蛋白(Ferritin)作补体结合反应,对13例人工感染传贫马试验结果全部呈阳性反应;在49例含铁细胞阳性马中,有47例为阳性。此外,用通过动物休及组织培养方法所获得了病毒,也为     

猪喘气病的血清学诊断的研究

猪喘气病对养猪业的危害甚大。截止目前,尚无满意的实验诊断与免疫方法。据华南农学院研究,X 线诊断与剖检的符合率可高达98.03%。但是,X 线诊断对于无明显病变的病例,则有其不可克服的局限性;且在大批广泛地进行检疫时,亦有困难。因此,实验诊断法的研究,十分必要。猪喘气病的实验诊断法的研究,已积累了不少资料,诸如病毒血球凝集试验、病猪血清的血球凝集试验、MG 链球菌病毒吸附凝集试验、环状沉淀试验、琼脂扩散沉淀试验、补体结     

猪瘟的类症鉴别

<正>1病原体猪瘟病毒(Hog cholera virus,HCV)是猪瘟的病原体,猪瘟病毒属于黄病毒科瘟病毒属,其为单股正连的ss RNA病毒。病毒粒子的外观呈圆形,大小为38~44nm,其外壳是立体对称二十面体,氯化铯中浮密度1.15~1.17g/ml,有包膜。猪瘟病毒在细胞质内复制,不能凝集红血球,该病毒与牛腹泻病毒有相关抗原。其一般只感染猪和野猪,其他动物不发病。该病毒对乙醚敏感,对     

一种快速检测抗沙门氏菌O抗原单克隆抗体的微量间接血凝试验

用热酚—水法提取沙门氏菌脂多糖(LPS),经pH8.0热处理后,致敏醛化的绵羊红血球,建立了一种快速检测抗沙门氏菌O抗原单克隆抗体的微量间接血凝试验。用致敏血球在96孔V型血凝板上与杂交瘤培养上清作凝集试验,数秒钟即能判定结果。本试验具有快速的特点,且有一定的敏感性。     

兔瘟的诊断及感染脏器含毒量的测定

从流行病学、临床症状、病理变化、血凝和血凝抑制反应及动物感染实验对惠水送检病死兔进行诊断,确诊为兔瘟。为进一步分析兔瘟病毒的血凝特性,分别用人的Ｏ、Ａ、ＡＢ、Ｂ型红血球和牛、马、猪、山羊、鸡、鸭、鹅、兔、小鼠等不同动物的红血球作血凝试验。结果表明：兔瘟病毒对人的Ｏ、Ａ、ＡＢ、Ｂ型鲜红血球具有较强的凝集作用（ＨＡ ４℃时为２＾１２～１３）,其中Ｏ型红血球凝集最好,ＨＡ可达２＾１３。对人工感染病死兔脏     

猪瘟的快速诊断——用反向间接血凝试验检测猪瘟抗原

以猪瘟免疫血清提取1gG,致敏用丙酮醛、甲醛固定的绵羊红血球,作反向间接血凝试验,可以检出猪瘟病料(脾及淋巴结)中的抗原。以其他IgG,如出败血清IgG、正常猪IgG致敏的血球作对照试验,非特异性凝集极小。以健康猪或其他高热病如出败、猪丹毒、弓形体病猪脾脏作阴性样品对照,血凝滴度也很低或阴性。以猪瘟高免血清作血凝抑制试验,有明显抑制作用。说明这种试验,对猪瘟抗原是有特异性的,可以作为猪瘟诊断用。 在40头血毒猪中,其脾脏有31头(77.5％)是阳性,淋巴结有30头(75％)是阳性。在此40头猪中,仅有3头在脾或淋巴结均为阴性,未检出抗原,因此,实际有37头(92.5％)的脾脏或淋巴结或两者都检出猪瘟抗原。但是,在病猪血液中不能检出抗原(凝集滴度过低),在脾脏浸出液中,如含有血色素过多,也不易检出。在新鲜采取的脾脏或淋巴结中,非特异性凝集不易排除,影响检出结果。脾脏或淋巴结1克剪碎,加蒸馏水或生理盐水5毫升,在8—10℃静置1—2天后,即可排除大部分非特异性凝集。堪称猪瘟诊断中最简便的方法之一,具有血清学的一般特异性。但尚缺乏天然病例的试验。     

猪传染性胃肠炎的快速诊断——用反向间接血凝试验检测猪传染性胃肠炎的抗原

本试验用反向间接血凝试验检测人工感染传染性胃肠炎病猪的抗原。结果表明,以小肠内容物和生前拉出的粪水作为检验材料较为适宜;滴度一般为1:128～1:2048;检验时间,一般2～3小时。以小肠粘膜作检验,滴度虽相当高,但非特异性凝集较多。 血球致敏条件,采用1％双醛固定绵羊红血球悬液。pH4.0醋酸缓冲液稀释。每毫升血球悬液含IgG80～160微克。在37℃致敏3～4小时最为适宜。致敏血球在4℃可保存198～227天。血凝试验结果判断标准,应以血清中和后抑制4个凝集孔以上,作为阳性。检出率为42/47(89.36％),以其他致敏血球作血凝试验和其他血清作抑制试验作比较,证明本试验的特异性相当可靠。 检测猪传染性胃肠炎的抗原,一般采用细胞培养和荧光抗体技术。前者比较困难,要传几代,才能获得细胞致病效应,且往往不上细胞。后者则适用于早期急性病例,在发病后期,尤其在上皮再生时期不易检出。采用间接血凝试验,国外仅见用于检测抗体,用作抗原检验,中外文献尚未见报导。本试验用反向间接血凝试验,检测人工感染猪的小肠粘膜、小肠内容物及粪水中的抗原,获得初步结果。     

水貂防疫注射应注意的问题

在水貂养殖过程中,每隔半年对种用水貂注射犬瘟热疫苗和传染性胃肠炎疫苗,使其产生抗体以保护怀孕期的母貂和仔貂不受犬瘟热和病毒性肠炎的感染,此种行为又称防疫或免疫接种。防疫用的疫苗就是免疫原,又称为抗原,是刺激水貂免疫系统产生抗体因子进入血液对抗犬瘟热病毒的蛋     

仙台病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

以纯化pQE31表达的融合蛋白仙台病毒EP（S）为诊断抗原、融合蛋白FP（S）免疫鼠血清为阳性抗体,建立了小鼠仙台病毒抗体检测的间接ELJSA诊断方法。该抗原FP（S）不与其他常见的小鼠病毒（小鼠肝炎病毒、鼠痘病毒、小鼠肺炎病毒和呼肠孤病毒Ⅲ型）的阳性缸清发生交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数均小于7％,与中国药品生物制品检定所的试剂盒符合率为98％。本研究建立的检测仙台病毒抗体的间接ELISA诊断方法,有很好的特异性和敏感性,为仙台病毒的抗体的检测提供了一种快速、简便的血清学诊断方法。     

“猪瘟血凝抗原”试用简报

<正> 猪瘟间接血凝抗原试剂简称“猪瘟血凝抗原,”由醛化血球吸附纯化抗原制成,可用于检测猪瘟抗体与抗原。抗原定性或定量均用血凝抑制试验。抗体定性,以两滴试剂能将检料分为性质不同的三个等级:保护性阳性、无保护阳性和阴性。抗体定量用常规倍比稀释梯度凝集法,可查猪、兔血清效价,     

鸡马立克氏病毒蛋白的分离与鉴定

鸡马立克氏病是一种高度接触性、致死性、恶性肿瘤性传染病,一旦发生,损失严重。为快速诊断此病,建立了一种应用SDS-PAGE电泳和Western-blot染色分离鉴定、纯化马立克氏病毒特异性抗原蛋白的方法,并获得了与MDV抗血清特异反应的抗原蛋白。为进一步制备抗MDV特异性单克隆抗体奠定基础。     

长叶车前花叶病毒(RMV)单克隆抗体的研制及初步应用

植物病毒病近年来越来越严重地影响农业生产,因而对病毒病的诊断、鉴定、防治等工作显得格外重要。然而病毒种类繁多,株系复杂,分类较乱,给植物病毒检疫,田间诊断,室内鉴定,株系划分等带来许多困难。迫切需要一些精确稳定鉴定病毒,分析株系的方法。免疫学技术是病毒鉴定的重要手段之一。普通抗体由于含有多种抗原决定簇的抗体,特异性差,难以区分株系。单克隆抗体只针对一个抗原决定簇,特异性极高,能精确鉴别病毒株系间的细微差异和株系间的亲缘关系。分析病毒的共同抗原决定簇和独特型决定簇,研究病毒表面结构及免疫学等方面的特征,单克隆抗体能使抗体制剂统一化、试剂化,为病毒的多项研究提供材料。研制长叶车前花叶病毒(RMV)单克隆抗体,无论对该病毒的鉴定、诊断、防治等生产实际问题,还是对植物病毒的基础理论研究,均具有现实意义。到目前为止,国内外尚未见有关RMV单克隆抗体的报道,本研究是首次报道。     

应用反向间接血凝试验检测山羊痘病毒抗原

以兔抗山羊痘病毒IgG致敏绵羊红细胞，采用反向间接血凝试验(RPHA)检测山羊痘病毒抗原。该诊断试剂与山羊痘病毒抗原发生特异性的凝集反应；在PBS中不自凝；与其它动物病病毒抗原无交叉反应。对贵州省8个疫区现场采集山羊痘待检抗原检测结果表明，该方法阳性检出率为87．5％(7／8)。与琼脂扩散试验(AGP)阳性检出率为50％(4／8)相比较，RPHA敏感性比AGP高；同时对山羊痘野生强毒H—GZ株F1～F5代细胞培养物进行检测，F1代就可检出RPHA效价，而AGP则不能检测。该诊断试剂可用于兽医临床上山羊痘的快速诊断及作为病毒分离培养的检测指标。     

马铃薯脱毒组培苗的免疫电镜检测研究

 应用马铃薯病毒X、Y(PVX及PVY)标准抗原和抗体,结合电子显微镜制样方法,对马铃薯脱毒组培苗进行免疫电镜检测研究.适宜工作条件室温20～25℃,抗体孵育10min、抗原吸附5min.在组培苗中检测到3种病毒粒体:PVX、PVY及类似烟草脆裂病毒(TRV)的短样杆状粒体.     

用交联葡聚糖柱层析提纯K_(88)抗原

连续三次用等电点沉淀法提纯的大肠杆菌K_(88)抗原,在琼脂扩散沉淀反应及免疫电泳中均与同源菌株的OK血清只产生一条沉淀线。这种抗原提取物在通过交联葡聚糖(Sephad ex)G_(50)柱层析后,在用紫外分光光度计检查时,其洗脱液却表现三个紫外线吸收峰。但在对豚鼠红血球的MR血凝反应(MRHA)中,仅第一峰呈阳性反应,也只有第一峰的洗脱液能象原K_(88)提取液那样在pH为4.5左右时发生浑浊沉淀。试验表明,在琼扩反应中表现为单     

PCV2衣壳蛋白肽段的表达及其血清抗体间接ELISA检测方法

利用可溶性重组PCV2-Cap蛋白肽段为抗原,建立PCV2血清抗体间接ELISA诊断方法(rhcap-ELISA)。将PCV2cap基因中含主要表位的片段克隆到表达载体pGEX-6p-1上,转化E.coli,降低诱导温度至18℃诱导,获得大小为34 ku的可溶性融合蛋白。Western blotting试验证实该融合蛋白具有很强的免疫学活性,通过亲和层析柱对可溶性蛋白进行纯化。用融合表达的可溶性蛋白肽段作为抗原,建立猪圆环病毒(PCV2)血清抗体间接ELISA诊断方法。该方法的交叉反应结果表明,重组抗原与PRRSV、CSF、PPV和PRV阳性血清之间不存在交叉反应;用rhcap-ELISA和商品化的同类试剂盒(PCV2-Ab-Kit)检测137送检血清样品,2种试剂盒的阳性检测率分别为79.56%和83.21%。因此,rhcap-ELISA猪圆环病毒抗体检测试剂盒具有良好的敏感性和特异性,适合于在大规模的PCV2血清抗体的检测工作中使用。     

山羊痘病毒增殖与沉淀抗原制备

取山羊痘分离野生强毒H—GZ株通过Vero—E6细胞传代增殖，经硫酸铵盐析与Sephadex G-200层析制备了山羊痘病毒沉淀抗原。该抗原在琼脂扩散反应和对流免疫电泳的试验中能够与山羊痘参考阳性血清、山羊痘免疫阳性血清出现沉淀线，所形成的沉淀反应能够被山羊痘参考阳性血清特异性地抑制，与其它常见的动物病血清不发生交叉反应。本次制备的山羊痘病毒沉淀抗原和山羊痘免疫阳性血清，可以用于兽医临床诊断、免疫效果监测和流行病学调查。     

细小病毒患犬病例的临床诊断与治疗

研究细小病毒患犬的临床诊断方法与治疗。选取110例细小病毒患犬,分析犬细小病毒病理特点,应用快速检测试纸对疑有细小病毒患犬进行化验,使用药物治疗。确诊了80只病犬患有细小病毒,通过单克隆抗体与利巴韦林注射,救治率为95%以上。应用细小病毒抗原快速检测法以及单克隆抗体诊断使救治率提高,临床应用可行。     

用对流免疫电泳法早期診断家蚕中肠型脓病試驗初报

家蚕中肠型脓病是我国目前危害严重的一种蚕病。该病潜伏期和发病过程较长,病情慢,蚕儿感染细胞质多角体病毒(CPV)后,出现症状较迟。过去主要靠肉眼观察或光学显微镜检查进行诊断,不能在感染早期发觉,影响防治效果。近年来,国内外用红血球凝集反应,对流免疫电泳、萤光抗体及凝胶扩散沉降等血清学方法对本病进行早期诊断研究,显示了这些方法特异性强、灵敏度高、检出时间早、有较好的效果。本文用对流免疫电泳法对感染了CPV的家蚕进行早期诊断研究,初步探讨不同蚕品种、不同感染病毒浓度对诊断效果的影响,现将结果报告于下。     

猪囊尾蚴病ELISA诊断抗原的研制及其应用

本文报道了在囊液理化性质及免疫性质分析的基础上,应用DEAE-Sephadex A50直接吸附法制备猪囊尾蚴囊液抗原组份,并与传统的蛋白质类抗原制备的Sephadex G200凝胶过滤法制备的囊液抗原组份进行比较。结果表明:γ~A组份作为囊尾蚴病诊断抗原,免疫比值高,非特异性吸附反应小;效价高,包被浓度为6μg/ml以下;特异性强,阳性检出率及阳性符合率均在98％以上。而且工艺简便,产品率高,便于推广应用。