提高小麦花粉植株诱导频率的研究

对影响小麦花粉植株诱导频率部分因素进行了研究,获得以下结果:(1)在现有的小麦花药愈伤组织诱导培养基中,W_(14)和马铃薯-Ⅱ的效果最好;(2)低温预处理的效果因杂交组合的不同而表现不同;(3)短期高温预培养可明显提高愈伤组织的产量;(4)绿苗分化率与愈伤组织年龄关系密切,愈伤组织转移的最适年龄与愈伤组织诱导培养基的种类有关;(5)大量元素减半的MS培养基绿苗分化率显著高于190—Ⅱ培养基。     

北方粳稻花培育种研究

利用粳稻品种间的杂种Ｆ１代，对北方粳稻花培育种中存在的诸多问题进行了研究。结果表明，不同接种材料的愈伤组织诱导频率差异是显著的。处于单核靠边期的花粉具有最大形成愈伤组织的能力，生长素也是诱导花粉去分化形成愈伤组织的主要因素之一。愈发化绿苗频率的高低与花药材料的来源，杂交组合，愈     

培养基中附加人参提取液对小麦花粉愈伤组织诱导的影响

本文着重研究在培养基中附加人参提取液对小麦花药培养中花粉愈伤组织诱导的影响。试验结果表明在 N_(T5-1)培养基中附加浓度为1g/L 的人参提取液对于多数小麦材料花粉愈伤组织的形成有不同程度的促进作用,对于某些特定基因型的材料可以成倍地提高其愈伤组织的诱导率。     

PHA对小麦花粉愈伤组织诱导频率的影响

PHA（植物血凝素）对小麦花粉愈伤组织诱导频率的影响研究结果表明，在W14＋2，4－D2.0mg/L＋KT0.5mg/L＋生物素2.0mg/L＋蔗糖70g/L＋麦芽糖20g/L培养基中加入2.0-4.0mg/L的PHA，可使小麦花粉愈伤组织的诱导频率提高0.99-7.24个百分点，以W14＋2，4－D2.0mg/L KT0.5mg/L 生物素2.0mg/L 蔗糖70g/L＋麦芽糖20g/L＋PHA4.0mg/L培养基的效果最好，3种供试材料的愈伤组织诱导频率为18.00%，比对照培养基上小麦花粉愈伤组织的诱导频率提高7.24个百分点。     

不同基因型亚麻花粉小孢子离体培养研究

[目的]研究不同基因型亚麻花粉小孢子离体培养,建立亚麻花粉小孢子离体培养再生体系,以期加快亚麻单倍体育种进程。[方法]以5种不同基因型亚麻的花粉小孢子为外植体,研究不同基因型亚麻愈伤组织诱导率、绿苗的分化率的差异,筛选适宜亚麻花粉小孢子培养基。[结果]不同基因型的亚麻花粉愈伤组织的诱导率、绿苗分化率差异显著,9601和9605愈伤组织的诱导率较高,分别为30.8%和28.6%;9601组合的花粉绿苗分化频率最高为14.5%。其次为9718和9712,分化率分别为11.5%和8.0%;筛选出亚麻花粉小孢子适宜的愈伤组织诱导培养基HF1、绿苗分化培养基HF2。[结论]初步建立了亚麻花粉小孢子离体培养再生体系,为亚麻单倍体育种、突变体筛选、转基因等研究奠定了基础。     

低温预处理对籼稻花粉植株诱导的效应

4个籼稻杂交组合,取花粉发育阶段为单核中晚期的穗子,置于9—11℃低温下预处理14天而后接种于不同培养基上。在接种的25,840枚花药中6,203枚花药产生愈伤组织,诱导率平均为24%(对照为3.4%)。随机取1,771枚花药的愈伤组织转入分化培养基进行分化培养,583枚花药的愈伤组织分化绿苗。分化频率平均为32.9%(对照为11%)。绿苗总诱导率为7.9%。观察汕优2号稻穗置于9—11℃低温预处理2—33天后进行花药培养。愈伤组织诱导率及绿苗分化率均以冷处理20天为最高。如温度降低则处理时间相应缩短。另外不同材料对冷处理的最适时间温度也稍有不同。正交试验结果表明,冷处理对花药培养效率的影响远比培养基的效率大。组织学观察表明,低温预处理能提高花药离体培养成活率,促使更多花粉细胞分裂发育成多细胞团。     

影响小麦愈伤组织发生因素的研究

研究不同基因型、外植体和培养基对小麦愈伤组织诱导和植株再生的影响,试验结果表明:以幼胚为外植体诱导愈伤组织优于成熟胚;含2mg/L2,4-D的MS培养基诱导愈伤组织优于含0.5mg/L2,4-D的MS培养基;潍麦9品种诱导愈伤组织比鲁麦21和烟农15的频率高。     

低温对小麦花培愈伤组织绿苗分化率的影响

小麦花药培养的技术关键在于提高花粉植株诱导率。花粉植株诱导率由花药愈伤组织诱导率和愈伤组织绿苗分化率共同决定。本试验以12个不同小麦杂交组合的F2代为材料，研究了在转愈初期短期低温处理对小麦愈伤组织绿苗分化率的影响。结果表明，在转愈伤组织初期，采用了4℃和6℃低温培养1～3d能大幅度提高小麦花培愈伤组织绿苗分化率，提高育种效率。     

日本落叶松体细胞胚胎发生的研究

[目的]对日本落叶松体细胞胚胎发生进行系统研究。[方法]以日本落叶松5个品种的未成熟合子胚为外植体,研究基本培养基、品种基因型、杂交系和纯系品种对日本落叶松愈伤组织诱导的影响,以及ABA对体细胞胚成熟及植株再生的影响。[结果]通过对日本落叶松胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚的成熟培养获得再生植株。2种基本培养基中,DCR对胚性愈伤组织的诱导频率最高,达54.0%;落叶松品种之间的愈伤组织诱导率有差异,以杂交品种愈伤组织的诱导率最高,达71.4%,优于纯系的落叶松品种（27.3%～50.0%）;在体细胞胚的成熟培养过程中,ABA可严重影响体细胞胚的发育,并影响到其以后的萌发能力和植株再生。[结论]杂交品系更有利于胚性愈伤组织诱导,ABA对日本落叶松体细胞胚胎发育起重要作用。     

天台铁线莲愈伤组织诱导研究

以浙江省特有种天台铁线莲为材料,研究了不同培养基、不同外植体和不同激素配比对其愈伤组织诱导的影响.筛选结果表明:MS为诱导愈伤组织的最适培养基;嫩茎的出愈率高、愈伤组织体积大,为愈伤组织诱导的最佳外植体;诱导嫩茎产生愈伤组织的最佳培养基为MS+BAP(苄氨基嘌呤)1.0 mg/L+NAA(萘乙酸)0.3 mg/L.     

禾谷镰刀菌毒素对小麦花药培养特性的影响研究

用不同浓度的禾谷镰刀菌毒素对离体培养的小麦花药进行胁迫。结果表明,在低浓度(质量浓度)时毒素具有类激素活性效应,能够促进小麦花药组织脱分化,形成愈伤组织;高浓度时毒素表现毒害作用,抑制花药的脱分化和愈伤组织的形成。当毒素质量浓度大于0.5g/L时,随着胁迫浓度的增加,毒素的毒害作用增强,小麦花药的脱分化和形成愈伤组织的能力迅速下降,表现在降低花药反应率和愈伤组织诱导率2个方面。同时毒素的这种效应,因供试材料基因背景的不同而有一定差异。比较而言,含感病基因的杂种花药对毒素敏感。     

麦芽糖对小麦花粉愈伤组织诱导和分化的影响

通过在小麦花药培养基中添加麦芽糖的试验,发现含有麦芽糖的诱导培养基对小麦花粉愈伤组织的诱导有明显的影响,这种影响不依赖于培养基中麦芽糖的绝对含量,而取决于培养基中蔗糖与麦芽糖的配比(Su/Ma),麦芽糖与9％蔗糖的最适配比浓度为1％～2％,诱导率比对照高126％～138％.诱导、分化培养基中同时附加一定量的麦芽糖,小麦花粉愈伤组织的绿苗分化率明显提高,在本研究的最优组合中,绿苗分化率比对照提高了22.5个百分点。     

小麦花药培养中的密度效应研究

采用不同培养容器和接种密度进行小麦花药培养 ,研究了小麦花约培养中的密度效应。结果表明 ,小麦花药培养中的愈伤组织诱导效率与培养容器大小无关 ,与花药接种密度显著相关 ;当花药密度达到一定范围之后 ,能够显著提高小麦花药培养中愈伤组织的诱导频率。在密度为 4.8和 6 .4枚 / m L时 ,小麦花药组织反应率、愈伤组织诱导率和 ACRC值均比在 0 .8～ 3.2枚 / m L下显著提高     

影响旱作小麦高效花药培养的因素

通过不同处理和多种影响因素对不同类型小麦花药培养效应的比较研究表明,旱作春小麦花药培养愈伤组织诱导率和绿苗分化率均存在显著的基因型差异,其中以普通小红麦诱导率最高,达8.12 %,八倍体小黑麦中以20-1528诱导率最高,达7.71 %。诱导培养基中2, 4-D、水解乳蛋白和蔗糖之间的适宜配比为:2.0∶0.5∶90(g/L);而在分化培养基中的适宜配比为:0∶0.5∶70(g/L)。对花药进行2 d低温预处理和32 ℃高温培养具有较高的花药愈伤诱导率,分别达7.6 % 和6.58 %。     

小麦花药培养效率的影响因素研究

【目的】研究影响小麦花药培养特性的因素,优化小麦花药培养条件,提高小麦花药培养效率。【方法】以10个普通小麦品种(系)及其16个杂交F₁代花药为材料,研究了普通小麦基因型、基本培养基种类及低温预处理时间、诱导培养基附加脯氨酸和硝酸铈对小麦花药培养特性的影响。【结果】不同基因型小麦花药培养特性差异较大,供试基因型的花药反应率与愈伤组织诱导率相关性高,而两者与绿苗分化率无相关性。荔高6号×置丰0502 F₁、周麦16×BI0452 F₁、烟农19×开麦18 F₁、豫麦69×新麦208 F₁、煤生0308和皖麦41×烟农19 F₁有较高的绿苗产率;基本培养基种类对供试小麦花药愈伤组织诱导率、反应率、绿苗产率有显著影响,对绿苗分化率影响不显著,癸培养基小麦花药培养特性总体优于C₁₇培养基;小麦花药低温预处理时间以0.5 d最佳;在诱导培养基中加入3.0～4.5 mg/L硝酸铈后,小麦花药愈伤组织诱导率提高83%～430%,绿苗产率提高82%～557%;600 mg/L的脯氨酸可以使小麦花药的愈伤组织诱导率提高118%,绿苗产率提高222%。【结论】选择花药培养特性好的基因型、对花药低温预处理0.5 d、在癸诱导培养基中添加4.5 mg/L硝酸铈和600 mg/L脯氨酸,可大幅度提高小麦花药的培养效率。     

黑龙江7个春麦小麦品种幼胚愈伤诱导和植株再生研究

选用来自黑龙江的7个不同基因型小麦品种,以幼胚为外植体,MS为基本培养基,通过选用不同浓度的激素和有机物,设计了4种诱导培养基和10种分化培养基,研究不同基因型在不同培养基上愈伤诱导及植株再生能力。结果显示,7个不同基因型小麦在MS4诱导培养基上均具有较高的愈伤诱导率,平均达92.7%,其中“农麦30”愈伤平均诱导率高达94.4%。不同分化培养基下出芽率与基因型显著相关,不同基因型有不同的最适分化培养基。农麦30和农麦12受激素的种类和量影响较小,10种分化培养基上的出芽率都在较高的水平上,是良好的转基因材料。     

小麦成熟胚高频再生基因型筛选及再生体系研究

以目前生产上主栽或主推的、具有优良农艺性状的18个黄淮麦区冬小麦品种(系)和2个西北春麦区春小麦品种为材料,对它们成熟胚再生能力进行比较,从中筛选出再生频率高的基因型,并探讨不同接种方法、麦草畏质量浓度、细胞分裂素和干燥处理等对小麦成熟胚愈伤组织诱导和分化频率的影响。结果表明,小麦成熟胚愈伤组织诱导率普遍较高,为66.7%～100.0%,而分化率普遍较低,为3.6%～35.8%。基因型间差异显著,其中愈伤组织分化率较高的基因型有泛麦8号、周麦27和邢麦6号,绿苗分化率超过30%;采用胚十字形切割法接种小麦成熟胚愈伤组织分化率较高,达到54.5%～73.3%;诱导培养基中麦草畏的诱导效果显著优于2,4-D。在麦草畏质量浓度为2～4mg/L时有利于愈伤组织诱导和分化;成熟胚愈伤组织转入不含激素或含有2mg/L 6-BA或KT的分化培养基中时,分化率分别达到38.5%,45.8%和37.0%,较其他细胞分裂素和质量浓度处理分化率高,而愈伤组织分化前干燥处理6h和未干燥处理的差异不显著,干燥12h分化率明显降低。     

基因型对小麦花药培养的影响研究

为研究基因型如何影响小麦花药培养力,对几组单一亲本相同的组合F1基因型花药培养力进行了比较.结果表明:各组单一亲本相同的组合中,另一亲本的不同对愈伤诱导率、绿苗产率、绿苗分化率及白苗分化率均有很大影响.有的组配愈伤诱导率较低甚至为0,但相同亲本的其他组配却具有较高的愈伤诱导率;绿苗产率与愈伤诱导率基本具有相同的趋势,但有的组配愈伤诱导率较高,绿苗产率则相对较低,说明愈伤诱导率与绿苗产率之间没有显著的规律性.各组组合中,多数组合绿苗分化率高于白苗分化率,也有的组合具有较高的白苗分化率而绿苗分化能力很弱,说明不同组合分化绿苗和白苗的能力有所不同.因此,在花药培养时,应尽量选择绿苗分化率较高、白苗分化率较低的组配.     

基因型及外源因子对小麦花药培养一步成苗的影响

研究了不同基因型及几种外源因子在小麦花药培养一步成苗中的效应。结果表明 ,花药培养一步成苗的愈伤组织诱导率、绿苗分化率、白苗分化率及绿苗产量存在基因型间的差异。高蔗糖浓度有利于获得高频率的花药愈伤组织 ,但同时又提高了花药培养中白化苗频率。动力精 (KT)对花药愈伤组织诱导率影响的差异不大 ,但对绿苗分化率、绿苗产量及绿苗 /白苗 (G/ W)均有显著影响。在试验浓度范围内 ,随 KT浓度的增大 ,绿苗产量提高 ,绿苗分化率明显增加 ,而白苗分化率下降 ,因而 G/ W值明显增大。说明 KT主要是通过提高绿苗分化率和降低白苗分化率 ,增大 G/ W而提高花培一步成苗效率的。在与 KT的配合使用中 ,2 ,4 - D比 NAA更有利于提高小麦花药培养中的愈伤组织诱导率和苗分化频率