DNA催化活性的研究：Ⅱ.DNA分子催化机理探讨

通过乙酸萘酯水解产物的显色反应，研究了ＤＮＡ分子二级结构对催化萘酯水解活性的重要性，结果表明：双链ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）分子具有良好催化乙酸－α－萘酯、乙酸－β－萘酯水解的活性，而单链ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）则完全不具备这种活性，ＤＮＡ完全酶解产物也不能使α－萘酯产生显色反应。因此认为，ＤＮＡ分子是具有催化活性的生物高分子。从ＤＮＡ二级结构角度探讨了其催化萘酯水解的反应机理。     

水稻浸胚法外源DNA导入过程中DNA分子降解研究

以湘早籼８号为受体材料，以易于大量获得的鲤鱼精液ＤＮＡ为分子供体，进行浸胚法ＤＮＡ导入水稻实验，研究了ＤＮＡ分子在浸胚过程中的降解情况。通过定时取样后琼脂糖凝胶电泳、紫外吸收光谱扫描分析，发现水稻胚在浸泡过程中能主动降解外源ＤＮＡ分子，４８ｈ后大部分ＤＮＡ分子被降解成小分子片段、单磷酸脱氧核苷酸、碱基甚或无机成分；紫外吸收光谱扫描发现２２０～２４０ｎｍ有明显的增色效应。鉴于浸胚法诱变优势的普遍性及基因导入的固有困难，推测外源ＤＮＡ浸胚过程中降解后的成分对诱变起更大的作用。     

被子植物叶绿体基因及其表达

本文简要综述了叶绿体ＤＮＡ分子结构、叶绿体基因的功能及其表达产物。着重阐述了被子植物叶绿体ＤＮＡ与细胞质雄性不育的关系；借助ｃｐＤＮＡ限制性片段分析，许多学者认为由于ｃｐＤＮＡ分子的缺失、突变或插入，叶绿体ＤＮＡ可能涉及到ＣＭＳ的产生，为了得到ｃｐＤＮＡ在ＣＭＳ中起作用的肯定性结论和在分子水平上解释被子植物细胞质雄性不育的机理，作者提出了应该进一步采取的措施。     

生物工程技术在化学除草中的应用

生物工程技术在化学除草中的应用●东北农业大学苏少泉７０年代中期，生物科学发生了革命，１９７３年第１次应用载体进行了Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ的ＤＮＡ分子重组，利用质粒将ＤＮＡ导入活细胞中进行基因克隆、分离、提纯并测定ＤＮＡ顺序；进而，在植物分子...     

分子标记技术在植物遗传育种中的应用

以ＤＮＡ核苷酸多态性为基础的分子标记技术，在ＤＮＡ分子水平，实验室条件下，揭示性状的遗传差异，为遗传研究提供了有力手段。本文对ＲＦＬＰ和ＲＡＰＤ等分子标记技术原理及其在植物遗传育种中的应用作一综述。     

DNA损伤,修复与突变的研究进展

ＤＮＡ分子是生物细胞中易受辐射损伤的敏感分子或称靶分子。ａ射线，Ｘ射线，ｒ射线、紫外线等辐射因子对ＤＮＡ结构造成的任何改变都可能导致细胞突变、癌变甚至死亡。电离辐射诱ＤＮＡ损伤主要有碱基损伤、单链断裂、双链断裂等。     

玉米YⅡ－1型不育胞质线粒体DNA（mtDNA）的摄取和电镜观察分析

提取黑暗中培养的玉米黄化苗线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ），通过琼脂糖凝胶电泳，发现不育胞质线粒体ＤＮＡ组成与不育胞质Ｓ群有显著差异，与Ｔ群差异较小，与Ｃ群相似。电镜观察ＹⅡ－１型不育胞质线粒体ＤＮＡ时，出现包括线性和环状的ＤＮＡ分子。     

玉米YⅡ—1型不育胞质线粒体DNA（mt DNA）的摄取和电镜观察分析

提取黑暗中培养的玉米黄花苗线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ），通过琼脂糖凝胶电泳，发现不育胞质线粒体ＤＮＡ组成与不育胞质Ｓ群显著差异，与Ｔ群差异较小，与Ｃ群相似。电镜观察ＹⅡ－１型不育胞质线粒体ＤＮＡ时，出现包括线性和环状的ＤＮＡ分子。     

植物总DNA和核DNA提取及其纯度的研究

采用氯仿－异戊醇－ＲＮＡ酶法及其改良法从小麦、燕麦黄化苗和大豆胚轴中提取植物总ＤＮＡ和核ＤＮＡ，结果表明：ＤＮＡ纯度Ａ２６０／Ａ２８０≥１．８０，Ａ２６０／Ａ２３０≥２，００，ＤＮＡ片段为５０Ｋｂ左右，均符合ＤＮＡ分子育种的要求。     

DNA指纹分析在植病真菌群体遗传研究中的应用

在总结植物病原真菌遗传标记的应用发展过程基础上，着重以重复序列为基础的ＤＮＡ分子标记的应用，综述了近年来ＤＮＡ指纹分析在植物病原真菌群体遗传分析中的应用。还简要讨论了群体遗传分析对植物病理学的深远影响     

褐点粉灯蛾核型多角体病毒的研究一核酸的纯化和特性

我国对灯蛾科昆虫病毒研究甚少,文献记载仅有二种;美国白蛾(Hyrhantria cunea)核型多角体毒病,红缘灯蛾（Amsacta lactinca)颗粒体病毒研究仅限于病毒形态观察及生物学特性等方面,而对于病毒核酸的研究均未见报道。     

Iron(II) EDTA used to measure the helical twist along any DNA molecule

A new method has been devised to measure the number of base pairs per helical turn along any DNA molecule in solution. A DNA restriction fragment is adsorbed onto crystalline calcium phosphate, fragmented by reaction with iron(II) EDTA, and subjected to electrophoresis on a denaturing polyacrylamide gel. A modulated cutting pattern results, which gives directly the helical periodicity of the DNA molecule. A 150-base pair sequence directly upstream of the thymidine kinase gene of the type 1 herpes simplex virus was found to have an overall helical twist of 10.5 base pairs per turn, which is characteristic of the B conformation of DNA. In addition, purines 3' to pyrimidines showed lower than expected reactivity toward the iron cutting reagent, which is evidence for sequence-dependent variability in DNA conformation.     

分子标记技术在番茄抗性育种中的应用

介绍了DNA分子标记的各种类型,RFLP、RAPD、SSR、AFLP和SNP标记是植物遗传作图最常用的,介绍了各种类型的使用范围以及优点和缺点。综述了近年来DNA分子标记技术在番茄抗性育种中的应用,包括耐冷性,耐盐性,抗病性,抗虫害等方面的应用,并就今后番茄分子育种主要研究方向进行了讨论。     

Mitochondrial-satellite and circular DNA filaments in yeast

Mitochondrial DNA of Saccharomyces cerevisiae contains a satellite DNA (density, 1.682) that appears to exist as open-ended filaments at least 5 microns long. DNA from intact cells contains circular filaments whose lengths vary from 0.5 to 7 microns, with a great majority at 1.95 microns. The circular DNA has a density similar to that of the major nuclear peak (1.697). When heat-denatured mitochondrial-satellite DNA is renatured, it cross-links to form a molecule that is larger than the native molecule. The formation of cross-links results in hypersharpening of the density profiles in cesium chloride and also leads to failure to pass Millipore filter paper.     

两种检测扁桃基因组RAPD扩增产物方法的比较分析

通过2;(w/v)的琼脂糖凝胶和8;(w/v)的聚丙烯酰胺凝胶电泳对扁桃品种基因组DNA的RAPD检测.结果表明:8;(w/v)聚丙烯酰胺凝胶优于2;(w/v)琼脂糖凝胶,主要表现在,8;聚丙烯酰胺凝胶对长度相差100 bp以下的DNA分子的分离较2;的琼脂糖凝胶电泳效果好;且8;聚丙烯酰胺凝胶的分辨范围广,在线性DNA分子(0.1～2.0 kb)范围内也能得到很好的分离效果;用8;的聚丙烯酰胺凝胶分离扁桃品种基因组DNA的RAPD扩增结果,表现出在扁桃品种间DNA水平上差异大,运用此方法提高了扁桃品种的鉴别能力.     

一种适宜PCR检测的番茄DNA微量提取方法

通过比较DNA微量提取方法和3种常规提取方法得到的DNA质量和PCR扩增结果,找到一种适用于番茄PCR技术的快速、简单、成本低的DNA提取方法。该方法的材料不用液氮,避免使用酚类、氯仿等有毒试剂,可以单人大批量提取,并在番茄分子标记辅助育种中能稳定而准确的规模化PCR检测。     

基于棉花BAC文库的线粒体DNA的提取方法

以棉花的黄化苗为材料，根据棉花自身的特点，利用差速离心的方法分离线粒体后再经低熔点琼脂糖包埋裂解提取了完整的mtDNA。其质量完全可以满足BAC文库构建中限制性酶切、PCR检测、分子杂交筛选等实验的要求。     

Action at a distance along a DNA

A number of ways are known by which an event at one location on a DNA molecule can affect an event at a distant location on the same molecule. Three classes of mechanisms are described for such distal actions: tracking or translocation of a protein along a DNA, the association of two proteins bound at separate sites to form a DNA loop in between, and distal interactions that are affected by the topology of the DNA. The basic characteristics of each type of mechanism are discussed in terms of the known physicochemical properties of DNA. The various modes of action at a distance are often interrelated. Examples include the formation of positively and negatively supercoiled DNA loops by tracking and the strong effects of DNA topology on looping.     

转基因康乃馨Moonlite品系检测用质粒标准样品研制

截至2020年底,国际上已有19种转基因康乃馨品系进入商业化种植。为了实现转基因康乃馨的有效检测监管,研制检测标准样品十分必要。目前,国际上还没有该类标准品的相关报道。为此,本文研制了商业化时间最长、种植量较大的转基因康乃馨Moonlite品系质粒标准样品,使其与转基因康乃馨检测技术标准的应用相配套,为口岸转基因产品的检测监管提供必要的技术支撑。首先,将康乃馨内源ANS基因1 279 bp片段和转基因康乃馨Moonlite品系406 bp 5'端特异性序列分别插入到pcDNA3.0载体的酶切位点和距离1 kb以上的多克隆位点上,合成质粒DNA标准样品。后将质粒DNA标准样品进行稀释、分装,对其均匀性、最小取样量和短期、长期稳定性等进行测定,采用数字PCR方法对质粒DNA标准样品进行定值,并进行不确定度评估。质粒DNA标准样品pLite经全基因组测序,与公开发布的序列完全一致。均匀性实验结果表明,分别以ANS基因和Moonlite品系特异性序列为目标进行测定,F值分别为1.61和1.14,均小于95%置信区间的F值,质粒DNA标准样品足够均匀。质粒DNA标准样品的最小取样量为2 μL。稳定性实验结果表明,质粒DNA标准样品pLite在45 ℃高温条件下,可稳定保存14 d;在26 ℃及以下温度条件下,可稳定保存1个月,在4 ℃及以下温度可稳定保存6个月,说明质粒DNA标准样品适宜运输。质粒DNA标准样品在反复冻融25次后,拷贝数浓度无显著变化。定值结果表明,质粒DNA标准样品pLite中康乃馨内源ANS基因拷贝数的参考值为(6.13±0.22)×10⁶ μL^-1,Moonlite品系特异性序列拷贝数的参考值为(6.10±0.24)×10⁶ μL^-1。研制的质粒DNA标准样品pLite具有良好的均匀性和稳定性,获得国家标准样品证书后,可用于转基因康乃馨Moonlite品系的检测。     

荧光原位PCR定位动物精子介导转移的外源基因

用荧光原位PCR对经体外介导外源基因转移方法处理的家畜精子进行检测。结果证实,牛,山羊和绵羊的精子在一定条件下能够携带所转移的外源基因,其平均转移效率分别为：绵羊27.12%,牛31.16%,山羊30.57%,同时发现外源基因已进入精子细胞内并位于核及其外围区域。