复方中草药及其与抗生素联用对斜带石斑鱼溶藻弧菌病的治疗效果

通过药物体外抑菌效果及对斜带石斑鱼抗病力影响的研究,筛选有效治疗斜带石斑鱼溶藻弧菌病复方中草药与中西药联用配方。用诃子、白芍、甘草比例分别为0.9∶1.3∶0.9、1.2∶0.9∶1.0和1∶1∶1的复方中草药对溶藻弧菌进行体外抑菌实验;将质量分数为2.2%的复方中草药与中西药联用添加到基础饲料中设为实验组,研究中西药对斜带石斑鱼溶藻弧菌病治疗效果。复方中草药实验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ为投喂饲料中添加不同比例诃子、白芍、甘草,中西药联用实验组Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ分别为投喂饲料中添加不同比例诃子、白芍、甘草、恩诺沙星。结果显示,复方中草药配方二药物质量浓度200 mg/mL,为最佳配方。40 d病鱼死亡数量比较结果为对照组Ⅱ对照组Ⅳ对照组Ⅲ实验组Ⅲ实验组Ⅱ实验组Ⅰ实验组Ⅴ实验组Ⅵ实验组Ⅳ对照组Ⅰ。实验组Ⅰ投喂饲料加诃子、白芍、甘草比例为0.9∶1.3∶0.9的复方中草药,实验组Ⅳ配方为诃子、白芍、甘草、恩诺沙星比例为0.9∶1.3∶0.9∶1.3,分别为治疗斜带石斑鱼溶藻弧菌病效果最好的复方中草药和中西药联用配方。研究表明,中西药联用复方药效强于复方中草药,均能较好治疗斜带石斑鱼溶藻弧菌病。     

斜带石斑鱼病原菌(哈维氏弧菌)的分离与鉴定

从患病斜带石斑鱼 (Epinepheluscoioides)肝脏组织分离到EcGY0 2 0 4 0 1菌株 ,经人工感染、回归感染实验证实为致病菌。通过API系统和菌体常规形态特征、培养特性和生理生化反应指标测定以及 16SrRNA测序分析等综合鉴定 ,Ec GY0 2 0 4 0 1菌株为弧菌属哈维氏弧菌 (Vibrioharveyi) ,其半致死剂量LD50 为 2 .7× 10 6CFU/g鱼体重。药敏试验结果表明 ,EcGY0 2 0 4 0 1菌株对利福平、四环素、喹诺酮类及头孢曲松等抗生素较为敏感     

梭子蟹溶藻弧菌病的初步研究

2005～2006年,昌邑池塘养殖梭子蟹发生被称为"牙膏病"的疾病,并导致大量死亡。发病时间主要在7～9月份的高水温期,病蟹典型症状是肌肉白浊、无弹性、呈不透明的乳白色。从病蟹的肌肉、肠道、胃、眼球、肝胰腺均分离到单一形态的微生物,经生理生化鉴定为溶藻弧菌。人工感染实验发现,其对健康梭子蟹具有致病性,出现与自然发病蟹相同的症状,并在人工感染病蟹中分离出同样性状的菌株,证实其为该病病原菌。     

副溶血弧菌对斜带石斑鱼血清中一氧化氮合酶活力的影响

为了研究感染副溶血弧菌对斜带石斑鱼体内一氧化氮合酶活力的影响 ,分别对斜带石斑鱼腹腔注射浓度为 5× 10 8cfu/ml、5× 10 7cfu/ml、5× 10 6cfu/ml的副溶血弧菌悬浮液 ,在注射后 2 4h、4 8h、72h、12 0h和 192h尾部取血 ,测定其血清中NOS活力的变化情况。结果表明 ,注射副溶血弧菌后斜带石斑鱼血清中NOS活力显著高于对照组 ,并且高浓度组NOS活力显著高于低浓度组 ,证明注射副溶血弧菌可以诱导斜带石斑鱼体内NOS活力的升高。     

云芝多糖和副溶血弧菌灭活苗对斜带石斑鱼免疫功能的影响

采用注射云芝多糖和副溶血弧菌灭活苗的方法免疫斜带石斑鱼后,测定了受免鱼的吞噬细胞的吞噬活性、杀菌功能和免疫保护率。结果表明,云芝多糖组在第3天,吞噬细胞的吞噬百分比(PP)达到峰值(90%),显著高于对照组(P0.05),然后开始下降,到第7天即与对照组相当(P0.05);30 m in和60 m in的杀菌率显著提高(P0.05)。灭活苗组和云芝多糖+灭活苗组的PP值和杀菌率显著高于对照组(P0.05),并维持在较高水平,但2组之间差异不显著(P0.05);用副溶血弧菌攻毒后,斜带石斑鱼的免疫保护率达87.6%。由此可见,灭活苗不仅能提高斜带石斑鱼的特异性免疫力,而且也能增强吞噬细胞的吞噬和杀菌活性等非特异性免疫力。     

臭氧对斜带石斑鱼胚胎发育和初孵仔鱼的毒性效应

为了评价臭氧消毒技术及其对石斑鱼(Epinephelus)潜在的毒性, 首先评价了两种质量浓度(0.05 mg/L和0.30 mg/L)臭氧对亚硝酸盐和弧菌的水处理效果, 并以斜带石斑鱼(E. coioide)受精卵为实验材料, 探讨臭氧对胚胎发育和初孵仔鱼的毒性作用。结果显示, 臭氧的水处理效果良好, 0.30 mg/L的臭氧在3 h内对水中亚硝酸盐的去除率可达72.29%; 0.05 mg/L的臭氧处理20 min后也能完全杀灭弧菌。但高浓度臭氧(0.30 mg/L)对胚胎发育具有一定的毒性, 会造成胚胎油球数目增多、萎缩、解体和死亡, 而低浓度组(0.05 mg/L)臭氧处理后22 h胚胎孵化率高达(87.14±7.20)%, 与对照组无显著差异。与胚胎相比, 初孵仔鱼对臭氧更加敏感, 0.05 mg/L的臭氧处理24 h也会导致初孵仔鱼的全部死亡。本研究结果旨在为石斑鱼育苗及养殖过程中正确使用臭氧消毒技术提供重要的数据参考和理论依据。

     

溶藻弧菌引起虾病暴发的病原学研究

<正> 副溶血弧菌 Vibrio Parahaemolyticus和溶藻弧菌 V.alginolyticus 均能引起食物中毒、创伤感染和败血症等,引起对虾致病也曾有报道。但对弧菌的生物学特性作系统研究的资料在水产方面的杂志上还很少报道。1990年5月28日,位于象山港末端大佳何高湖塘养殖场的5号、24号塘内的对虾突然发病,103亩虾塘内110万尾对虾毁于旦夕,同时在其他塘内也发现了同样的疾病。作者于5月30日应邀去现场进行残活病虾的检验,发现肝脏发白或呈棕灰色,肌     

一株斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）病原菌的分离与鉴定

2011年7月,福建省晋江某养殖场养殖的斜带石斑鱼( Epinephelus coioides )发病,病鱼体重3~10 g,症状为鱼体色变深,拒食,离群缓慢游动,背鳍下方局部鳞片脱落、表皮溃烂,肝脏点状发红。2011年7月从濒死病鱼肝脏、肾脏中分离到2株细菌,分别命名为201107-I与201107-II,经生理、生化指标和16S rRNA 基因鉴定,这两株均为哈维氏弧菌( Vibrio harveyi )。毒性实验发现这两株菌都能引起斜带石斑鱼表皮溃烂症,其中201107-II毒性较强,被用于后续感染实验。通过肌肉注射、腹腔注射与创伤浸浴3种方式进行回归感染实验,得到3种方式对石斑鱼的半致死量LD50分别为4．3×104、2．9×105和5．4×106 cfu/g鱼体重。从人工感染的石斑鱼肾脏中再次分离到该菌,经生理、生化指标和16 S rRNA 基因鉴定,为同株菌。药敏实验结果表明,该菌株对红霉素、大观霉素、氯霉素等16种抗生素高度敏感,对呋喃唑酮、克拉霉素、环丙沙星等9种抗生素中度敏感,对苯唑西林、青霉素G、万古霉素等13种抗生素不敏感。本研究对石斑鱼病害防治与健康养殖具有一定的指导意义。     

斜带石斑鱼池塘生态育苗技术

本文主要介绍了斜带石斑鱼池塘生态育苗技术操作要点,并对育苗过程中的几个常见问题做了简要综述。     

斜带石斑鱼消化系统胚后发育的组织学研究

利用形态学和连续组织切片技术，对出膜后1-60d的斜带石斑鱼各期仔鱼、稚鱼和幼鱼的消化系统进行了光镜观察，描述了其消化器官发育过程和组织学特性。研究表明，实验水温为22.0-27.8℃时，孵化后第4天，上下颌形成，卵黄囊被吸收，消化系统明显分化成食道、胃、肠、直肠以及肝脏、胆囊和胰脏等，鱼体由内源性营养转向外源性摄食营养，表明其消化系统的形态变化与食性的变化相适应。此后随着鱼体的生长，其消化系统从功能和结构上逐步完善成熟。胰脏在出膜后第4天出现，是和肝脏相互分开的一个独立的器官，但是发育到第35-60天，位于肠道后部的胰脏组织内出现许多大空泡。     

鱼源芽孢杆菌在石斑鱼稚鱼育苗中的应用研究

利用芽孢杆菌SE5和DE5单独及联合强化桡足类,研究SE5和DE5对斜带石斑鱼稚鱼生长、存活率、水质及水体和稚鱼体内细菌总数和弧菌数量的影响。试验结果表明,饲养14d时,SE5组和DE5组体长显著高于对照组,混合组体长和体质量显著高于对照组。饲养28d时,SE5组和DE5组体长和体质量均高于对照组,混合组体长和体质量显著高于对照组。饲养28d时,SE5组和DE5组存活率显著高于对照组。14d时SE5组和混合组水体NH3-N显著低于对照组,28d时各组NH3-N均低于对照组。14d时,混合组水体NO2-N显著高于对照组,28d时各试验组NO2-N均显著高于对照组。试验结束时(28d),各试验组水体细菌总数均高于对照组,SE5组和DE5组水体弧菌数量高于对照组;DE5组和混合组活饵细菌总数高于对照组,各试验组活饵弧菌数量高于对照组,其中混合组显著高于对照组;各试验组稚鱼体内细菌总数高于对照组,其中DE5组显著高于对照组。DE5组稚鱼体内弧菌数量显著高于对照组,SE5组高于对照组。     

Temporal genetic heterogeneity of juvenile orange-spotted grouper (Epinephelus coioides, Pisces: Serranidae)

Juveniles of orange-spotted grouper ( Epinephelus coioides ), a tropical serranid species, are heavily harvested for aquaculture seeds from nursing grounds in several Southeast Asian countries. Because juveniles of similar sizes are present in a nursery area throughout the year, we aimed to determine whether more than one genetically distinct population contributes to juvenile aggregations. We examined the temporal genetic heterogeneity of juvenile aggregations collected at four different times of the year at a nursery area in coastal waters of the Andaman Sea in Trang province, Thailand. Also, we examined the differences between these temporal samples and an outgroup collected from the Gulf of Thailand (Chantaburi). The genetic variation at six polymorphic microsatellite loci within each sample was moderate, with observed heterozygosities across all loci ranging from 0.551 to 0.629 and number of alleles per locus ranging from 7.0 to 8.33. Results indicated substantial genetic differences between the two geographically distant samples, Trang and Chantaburi (F_st=0.040–0.050, P <0.005), and between the July sample and the remaining samples from Trang (F_st=0.096–0.106, P <0.005). The observed temporal genetic heterogeneity of E. coioides juveniles may reflect high variability in the reproductive success of each spawning event and the existence of spatially isolated groups of spawners.     

饥饿对斜带石斑鱼肝脏和肌肉脂肪酸组成的影响

在室外水泥池(4m×1.5m×1m)进行石斑鱼(62.3±0.6g)的饥饿实验,每池放养35尾,设3个重复,实验时间分别为0、1、2、3和4周。随着饥饿时间的延长,体重减轻,肥满度和肝体比显著降低;肌肉水分显著增加而蛋白质含量显著下降(P<0.05),脂肪含量在第1周下降后基本保持稳定。肝脏饱和脂肪酸在饥饿前3周基本保持不变,第4周显著下降。单不饱和脂肪酸在饥饿第1周保持不变,然后呈下降趋势。多不饱和脂肪酸和高不饱和脂肪酸的总和随着饥饿时间的延长,含量显著增加。与肝脏相比,肌肉中脂肪酸变化程度较小。随着饥饿时间的延长,肌肉中140减少而205增加。饥饿使肌肉中DHA/EPA比率呈下降趋势,但肝脏DHA/EPA比率显著上升;肌肉和肝脏中DHA EPA的百分比都随饥饿时间的延长而显著上升。     

Cryopreservation of sperm from natural and sex-reversed orange-spotted grouper (Epinephelus coioides)

The shortage of males and/or sperm has been an impediment to the aquaculture of orange-spotted grouper (Epinephelus coioides). This study reversed orange-spotted grouper females into males using hormone implants. A cryopreservation protocol for sperm was developed using normal males, and then using similar procedures the cryopreservation of sperm from sex-reversed males was compared. Immature, young and mature female fish were injected with 4 mg kg⁻¹ BW 17α methyltestosterone as implants and the gonad development stage was monitored over a 120-day period. All treated females converted into functional males within 120 days of the experimental period. Younger females (2Y) were all males within 30 days, although not all were capable of fertilizing fresh ova until day 60. The time after injection to sex reversal in immature fish was 50% shorter than in older females. Postthaw fertilization (81%, 82%) and hatching (45%, 47%) of cryopreserved sperm from natural males were the highest in trehalose (15–20%) with 150 mmol NaCl treatment; however, it was less than the control (89% fertilization and 69% hatch). There was no difference in the postthaw fertilization and the hatch percentages between sex-reversed male sperm (64% and 46% respectively) compared with natural male sperm (59% and 49%). The findings of this study suggest the potential use of sex-reversed males and cryopreserved sperm for commercial production of orange-spotted grouper seed for aquaculture.     

石斑鱼人工育苗技术研究

通过对点带石斑鱼人工育苗生产试验,从饵料准备、环境条件控制、管理措施等方面进行了探索。共培育出规格5～8cm的石斑鱼苗60多万尾。     

深水抗风浪网箱斜带石斑鱼生长研究

研究深水抗风浪网箱养殖斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)的生长特性。经过125 d的养殖,斜带石斑鱼体重由15.2 g增加到102.8 g,平均日增长率为4.610%,体重和时间的关系式为M=12.247e0.014 7 t;全长由9.67 cm增加到19.36 cm,平均日增长率为0.802%,全长与时间的关系式为L=0.063 7 t+9.186 3;体重和全长的关系式为M=0.012 7 L3.051 1。