包埋-脱水法常温和常低温保存条斑紫菜自由丝状体

用包埋-脱水法在常温和常低温下保存条斑紫菜自由丝状体,探讨了温度、光(暗)和含水量等因素对存活率的影响.结果表明,条斑紫菜自由丝状体在常温或常低温下都可以保存6个月并保持较高的存活率;其中,4℃(暗)保存的最高存活率达到71.5%;而且保存后的丝状体的生长力达到了保存前的水平.包埋-脱水法操作简单,无需贵重设备,在藻类种质保存中有广阔的应用前景.     

酵母菌制剂保存的稳定性研究

选取3种不同浓度的酵母菌制剂(1.67×10-2、5.00×10-2、8.00×10-2 g/m L)分为试验组1、2和3,在4℃下保存360 d,每30 d取样1次,采用稀释平板法进行活酵母菌计数,检测酵母菌制剂保存的稳定性。结果表明,随着保存时间延长,试验组1、3的活酵母菌数呈下降趋势,试验组2的活酵母菌数呈先下降后升高的趋势。在第30、90、180和360天时,试验组1酵母菌存活率分别为76.27%、28.64%、20.85%和11.10%,试验组2酵母菌存活率分别为106.25%、13.63%、121.25%和101.88%,试验组3酵母菌存活率分别为126.37%、90.11%、69.78%和56.04%。可见,酵母菌制剂试验组3保存的稳定性良好,4℃条件下保存期可达到180 d以上。     

超低温处理对南瓜种子萌发的影响

分别将北京小南瓜种子在5%、10%、15%、20%的含水量,4℃、-30℃、-75℃的降温预处理,40℃温水浴、自来水冲洗、室温化冻3种解冻方式与10、20、30、60 d的保存期限条件下,进行超低温保存,然后对保存后种子的发芽率进行测定比较.结果表明,种子不同含水量、预处理温度、解冻方式和保存时间对保存效果均有显著影响.其中,在10%的种子含水量、40℃的温水浴解冻方式和大于30 d的保存时间下,南瓜种子的发芽率有了明显的提高,而不同的预处理温度均不同程度地降低了种子的发芽率.     

黑莓花粉含水量与贮藏特性的研究

用硅胶对黑莓花粉进行干燥,发现干燥4 h时花粉的含水量降为14.13%,生活力为39.16%,在该含水量下花粉的耐贮藏性最好,在-20℃贮藏120 d后,仍能保存20.35%的花粉生活力。     

高温胁迫对裙带菜配子体的生长和生理影响

以裙带菜配子体(Undaria pinnatifida)为试验材料,研究了高温胁迫对其叶绿素a含量、POD活性、脯氨酸含量、丙二醛含量的影响。结果表明:与20℃对照组相比,裙带菜配子体在高温胁迫下,试验组随着时间的增加叶绿素a含量明显下降,且30℃下叶绿素a含量的降幅明显大于25℃;丙二醛的含量随着时间的增加呈现逐渐上升的趋势,且30℃下丙二醛含量的增幅明显大于25℃;POD活性在24h时达到最低,然后略有增加;脯氨酸的含量在高温下随着时间的延长呈现逐渐上升的趋势。该研究结果为进一步揭示裙带菜抗高温分子机制和培育抗高温裙带菜新品种提供了一定参考。     

猪极体的保存研究

将从屠宰场采集的猪卵巢卵母细胞进行体外成熟培养和体外受精,得到猪第一极体和第二极体.通过形态学观察和台盼蓝染色,探讨不同保存温度(39 ℃、4 ℃、-20 ℃、-196 ℃)下猪第一极体和第二极体的存活情况.试验结果表明:随着保存温度的降低,猪第一极体和第二极体的存活率随之升高.第一、二极体在39 ℃条件下大都在几小时内发生退化;4 ℃条件下保存40 h存活率为70%～80%;-20 ℃保存7 d时存活率达90%以上;而在液氮中保存1个月时,第一极体和第二极体的存活率仍接近90%.     

包埋-脱水法常温和低温下保存盐生杜氏藻的研究

用包埋-脱水法在常温和低温保存盐生杜氏藻（Dunaliella salina）,探讨了温度、光暗和含水量等因素对存活率的影响。结果表明：盐生杜氏藻在4℃下保存6个月后的最高存活率达到54．4％。保存后的藻细胞经过恢复培养后,其生长力可达到保存前的水平。包埋-脱水法操作简单,无需复杂设备,在藻类种质的中期保存中有广阔的应用前景。     

猪极体的排出与退化规律及其活性保存

哺乳动物卵母细胞二次减数分裂分别产生第一极体(PbⅠ)和第二极体(PbⅡ),极体(Pb)含有与卵母细胞相似的遗传物质。为探索猪Pb的排出与退化规律,并建立有效的Pb保存方法,从屠宰后的母猪卵巢中采集卵母细胞进行体外成熟培养及体外受精,分别对PbⅠ和PbⅡ的排出与退化规律及其在不同保存温度下的存活情况进行研究。结果表明:PbⅠ在卵泡卵母细胞体外培养40 h时排出率最高,PbⅠ在39℃条件下保存6 h形态正常率为85.5%,但存活率只有18.2%,4℃保存40 h存活率为85.0%,-20℃保存168 h存活率为95.0%,-196℃超低温保存1 344 h存活率和形态正常率分别达89.1%和97.8%。PbⅡ在卵母细胞受精后20 h排出率最高,PbⅡ在39℃条件下保存16 h形态正常率为69.0%,但存活率只有34.5%,4℃保存30 h存活率为87.5%,-20℃保存240h存活率为84.6%,-196℃超低温保存1 344 h存活率和形态正常率分别达87.0%和95.7%。     

高山红景天愈伤组织的玻璃化法保存及植株再生

采用玻璃化法对高山红景天的愈伤组织进行了超低温保存研究.高山红景天愈伤组织在8%蔗糖中暗培养5 d后,先用25℃的60%玻璃化保护剂PVS2预处理20 min,转至100% PVS2于-20℃乙醇浴中处理2 h后,投入液氮进行保存,48 h后使用40℃水浴快速化冻.冻存后的愈伤组织用液体培养基MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+40%蔗糖洗涤3次,再转入MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.5 mg/L固体培养基中在22℃条件下进行暗培养,2周后转入光照培养（光照强度800 lx）. 6周后观察到高山红景天愈伤组织呈鲜绿色,长势较为旺盛,存活率可达到78.24%.冻存后的愈伤组织可诱导成苗.      

黄帝陵古侧柏花粉生活力及其保存方法的研究

以黄帝陵千年古侧柏花粉为试验材料,用离体萌发法测定花粉的生活力,研究不同保存方法对花粉萌发率的影响,探讨花粉含水量、投入方式、化冻方式对超低温保存效果的影响。结果表明:古侧柏花粉在9%蔗糖+0.01%硼酸的培养基中离体培养4 d萌发率最高。90 d内,随着保存时间的延长,室温（20℃）保存的花粉迅速失活,低温（0℃、-20℃）保存的花粉萌发率呈逐渐下降趋势,超低温（-196℃）保存的花粉萌发率最高且保持效果最好,为古侧柏花粉长期保存的适宜方法。在超低温保存中,花粉以未经干燥、直接投入液氮、37℃恒温水浴化冻5 min保存效果最好;花粉含水量、投入方式、化冻方式之间交互效应显著。     

贮藏温度对向日葵花粉生活力的影响

为了解决向日葵杂交育种中花期不遇或远距离杂交等问题,探寻适合向日葵花粉长期贮藏的条件,以3个向日葵品种的花粉为试材,均在室温(20℃)、低温(4℃)、冷冻(液氮处理后-80℃保存)、超低温(-196℃的液氮中保存)4种温度条件下保存360 d,采用离体培养的方法,定期测定了不同贮藏时间后的花粉活力,以探索适宜向日葵花粉贮藏的温度条件。结果表明:20℃室温贮藏,花粉活力下降很快,贮藏1 d后花粉活力降至50%以下,第7 d时已基本失活,不适宜花粉贮藏;4℃低温贮藏,第10 d时花粉活力维持在50%以上,超过10 d后花粉活力快速下降,适宜花粉10 d内的短期贮藏;-80℃冷冻和-196℃超低温贮藏,至360 d时花粉活力与贮藏前相比均变化不大,适宜向日葵花粉的长期贮藏。     

高压静电场激励裙带菜配子体的生物效应研究

为获得高产的裙带菜Undaria pinnatifida品种,以优选的裙带菜DL18品系配子体为材料,采用高压静电场处理的方法,在不同电场强度(0、3.3、4.0、4.7、5.3、6.0 kV/cm)下处理一定时间(2~10min)后进行配子体的培养、采苗、育苗、海区暂养、栽培和F1代配子体的rbcL、rbcL-rbcS间隔区及部分rbcS基因(rbcL-sp-S)序列分析的研究。结果表明:在3.3~6.0 kV/cm电场强度、2~10 min处理时间范围内,随着电场强度、处理时间的增加,配子体的存活率逐渐降低,但均在95%以上;处理组与对照组雌、雄配子体的成熟率、成熟卵的受精率和受精卵的萌发率均无显著性差异(P0.05);配子体的特定生长率及幼孢子体的长度在处理组与对照组间均有显著性差异(P0.05),在5.3 kV/cm电场强度下,配子体生长最快,幼孢子体长度最大;随着孢子体的生长,处理组藻体的生长优势越来越明显,在4月份其长度和质量达到最大值,分别为(2.4~2.8)m、(1.6~2.0)kg,其中在5.3 kV/cm电场强度处理下藻体的平均长度和质量最大,分别为(2.8±0.5)m、(2.0±0.3)kg,对照组藻体的平均长度、质量分别为(2.2±0.3)m、(1.2±0.2)kg;rbcL-sp-S序列分析结果表明,该序列长度超过2100 bp,处理组与对照组的A+T平均含量为64.22%,均高于G+C含量;处理组碱基置换明显增多,同时也出现碱基缺失、插入情况;随着电场强度的增加,处理组F1代配子体与对照组F1代配子体的遗传距离逐渐增大,从0.002 4增至0.005 7,对照组F1代配子体与F2代配子体的遗传距离为0.003 3。本研究结果可为高压静电场技术应用于裙带菜种质改良和品种选育提供理论指导。     

麦穗鱼囊胚细胞的分离与冷冻保存

为了探讨麦穗鱼囊胚细胞的分离方法及其较佳的冷冻保存条件,采用胰蛋白酶酶解法和低温冷冻保存技术对麦穗鱼囊胚细胞的分离和保存进行研究。结果显示,20℃微流水条件下,受精后120 min左右麦穗鱼胚胎发育达到囊胚期;25℃条件下,0.25%胰蛋白酶作用12~18 min,麦穗鱼囊胚细胞即可脱去胚胎膜,且所获的囊胚细胞存活率可达90%以上;10%DMSO+DMEM作为冷冻储存保护液,储存于-80℃超低温冰箱中8 d,囊胚细胞存活率保持在50%以上;储存于-196℃,8 d后囊胚细胞存活力可达70%以上,储存128 d后,细胞存活率仍可保持60%以上。表明25℃、0.25%胰蛋白酶作用是较好的麦穗鱼囊胚细胞卵膜去膜条件,10%DMSO+DMEM保护液、细管和液氮(-196℃)保存囊胚细胞128 d可保持其有60%以上的存活率。     

密花石斛花粉的保存方法研究

研究了密花石斛花粉不同保存方法下的花粉寿命,并对密花石斛花粉的超低温保存技术程序进行了研究。 结果表明:1)密花石斛花粉采用室温（(27±2)℃）、冷藏（4℃）、冷冻（-20℃）保存,花粉寿命分别为5、23、17 d,超低温保存(-196℃)的花粉120 d后仍可检测到花粉萌发,且萌发率与新鲜花粉相同,超低温保存方法至少可以保存密花石斛花粉4个月;2)密花石斛花粉超低温保存的程序为新鲜花粉（含水量43.26%）直接投入液氮（LN）保存,需用时采用室温、自来水或水浴化冻即可。      

裙带菜配子体采苗及育苗的研究

报道了在１０．１５,２０℃条件下配子体生长的适宜温度为２０℃,适宜发育成熟温度为１５℃,１２０μｍ为配子体切断最适长度。采用配子体采苗方法进行了育苗实验,完成了采苗、育苗、海区暂养全过程,,出藻体长度１．０－２．０ｃｍ,幼苗密度为５８－１２０株／ｃｍ裙带菜苗种绳１００ｍ。     

保存温度对茵芋花粉活力的影响

采用正交试验研究了保存温度、保存时间对茵芋花粉活力的影响.结果表明:-20、-12、0、4、6℃及室温的6种保存温度对茵芋花粉活力的影响明显.保存30 d时,20、-12、0、4、6℃及室温下保存的花粉活力分别为64.9%、63.7%、69.8%、70.9%、46.9%、19.5%,4℃下保存的花粉活力是室温的3.64倍.-20、-12℃下保存的花粉活力随着保存时间的延长呈直线下降,0、4、6℃及室温下保存的花粉活力随着保存时间的延长呈抛物线型下降.-20、-12℃适宜花粉90 d的较长时间保存,90 d时的花粉活力分别为63.8%、62.4%;0、4、6℃适宜30 d的短期保存,30 d时的花粉活力分别为69.8%、70.9%、46.9%;室温仅适宜12 d的临时保存,12 d时的花粉活力为57.9%.     

蚕豆人工春化诱导技术研究

为了探索适宜蚕豆(Vicia faba L.)提早结荚技术体系,以大朋一寸蚕豆品种为材料,对蚕豆种子进行4、0、-4℃低温的10、20、30 d春化处理。结果表明,0℃/20 d、0℃/30 d低温处理的蚕豆从播种到青荚采收,其周期与对照相比分别提前60 d和50 d,而4、0、-4℃的10 d低温处理与对照相比无差异。0℃/20 d处理的平均单株青荚数的增加最为明显,为57个,其次是0℃/30 d为51个,分别比对照增加了17和11个。0℃/20 d低温处理的百颗鲜粒重最高为360 g,而对照组为330 g,提高了约9%。株高除了0℃/20 d、4℃/20 d偏高以外,其他组相较于对照组无明显差异。由以上结果得知,春化处理时间以20 d最好,处理温度以0℃春化的效果最好,4℃次之。     

用裙带菜孤雌生殖的幼孢子体体细胞诱导雌配子体的研究

在裙带菜雌配子体的切碎培养中,通过成熟的卵孤雌生殖获得幼孢子体,经染色体观察其染色体数为30条,而正常幼孢子体的染色体为60条。采用切除假根的方法从孤雌生殖幼孢子体体细胞中诱导出雌配子体。在设定的不同温度下,20℃下诱导5d时开始出现雌配子体,培养60d后雌配子体的诱导率达到100％;15℃下诱导5d后出现雌配子体,培养60d后的诱导率为45％;10℃下诱导45d后才开始出现雌配子体,培养60d后的诱导率仅为12％。将诱导产生的雌配子体切碎,在20℃下培养5d后开始成熟,10d后成熟率为75％,15d后成熟率达到100％,与对照组正常的雌配子体无明显差异（P〉0．05）。使用孤雌生殖幼孢子体诱导产生的雌配子体与正常雄配子体杂交,幼孢子体的形成率为88％,与正常雌雄配子体杂交的幼孢子体的形成率（92％）差异不显著（P〉0．05）。将诱导产生的雌配子体与正常雄配子体混合切碎并撒在维尼纶育苗绳上,30d后培育出藻体长度为1—2mm的裙带菜幼苗。     

文蛤保活及其营养成分的变化

确定文蛤冻结点和临界温度的基础上,研究不同温度(-2℃～0℃,1℃～2℃,4℃～6℃,15℃～20℃和24℃～26℃)条件对文蛤存活率的影响,结果表明:文蛤的结冰点在-2℃,临界温度为0℃～2℃;在1℃～2℃条件下保活效果最好,保存11d后存活率为100%。在上述5种不同的保活温度下,随着保活时间的延长,文蛤的水分、粗蛋白和粗脂肪的含量呈逐渐下降趋势,灰分含量呈上升趋势。文蛤在1℃～2℃下保活10d,水分、粗蛋白和粗脂肪含量分别下降了2.8%、22.1%和9.3%,灰分含量则相应上升了121.3%。     

黄孢原毛平革菌降解白酒糟中木质素的影响因素

考察不同温度(37℃、38℃、39℃)、时间(8 d、9 d、10 d)、含水量(55%、60%、65%)和接种量(按V/W的10%、20%、30%)组合对黄孢原毛平革菌降解白酒糟中木质素的影响。研究表明:当接种量为10%、含水量为60%,在39℃下发酵10 d,可使白酒糟中木质素降解率达到5.93%;4个因素对黄孢原毛平革菌降解白酒糟中木质素影响的主次顺序为:时间,含水量,温度,接种量;本实验条件下最优发酵组合为:时间为10 d,接种量为10%,温度为38℃,含水量为65%。