鸡柔嫩艾美球虫鸡胚继代致病力的研究

通过鸡胚系列继代已获得了变位艾美尔球虫、柔嫩艾美尔球虫及毒害艾美尔球虫的致弱虫株.我们曾对日本柔嫩艾美尔球虫进行了51代鸡胚连续培养,发现在鸡胚内的繁殖性能和对鸡胚的致死性没有变化.但接种雏鸡后,与感染的原代虫株相比,盲肠很少有严重损伤和出血,同时鸡的体重和采食量都增加.在柔嫩艾美尔球虫的子孢子中发现有 PAS 阳性颗粒,被确认为是支链淀粉。用原代虫株曾做了系列试验,发现子孢子内支链淀粉的含量与虫株的生命力和运动活性及其在宿主细胞内的发育有关。柔嫩艾美尔球虫的子孢子中的支链淀粉被认为     

鸡球虫特异性抗体检测技术研究进展

鸡球虫特异性抗体的检测，始于20世纪50年代。自此以后，许多学者对其进行了广泛而深人的研究。目前，文献报道的鸡球虫特异性抗体检测技术有近10种，主要是用于免疫机理的研究及球虫病的诊断。一、包是试验法Morita等（1972）建立了检测柔嫩艾美耳球虫血清抗体的色素试验法，这是一种补体介导致虫体溶解为基础，以柔嫩艾美耳球虫的第2代裂殖子为抗原的检测技术。纯化的裂殖子悬浮于球虫阴性的雏鸡新鲜血清中，浓度调整为每个视野20～30个裂殖子，然后分别与等量的经信比稀释的柔嫩艾美耳球虫阳性血清混合，37℃孵育1小时。通过流水将混合…     

柔嫩艾美尔球虫与肠炎沙门菌混合感染对雏鸡盲肠菌群的影响

为探讨柔嫩艾美尔球虫与肠炎沙门菌单独感染及混合感染对盲肠肠道菌群的影响,12日龄莱航鸡口服单独或混合感染柔嫩艾美尔球虫或肠炎沙门菌,18日龄通过16SrRNA Miseq高通量测序检测鸡盲肠菌群组成。结果表明,18日龄莱航鸡盲肠内主要菌群为厚壁菌门和拟杆菌门。与柔嫩艾美尔球虫或肠炎沙门菌单独感染相比,混合感染导致肠杆菌科明显增加,毛螺菌科明显减少;因此,柔嫩艾美尔球虫与肠炎沙门菌混合感染对盲肠肠道菌群的影响与两者单独感染明显不同。     

抗球虫剂对Eimeria tenella裂殖子的效力试验

利用鸡胚模型研究了三种聚醚类抗生素及七种化学抗虫剂对柔嫩艾美球虫第二代开明殖子的效果。纯化的裂殖子用抗球虫药作用30分钟，用Hank‘s平衡盐溶液洗去药物后接种10-11天龄鸡胚，2.5天后收集鸡胚中的卵囊，以卵囊形成数判断药物的效果。结果证明，除Amprolium（氨丙啉）外，大部分抗球虫剂对裂殖子是有效的。各种药物的最低有效浓度为：Lasalocid（接萨菌素）、Salinomycin（盐霉素）、Monensin（莫能菌素）、Diclazuril（杀球灵)、Halofuginone（常山酮）为10μg/ml；Robenidine(氯苯胍）、Decoquinate（乙羟喹酯）为100μg/ml；Clopidol（氯吡本分）为500μg/ml；Nicarbazin（尼卡巴嗪）为100μg/ml。药物剂量逐渐提高，裂殖子逐渐丧失其活性。当Lasalocid、Salinomycin、Monensin、Diclazuril、Halofuginone、Robenidine分别达到350、150、120、200、500和700μg/ml时，所有的裂殖子完全丧失活性。本文还比较了不同授药方法优缺点，并讨论了药物的活性期。作者认为这种技术能直接评价药物对艾美球虫裂殖子的效果。     

大量制备毒害艾美耳球虫配子体方法的研究

鸡经嗉囊接种毒害艾美耳球虫孢子化卵囊148 h后,从鸡小肠中段分离成熟的第二代裂殖子;经外科手术方法,将第二代裂殖子直接注入鸡盲肠内,使第二代裂殖子同步发育至配子体;手术后30 h剖检鸡,刮取盲肠黏膜,随后依次通过透明质酸酶消化、滤膜过滤、红细胞裂解、Percoll密度梯度离心等步骤,分离、纯化毒害艾美耳球虫配子体。结果显示,通过本方法分离、纯化的配子体纯度高、数量多,可用于基因转录组学、蛋白质组学、免疫学和疫苗等方面的研究。     

重庆市鸡球虫种类调查

首次在重庆市开展的较大规模的鸡球虫感染的调查，发现鸡感染有9种艾美尔球虫，即：柔嫩艾美尔球虫（Eimeria tenella)，巨型艾美尔球虫（E.maxia），堆形艾美尔球（E.acervulina），毒害艾美尔球虫（E.necatrix），布氏艾美尔球虫（E.brunetti），变位艾美尔球虫（E.mivati）和缘艾美尔球虫（E.mitis）、哈氏艾美尔球虫（E.hagani）和早熟艾美尔球虫（E.praecax）。在调查的不同地区、不同饲养规模、不同饲养方式的鸡，其感染的球虫种类不一致，在规模化鸡场爽为3－4种混合性感染，多的有7种，而在农村散养鸡感染的种类为1－2种。调查发现，部分中、小规模的养鸡场，多数是因饲养条件较差，鸡球虫的感染率和雏鸡的发病率都很高，尤其因养殖户对鸡球虫病的发生和抗球虫药的性质及使用缺乏基本的科学知识，常常在雏鸡爆发急性球虫病、在青年鸡发生亚临床球虫病，据感染率和发病鸡的病理变化，在重庆市，鸡球虫的主要致病种是柔嫩艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫和堆形艾美尔球虫。     

鸡球虫病防制经验谈

鸡球虫病是由９种鸡艾美尔球虫引起疫病的总称。虽然各种球虫在无性繁殖的代数和每一发育阶段所需的时间不同，但其生活史大同小异，所以仍可以柔嫩艾美尔球虫的生活史作为所有艾美尔属虫种的代表（图１）。鸡食入球虫卵囊后，卵囊壁在肌胃中被碾碎，释放出子孢子，进入小肠粘膜，并开始繁殖。至少需经两代无性繁殖（称之为裂殖生殖），随后进行有性繁殖。在此过程中，小的能运动的小配子寻找大配子，并与之结合，形成合子，合子发育成熟为卵囊，卵囊从肠粘膜上释放，随粪便排出。整个过程约为４－６天，具体时间依虫种而定。一．流行病学球…     

一种纯化柔嫩艾美耳球虫裂殖子的新方法

本文报道了一种快速而简单的纯化柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子的新方法。这种方法是利用含0.25％胰酶和5％胆盐的消化液,消化被感染的鸡胚或盲肠而释放出裂殖子。利用这一消化程序子孢子液过滤后每胚或每条盲肠可获得1.4×10~7和8.33×10~7的裂殖子。与老方法相比。此法比从鸡胚收获到裂     

柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子的分离纯化

本文报道了柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子的分离纯化方法。依次通过酶消化、离心洗涤、红细胞裂解、Percoll密度梯度离心等手段对鸡柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子进行了分离纯化,结果表明,该法效果好,回收率高,操作程序较简单,所获得的裂殖子杂质极少,其纯度适用于进行分子生物学方面的研究。     

用裂殖体和卵囊抗原检测鸡球虫血清抗体

将柔嫩艾美球虫孢子化卵囊和第二代裂殖体制成可溶性抗原，用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测实验感染性柔嫩艾美球虫肉用鸡和ＳＰＦ单冠白来航蛋鸡的血清抗体。肉鸡于１５日龄接种卵囊，接种后１９天，ＥＬＩＳＡ值迅速增加，接种后２９和３２天，抗裂殖体和卵囊原ＥＬＩＳＡ值均达最高值。抗裂殖体抗原ＥＬＩＳＡ值明显高于抗卵囊抗原ＥＬＩＳＡ值。ＳＰＦ蛋鸡于１５日龄接种孢子化卵囊，接种后７天，ＩＬＩＳＡ值迅速增加，抗     

捕食线虫性真菌的分离鉴定

本文报道首次从我国内蒙古土壤中分离出一株捕食线虫性真菌,该菌株适宜在２０℃,ｐＨ６,玉米粉浓度０．４ｇ／Ｌ的玉米粉琼脂（ＣＭＡ）培养基中生长。通过对其菌丝、孢子及捕食性结构的形态学观察,鉴定其为节丛孢属的少孢节丛孢菌ＣＩＭＨＩ株（Ａｒｔｈｒｏｂｏｔｒｙｓｏｌｉｇｏｓｐｏｒａ,ｓｔｒａｉｎＣＩＭＨＩ）。     

广西水牛类圆线虫病的病原体形态

类圆线虫病是广西水牛的常见寄生虫病之一,本文作者通过光镜观察,我们确认广西水牛类圆线虫病的病原体即为乳突类圆线虫。本文首次记述该虫种第四期幼虫的形态。在扫描电镜下,虫卵表面光滑,近似椭圆形。丝状蚴头端钝圆,口孔裂隙状,左右为2唇片,每唇片似分3小叶;体表两侧自劲部开始,各有2条纵嵴,延续至尾端,称为双翼膜(double alae),这是该期虫体独有的构造;丝状蚴尾端分叉。自由生活成虫具6片唇,各唇上有1个唇乳突;口孔内沿有一排锥状齿,共9枚;头端两侧各具1个半球形的头感器;头端背腹面的两侧各具1个头乳突,共4个,锥形。自由生活雄虫的泄殖腔处明显地突出于虫体表面,其周围有7对性乳突。自由生活雌虫的阴门横裂,肛门呈半月形。寄生生活雌虫头端截平,4个唇片由口缘伸向口孔,唇片近口孔中央向上翻卷,唇片上各有1个唇乳突;口孔呈倾斜(45°)的马耳他“十”字形;头感器1对,头乳突4个;阴门横裂,阴门部有1对阴侧感觉窝和1对阴后乳突;肛门横裂,突起;尾部自肛门后突然收缩,呈指状。在宿主体内未见到寄生生活雄虫。     

工程量清单计价模式实施探析

实行工程量清单计价是一种既符合我国市场竞争规则，又符合与国际惯例接轨的造价模式，是我国建设市场发展需要的必然结果。阐述了在我国实行工程量清单计价的重大意义，探讨了现阶段实施工程量清单计价中遇到的问题，并提出了完善措施。     

《证券法》的修改与上市公司信息披露的规范

上市公司信息披露关系到市场的健康发展，但目前上市公司信息披露存在着许多问题，如信息披露制度不完善，信息披露质量难言满意等。根据证券法修订草案中对上市公司信息披露的相应修改内容，应用XBRL技术加速上市公司信息披露规范，多管齐下改善披露质量：引入做空机制是一个优选；加重违反信息披露法律法规上市公司的法律责任；加大信息披露监管力度。     

家兔四肢动脉解剖

家兔四肢动脉的分布情况,国内外文献均十分简单,特别是缺少一张完整的图。前、后足部的血管图,大部分文献中均略去。本文对此进行了研究,绘出了完整的模式图,可供参考。     

鸡胚法氏囊的组织发育

本试验通过对孵化至１３－２１日龄的鸡胚法氏囊进行组织学的连续性动态观察,较为详细地描述了早日龄鸡胚法氏囊的组织学分化发育过程。实验结果显示,直至出壳胶鸡胚法氏囊尚未形成较完整的能组织起 体液免疫促进作用的组织基础结构,其完善的形态结构需在后天环境中分化和发育。     

日本血吸虫重组IAP蛋白的免疫保护效果评估

为研究日本血吸虫凋亡蛋白抑制因子（inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum,SjIAP）重组蛋白诱导BALB/c小鼠的免疫保护效果,利用PCR技术扩增SjIAP基因,构建重组表达质粒pET-28a（＋）-SjIAP,诱导表达重组SjIAP蛋白,并利用重组蛋白制备兔源多克隆抗体血清。然后,选用SjIAP重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用ELISA检测免疫小鼠血清中的特异性抗体水平,以及免疫小鼠脾脏淋巴细胞在SjIAP重组蛋白刺激后产生的细胞因子水平。强化免疫后,将小鼠进行血吸虫尾蚴攻虫试验,感染38 d,进行剖杀,计算虫体减虫率及肝脏减卵率。Western blot结果表明本研究制备的兔源多抗血清能特异性识别SjIAP重组蛋白。ELISA检测表明免疫SjIAP重组蛋白可诱导较高水平的IgG及IgG亚型（IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3）抗体和IFN-γ、IL-2及IL-4细胞因子。动物试验表明,免疫SjIAP重组蛋白的小鼠与PBS组相比分别获得了31.5%的减虫率和37.2%的肝脏减卵率。免疫SjIAP重组蛋白能诱导小鼠获得一定减虫和减卵保护效果,提示血吸虫凋亡蛋白抑制因子可作为抗血吸虫病的疫苗候选分子。