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1.
在分析了人GnRH受体基因结构特征的基础上,对大鼠,小鼠和绵羊的GnRH受体基因进行描述。不同动物GnRH受体基因的结构特征基本相同。PCR分析表明编码GnRH受体的基因位于染色体的特一位置。在GnRH受体基因上存在多个启动子和转录起始位点与多重调节序列,表明GnRH受体基因的活动是复杂的高度调节的。 相似文献
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用不同剂量鸡促性腺激素释放激素(cGnRH-I和cGnRH-Ⅱ)单独或与鸡LH(cLH)协同处理短期(3h)培养的鸡卵泡颗粒细胞,以观察鸡GnRH对颗粒细胞孕酮分泌的影响。结果表明:随着卵泡的成熟,孕酮分泌量逐渐增加,到F1卵泡时增加最明显;在本实验所用细胞孕酮分泌都有明显促进作用,GnRH-Ⅱ使F2至F4卵泡颗粒细胞孕酮分泌量有增加,而对F3卵泡颗粒细胞作用量明显,用鸡GnRH-Ⅱ的促进作用更明 相似文献
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刘山莉 《东北农业大学学报》1997,28(1):84-89
试验研究了寒地粳稻(DS2#)成熟胚为受体的JQ700型基因枪转化,寒地粳稻(DS3#)下胚轴愈伤悬浮细胞与细胞团为受体的农杆菌LBA4404共培养转化,以及寒地粳稻(DS2GG#)未受精胚囊为受体的花粉管通道等转化途径的初步尝试。结果首先在基因枪转化途径上得到突破——成功地将NPTⅡ基因、GUS基因及抗虫基因(B.t)的DNA片段导入寒地粳稻(DS2#)成熟胚。以GUS基因组织化学法检测外源基因的表达,结果转化水稻细胞的短暂表达为阳性。经过一系列组织培养过程,诱导获得了绿色转基因水稻植株,取其叶片进行外源基因的稳定遗传与表达检测,结果GUS基因组织化学检测亦为阳性,Olympus倒置显微镜镜检结果——转基因水稻(DS2#)植株叶片的叶脉等维管组织中GUS基因表达更强烈。本文只是对转化途径进行研究,关于B.t基因的整合与表达的检测工作正在进行中 相似文献
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大豆黄酮对青年母猪GnRH,LH和抑制素分泌的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
利用植物雌激素大豆黄酮静脉内注射正常间情期青年母猪(ID猪)和去卵巢青年母猪(OVE猪),前者每公斤体重注射2mg大豆黄酮,后者每kg体射注射20μg大豆黄酮,两者均以仅注射溶剂为对照,大豆黄酮处理后第2小时和第3小时ID猪血清GnRH峰值显著高于处理前和对照,但GnRH平均水平无显著差异,血清LH和抑制素浓度在大豆黄酮处理后均显著降低(P〈0.01)。OVE猪血清LH浓度在注射大豆黄酮后第1小时 相似文献
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大豆黄酮对体外灌流垂体前叶组织促黄体素分泌的影响 总被引:7,自引:2,他引:7
对德国格丁根微型猪垂体前叶组织进行体外灌流培养,研究大豆黄酮对垂体促黄体素(LH)分泌的影响。结果表明,灌流24h后,大豆黄酮灌流组(Ⅰ组100ng/ml;Ⅱ组2μg/ml)和雌二醇灌流组(Ⅲ组100pmol/L;Ⅳ组200pmol/L)LH分泌水平低于对照组(Ⅴ组空白对照;Ⅵ组助溶剂对照),雌激素抑制效应明显较强。灌流48h,Ⅰ、Ⅱ组LH峰值和平均水平均显著高于对照组,Ⅲ、Ⅳ组则明显低于对照组。促性腺激素释放激素(GnRH)刺激后1~2h,Ⅰ、Ⅱ组LH平均水平、峰值和脉冲频率均明显高于刺激前,而且显著高于对照组;Ⅲ、Ⅳ组却明显低于对照组和Ⅰ、Ⅱ组。大豆黄酮、雌激素对垂体体外LH分泌没有明显的剂量差异。无GnRH刺激时,大豆黄酮对离体垂体LH分泌表现为抑制效应,但抑制强度较弱;长期以大豆黄酮灌流培养垂体,或加以GnRH刺激,大豆黄酮对LH分泌具促进作用。 相似文献
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分别制备了遗传工程稻GER-1及其DNA供体(慈利玉米)、DNA受体(水稻湘早籼8号)的叶绿体DNA(cpDNA),对三者之间的多种限制性内切酶酶切图谱比较表明,GER-1的cpDNA基本与DNA受体水稻一致。进一步克隆了CEF-1的psbA基因,并构建其酶切图谱、测定其3'非翻译区(3'UTR)序列,初步认为该基因的序列结构与水稻相同,从而排除了GER-1的性状变异是由其psbA基因发生变化所致 相似文献
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GnRH主动免疫对绵羊血清睾酮含量的影响 总被引:4,自引:1,他引:4
用碳二亚胺将GnRH与牛血清白蛋白联结,加入弗氏完全佐剂主动免疫8只3月龄雄性绵羊,结果表明免疫后至少在120天内会引起睾丸发育停滞,第二性征抑制,血清睾酮水平降低,其含量与手术去势组动物差异不显著,免疫组绵羊生长发育与手术组无明显差异,达到了去势的效果。 相似文献
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分别制备了遗传工程稻GER-1及其DNA供体(慈利玉米)、DNA受体(水稻湘早籼8号)的叶绿体DNA(cpDNA),对三者之间的多种限制性内切酶酶切图谱比较表明,GER-1的cpDNA基本与DNA受体水稻一致.进一步克隆了CER-1的psbA基因,并构建其酶切图谱、测定其3′非翻译区(3′UTR)序列,初步认为该基因的序列结构与水稻相同,从而排除了GER-1的性状变异是由其psbA基因发生变化所致的可能.此外,对叶绿体DNA的制备及酶切消化作了较深入的探讨 相似文献
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[目的]探讨广西沼泽型水牛垂体中促性腺激素释放激素(GnRH)的细胞定位以及是否存在促性腺激素释放激素受体(GnRH—R)。为GnRH-R的克隆及其序列分析提供理论依据。[方法]采用免疫组织化学ABC法,确定促性腺激素释放激素在垂体中的定位,结合图像分析系统检测GnRH在垂体中的含量,并利用RT—PCR技术扩增其受体基因片段。[结果]腺垂体远侧部中呈现较强的阳性GnRH免疫反应,阳性物质主要分布在胞质,胞核呈阴性。神经垂体中无阳性信号。同时,在垂体中扩增出大小为1008bp的GnRH—R基因片段。[结论]腺垂体远侧部边缘区中有大量GnRH及其受体存在,证实垂体前叶是下丘脑-垂体-性腺轴以及多个内分泌轴相互作用的重要部位。 相似文献
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半番鸭与番鸭精巢组织差异表达转录组测序分析 总被引:2,自引:2,他引:0
【目的】研究半番鸭与番鸭精巢组织转录组差异表达基因,为进一步阐明半番鸭不育的遗传机制奠定理论基础。【方法】利用转录组测序方法对半番鸭和番鸭的精巢组织进行研究,筛选其差异表达基因,并对其功能进行注释和荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,QRT-PCR)验证。【结果】测序共获得43.84Gb Clean Data,组装后共获得193 535条Unigene。DESeq分析发现3 597个基因在两个鸭品种间差异表达,其中上调基因1 194个和下调基因2 403个,包括与生殖功能相关的基因,如成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、丝裂原活化蛋白激酶7(mitogen-activated protein kinase 7-like,partial,BMK)、生长因子受体结合蛋白2(growth factor receptor-bound protein 2,GRB2)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和肿瘤坏死因子受体超家族成员6(tumor necrosis factor receptor superfamily member 6,FAS)等。GO(gene Ontology)分析发现382个差异基因获得功能注释,其中97个基因涉及发育繁殖生物学过程。KEGG(kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路分析表明差异表达基因共富集到50条信号通路中,其中17个通路显著富集,包括丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路(mitogen-activated protein kinase signaling pathway,MAPK)、甘油酯代谢(glycerolipid metabolism)以及钙信号途径(calcium signaling pathway)信号通路等,与生殖功能密切相关的有促性腺激素释放激素信号通路(gonadotropin releasing hormone(Gn RH)signaling pathway)和MAPK信号转导通路。经QRT-PCR验证,差异基因表达变化模式与转录组测序结果一致,测序结果可靠。【结论】在转录组水平上筛选出半番鸭和番鸭精巢组织差异表达基因,揭示了Gn RH和MAPK信号通路在鸭的生殖活动中发挥了重要作用,为进一步探索半番鸭生殖系统的分化机理提供可靠的参考依据。 相似文献
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【目的】寻找与番鸭就巢性状相关的表达基因,了解其就巢调控的分子机理。【方法】采用cDNA-AFLP (cDNA-amplified fragment length polymorphism)技术分析遗传背景相近的RF系白羽番鸭就巢个体和非就巢个体脑垂体基因表达差异。【结果】筛选到与就巢行为相关差异表达片段82条,选取其中15条进行测序。将测序结果在GenBank数据库进行BLAST比较和分析,发现 8个片段(53.3%)与已知基因具有较高同源性,涉及与繁殖性能紧密相关的下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonadal,HPG)上的功能基因,如GnRH基因、FSH基因,同时也分离到位于GH/IGF轴上的功能基因,即GH基因;以及在功能上属于信号传导、转录调控、代谢的调节基因,如超氧化物歧化酶基因、角蛋白关联蛋白基因、硫氰酸酶释放硫基转移酶基因等。2个片段与未知功能的基因有同源性,5个与数据库中现有的基因没有明显的相似性。随机选择3个片段进行RT-PCR验证,检测片段的表达模式与cDNA-AFLP结果一致。【结论】揭示番鸭不同就巢性状基因表达调控模式,进一步阐明番鸭就巢的分子机理。 相似文献
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【目的】构建猪淋巴细胞基因文库,初步绘制正常猪外周血淋巴细胞的基因表达谱,为进一步筛选免疫相关基因提供平台。【方法】以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与质粒载体连接后转化大肠杆菌,进一步扩增后,获得猪外周血淋巴细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合,并进行序列分析和注释。【结果】构建了正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库,获得库容量为1.2×10^6PFU/mL、重组率为93.3%、85%插入片段处于750~2000bp的高质量文库;随机测定1100条ESTs,经拼接和聚类,获得152条高表达的基因重叠群(Contigs)和619条低表达基因——单拷贝的EST(Singletons);经序列比对分析,发现23.3%ESTs为与任何物种都没有匹配的新基因,75.9%ESTs为与猪没有匹配的新基因。用GO数据库对获得的EST进行基因功能分类和KEGG路径图分析,发现丝裂原活化蛋白激酶途径(Mitogenn—activated protein kinase,MAPK)、钙信号通路、胰岛素信号通路、脂肪细胞因子信号通路、Toll—like受体信号通路、B细胞受体信号通路和T细胞受体信号通路的基因均有较高表达。【结论】大部分的猪外周血淋巴细胞基因尚未被分离和鉴定出来,但这些基因mRNA转录和表达丰度均较高,且在猪外周血淋巴细胞中起着非常重要的作用。 相似文献
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正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库构建及EST初步分析 总被引:1,自引:1,他引:0
【目的】构建猪淋巴细胞基因文库,初步绘制正常猪外周血淋巴细胞的基因表达谱,为进一步筛选免疫相关基因提供平台。【方法】以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与质粒载体连接后转化大肠杆菌,进一步扩增后,获得猪外周血淋巴细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合,并进行序列分析和注释。【结果】构建了正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库,获得库容量为1.2×106 PFU/mL、重组率为93.3%、85%插入片段处于750~2000 bp的高质量文库;随机测定1100条ESTs,经拼接和聚类,获得152条高表达的基因重叠群(Contigs)和619条低表达基因——单拷贝的EST(Singletons);经序列比对分析,发现23.3% ESTs为与任何物种都没有匹配的新基因,75.9% ESTs为与猪没有匹配的新基因。用GO数据库对获得的EST进行基因功能分类和KEGG路径图分析,发现丝裂原活化蛋白激酶途径(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)、钙信号通路、胰岛素信号通路、脂肪细胞因子信号通路、Toll-like受体信号通路、B细胞受体信号通路和T细胞受体信号通路的基因均有较高表达。【结论】大部分的猪外周血淋巴细胞基因尚未被分离和鉴定出来,但这些基因mRNA转录和表达丰度均较高,且在猪外周血淋巴细胞中起着非常重要的作用。 相似文献
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人促性腺激素释放激素及其转运肽基因的克隆、表达与纯化 总被引:7,自引:0,他引:7
研究根据GenBank中已发表的人GnRH2基因mRNA序列以及转运肽基因核苷酸序列,借助Oli-go4.1设计了一对寡核苷酸引物,以引物3'末端的短互补序列退火形成小段双链,从而互为模板和引物,通过引导合成长达90bp的目的序列GnRH/TRS。将其克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pYC1,经酶切鉴定筛选出阳性克隆pYC1,进一步的序列分析确认其中GnRH/TRS序列的正确性。pYC1经BamHI和EcoRI酶切得到GnRH/TRS片段,然后将此片段克隆到表达载体pGEX-6p-1上,构建重组质粒pYC2。经酶切鉴定筛选出阳性克隆pYC2,并转化到大肠杆菌BL21(ED3)plyS实现原核表达。IPTG诱导后成功表达出与预期大小相符的约28ku的融合蛋白,光密度扫描对表达产物进行初步定量,表达产物约占菌体总蛋白的33.3%,表达产物经GlutathioneSepharose4B层析纯化后,得到了纯度较高的GST-GnRH/TRS融合蛋白,为进一步科研和实际应用奠定基础。 相似文献
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Cloning, sequencing, and expression of the gene coding for the human platelet alpha 2-adrenergic receptor 总被引:55,自引:0,他引:55
B K Kobilka H Matsui T S Kobilka T L Yang-Feng U Francke M G Caron R J Lefkowitz J W Regan 《Science (New York, N.Y.)》1987,238(4827):650-656
The gene for the human platelet alpha 2-adrenergic receptor has been cloned with oligonucleotides corresponding to the partial amino acid sequence of the purified receptor. The identity of this gene has been confirmed by the binding of alpha 2-adrenergic ligands to the cloned receptor expressed in Xenopus laevis oocytes. The deduced amino acid sequence is most similar to the recently cloned human beta 2- and beta 1-adrenergic receptors; however, similarities to the muscarinic cholinergic receptors are also evident. Two related genes have been identified by low stringency Southern blot analysis. These genes may represent additional alpha 2-adrenergic receptor subtypes. 相似文献