茄子抗青枯病基因的RAPD标记研究

 为探明茄子抗青枯病的遗传机制, 以高感青枯病品种北京六叶茄064, 高抗青枯病半栽培种马来西亚S3及其F₂ 代为材料, 用RAPD技术对供试材料的抗青枯病基因进行了研究。结果表明: 通过300个随机引物的PCR扩增分析, 发现15.6%的引物在双亲间表现出多态性, 找到了一个与茄子抗青枯病亲本S3中的抗病基因紧密连锁的分子标记S264₇₈₀ (该引物的碱基序列为CAGAGCGGA) , 该标记与S3的抗病基因的交换值为4.32% , 遗传距离为4.33 cM。     

茄子抗青枯病研究进展

茄子青枯病是一种全球性病害,严重危害茄子生产。近年来,国内外学者对该病进行了广泛研究,并取得一定进展。该研究对茄子青枯病的研究进展进行了综述,主要包括青枯病病原菌的分类和侵染过程、茄子抗青枯病的遗传规律、茄子抗青枯病基因及青枯病的综合防治等方面。     

茄子抗青枯病研究进展

综述了国内外茄子抗青枯病的研究进展 ,包括青枯病病原生理小种及生化型、茄子青枯病的抗源筛选和抗病育种手段 ,并针对当前茄子青枯病抗性育种中存在的主要问题 ,提出了解决问题的策略     

茄子青枯病抗性相关的E3泛素连接酶基因的筛选及鉴定

茄子在生产中易受青枯病侵袭。为挖掘茄子青枯病抗性基因,前期以茄子高抗青枯病自交系和感病自交系为试材进行转录组分析,获得4个与调控青枯病抗性相关的E3泛素连接酶基因,分别命名为SmSP1、SmSPL2、SmDDA1a1和SmDDA1a2。序列分析发现,4个E3连接酶的结构域在7个物种中较为保守,SmSP1及SmSPL2属RING型E3连接酶,SmDDA1a1和SmDDA1a2属CRL^DDB型E3的底物受体。亚细胞定位表明,除SmDDA1a2定位于细胞核,SmSP1、SmSPL2和SmDDA1a1定位于细胞核及其他细胞部位。4个基因在茄子抗感材料的根、茎及叶中均有表达,叶中最高。青枯菌及外源激素可诱导4个基因的表达,且在抗性材料中的表达量高于感病材料。水杨酸可诱导SmSP1的表达,茉莉酸甲酯可诱导SmSPL2、SmDDA1a1和SmDDA1a2的表达,乙烯利可诱导4个基因的表达。VIGS基因沉默结果显示,在抗性材料中沉默SmSP1和SmDDA1a2后,导致植株青枯病抗性下降,沉默SmSPL2和SmDDA1a1后,对植株青枯菌抗性没有影响。以上结果表明,SmSP1和Sm...     

茄子青枯病抗性材料的鉴定及性状观察

对亚蔬中心的８份茄子抗青枯病材料,１份感病对照,在温室中进行苗期人工种鉴定其抗病性。结果７份材料表现抗病、１份表现中抗。同年了露地种植,调查其植物学性状。     

如何防治茄子黄萎病和青枯病

茄子青枯病和黄萎病的防治,是当前茄子栽培的重要难题.这两种病的防治,关键在于采用农业措施健康栽培加以预防,菜农应从茄子育苗开始,通过一系列农业措施,再结合化学药剂来防治青枯病和黄萎病.     

茄子青枯病抗性的遗传分析

 选用6个对青枯病具有不同抗性水平的茄子自交材料，按完全双列杂交设计，配制36个组合(包含亲本自交)。苗期人工接种鉴定各组合抗性并计算病情指数，采用Grifmg方法I及Hayman方法对抗性配合力方差进行分析，估计相关遗传参数。结果表明，茄子对青枯病的抗性遗传规律符合“加性一显性”效应模型。遗传效应中同时存在加性效应、显性效应和反交效应，但以加性效应为主。茄子对青枯病的抗病性表现隐性，感病性表现部分显性。茄子对青枯病的抗性遗传较为复杂，由多个微效基因、较少的主效基因和细胞质基因共同控制。     

茄子青枯病抗性基因的遗传分析及其AFLP标记

 以茄子高感青枯病品种‘三月茄’与高抗品种‘S69’的F1、F2为材料, 对青枯病抗性遗传进行了分析, 同时开展了与抗性基因连锁的AFLP标记鉴定。结果表明: ‘S69’对青枯病的抗病性属于不完全隐性遗传, 感病性属于不完全显性; 抗性由1～2对基因控制。对86个F2单株AFLP分析, 鉴定出1个与‘S69’抗性基因连锁的AFLP标记39A980 (该引物组合为E-ACC /M-CTG) , 该标记与抗性基因间的交换值为4.65% , 遗传距离为4.9 cM。     

番茄抗青枯病材料的鉴定与筛选

于１９９６年从亚洲蔬菜研究与发展中心（ＡＶＲＤＣ）引进３６份番茄材料进行青枯病抗性鉴定比较及农艺性状调查,结果表明Ｒ ３０３４ １０ Ｎ ＵＧ（５０４５）、Ｃｒａｖｅｌ（５０５２）、ＣＬＮ１４６３ １６０ ４０ ６０（５０５６）、ＣＬＮ１４６４ １１１ ３０ ４５（５０５７和Ｒｅｄｌａｎｄｅｒ（５０５９）等５份材料青枯病发生少且产量、品质表现较好,可望在育种上进一步利用。     

茄子青枯病和黄萎病的识别与防治

漳州市茄子栽培中发生的病害主要是黄萎病,有些地块发病率达30%以上,近两年,我市茄子青枯病发病率有上升的趋势,有些地块茄子黄萎病和青枯病同时发生,由于这两种病害症状相似,不容易区别,菜农常常误诊,不能对症下药,因而达不到防治效果,造成较大损失.7～8月正遇我市茄子育苗,现将茄子两种病害的识别与综合防治措施介绍如下.     

茄子TRV-VIGS体系的优化及SmIAA19基因功能初步分析

以经过改造的烟草脆裂病毒（Tobacco rattle virus,TRV）载体PYL156为工具,采用叶片注射法侵染茄子（Solanum melongena L.）叶片,通过表型比较、TRV病毒分子检测和荧光定量PCR技术分析,探究环境温度、植株大小、目的基因插入片段大小对茄子TRV-VIGS沉默体系的影响。结果表明,昼夜温度为（25 ± 3）℃和（20 ± 2）℃时,接种茄子幼苗子叶的植株沉默效果明显,侵染后植株叶片中目的基因表达量与阴性对照相比明显降低;早春日光温室和秋季日光温室条件下,侵染植株表型性状和基因表达量差异不显著。沉默片段大小为200 bp左右时目的基因的沉默效果最好;侵染茄子幼苗子叶期植株出现明显病毒斑,而接种6周龄真叶则无明显表型差异。用茄子生长素诱导基因（SmIAA19）为靶基因对其进行验证,结果表明显著抑制了SmIAA19的表达,其在叶片中的表达量和生长素含量均显著降低,表明SmIAA19是1个与生长素代谢途径相关的基因。     

茄子SmMsrA基因VIGS表达载体的构建及表达分析

利用RT-PCR从茄子单性结实品系D-10中获得甲硫氨酸亚砜还原酶A基因(Sm Msr A)的编码区。通过Gateway同源重组技术,构建了3个分别含Sm Msr A基因不同片段的烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默(VIGS)表达载体p TRV2-Sm Msr Ai。表达载体转入农杆菌GV3101后,用注射压迫法侵染茄子叶片。采用表型观察、TRV病毒分子检测和q RT-PCR技术,评价构建的VIGS体系对Sm Msr A基因的沉默效果。结果表明,报告基因PDS沉默后叶片呈现明显的光漂白现象,Sm Msr A基因沉默后叶片呈花叶状,果实变小,叶片和果实中的Sm Msr A基因的表达量明显降低,表明Sm Msr A基因是正向调控茄子果实发育的相关基因。     

番茄青枯病抗性两个相关基因功能的初步鉴定

对抗性番茄材料‘Hawaii 7996’分别接种强致病力青枯菌（RsH）和中等致病力青枯菌（RsM）后,利用双向电泳技术找到了两个差异表达蛋白质--谷胱甘肽S转移酶L3和Remorin 1蛋白。在利用携带八氢番茄红素脱氢酶基因PDS的TRV重组病毒载体通过叶片浸润法证明VIGS体系可行后,进一步利用该技术沉默上述两个蛋白质的对应基因GST-L3和Rem-1,并用半定量RT-PCR检测沉默效果。结果表明,分别沉默GST-L3和Rem-1的番茄植株抗性减弱,在接种中等致病力青枯菌（RsM）后青枯病发病率和病情指数都明显高于对照植株,说明基因GST-L3和Rem-1与番茄对青枯病的抗性相关。     

茄子生长素诱导基因SmIAA19的克隆和分析

以茄子单性结实品系‘D-10’为材料,以茄子单性结实差减文库中差异表达的EST片段Z732为依据,采用RT-PCR和RACE技术克隆获得了生长素诱导基因SmIAA19（登录号KP114221）的cDNA序列。该基因全长为800 bp,开放阅读框为558 bp,编码185个氨基酸。氨基酸序列比对结果表明该基因编码的氨基酸序列具有Aux/IAA基因家族的典型结构域和保守基本序列,在分子进化上与马铃薯距离最近,与番茄处于同一分支。qRT-PCR分析表明,在低温（门茄）和适温（四门斗）条件下,SmIAA19在单性结实和非单性结实的子房和果实发育过程中均有表达,单性结实品系中的表达量显著高于非单性结实品系,单性结实品系开花当天子房中的表达量最高,非单性结实品系在低温和适温条件下的表达量均保持在较低的水平。IAA含量检测结果表明,在不同结实性茄子品系的果实发育过程中IAA含量的变化趋势基本相同,在果实发育前期含量较高,且在低温（门茄）条件下,不同结实性果实中IAA的含量变化与SmIAA19基因的表达量变化相一致。SmIAA19基因可能与茄子的单性结实有关。     

番茄抗青枯病材料的筛选

采用伤根灌注法对5份番茄育种试材接种青枯病菌,从中筛选抗青枯病的育种材料。结果表明:T2-08-555发病率和病情指数分别为38.9%和26,抗性水平明显优于对照。该材料为有限生长型,果重偏小(36.3 g),需改良后方能利用。     

茄子花青素合成相关基因SmMYB 的克隆与表达分析

 以茄子（Solanum melongena L.）‘YZ14’（紫茄）和‘YZ3’（白茄）为试验材料,采用 同源克隆与RACE（rapid amplification of cDNA ends）相结合的方法克隆了茄子MYB 基因cDNA 及gDNA 全长序列,命名为SmMYB。序列分析结果表明：该基因cDNA 全长1 035 bp,开放阅读框837 bp,编码 278 个氨基酸,与辣椒（Capsicum annuum L.）MYB 转录因子氨基酸序列相似性达71%;成熟蛋白的等电 点为8.47,具有2 个典型的DNA-binding 结构域且亚细胞定位于细胞核;gDNA 全长3 834 bp,包含3 个 外显子及2 个内含子。荧光半定量检测结果表明：SmMYB 在茄子根、茎、叶、花瓣、果皮中均有表达, 但表达水平具有组织特异性;遮光处理后紫色茄子果皮中该基因表达量变化与花青素合成量变化趋势相 似。推测SmMYB 为一个MYB 转录因子基因,正向调控茄子花青素的合成。     

抗青枯病樱桃番茄品种的初步筛选及评价

对28个樱桃番茄品种的田间抗病性、植株类型、单果质量、果色、可溶性固形物含量等主要经济性状进行调查。试验结果表明,感病品种红艳发病最重,发病率为73.67%,其次是红箭、红日和金艳,发病率分别为23.33%、21.67%和20.33%,其他品种发病率都在20%以下;28个品种的果实颜色、大小、口感等差异明显,除黑宝石映泰及黄金蛋可溶性固形物含量在4.10%以下外,其他品种可溶性固形物含量都达5.20%以上。综合分析,筛选出绿天使、粉仙、红娘9号、绿圆、格丽贝、红椭圆等11个抗青枯病且经济性状优良的樱桃番茄品种,为优质抗青枯病樱桃番茄的选育和推广提供了参考。     

优质抗青枯病茄子新品种紫荣6号的选育

紫荣6号是以自交系9424为母本,以M3-1为父本配制而成的茄子一代杂种。中熟,坐果能力强,果实长棒形、顺直、匀称,果皮深紫红色,果面平滑,光泽度好,平均果长30 cm,横径5.5 cm,单果质量350 g,果肉白色,肉质紧实,耐老,商品率高,每667 m2产量2 300 kg左右。抗青枯病,耐热、耐寒、耐涝和耐旱性均较强,适宜华南、华中地区露地栽培。     

茄子单性结实差异表达序列鉴定及分析

利用实时荧光定量PCR技术,研究茄子单性结实SSH-c DNA文库中的96条EST序列在单性结实自交系和非单性结实自交系果实发育过程中的表达模式。分析表明,在低温条件下,相对表达量有显著差异的EST序列有31条,总体上调表达的EST序列有17条,总体下调表达的EST序列有14条。通过NCBI对EST序列进行Blastx比对,得到与其同源性高的序列信息。其中5条EST与抵御低温相关,6条EST与植物激素代谢相关,多条EST与植物代谢过程中的蛋白质和碳水化合物合成相关,1条EST无比对结果,可能为新基因。差异表达序列可作为研究茄子单性结实和耐低温的候选基因。