应用间接ELISA检测猪旋毛虫抗体

以猪旋毛虫抗原基因Ts88的重组蛋白为包被抗原,建立了猪旋毛虫抗体间接ELISA检测方法。最佳抗原包被浓度为1μg/mL,待检血清的最佳稀释倍数为1:80。采用间接ELISA方法检测2000份猪血清,阳性检出率为1.5%,血清样本对应猪肉采用镜检法,阳性检出率为1.30%。试验结果显示,该方法操作简便、快速、特异性好,适用于猪旋毛虫的临床诊断和流行病学调查。     

应用间接ELISA检测猪旋毛虫抗体

以猪旋毛虫抗原基因Ts88的重组蛋白为包被抗原,建立了猪旋毛虫抗体间接ELISA检测方法。最佳抗原包被浓度为1μg/mL,待检血清的最佳稀释倍数为1:80。采用间接ELISA方法检测2000份猪血清,阳性检出率为1.5%,血清样本对应猪肉采用镜检法,阳性检出率为1.30%。试验结果显示,该方法操作简便、快速、特异性好,适用于猪旋毛虫的临床诊断和流行病学调查。     

旋毛虫病McAb快速ELISA诊断盒的应用研究

应用ＭｃＡｂ 快速ＥＬＩＳＡ 诊断盒,对感染了４ 个旋毛虫隔离种的猪定期检测其血清中抗体出现情况。结果,猪旋毛虫和旋毛形线虫（Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ）在感染２４ ｄ 后、犬旋毛虫和本地毛形线虫（ Ｔ．ｎａｔｉｖａ）３１ ｄ 后,可在猪血清中检出抗体;在抗体出现时间上前二者较后二者早７ ｄ 左右。     

应用间接ELlSA检测猪旋毛虫抗体

以猪旋毛虫抗原基因Ts88的重组蛋白为包被抗原,建立了猪旋毛虫抗体间接ELISA检测方法。最佳抗原包被浓度为1μg/mL,待检血清的最佳稀释倍数为1：80。采用间接ELISA方法检测2000份猪血清,阳性检出率为1．5％,血清样本对应猪肉采用镜检法,阳性检出率为1．30％。试验结果显示,该方法操作简便、快速、特异性好,适用于猪旋毛虫的临床诊断和流行病学调查。     

快速ELISA诊断猪旋毛虫病的研究

在快速间接ＥＬＩＳＡ中将被检血清样品和酶结合物一起保温，即简化了操作步骤，又比常规ＥＬＩＳＡ缩短了３０－９０分钟。通过对猪旋毛虫病阴阳性血清检测，表明该方法敏感性为９３．６２％，特异性为９６．８８％。为猪旋毛虫病提供了一种快速诊断方法。     

旋毛虫病McAb快速ELISA诊断盒的研制与应用

本研究建立了ＭｃＡｂ快速诊断猪旋毛虫病的ＥＬＩＳＡ试剂盒，应用旋毛虫单克隆抗体系和层析纯化抗原（ＰＡＡ）与旋毛虫肌幼虫排泄－分泌抗（ＥＳ）作常规ＥＬＩＳＡ平行检测６１头人工感染旋毛虫病猪血样，阳性率均为１００％，检测健康猪血样１０８２头，阴性率也为１００％，检测疫区自然感染猪血样１２５３头，阳性率分别为１．４４％和１．１２％，随机抽采１７５头猪血样和肉样作旋毛虫病消化法，常规法和快速法对比试验，诊     

PRRS ELISA试剂盒检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的应用

利用重组杆状病毒表达的PRRSV核衣壳蛋白作抗原制成ELISA诊断试剂盒，检测人工感染PRRSV猪血清、疫苗免疫抗体和田间血清，并与IDEXX公司生产的试剂盒进行比较。结果表明，该试剂盒在PRRSV感染后8天内就可检出感染性抗体，而用IDEXX公司生产的试剂盒在感染后的18天才检测到感染性抗体，对弱毒疫苗的免疫检测也基本能反映出疫苗的免疫应答状况。对华东地区PRRSV流行病学调查结果表明，PRRSV在国内普遍存在，同时也证明研制的试剂盒，是客观科学调查我国PRRS流行情较理想的检测工具。     

猪旋毛虫的检疫及防控措施

猪旋毛虫病是一种人畜共患寄生虫病,在公共卫生学上具有十分重要的意义,也是猪肉制品卫生检验项目之一。该病对人类健康和养猪业的可持续发展均有较大危害。本文主要从该病的病原学、旋毛虫生活史、流行病学、检测方法及防治措施等方面进行了综述。以期为临床上旋毛虫病的防治和猪肉及其制品中旋毛虫的屠宰检验提供参考。     

快速ELISA诊断猪旋毛虫病的研究

在快速间接ELISA中将被检血清样品和酶结合物一起保温。既简化了操作步骤,又比常规ELISA缩短了30～90分钟。通过对猪旋毛虫病阴阳性血清检测,表明该方法敏感性为93.62％,特异性为96.88％。为猪旋毛虫病捉供了一种快速诊断方法。     

重组N蛋白抗原检测PPRV抗体ELISA的研究——试剂盒阴阳性临界值的测定及其与OIE参考实验室试剂盒的比较

对临床上采集的244份不同背景的羊血清样本,用纯化的重组N蛋白为包被抗原建立的检测小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体的间接ELISA进行检测,运用统计学方法摸清了检测结果的分布规律,并同时用OIE参考实验室抗体检测试剂盒进行检测,结果表明,两种检测方法的符合率为91.73%。利用TG-ROC软件分析了ELISA抗体检测临界值,该试剂盒与国外试剂盒相比,其相对特异性和敏感性分别为98.6%和85.4%。     

用ELISA检测猪链球菌病血清抗体（初报）

以2．5％NaCl浸提猪链球菌荚膜多糖抗原,选用2％明胶作封闭液,4％PEG－PBS为血清稀释液,用ELISA检测猪链球菌病血清抗体,特异性强,比琼扩敏感25-250倍,简便快速,在本病诊断、检疫中有一定实用价值。     

牛结核ELISA方法的改进和优化研究

在传统ELISA基础上，对ELISA板的稳定系统、血清稀释液的显色系统、ELISA底物等流程进行了改进，建立了牛结核ELISA方法。阻断试验和交叉反应结果表明该ELISA方法具有较好的特异性；不同人多次重复试验，证明本方法的重复性好。     

一种轮状病毒特异抗体ELISA检测方法

在实验室条件下,建立较为快速的轮状病毒抗体ELISA检测方法。利用组织培养的轮状病毒SA11株经初步的浓缩和纯化后,作为包被抗原包被酶标板。SDS-PAGE分析表明,经浓缩纯化后,轮状病毒的主要抗原均存在。将测试血清用SA11中和后,轮状病毒或其抗原免疫血清(肠黏液,粪便悬液)的OD490值比中和前有明显的下降,下降比率大于45％,而对照组血清的OD490值与中和前相比没有明显的变化,下降比率小于9％。表明用此ELISA体系检测轮状病毒抗体具有特异性。     

一种猪圆环病毒Ⅱ型ELISA抗体检测试剂盒的临床应用

采用猪圆环病毒2-dCap-ELISA抗体检测试剂盒,对河北、山西两地共441份猪血清样品进行检测。结果显示,河北保定地区349份血清样品中阳性样品为306份,感染率为87.68%;山西地区92份血清样品中阳性样品为77份,感染率为83.7%。与标准的间接免疫荧光检测法进行比较,该ELISA检测试剂盒的诊断敏感性为95.48%（380/398）,诊断特异性为93.02%（40/43）,总符合率为95.24%。由此表明该试剂盒是一种简便、快速、灵敏、适合于大规模临床应用的猪圆环病毒2型抗体检测试剂盒。     

Development and Application of a PEDV Nsp7-based Indirect ELISA for Antibody Detection

This study was aimed to establish an indirect ELISA to detect antibodies against different strains of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV). Puried nonstructural protein 7(Nsp7) was used as coating antigen, and the indirect ELISA was established by optimizing the ELISA reaction conditions. The results showed that the optimal reaction conditions were as follow:The amount of coating antigen was 0.20 μg/well, and the coating condition was at 37℃ incubation for 1 h then 4℃ overnight; The working dilution of serum samples and HRP-labelled secondary antibody were 1:300 and 1:10 000, and the incubation time were 2 and 1.5 h, respectively; TMB substrate incubation time was 15 min. Serum sample was determined as positive when its S/P>0.1694 and negative when its S/P<0.1398. The ELISA was specific, reproducible and sensitive. Forty samples of suspected PEDV serum samples were tested by the established ELISA, and the coincidence rate between the ELISA and the commercial kit was 95%. The ELISA established in this study could be used clinically to detect the antibody level of different strains of PEDV, and it also had the potential for early diagnosis of PEDV, providing a basis for the development of effective measures to control PEDV.     

柱状黄杆菌双抗体夹心ELISA检测方法的建立

The aim of this study was to develop a rapid method for the detection of Flavobacterium columnaris based on a double antibody sandwich ELISA （DAS-ELISA）. Purified monoclonal antibody against Flavobacterium columnaris was used as the capture antibody, while polyclonal antibody was used as the detection antibody. The optimal conditions for the ELISA were as follows: monoclonal antibody with 0.08 μg per well was added to coat overnight at 4 ℃; the plate was blocked by 30 g/L bovin serum albumin for 90 min at 37 ℃; incubation concentration of polyclonal antibody was 0.11 μg per well; the incubation time for detection antigen, polyclonal antibody and enzyme labeled antibody was 1 h at 37 ℃ for each; the value of D_{492 nm} was obtained after 15 min coloration. Judging with P/N≥2.1 and D_{492 nm}≥0.776 as positive criteria. This method had no cross reaction with Edwardsiella tarda, E. coli, Aeromonas hydrophila, Vibrio anguillarum, Vibrio alginolyticus, Vibrio parahaemolyticus and Vibrio harveyi. Its minimum detectable limit was 1×10³ CFU. Therefore, this study provided a specific and sensitive detection method for Flavobacterium columnaris for the first time.     

间接ELISA法对禽霍乱抗体的动态监测

将40只50日龄健康禽霍乱非免疫鸡随机分为四组,每组10只。用禽霍乱蜂胶佐剂灭活疫苗对各组鸡进行不同水平的免疫,同时设非免疫对照组。各组鸡间隔5-7天采血,以间接ELISA法测定血清P／N值,并确定临界值。将P／N值在2.1-4.7的13只试验鸡以一个最小致死量（相当于10个菌／ml）进行攻毒试验,同时设攻毒对照,在1周内3只对照鸡均表现感染发病并死亡,而试验鸡均健活,从而初步证明所确定的临界值是合理的。     

不同包被液对ELISA检测五号病病毒抗体的比较试验

０．０５ＭｐＨ９．６碳酸盐缓冲液和０．０５ＭＰＨ１３ＮａＯＨ溶液作为包被液，分别用于间接ＥＬＩＳＡ检测乙型五号病病毒抗体。结果表明，用０．０５ＭＰＨ１３ＮａＯＨ溶泡包被可完全灭活五号病病毒抗原而用０．０５ＭＰＨ９．６碳酸盐缓冲液却有８７％的五号病病毒抗原未被杀灭；用于检测时，以０．０５ＭＰＨ１３ＮａＯＨ溶液为包被液在敏感性及检测结果的梯度方面都优于用０．０５ＭＰＨ９．６碳酸盐缓冲液。