猪圆环病毒2型感染对猪肺泡巨噬细胞受体数的影响

猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)是近年来被发现和认识的一种重要的猪传染病。PMWS主要侵害5~12周龄的仔猪,以进行性消瘦,生长发育迟缓,皮肤苍白和多系统病理损伤为特征。     

猪圆环病毒2型感染对猪肺泡巨噬细胞生物学活性的影响

将猪圆环病毒2型（PCV2）BF株经口、鼻接种40日龄健康仔猪，在接种后不同时间宰杀，收集猪肺泡巨噬细胞（PAM），同时设立对照。用FITC—Annexin V／PI双染色流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳检测PAM凋亡现象，通过EA花环试验测定Fc受体数目，通过吞噬鸡红细胞试验测定吞噬功能，分析PCV2感染对PAM生物学活性的影响。结果显示，在整个试验期内2种方法均没有检测到PAM凋亡，表明PCV2感染不会诱发PAM凋亡。PAM的Fc受体数和吞噬鸡红细胞数的变化规律一致，与对照组相比，两者数量在接种后第3d明显下降，第7d有所回升，之后基本恢复，表明PCV2感染后PAM吞噬和清除病原的功能出现短暂下降。     

仔猪圆环病毒2型感染防控

<正>猪圆环病毒为圆环病毒科圆环病毒属成员,已知有三种血清型,即PCV1,PCV2和PCV3型,PCV1对猪的致病力较低,偶尔可引起胎儿感染及母猪繁殖障碍。PCV2对猪的危害极大,可引起一系列相关疾病,包括断奶仔猪多系统衰竭综合征、皮炎和肾病综合征等。PCV3据报道感染率较高,会导致同PCV2类似的疾病,可加重PCV2的感染,增加猪场防控难度。1实验材料1.1材料来源从数个家庭农场随机采取免疫过猪瘟、伪狂犬、口蹄疫等疫苗的50～80日龄健     

猪圆环病毒2型感染的猪肺泡巨噬细胞TLR2/TLR4/CD16/CD18转录水平动态变化

为了解猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)感染对仔猪的肺泡巨噬细胞(PAM)免疫功能造成的影响,试验对PCV2感染40日龄左右健康仔猪PAM模式识别受体TLR2、TLR4、CD16、CD18 mRNA的动态变化进行了研究。结果发现,在病毒感染后TLR2、TLR4、CD16 mRNA的转录水平动态变化基本相似,3、7 d高于对照组,14 d低于对照组,28 d接近对照组,且3 d时TLR4、CD16差异极显著(P<0.01),14 d仅TLR2差异显著(P<0.05);CD18 mRNA的转录水平,3 d时显著低于对照组(P<0.05),而7 d时显著高于对照组(P<0.05),28 d接近正常。以上结果表明,PCV2感染PAM后可引起PAM对异物识别吞噬功能与吞噬后信号转导功能出现紊乱,影响了PAM吞噬和清除病原微生物的能力。     

仔猪猪瘟病毒和猪圆环病毒2型混合感染的诊断

猪瘟是由猪瘟病毒(ClassicalSwineFeverVirus,CSFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触性传染性和致死性疾病[1]。猪圆环病毒病(PorcineCircovirusDiseases)是由猪圆环病毒2型(PorcineCircovirustype2,PCV2)感染引起的仔猪多种综合征[2]。猪圆环病毒病是一种条件性疾病,该病病毒主要侵害猪的免疫系统,可造成机体免疫力下降,从而继发如猪伪狂犬病、猪瘟、猪肺炎支原体和猪细小病毒病等疾病,与之发生混合感染,加重疾病的发生和发展,严重危害着猪群的健康程度[3]。     

猪圆环病毒2型病毒样颗粒研究进展

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪圆环病毒相关疾病的主要病原体,给养殖业造成重大经济损失。一直以来,对于PCV2的防控主要通过疫苗接种。目前使用的疫苗可大致分为全病毒灭活疫苗、嵌合病毒疫苗、重组亚单位疫苗三大类。病毒样颗粒(VLPs)作为一种伪病毒,以其高免疫原性、高安全性成为新型疫苗的研究热点。本文综述了VLPs在国内外的最新研究动态、研究和开发的意义,提出了VLPs作为一种基因转载工具,其研究为疫苗研发开拓了新的方向。     

远离猪圆环病毒2型感染

随着该病的不断出现．人们越来越注意到猪圆环病毒2型的危害性。它不仅是断奶仔猪多系统衰竭综合征的罪魁祸首,也是其他传染病的诱因之一。正是圆环病毒2型破坏了免疫系统．才加剧了诸如猪繁殖与呼吸综合征．猪细小病毒病及其他病毒病的发生和流行。因此．有必要对该病进行全面的了解。     

猪圆环病毒2型感染对仔猪免疫功能的影响

为研究猪圆环病毒2型(PCV2)对宿主免疫应答的动态影响,选取19头PCV2和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)血清抗体阴性的普通断奶仔猪,随机分为对照组(4头)和试验组(15头),试验组每头仔猪接种PCV2病毒悬液,分离攻毒后0、3、7、14、21、28和35 d仔猪外周血淋巴细胞和血清,用MTT法检测外周血淋巴细胞的转化率,并用ELISA法检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-6和IL-10的表达变化。结果显示,脂多糖(LPS)刺激下仔猪外周血淋巴细胞的转化率在攻毒后各时间点均极显著降低(P0.01);植物血凝素(PHA)刺激下仔猪外周血淋巴细胞的转化率在攻毒后3、21和28 d极显著降低(P0.01),在攻毒后14 d显著降低(P0.05);与对照猪相比,攻毒猪血清中IL-6的含量在攻毒后各时间点均无显著变化(P0.05);IL-1β的含量在攻毒后7 d显著升高(P0.05),IL-10的含量在攻毒后35 d极显著升高(P0.01);IL-2的含量在攻毒后7 d显著降低(P0.05),在攻毒后21 d显著升高(P0.05),在攻毒后28和35 d均极显著升高(P0.01)。结果表明,PCV2能显著抑制仔猪外周血T、B淋巴细胞的转化能力,并能激活机体的固有免疫应答,但同时能导致适应性免疫应答的活化出现迟滞并在攻毒后期引起免疫调节紊乱。     

人工感染猪圆环病毒2型仔猪的组织病理学观察

为探索猪圆环病毒2型(PCV-2)对仔猪的致病机理,采用免疫组化方法和HE染色对人工感染PCV-2仔猪的呼吸、消化及淋巴系统主要器官进行抗原定位和组织病理观察。结果显示,淋巴器官的组织广泛分布阳性抗原,尤其在淋巴小结较为密集,组织出现不同程度的棕黄色着色,不均匀分布在胞质中。消化与呼吸系统的实质性器官功能性小叶不完整,组织结构紊乱,组织细胞呈不同程度的胞质溶解、胞核固缩及出现包涵体等病理变化。淋巴器官的组织细胞出现不同程度的裂解与消失,严重病例中大多数淋巴细胞成团消失,难以发现较为完整的淋巴小结,并在细胞质中出现球形的包涵体,也具有呈单或团状的类上皮样组织结构,细胞质出现溶解或消失,仅剩细胞膜的结构,出现胞核固缩,导致组织的空泡化现象。     

仔猪人工感染猪圆环病毒2型后的病理学特征

自Harding首次报道1991年加拿大发现断奶仔猪多系统衰弱综合征（post-weaning multisystemic wasting syndrome，PMWS）以来，猪圆环病毒2型（porcine cirovirus type 2，PCV2）感染及其所致疾病已遍及世界各地，成为危害世界养猪生产的一大疫病。PCV2是引起PMWS的主要病原体。PMWS主要感染5～12周龄断奶仔猪，引起的临床症状包括体重下降、进行性消瘦、呼吸困难、贫血、腹泻和黄疸；组织病变包括淋巴结病，肉芽肿性间质性肺炎，肝炎和间质性肾炎，其发病率在5％～30％不等，死亡率可高达50％炉此外，由于PCV2感染引起的免疫抑制可造成二次感染，更增加了疾病的严重程度。     

山豆根多糖对猪圆环病毒Ⅱ型感染猪肺泡巨噬细胞炎性因子水平的影响

试验旨在研究山豆根多糖（SSP）对猪肺泡巨噬细胞3D4/2感染猪圆环病毒Ⅱ型（Porcine circovirus virus Ⅱ type,PCV2）后炎性因子水平的影响。本试验设空白对照组、PCV2感染组、脂多糖（LPS）对照组和3种浓度（100、200和400 μg/mL）的山豆根多糖组,采用PCV2体外感染猪肺泡巨噬细胞,在培养液中分别加入100、200和400 μg/mL山豆根多糖培养24 h后收集样品,用酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞分泌单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白细胞介素-8（IL-8）水平和胞内环氧合酶-1（COX-1）、环氧合酶-2（COX-2）的酶活性,实时荧光定量PCR和Western blotting法分别检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、COX-2基因及其蛋白表达。结果显示,PCV2感染猪肺泡巨噬细胞后极显著提高了MCP-1、IL-8分泌水平和细胞内COX-1、COX-2酶活性（P<0.01）,iNOS、COX-2 mRNA和蛋白表达水平均极显著提升（P<0.01）;100、200、400 μg/mL山豆根多糖处理后,3D4/2细胞MCP-1、IL-8分泌水平和细胞内COX-1、COX-2酶活性均显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）,其中400 μg/mL山豆根多糖处理后效果最显著,细胞内iNOS、COX-2基因mRNA表达水平同样显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）;100、200、400 μg/mL山豆根多糖处理后,显著或极显著抑制了由PCV2诱导的iNOS蛋白表达量的增加（P<0.05;P<0.01）,经200、400 μg/mL山豆根多糖处理后显著抑制COX-2蛋白表达量的增加,400 μg/mL山豆根多糖处理效果最佳。综上所述,山豆根多糖可在一定程度上抑制PCV2感染所引起的促炎症因子mRNA表达的升高及其蛋白的表达,起到一定的缓解炎症的作用。     

猪圆环病毒2型感染的净化

猪圆环病毒2型感染是由2型猪圆环病毒（PCV-2）引起的一种多系统功能障碍性疾病,该病与猪的多种疾病综合征有关,由其引起的疾病主要有断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎及肾病综合征、母猪繁殖障碍、猪间质性肺炎、肠炎6种疾病。另外,它与猪呼吸与繁殖障碍综合征、猪细小病毒、传染性先天性震颤也有关联。病毒能侵害猪体免疫系统,导致猪体的免疫抑制及抵抗力下降,干扰和破坏猪对其他疫病免疫抗体的产生和维持,从而继发或并发其他疾病,它给养猪业造成了巨大的经济损失。目前,PCV-2感染在我国分布广泛,应引起畜牧兽医工作者的高度重视。     

猪圆环病毒2型感染的诊断

<正>对于猪圆环病毒2型感染的诊断方法,目前有PCR技术、多重PCR、巢式PCR方法、竞争PCR方法、荧光定量PCR、原位杂交技术、DNA芯片技术等检测技术[1]。本文通过聚合酶链反应(PCR)、免疫组织化学(IHC-P)和免疫荧光(IFA)的方法,对送检病猪样本进行检测,及时发现和淘汰感染猪,减少由PCV引发的疾病,对降低养猪业的经济损失十分必要。1临床症状对57例PCV-2阳性病猪的临床症状统计,消瘦、被毛粗乱是PCV-2相关疾病的主要临床表现。进行性呼吸困难、皮肤苍白也是大部分病例     

猪场母猪与仔猪猪圆环病毒2型感染情况调查

为了解目前母猪和仔猪猪圆环病毒2型(PCV2)感染情况,本试验对来自于15个猪场的85份母猪血清和29个猪场的55份仔猪可疑病料(脾脏、淋巴结、肾脏等),分别采用间接ELISA和PCR法进行PCV2抗体和病毒核酸检测。结果显示,在15个猪场中,1个猪场母猪抗体呈阴性,其他14个猪场母猪抗体均呈阳性,猪场PCV2阳性检出场为93.3%(14/15),85份母猪血清抗体总阳性率为75.3%(64/85)。29个猪场的仔猪,PCV2核酸检测阳性猪场为19个,猪场阳性率为65.5%(19/29),55份仔猪可疑病料病毒核酸检测总阳性率61.8%(34/55)。可见,母猪和仔猪感染PCV2相当普遍。对母猪群PCV2抗体阳性率及其仔猪群病毒核酸阳性率进行比较发现,母猪群PCV2抗体阳性率越高其仔猪群病毒核酸阳性率却越低。     

凉山州腹泻仔猪猪圆环病毒2型感染情况调查

为了解凉山州腹泻仔猪猪圆环病毒2型(PCV2)的感染情况,采用PCR方法对采自四川省凉山州西昌市和喜德县7个猪场85份腹泻仔猪粪便、病变组织等样品进行PCV2检测,并将扩增到的PCV2 ORF2基因片段进行测序和序列分析。结果显示,PCV2阳性样品有22份,阳性率为25.9%,阳性猪场占71.4%(5/7)。22个ORF2基因片段长度均为459 bp,核苷酸同源性为92.8%～100%,氨基酸同源性为93.5%～100%。构建的系统进化树显示22个测序序列分别处于2个分支:PCV2b和PCV2d,但未形成明显的地理分支。结果表明凉山州猪群中PCV2感染较为普遍,且以PCV2d亚型为主,并存在一定程度的遗传变异。     

脂多糖诱导的猪肺泡巨噬细胞中Toll样受体和下游基因的表达

本研究旨在确定Toll样受体(TLRs)和下游基因的表达,以及脂多糖(LPS)刺激的猪肺泡巨噬细胞(AM)中细胞因子的分泌随年龄的动态变化。从5日龄新生仔猪和120日龄幼猪中分离AMs,在无LPS和不同浓度LPS添加条件下培养24 h,用实时定量PCR和ELISA分别对其mRNA的表达和细胞因子进行检测。结果表明,与未刺激的细胞相比,添加不同浓度的LPS均导致TLRs 2、4、5和9 mRNA的上调,其中在不同年龄中TLR4的表达均为最高(P<0.05)。此外,定量分析结果表明,两个年龄阶段编码TLRs 2、4、5和9,LBP、CD14、MD2、MyD88、IRAK4和TRAF6的mRNA表达的增加均呈时间依赖性(P<0.05);LPS诱导的TLR4、LBP、CD14和MyD88 mRNA的表达,新生仔猪显著高于幼龄猪(P<0.05);上清液中细胞因子IL-6和TNF-α的水平随培养时间和动物年龄显著变化(P<0.05)。在两个年龄的猪中,其浓度在LPS刺激1 h后增加,且在48 h时仍差异显著。幼龄猪上清液中的促炎性细胞因子IL-6和TNF-α显着高于仔猪。研究结果表明,TLRs和下游基因的表达随年龄而变化,促炎性细胞因子促进了与年龄相关的肺部感染先天性免疫应答的不同。下一步需要在更大的年龄范围内通过功能研究手段确定LPS对猪AMs的精确影响。     

猪圆环病毒2型感染血清学调查

为掌握云南省猪圆环病毒2型的感染状况,2006—2010年间从云南省部分规模化猪场采集未经PCV2疫苗免疫猪的血样共2974份,采用ELISA 方法进行抗体阳性率检测。结果表明,检测的5年间PCV2抗体总阳性率为42.04%,且基本上呈逐年上升趋势。与商品猪相比,种猪的PCV2抗体阳性率相对最高,证实在云南规模化猪群中存在较为严重的PCV2感染和流行。     

猪圆环病毒2型合并感染脑心肌炎病毒对仔猪的致病性分析

旨在研究猪圆环病毒2型(PCV-2)感染仔猪后造成免疫抑制条件下,探索合并感染脑心肌炎病毒(EMCV)对仔猪的生长性能影响和致病性分析。选取16头健康仔猪设计了EMCV攻毒组、PCV-2攻毒组、PCV-2/EMCV联合攻毒组和对照组,通过临床表现、组织病理学检测、生长性能、免疫指标以及排毒情况等多方面评价,对二者合并感染仔猪的影响进行了研究。结果显示,2种病毒单独感染后,均表现出各自的典型临床特征,危害均不严重。但合并感染后死亡率迅速上升,平均日增重显著降低,体重负增长率升高,心肌和脑组织变性、坏死更为严重,血液中淋巴细胞比率始终较低,EMCV中和抗体较长时间维持在低水平。EMCV排毒期可持续至感染后第12天,略长于EMCV单独攻毒组的第9天。研究结果证实,PCV-2先期感染可使EMCV对仔猪表现出更为严重的致病性和致死性,免疫功能降低,并可能使得EMCV在猪体内的复制、排毒能力增强。     

猪圆环病毒2型复制与转录模式研究进展

猪圆环病毒是一种单股负链环状DNA病毒,有PCV1和PCV2两种血清型,PCV1一般认为无致病性,而PCV2是导致断奶仔猪多系统衰竭综合症的重要病原,给养猪业造成了巨大的经济损失。PCV复制模式为坩埚滚环复制,须依赖于Rep和Rep,蛋白的共表达、病毒复制起始区和双链DNA片段的形成,三者缺一不可;其转录模式也较为复杂,可双向进行且通过选择性剪切从而产生不同的RNA。主要对PCV2复制模式和转录模式等方面进行综述,以期为PCV的相关研究提供借鉴和参考。     

广西断奶仔猪猪圆环病毒2型的检测

对广西16个养猪场的22份断奶仔猪病料用PCR技术检测猪圆环病毒2型（PCV-2），对阳性病进一步检测猪瘟病毒、猪生殖和呼吸系统综合征病毒、伪狂犬病病毒及细菌性病原。结果，从南宁市郊某猪场表现衰弱症状的病猪病料中检测出PCV-2，而这些病料没有检出猪瘟病毒、猪生残和呼吸系统综合征病毒、伪狂犬病病毒及可疑细菌，证实广西存在PCV-2引起的断奶仔猪多系统衰弱综合征（PMWS）。