紫锥菊、黄芪对感染IBDV雏鸡胸腺、小肠中CD4+、CD8+T淋巴细胞动态分布的影响

将14日龄雏鸡随机分为3组,A组灌服1 mL的紫锥萄、黄芪合荆,B、C组灌服生理盐水,连续灌服7 d.21日龄时A、B组雏鸡接种传染性法氏囊病病毒(IBDV),用免疫组化法观察雏鸡胸腺、小肠中CD4+、CD8+T淋巴细胞动态分布的变化.结果表明,用药组和攻毒对照组相比较,CD4+T淋巴细胞差异显著(P<0.05),但是CD8+T淋巴细胞差异不显著(P>0.05),与空白对照组相比CD4+淋巴细胞显著增多.胸腺、小肠中24日龄时CD4+、CD8+T细胞数量较其他日龄差异显著(P<0.05).总试验期胸腺中CD4+、CD8+含量是所测总数的60%.表明紫锥菊、黄芪对机体免疫有显著增强作用,以胸腺中CD4+、CD8+含量多于小肠,能显著降低IBDV对机体造成的损伤.     

增免散对鸡脾T淋巴细胞CD4^＋和CD8^＋亚群的影响

将300只1日龄雏鸡随机分为中药增免散组、环磷酰胺组、环磷酰胺＋左旋咪唑组、环磷酰胺＋增免散组和正常对照组，6日龄时用鸡新城疫LaSota疫苗点眼滴鼻免疫，14、21、28、35日龄时测定鸡血液NDV抗体效价，脾器官指数，脾组织中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞浓度和脾细胞凋亡率，观察脾的组织结构变化。结果显示，14、21日龄增免散组抗体水平高于其他各组（P〈0．01）；14、21、28日龄增免散组脾指数高于其他各组，增免散组脾CD4^＋细胞浓度、CD4^＋／CD8^＋比例高于其他各组，差异极显著（P〈0．01）；14、21、28日龄增免散组脾细胞凋亡率低于其他各组，差异极显著（P〈0．01）；14、21日龄时，增免散组脾白髓和红髓内网状细胞和中淋巴细胞较多，脾小体比对照组略有增加。表明，中药增免散不仅能促进鸡脾的发育，增高脾组织中CD4^＋／CD8^＋比例，而且对环磷酰胺的免疫抑制有一定拮抗作用。     

紫锥菊和黄芪活性成分缓解IBD雏鸡免疫抑制性的研究

为探讨紫锥菊、黄芪对感染传染性法氏囊病(IBD)雏鸡免疫的影响,给14日龄雏鸡灌服不同浓度紫锥菊、黄芪合剂(按3∶1比例混匀),其有效成分为菊苣酸和黄芪多糖,连续灌服7 d,21日龄时给雏鸡接种传染性法氏囊病病毒(IBDV)。结果表明,应用紫锥菊、黄芪后可缓解IBDV造成法氏囊的病理损伤,增加免疫器官指数,在攻毒20 d后差异明显;用药组中球蛋白含量在攻毒后11 d升高明显,可以缓解免疫抑制,进而调节机体免疫机能,增强机体的防御功能,有利于该病的防治。     

紫锥菊黄芪对传染性囊病疫苗免疫雏鸡淋巴细胞亚群和肿瘤坏死因子含量的影响

为探讨紫锥菊、黄芪提取物提高雏鸡免疫力的效果,本试验选用紫锥菊、黄芪、紫黄(紫锥菊黄芪)合剂3种组方分别以不同的3种剂量给6日龄雏鸡连续口服7 d,13日龄进行腔上囊疫苗免疫,在20,27,34日龄时ELISA方法检测血清中TNF-α的含量;在13,20,27日龄时流式细胞仪检测外周血中CD4+、CD8+含量并计算CD4+/CD8+比值.结果表明,紫锥菊对外周血CD4+/CD8+ T淋巴细胞亚群的比例以及血清TNF-α的含量均有一定的提高,说明紫锥菊提取物针对IBD疫苗具有明显的免疫促进作用,是一种效果极为明显的免疫增强剂.     

紫锥菊、黄芪对法氏囊病雏鸡的肝损伤及脾脏NK细胞活性的影响

给14日龄雏鸡灌服不同浓度紫锥菊、黄芪合剂,连续灌服7d,21日龄时雏鸡接种传染性法氏囊病病毒(IB-DV),来观察雏鸡血液转氨酶活性及脾脏NK细胞活性的变化。结果显示,攻毒后4d和攻毒后11d时用药组与攻毒对照组相比,谷草转氨酶(Ast)、谷丙转氨酶(Alt)均有所降低,差异显著(P<0.05);攻毒后11d时Ast/Alt比值极显著低于攻毒对照组(P<0.01)。脾脏NK细胞活性在感染后14d,高剂量组活性极显著高于攻毒对照组和空白对照组(P<0.01),感染21d后各组差异不显著。结果表明,紫锥菊、黄芪合剂在雏鸡感染IBDV后12d前后一段时间可显著降低传染性法氏囊病病毒对肝脏造成的损伤,促进脾脏NK细胞的活性,增强机体的防御功能,有利于该疾病的防治。     

传染性法氏囊病病毒超强毒感染SPF鸡免疫器官中CD4+和CD8+T淋巴细胞动态分布

利用免疫组织化学染色对传染性法氏囊病病毒（IBDV）超强毒LX株感染SPF鸡免疫器官中CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞的动态分布进行了研究。超强毒LX株接种2周龄SPF雏鸡，在其法氏囊、脾脏、胸腺、盲肠扁桃体、骨髓和哈氏腺中均可检出IBDV抗原的存在和CD4^ 与CD8^ T淋巴细胞的数量改变。在法氏囊中，CD4^ 淋巴细胞主要存在于淋巴滤泡间隙和滤泡皮质，而CD8^ T淋巴细胞则丰在于整个淋巴滤泡和滤泡间隙，并且CD8^ T淋巴细胞数量明显多于CD4^ T淋巴细胞，在接种后14d仍未见CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞数量减少。脾脏中CD4^ T淋巴细胞主要存在于外周小动脉淋巴鞘或散在，而CD8^ T淋巴细胞则多存在于外周小动脉淋巴鞘和红髓。接种后胸腺中CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞在皮质中减少，但在髓质增多，尤其是CD8^ T淋巴细胞数明显多于CD4^＋T淋巴细胞。盲肠扁桃体中CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞主要存在于发生中心，尤其是CD8^ T淋巴细胞数比CD4^ T淋巴细胞明显多。骨髓和哈氏腺中也可见CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞，而且CD8^ T淋巴细胞更多。在这些淋巴器官中，病毒损伤部位出现CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞的迁入聚集，表明T淋巴细胞可能参与IBDV超强毒的免疫致病过程。     

中药复方连翘对感染法氏囊病毒雏鸡免疫功能的影响

160只7日龄健康岭南黄鸡随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组,每组40只,Ⅰ为正常对照组、Ⅱ为感染病毒组、Ⅲ为中药复方治疗组、Ⅳ为中药复方制剂组,Ⅱ、Ⅲ组均于8日龄感染传染性法氏囊病毒（IBDV）,Ⅲ、Ⅳ以20g&#183;kg^-1单剂量灌服中药复方连翘汤。分别于试验后第7、14、21、28日龄采外周血及免疫器官法氏囊和脾脏,测定血细胞的吞噬能力、外周血T淋巴细胞的百分率和T淋巴细胞的转化率,流式细胞仪测定鸡外周血和脾T淋巴细胞亚群CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋T细胞的含量;放血致死称体质量、脾和法氏囊质量,计算免疫器官指数。在感染IBDV7d后取脾脏和法氏囊组织,制备组织样品进行组织学及透视电镜观察。结果表明：中药复方连翘制剂可使雏鸡外周血细胞的吞噬能力、T淋巴细胞的百分率和T淋巴细胞的转化率、法氏囊和脾脏的质量明显提高,对感染IBDV后免疫器官法氏囊和脾脏有明显的改善和恢复作用,提高外周血和脾淋巴细胞中CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋T细胞百分率,改变CD4^＋／CD8^＋比值促进对机体免疫系统的调控。感染病毒组的上述指标显著下降,中药复方连翘治疗组与感染病毒组相比能显著提高上述指标。     

紫锥菊、黄芪提取物对鸡传染性法氏囊病疫苗免疫调节作用和生产性能的影响

为了探讨紫锥菊和黄芪的免疫调节作用,以1日龄罗斯308肉鸡作为试验材料,用传染性法氏囊病(IBD)疫苗进行免疫,以紫锥菊提取物单剂,黄芪提取物单剂,以及紫锥菊和黄芪合剂3种组方,分别以3种剂量在6日龄连续给雏鸡口服7 d,在13、20、27、34、41日龄采血检测外周血中鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)抗体,IL-2含量,并测定肉鸡生产性能.结果表明,应用紫锥菊提取物能明显提高外周血中IBDV抗体和IL-2含量,提高试验鸡料肉比.说明紫锥菊提取物具有明显的免疫促进作用,改善生产性能作用,其中0.5%为最佳剂量.用两种提取物相配伍后(0.5% 0.25%)同样提高其机体免疫水平,显示出两种物质的协同作用和增强作用.     

刺五加多糖对雏鸡脾脏中CD4+ 和CD8+T淋巴细胞定位分布的影响

为了研究刺五加多糖（ASPS）对雏鸡脾脏中CD4+和CD8+ T淋巴细胞定位分布的影响,从组织学角度评价ASPS对脾脏的免疫调节作用,试验将1日龄海兰褐公雏饲养至7日龄时选取150只,随机分为3组：空白对照组、ASPS低剂量组（ASPSL）和高剂量组（ASPSH）,每组50只,所有组每天注射1次,连续注射3天。免疫后的第7、14、21和28天分别取其脾脏制作冰冻切片,采用免疫组织化学方法检测CD4+和CD8+ T淋巴细胞的定位分布。结果显示,与空白对照组比较,免疫注射后21天和28天时ASPSL组和ASPSH组CD4+ T淋巴细胞的数量均显著增加（P<0.05）,而且ASPS能够促进红髓中CD4+ T淋巴细胞向动脉周围淋巴鞘迁移,从而使单个动脉周围淋巴鞘面积较对照组明显增加,而ASPS对脾脏中CD8+ T淋巴细胞的数量和分布无明显影响。由此可知,ASPS能够通过影响脾脏中CD4+ T淋巴细胞的定位分布发挥免疫调节作用,这对于进一步揭示ASPS的免疫调节机制具有重要意义。     

中药复方紫石散对肉鸡免疫效果的影响

本实验目的是为了研究中药组方紫石散对肉鸡免疫效果的影响。试验用6日龄同一品种,体重接近,健康肉雏鸡作为实验动物150羽,随机分为5个处理组,饲喂低(1.0%)、中(1.5%)、高(3.0%)三种剂量浓度紫石散,连续灌服药物一星期。在13日龄、20日龄、27日龄、34日龄翅静脉采血,检测IBDV抗体含量,以及应用流式细胞仪(Flow Cytometry,FCM)检测外周血中CD4+,CD8+的含量。结果表明,在用药一周后IBDV抗体含量增加,CD4+,CD8+和CD4CD8均有明显提高,中高剂量组提高显著P<0.05,并且体现出明显的剂量依赖性。说明中药方剂紫石散具有明显促进免疫的作用。     

米糠多糖对雏鸡T细胞免疫功能的影响

为探讨米糠多糖（RBS）对不同免疫状态雏鸡免疫功能的影响,本试验采用流式细胞技术检测了健康雏鸡、环磷酰胺（CTX）处理雏鸡和人工感染IBDV雏鸡等三种免疫状态雏鸡在服用米糠多糖（剂量150mg／kg·d））和不服用米糠多糖情况下,外周血CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群数量的动态变化。结果显示,口服米糠多糖能够提高健康雏鸡外周血中CD4^＋T淋巴细胞比率,对CD81淋巴细胞作用不明显;米糠多糖对CTX和IBDV引起试验雏鸡外周血中CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群减少具有一定的抑制作用。     

传染性法氏囊病病毒对SPF雏鸡免疫器官T细胞增殖能力及亚型的影响

以SPF雏鸡为研究对象,应用细胞培养、MTT及流式细胞检测技术,通过T淋巴细胞对刀豆蛋白A的增殖能力及其CD4+和CD8+T淋巴细胞亚型数量的检测,较全面系统的研究了传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染21日龄SPF雏鸡后,其免疫器官(胸腺、脾脏、法氏囊)T细胞增殖能力及其亚型的动态变化,结果发现:IBDV感染SPF雏鸡后,其胸腺和脾脏T淋巴细胞增殖能力于病毒感染后3～7 d显著降低,CD4+和CD8+T淋巴细胞数量于病毒感染初期明显低于对照雏鸡;法氏囊中CD4+和CD8+T淋巴细胞数量在病毒感染初期迅速增加,而后持续低于对照雏鸡.表明SPF雏鸡感染IBDV后,其免疫器官细胞免疫功能受抑制,而作为病毒侵袭的主要靶器官,法氏囊在病毒感染初期有大量T细胞浸润,该项研究为进一步阐明IBDV的免疫致病机制提供了重要的参考依据.     

E.tenella初次感染雏鸡外周血T淋巴细胞亚群及增殖能力变化的动态研究

应用流式细胞术（ FCM）和MTS比色法检测雏鸡初次感染柔嫩艾美尔球虫（ E． tenella）后外周血中CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T淋巴细胞及其增殖能力的动态变化。数据显示,E． tenella初次感染雏鸡后7～20 d CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T 淋巴细胞比例明显高于对照组雏鸡（ P＜0．05和P＜0．01）,并且均于12 d时达到峰值。初次感染后7～20 d雏鸡外周血中CD4＋／CD8＋T淋巴细胞亚群的比值明显升高,于感染后16 d时达到1．78。 E． tenella初次感染雏鸡后12～20 d外周血淋巴细胞增殖能力明显高于对照组雏鸡（ P＜0．05）,并于16 d达到峰值。试验表明E． tenella初次感染雏鸡能激活淋巴细胞产生增殖反应,CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T淋巴细胞在抵抗E． tenella初次感染过程中有重要作用。     

紫锥菊复合物对雏鸡人工感染传染性法氏囊病病毒的效果观察

本试验将240只海兰褐雏鸡随机分为8组,每组30只,分别为紫锥菊复合物高剂量组、中剂量组、低剂量组、中药对照组、西药对照组、疫苗对照组、阴性对照组、健康对照组,采用紫锥菊复合物,将试验鸡人工感染传染性法氏囊病病毒（IBDV）强毒,观察紫锥菊复合物对雏鸡的保护作用。结果表明：紫锥菊复合物可以减弱IBDV强毒对雏鸡免疫器官的损害,对传染性法氏囊病强毒感染雏鸡具有明显的保护作用。     

不同日龄鸡肺脏中CD4~+、CD8~+ T淋巴细胞分布规律

为了解鸡肺脏不同时期的免疫状态,选择不同日龄海兰白鸡的肺脏组织,利用免疫组织化学方法研究CD4~+和CD8~+T淋巴细胞的出现、定位分布及数量变化过程。结果显示,CD8~+细胞最初于18 d胚胎中出现,而CD4~+T淋巴细胞于孵化后1日龄雏鸡中出现。4日龄时,在初级支气管与次级支气管交汇处有淋巴细胞的聚集物,即形成了明显的支气管相关性淋巴组织(BALT)。在定位分布上,各日龄CD4~+T淋巴细胞主要占据BALT的中央区域,而CD8~+T淋巴细胞主要环绕在外周。从56日龄开始,CD8~+T细胞较CD4~+T细胞分布范围更为广泛,在三级支气管气道内壁中、房间隔中、气体交换区和小叶间结缔组织中均有分布,散布在整个肺脏中。在数量变化上,随着日龄增长,CD4~+T淋巴细胞和CD8~+T淋巴细胞数量均逐渐增加,且35日龄之前CD4~+T细胞数量多于CD8~+T细胞,而此后各日龄CD8~+T细胞的数量均显著多于CD4~+细胞。以上结果表明,鸡肺脏中CD4~+和CD8~+ T淋巴细胞的分布和数量均呈日龄相关性变化,且该变化说明鸡35日龄之前肺脏以体液免疫为主,而之后则倾向于细胞免疫。     

雏鸡感染毒害艾美耳球虫后免疫器官T细胞亚群的动态变化

采用ABC法检测了毒害艾美耳球虫（Eimeria necatrix）初次、二次感染雏鸡后，其免疫器官T细胞亚群的动态变化。结果发现：雏鸡初次感染E．necatrix后，其胸腺和脾脏的CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞于感染后4～21d不同程度高于未感染的对照雏鸡，14～16d达峰值，随后缓慢下降。其中CD4^＋T细胞较CD8^＋T细胞增殖辐度大，持续时间也较长。Enecatrix二次感染雏鸡后，上述免疫器官的CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞数量在感染后2～7d呈下降趋势，随后回升，至10～14d明显高于对照和初次感染雏鸡。其中CD8^＋T细胞在二次感染后降幅较小，回升更迅速，增殖幅度也较大。表明鸡CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞在抵抗E．necatrix感染的不同时期发挥不同的作用。     

苷肽注射液对犬外周血CD 4、CD 8比值的影响

以20只健康犬为研究对象,随机分为四组,每组5只,分别注射苷肽注射液、苷肽注射液和犬五联疫苗、犬五联疫苗、生理盐水,各组犬于注射的第0、2、7、15天采血,检测不同组之间的CD 4＋和CD 8＋比值变化规律。结果表明：苷肽注射液单独应用和与疫苗同时应用,在注射的第2天就可以显著提高CD4＋、CD8＋比值,到第7天时达到最高值。并且发现,注射苷肽注射液同时注射犬五联疫苗组和单独注射苷肽注射液组CD4＋、CD8＋比值显著高于单独注射犬五联疫苗组（P〈0.05）,这说明苷肽注射液具有增强免疫的作用。     

外源性核酸对感染IBDV雏鸡免疫功能和抗氧化能力的影响

300只20日龄健康海兰白雏鸡随机分为6组,Ⅰ组为对照组,Ⅱ～Ⅵ为试验组,Ⅱ、Ⅴ组饲料中分别添加0.1%核酸,Ⅲ和Ⅵ组分别添加0.2%核酸,Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组于27日龄感染传染性法氏囊病毒(IBDV),分别于30,33,36,39,42日龄心脏采血测定T淋巴细胞转化率,白细胞的吞噬率,SOD、GSH-Px和CAT活性,用流式细胞仪测定鸡脾脏T淋巴细胞亚群的变化;时处死雏鸡,测定免疫器官法氏囊和脾脏指数,观察其组织结构.结果表明,日粮中添加不同剂量的核酸均可提高T淋巴细胞转化率和T淋巴细胞数,法氏囊和脾脏的相对质量均明显增加,并能促进法氏囊和脾脏的快速发育,提高脾淋巴细胞中CD3+、CD4+和CD8+T细胞百分率,改变CD4+/CD8+比值促进对机体免疫系统的调控,增强白细胞的吞噬功能;可显著提高鸡血清中SOD、GSH-Px和CAT活性.IBDV感染组与病毒感染加核酸组之间上述指标差异显著,感染IBDV组可使上述指标明显下降,感染IBDV加核酸组的上述指标接近正常对照组,说明核酸能补偿IBDV对雏鸡免疫系统的抑制作用,具有一定的抗氧化能力,而且能促进雏鸡修复组织损伤.     

益生菌对Balb/C小鼠外周血CD3、CD4和CD8分子表达水平的影响

为研究益生菌增强Balb/C小鼠免疫功能的作用机理,本试验将48只Balb/C小鼠分为对照组（生理盐水灌服组）和试验组（益生菌灌服高、中、低剂量组）,下文记为C、P-L、P-M和P-H组。分别在灌服7、14、21、28d后,每组随机选取3只小鼠处死,取其外周血离心后收集上清,采用ELISA方法分别检测CD3、CD4和CD8分子的表达量。结果显示,试验7d后,与对照组相比,P-L和P-H组小鼠血清CD3分子表达量分别显著上升54.78%(P <0.05)、98.52%(P <0.05);21d后,P-H组小鼠血清CD3分子表达量与对照组相比显著升高83.51%(P <0.05);7d后与对照组相比,P-L、P-M和P-H组小鼠血清CD8分子表达量分别显著上升44.94%(P <0.05)、46.73%(P <0.05)和43.78%(P <0.05);14d后,与对照组相比,P-L、P-M和P-H组小鼠血清CD8分子表达量分别显著上升39.27%(P <0.05)、40.05%(P <0.05)和36.02%(P <0.05);21d...     

负载灭活口蹄疫病毒树突状细胞启动的CD8~＋T细胞应答

探讨在体外条件下负载灭活口蹄疫病毒（iFMDV）树突状细胞对CD8＋T细胞的活化效应。用重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rmGM-CSF）和白介素-4（rmIL-4）将小鼠外周血单核细胞诱导分化成树突状细胞（MoDCs）,用信号阻断法从淋巴结T细胞制备CD8＋T细胞,利用负载iFMDV的MoDCs与CD8＋T细胞共培养,以iFMDV＋MoDCs作为对照,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。用蛋白酶体抑制剂处理MoDCs,2h后再负载iFMDV,并与CD8＋T细胞共培养,对照组则用iFMDV＋MoDCs＋CD8＋T细胞,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。结果表明,同对照组相比,在共培养后9,12,24,36,48h,CD8＋T细胞组均产生高水平的IFN-γ。而且,经抑制剂预处理的MoDCs与CD8＋T细胞共培养后,其分泌的IFN-γ量不仅没有降低,反而显著升高。因此得出,MoDCs可与蛋白酶体等加工iFMDV抗原,并通过交叉提呈途径激活CD8＋T细胞。