不同培养基培育蛹虫草中的虫草素和腺苷含量测定

虫草素和腺苷是蛹虫草的重要活性成分,通过高效液相色谱(HPLC)法测定不同培养基培育蛹虫草中的虫草素和腺苷含量,筛选能生产高品质蛹虫草的培养基。测定结果表明,用不同培养基培育的蛹虫草子实体中,其虫草素和腺苷含量存在显著差异,总体表现为粳米+家蚕蛹浸提液培养基>糯米+家蚕蛹浸提液培养基>粳米培养基>糯米培养基,其中用粳米+家蚕蛹浸提液培养基培育蛹虫草子实体中的虫草素和腺苷质量比分别高达15.37 mg/g和39.96 mg/g。此外,相同培养基培育的蛹虫草子实体、菌丝体和培养基质中的虫草素与腺苷含量存在极显著差异,总体表现为子实体>菌丝体>基质。试验结果表明,粳米培养基中添加家蚕蛹浸提液可显著提高蛹虫草中的虫草素和腺苷含量。     

人工培育条件对蚕蛹虫草主要活性成分含量的影响

虫草素和腺苷是蛹虫草(Cordyceps militaris)最主要的药用活性成分。以家蚕幼虫为寄主人工培育蚕蛹虫草,研究不同培育条件对蚕蛹虫草中虫草素和腺苷含量的影响,为建立不同药用需求的高品质蚕蛹虫草栽培技术提供试验依据。不同培育环境条件下的试验结果是:培养温度在24℃时蚕蛹虫草中的虫草素含量最高,22、24℃时腺苷的含量较高;每天以10℃的温差处理8 h,蚕蛹虫草中的虫草素含量最高(P0.01),而以此温差处理2 h与处理8 h腺苷的含量差异不显著(P0.05);光质为黄光最有利于虫草素和腺苷的形成(P0.01),其次是白光和蓝光;光照度在240~1 200 lx之间虫草素含量的差异不显著(P0.05),光照度在600~1 200 lx之间腺苷的含量差异显著(P0.05)。此外,以饥饿处理(接种后每天只给1次饲料)的家蚕幼虫作寄主有利于虫草素的形成,而以饱食的家蚕幼虫作寄主则更有利于腺苷的形成;以5龄第2天幼虫接种有利于虫草素的形成,以5龄起蚕接种有利于腺苷的形成。根据培养蚕蛹虫草的药用目的,可以对培养温度、温差处理时间、光照以及寄主家蚕幼虫的龄期和取食量等条件进行调节。     

木薯蚕蛹主要营养成分及矿物元素含量分析

木薯蚕蛹含有丰富的蛋白质、脂肪和矿物质,是有开发潜力的新型食用昆虫资源。为了给木薯蚕蛹的有效利用提供依据,开展了木薯蚕蛹的主要营养成分及矿物元素含量测定试验。试验结果表明:木薯蚕蛹中的粗脂肪、总糖含量分别为19.19%±0.12%、3.09%±0.03%,比家蚕雄蛹分别低19.69个百分点、5.16个百分点;木薯蚕蛹粗蛋白质含量为67.20%±0.89%,比家蚕雄蛹高25.55个百分点;在木薯蚕蛹中矿物元素钾含量最高,其次依次是镁、锌、钠、钙含量,分别为5.987 2 mg/g、0.281 1 mg/g、0.146 5 mg/g、0.112 0 mg/g、0.038 1 mg/g;在木薯蚕蛹中硒含量为0.002 8 mg/g,约为等质量家蚕蛹硒含量(0.001 8 mg/g)的1.55倍;但木薯蚕蛹有害元素总砷、总铅和总镉含量分别为1.990 0 mg/kg、0.140 0 mg/kg、0.540 0μg/kg,分别比家蚕蛹的含量高672.21%、42.86%、489.91%,总砷含量超过了食品中总砷含量的限值(0.50 mg/kg)。木薯蚕蛹蛋白含量高,脂肪含量低,富钾低钠,是具有潜力的新资源食品。但其砷的含量超过安全限值,在实际应用时需要进一步作毒理研究并降低含量。     

干燥方法和冷藏保鲜条件对蚕蛹虫草中主要活性成分含量的影响

以家蚕幼虫为寄主接种蛹虫草菌(Cordyceps militaris),人工栽培获得蚕蛹虫草。用不同干燥方法及冷藏保鲜条件对蚕蛹虫草进行处理后,测定蚕蛹虫草中虫草素和腺苷的含量。新鲜蚕蛹虫草采用微波干燥处理,当微波功率为900 W和720W时虫草素的含量较高(P0.01),并且功率为900 W时腺苷的含量也最高(P0.01);新鲜蚕蛹虫草采用高温烘干处理,烘干温度在60℃时虫草素的含量最高(P0.01),烘干温度在100℃时虫草素的含量最低(P0.01),而烘干温度为70℃时腺苷的含量最高(P0.01)。比较微波干燥、高温干燥、冷冻干燥和室内阴干4种方法,经微波干燥处理的蚕蛹虫草无论是虫草素还是腺苷含量都是最高的(P0.01)。新鲜蚕蛹虫草0~5℃条件下冷藏10~20 d,虫草素和腺苷的含量呈极显著下降趋势(P0.01),冷藏20 d以上则2种活性成分的含量变化不再显著(P0.05);冷藏10 d 8℃处理组蚕蛹虫草中2种活性成分的含量极显著高于5℃和0℃处理组(P0.01)。在实际应用中需针对不同的目标产物设置微波干燥条件对蚕蛹虫草进行加工处理,如果选择冷藏保鲜处理,则适宜的温度为5~8℃,并且时间不宜超过10 d,以最大限度地保留所需药用活性成分。     

不同蛹虫草菌株栽培蚕蛹虫草的形态性状及活性成分含量比较

选择5株蛹虫草菌株感染家蚕5龄第3天幼虫生产蚕蛹虫草,通过观察检测蚕蛹虫草的形态性状及采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定虫草素和腺苷的含量,为筛选高产优质蛹虫草菌株提供依据。不同菌株栽培生产的蚕蛹虫草的外观形状、生长状况以及活性成分含量均有明显差异:1-Y菌株栽培的蚕蛹虫草整体形状较接近于野生的冬虫夏草,MS菌株栽培的蚕蛹虫草子座形状较佳,17-3菌株栽培的蚕蛹虫草僵虫体形状较佳;1-1菌株栽培的蚕蛹虫草总质量和僵虫体质量均最高,干质量分别达到1.460 g和1.170 g;MS菌株栽培的蚕蛹虫草子座总数量、子座总长度及子座质量占虫草总质量的比率等指标均极显著高于其他菌株(P0.01),分别达15.100根、44.877 cm和41.357%;1-Y菌株栽培的蚕蛹虫草整体所含虫草素最高,达8.92 mg/g,MS菌株栽培的蚕蛹虫草整体所含腺苷最高,达2.22 mg/g,并且5株供试菌株栽培的蚕蛹虫草僵虫体中的虫草素含量均高于子座,而子座中的腺苷含量均高于僵虫体。研究结果表明,蛹虫草菌株是影响人工栽培蚕蛹虫草形态性状及活性成分含量的重要因素,初步认为1-Y菌株和MS菌株具有较高的生产应用价值。     

家蚕蛹虫草的化学成份分析

分析表明 :家蚕蛹虫草含有虫草酸、虫草素、腺嘌呤、尿嘧啶、β 谷甾醇、麦角甾醇、生物碱和多种游离基酸 ,其化学成份的种类与冬虫夏草基本类似 ,但虫草素、腺嘌呤的含量是冬虫夏草的 3倍。氨基酸分析表明 :家蚕蛹虫草子实体中氨基酸含量高于蛹体部分 ,特别是Glu、Lys ,而Gly则明显低于蛹体部分。比较家蚕蛹虫草与蛹虫草菌粉的化学成份可知 :炽灼残渣、重金属、总氮量和腺嘌呤的含量家蚕蛹虫草高于蛹虫草菌粉 ;总糖、腺苷、甘露醇的含量低于蛹虫草菌粉。稳定性试验表明 :3个月内家蚕蛹虫草的功效成份无明显变化     

不同发育程度柞蚕蛹培育蚕蛹虫草的产量与营养保健品质

将经过0、30、60、90、120和150℃有效积温(以下称积温)处理的柞蚕蛹用于培育蚕蛹虫草,通过调查和检测柞蚕蛹虫草的生长状况及氨基酸组成与主要活性成分含量、超氧化物歧化(SOD)酶活力,考察不同发育程度柞蚕蛹对培育蚕蛹虫草的生长性状与营养保健品质的影响。结果表明,柞蚕蛹感受积温不超过90℃时,蛹虫草菌对柞蚕蛹的感染速度较快,僵蛹率在92%以上,生产蚕蛹虫草总鲜质量及子实体的数量、长度等产量指标显著高于感受积温120℃、150℃的柞蚕蛹生产的蚕蛹虫草(P0.05);柞蚕蛹感受积温在0~120℃之间,随着积温增加,生产蚕蛹虫草的氨基酸总量也有增加趋势,当感受积温150℃时生产蚕蛹虫草的氨基酸总量又降低,比最高组(氨基酸总量的质量分数为35.05%)减少了28.73%;柞蚕蛹感受积温60℃时生产蚕蛹虫草的虫草素含量最高,质量比达到1.15 mg/g;随着柞蚕蛹感受积温的增加,生产蚕蛹虫草中的虫草多糖含量与SOD酶活力逐渐降低,柞蚕蛹感受积温150℃时生产蚕蛹虫草中的虫草酸含量最高(质量分数达13.23%)。试验结果提示,利用柞蚕滞育蛹或轻度发育蛹可以高效生产出品质优良的蚕蛹虫草。     

用不同蛹虫草菌株和家蚕品种幼虫覆土栽培蚕蛹虫草的试验

采用覆土培育的方法人工栽培蚕蛹虫草,在相同的培育环境条件下以6株蛹虫草菌(Cordyceps militaris)菌株和4个家蚕品种的5龄第6天幼虫供试,筛选合适的菌株和蚕品种。同一个家蚕品种的幼虫接种不同蛹虫草菌株的感染率差异显著;接种相同蛹虫草菌株120 h时,家蚕二元杂交组合与四元杂交组合幼虫间的感染率差异显著,至168 h,仅接种菌株H24的2个家蚕二元杂交组合间幼虫的感染率差异显著,各家蚕品种幼虫接种其余菌株的感染率已无显著差异,家蚕品种7532×湘晖的幼虫接种菌株LP4的感染率最高达到93.33%,并且该菌株对4个家蚕品种幼虫的感染能力显著高于其他菌株。不同菌株接种各家蚕品种幼虫的发菌率无显著差异。各家蚕品种幼虫接种菌株H24和H7未获得子实体,接种菌株H10和LP4的出草率最高,平均值分别为84.73%和88.70%。供试菌株和家蚕品种均显著影响蚕蛹虫草中3种活性成分的含量,并且菌株的影响更显著:以菌株L2接种7532×湘晖的幼虫培育蚕蛹虫草中的虫草素含量最高;以菌株H0接种932·芙蓉×7532·湘晖的幼虫培育蚕蛹虫草中的腺苷含量最高;以菌株H0接种洞·庭×碧·波的幼虫培育蚕蛹虫草中的虫草多糖含量最高。综合各项试验成绩初步认为:蛹虫草菌L2菌株和LP4菌株具有较高的生产应用价值;家蚕品种直接影响菌株的感染速度,对培育蚕蛹虫草中活性成分的含量也有一定影响。     

蚕体和蛹粉代料培养基上的蛹虫草生长状况与品质检测

在实验室条件下以优选的蛹虫草菌株YCC-XD-2在家蚕蛹、蛾培养基和蛹粉代料培养基上培育蛹虫草,比较不同培养基上的蛹虫草的生长状况和虫草素含量,探究高产优质蛹虫草的培养方式。蛹虫草菌种在蚕体和蛹粉代料培养基上均生长良好,其中:蚕体培养基以蚕蛾培养基上的蛹虫草生长较好;蛹粉代料培养基以糯米+蛹粉培养基上的蛹虫草生长较好。蚕体培养基培育蛹虫草子实体中的虫草素含量显著高于蛹粉代料培养基培育的蛹虫草,其中,蚕蛾培养基培育蛹虫草子实体中的虫草素质量比高达21.97 mg/g。在相同培养条件下,蛹虫草子实体中的虫草素含量高于菌丝体和培养基质。试验结果表明,利用家蚕蛹、蛾培养基可以生产出高品质蛹虫草。     

家蚕蛹虫草菌丝体水提物对CCl4诱导小鼠肝脏和免疫功能损伤的保护作用

为发掘家蚕蛹虫草的药用价值,研究家蚕蛹虫草菌丝体水提物对CCl4诱导的小鼠肝脏及免疫功能损伤的保护作用。将ICR雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组和家蚕蛹虫草菌丝体水提物低、高剂量组[0.2、0.4 g/(kg.d)],除正常对照组外各组均按剂量30 mg/kg腹腔注射CCl4造模。测定各组小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性和免疫因子白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)的水平,结果表明家蚕蛹虫草菌丝体水提物可极显著提高模型小鼠血清中的IL-2、IFN-γ水平(P<0.01),并极显著降低AST、ALT活性及TNF-α含量(P<0.01)。研究结果显示家蚕蛹虫草菌丝体水提物对CCl4诱导的肝损伤具有明显的保护作用,并通过促进IL-2、IFN-γ的分泌,进而降低TNF-α的水平,调节CCl4模型小鼠的免疫功能,这也是其发挥抗肝脏纤维化作用的机制之一。     

蚕蛹虫草母种培养基的初步研究

冬虫夏草是我国名贵的珍稀药材,资源紧缺,价格昂贵.蛹虫草具有和冬虫夏草相似的活性成分和医疗保健功效,也是我国著名的中药材.蛹虫草可以用蚕蛹或家蚕作寄主进行人工培养,所得虫草主要活性成分的含量比冬虫夏草还高,是最有可能代替冬虫夏草的虫草品种.用蚕蛹培养蛹虫草,可使桑蚕养殖的经济效益大幅度提高,韩国在这方面已提供了成功范例,但其菌种和我国的不同.我们对用家蚕和蚕蛹培养蚕蛹虫草进行了系列研究,研究过程中发现母种培养基对菌种质量至关重要,经过几个批次的研究筛选,得出了母种培养基的最佳配方,现将有关情况报告如下.     

2013年西宁市4种市售肉类的重金属污染监测

为了解西宁市地区农贸市场中部分鸡肉、牛肉、羊肉、猪肉中重金属铅(Pb)、砷(As)、汞(Hg)、镉(Cd)的污染状况。试验采用石墨炉原子吸收分光光度法测定样品中铅、镉的含量;采用原子吸收火焰法测定样品中砷、汞的含量。4种禽畜肉中Pb、As、Hg、Cd的含量平均值范围分别为0.017 80~0.062 20 mg/kg、0.003 44~0.021 70 mg/kg、0.000 204 6~0.000 836 0 mg/kg、0.000 68 mg/kg~0.001 86 mg/kg。结果表明:西宁市市售鸡肉、牛肉、羊肉、猪肉中重金属铅、砷、汞、镉的含量均未超过国家限量标准,市场抽检合格率为100%。     

用不同家蚕品种5龄幼虫培育蚕蛹虫草中的1-脱氧野尻霉素含量检测

家蚕幼虫体内的活性物质1-脱氧野尻霉素(DNJ)的含量在家蚕品种之间存在差异。以蛹虫草菌(Cordyceps militaris)感染家蚕幼虫生产蚕蛹虫草,分别以20个家蚕品种的5龄第3天幼虫作为寄主,调查96 h家蚕感染率、10 d出草率及蚕蛹虫草中的DNJ含量,筛选蚕蛹虫草产量高且富含DNJ的家蚕品种。结果表明,蛹虫草菌对不同家蚕品种幼虫的感染率无显著差异,感染率和10 d出草率均达到100%;不同家蚕品种5龄第3天幼虫制备全蚕粉样品中的DNJ含量存在极显著差异,其中家蚕品种楚玉样品中的DNJ质量分数最高达0.557 5%,用不同家蚕品种5龄第3天幼虫培育的蚕蛹虫草中的DNJ含量也存在极显著差异,其中用家蚕品种东四单幼虫培育蚕蛹虫草样品中的DNJ质量分数最高达0.239 7%。依据试验结果初步认为,不同家蚕品种幼虫接种同一株蛹虫草菌对人工培育蚕蛹虫草的出草率没有影响;蛹虫草菌在蚕体内生长过程中会在一定程度降低蚕体原有的DNJ含量,家蚕品种东四单的5龄幼虫可用于生产高DNJ含量的蚕蛹虫草。     

利用磁化水培养富硒蛹虫草条件优化的研究

为了优化磁化水培养富硒蛹虫草的条件,试验采用正交试验优化磁化水培养富硒蛹虫草的条件。结果表明:最佳培养条件为富硒浓度7 mg/kg、磁场强度0.1 T、磁程15次,在此条件下得到的蛹虫草子实体生物学效率为82.36%,多糖含量为34.41 mg/g,虫草酸含量为60.32 mg/g,虫草素含量为3.15 mg/g,总硒含量为8.97 mg/kg。说明利用磁化水培养富硒蛹虫草能有效提高蛹虫草的生物学效率和活性成分的含量,具有良好的应用前景。     

一株野生北冬虫夏草的分离与以蚕蛹为载体的人工培育

为促进宜宾市蚕桑资源多元化利用,解决蚕蛹虫草生产中菌种来源与质量不稳定及引进菌种适应性差的问题,于当地采集得到一株野生北冬虫夏草菌株,以该菌株为菌种、活体桑蚕蛹为寄主,研究了该菌菌种制备、活蛹接种的最适方法。结果表明,菌种制备以葡萄糖作为碳源、蛋白胨作为氮源、硫酸镁和VB_1为微量元素,接种量为2个单位、振荡频率为120r/min、培养时间为8d最为适宜;活蛹接种以4d蚕蛹于翼翅尖端点接种150mL菌液时,蚕蛹僵化率与出草率最高,均可达90%以上;成熟后子实体长度可达5.5cm,鲜重达1.3g。说明该野生菌株生产性状良好,可作为生产用种进行开发研究。     

高效毛细管电泳法测定虫草制品中核苷类化合物

建立了用高效毛细管电泳技术测定虫草中核苷类化合物的方法,比较了冬虫夏草、人工培养的蚕蛹虫草、人工液体发酵的虫草菌丝及市售虫草制品中核苷类化合物的含量。采用熔融石英毛细管及Beckman P/ACE毛细管电泳仪,在硼砂-磷酸缓冲液(pH8.9),检测波长254nm,分离电压20kv的条件下,4种虫草水提液中的核苷类化合物(虫草素、腺苷、腺嘌呤、尿嘧啶和次黄嘌呤)获得了基线分离,并具有良好的精密度和重现性。检测结果表明:蚕蛹虫草中核苷类化合物含量丰富,虫草素和腺苷含量均高于冬虫夏草,液体发酵的虫草菌丝也可以达到替代野生虫草的效果。     

硒元素对铅、汞胁迫下紫花苜蓿生长的影响

采用沙培盆栽的方法,探讨了在重金属铅、汞胁迫下硒元素对紫花苜蓿生长、养分含量及固氮能力的影响,结果显示:浓度为5mg/kg的硒能明显促进紫花苜蓿的生长,单株干重、粗蛋白含量分别比对照增加了19.8%、12.9%,茎叶硒含量为4.19mg/kg,根瘤固氮酶活性提高了28.7%;单施铅浓度为500mg/kg时,植株干草产量比对照下降了25.3%,过氧化物酶(POD)活性提高了23.2%,茎叶铅含量增加了104.2%,粗脂肪含量下降了31.1%;单施汞浓度为1.5mg/kg时,植株干草产量下降了36.1%,茎叶汞含量增加了256.0%,脯氨酸(Pro)含量增加了15.8%,固氮酶活性下降了51.5%;与铅、汞单施相比硒铅、硒汞混施植株茎叶铅、汞含量分别降低了40.5%和47.9%,Pro含量分别下降了10.9%、6.7%,POD活性下降了7.8%、9.13%,固氮酶活性增加了6.58%、13.1%。适宜浓度的硒元素对紫花苜蓿的促生作用明显,同时能缓解重金属铅、汞对植株生长的毒害。     

用脱脂蚕蛹水解物作氮源培养裂殖壶菌生产DHA的发酵工艺及动力学研究

二十二碳六烯酸(DHA)是人体生长发育所必需的一种多不饱和脂肪酸,裂殖壶菌(Schizochytrium limacinum)因高产富含DHA的油脂而被用于人工发酵生产DHA。为了降低DHA的生产成本,以脱脂蚕蛹水解物作为裂殖壶菌SR21菌株发酵培养基的唯一氮源,并对发酵工艺条件进行优化。以3 L发酵罐培养裂殖壶菌SR21菌株,当脱脂蚕蛹水解物用量为20 g/L、培养温度为26℃、初始p H为6.0、海水晶质量浓度为40 g/L和溶氧量为20%时,菌株发酵培养120 h获得的生物量为39.27g/L,油脂产量22.44 g/L,其中DHA生产效率为62.63 mg/(L·h)。与使用商品化酵母浸粉为培养基氮源相比,以脱脂蚕蛹水解物为氮源培养裂殖壶菌SR21菌株所产油脂的脂肪酸组成保持不变,且DHA产量高达7.52 g/L。利用Logistic模型和LuedekingPiret模型(R~20.99)成功拟合了裂殖壶菌在脱脂蚕蛹水解物作氮源的培养基中生长的动态过程,为后续分批补料培养提供了依据。研究结果表明,脱脂蚕蛹水解物适合作为有机氮源用于培养裂殖壶菌类微藻发酵生产DHA等高附加值油脂。     

蚕蛹粉和蚕粕的制作与应用

蚕蛹粉是未经脱油的制品,蚕蛹粕(渣)是蚕蛹脱油后的残余物制品. 　　蚕蛹粉是蚕蛹经干燥、粉碎后的产物,其粗脂肪含量可达22%以上,故代谢能水平高,可达2.8兆卡/公斤以上.蚕蛹粕(渣)的粗脂肪含量一般仅在10%左有,代谢能水平为2.4-2.5兆卡/公斤.蚕蛹粉和蚕蛹粕的蛋白质含量相当高,分别为54%和65%.……     

蚕蛹粉和蚕粕的制作与应用

蚕蛹粉是未经脱油的制品,蚕蛹粕(渣)是蚕蛹脱油后的残余物制品. 蚕蛹粉是蚕蛹经干燥、粉碎后的产物,其粗脂肪含量可达22%以上,故代谢能水平高,可达2.8兆卡/公斤以上.蚕蛹粕(渣)的粗脂肪含量一般仅在10%左有,代谢能水平为2.4-2.5兆卡/公斤.蚕蛹粉和蚕蛹粕的蛋白质含量相当高,分别为54%和65%.