影响洋葱愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的因素研究

以洋葱雄性不育系种子(10-8F)为外植体,研究了蔗糖浓度、暗处理及取材时间对洋葱愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的影响,以期优化胚性愈伤组织的形成条件,为转基因提供良好受体并为建立高频再生体系奠定基础.结果表明:40 g/L蔗糖及光培养最适合愈伤组织的诱导;50 g/L蔗糖及暗培养最适合胚性愈伤组织的诱导,最适宜的取材时间为45 d.     

几种抗生素对柑桔胚性愈伤组织,原生质体生长的影响

本文试验了４种抗生素对柑桔胚性愈伤组织,原生质体生长的影响,认为在柑桔的遗传转化中宜选用潮霉素磷酸转移酶（Ｈｐｔ）基因为选择标记基因,以潮霉素作为筛选剂,即使是使用新霉素磷酸转移酶基因作为选择标记基因,也不宜使用卡那霉素作为筛选剂,同时确定了柑桔遗传转化后的筛选时宜采用的抗生素浓度。     

橄榄胚性愈伤组织的诱导初探

橄榄 (ＣａｎａｒｉｕｍａｌｂｕｍＲａｅｕｓｃｈ )属于橄榄科橄榄属 ,为福建的特产名果。可鲜食 ,也可加工制成各种风味佳美的蜜饯 ,而且还有药用价值。由于橄榄树体高大 ,童期长 ,且缺乏遗传背景研究资料 ,常规育种遇到很大困难。本文报道诱导橄榄胚性愈伤组织的有效途径 ,以期为利用现代生物技术改良橄榄品种及快速繁殖苗木打下基础。1　材料与方法花后 40～ 5 0ｄ的橄榄幼果采自闽侯村下橄榄园 ,供试品种为福建省的主栽品种惠圆 ,树龄为 2 0年左右。橄榄幼果先用 75 %的酒精浸泡 1ｍｉｎ ,再用 0 1 %的升汞浸泡消毒 1 0ｍｉｎ ,无菌水…     

南丰蜜桔胚性愈伤组织的诱导

以南丰蜜桔"杨小—26"花药为外植体,培养诱导胚性愈伤组织。结果表明:在不同取材时期和培养基条件下,胚性愈伤组织发生率是不同的。南丰蜜桔花药培养的取材最佳时期是单核靠边期;培养基LP+TDZ3.0mg/L+A1.03.0mg/L+NAA1.0mg/L+10mg/LAgNO3较适于胚性愈伤组织再生,再生率高达20.3%;培养基配方中AgNO3对胚性愈伤组织再生无显著影响。本研究首次报道了南丰蜜桔花药离体培养,诱导出胚性愈伤组织。     

侧柏胚性愈伤组织的诱导研究

以侧柏未成熟合子胚、胚根为试材,研究了基本培养基、不同外植体、植物激素、合子胚发育阶段等因素对侧柏愈伤组织诱导的影响.结果表明:未成熟合子胚、胚根在适宜的培养基上都能诱导出愈伤组织,DCR+2.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+0.5 g/L谷氨酰胺是未成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基,诱导率高达96.67％.DCR+1.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA+0.5 g/L谷氨酰胺是胚根诱导愈伤组织的最佳培养基,诱导率高达93.33％.最佳采样时期为7月3日前后.     

长寿花胚性愈伤组织的诱导及胚状体再生

 研究了长寿花胚性愈伤组织的筛选，胚状体的诱导发生、发育过程及植株再生。经过对外观及细胞学观察，看出外观质地疏松、颗粒状的淡黄色愈伤组织细胞圆形且形状规则，是胚性愈伤组织。诱导胚性愈伤组织的最适培养基为：MS+2，4-D 2 mg·L^-1 +BA 0.2 mg·L^-1；胚状体的诱导培养基为MS+BA 2 mg·L^-1 +NAA 0.2 mg·L^-1 +活性炭4 g·L^-1+蔗糖30 g·L^-1，胚状体诱导率可达185个胚状体；胚状体的再生培养基为MS+蔗糖30 g·L^-1。利用石蜡切片对胚状体的发生过程进行了观察。     

荔枝胚性愈伤组织的诱导和保持

以荔枝绿沙，兰竹，东刘一号三个品种的４－７周幼胚为外植体，培养胚性愈伤组织的发生，结果表明，以２，４－Ｄ２ｍｇ／Ｌ和ＢＡ０．５－１ｍｇ／Ｌ配合使用，可使以上三个品种的胚性愈伤组织诱地率分别为绿沙２３－２７％，兰竹２８．６－３０５．％，东刘一号２９－３３．７％。采用有激素和无激素培养基交替继代可以长期保持兰竹，东刘一呈的胚性愈伤组织。     

油松未成熟合子胚离体培养诱导胚性愈伤组织

研究了油松未成熟合子胚不同发育时期和不同植物生长调节剂组合对油松胚性愈伤组织诱导的影响。结果表明:在沈阳地区,油松未成熟合子胚诱导胚性愈伤组织的最佳采种时间为7月10日左右;以DCR为基本培养基,添加较低浓度的KT和较高浓度的2,4-D有利于油松胚性愈伤组织的诱导,其中以添加2,4-D 2mg/L和KT 0.5mg/L时诱导率最高,可达88.3%。     

芦柑,雪柑胚性愈伤组织的诱导

柑桔是世界重要果树之一，由于其所特有的多胚性，漫长的童期，遗传上的高度异质性及在部分品种的不育性限制了有性杂交在柑桔品种改良匕的应用，原生质体融合技术的出现，使柑桔品种问、种间、属问的基因重组成为可能，为柑桔品种改良，抗病有种提供了新的方法和手段。为完成芦柑、雪租等基香科植物的原生质体融合，首先必须建立芦柑、雪柑胚性愈伤组织。柑桔的珠心组织可产生无性胚，经组织培养获得的胚性愈伤组织，具有良好的分化、再生能力，可为其原生质体培养、体细胞亲交、种质的保存等方面研究提供材料来源。诱导胚性愈伤组织一般可…     

本地早胚性愈伤组织耐盐性研究

柑桔是对盐分极度敏感的植物,盐分可导致柑桔焦叶、枯枝,生长抑制和品质变劣等,砧木对盐分也十分敏感,土壤中可溶性盐分的存在与增加,往往成为柑桔栽培的限制因子,因此,研究柑桔的耐盐性及选择耐盐品种类型,对柑桔栽培具有十分重要的意义。     

结缕草愈伤组织诱导及植株再生

 以日本结缕草种子为外植体，2份材料在附加2,4-D 2.0 mg/L水平的Ms培养基上愈伤组织诱导率较高；在含不同水平2,4-D的培养基中添加6-BA对非胚性愈伤组织转变成胚性愈伤组织起重要作用，其中2,4-D 2.0 mg/L配合6-BA 0.1mg/L的Ms培养基诱导出的胚性愈伤组织比例较高；胚性愈伤组织在2,4-D为0.1mg/L的分化培养基上分化率和生根率最高，为46.8％~ 48.1％。     

过氧化氢与蝴蝶兰胚性愈伤组织诱导

 从蝴蝶兰类原球茎切块诱导胚性愈伤组织, 诱导期间培养物DNA甲基化程度持续下降, 与H₂O₂含量变化呈极显著负相关。在降低6-BA浓度的培养基中添加H₂O₂可提高愈伤组织诱导率, 在诱导培养基中添加H₂O₂淬灭剂二甲基硫脲降低了愈伤组织诱导率,H₂O₂可能是诱导胚性愈伤组织的信号分子之一。愈伤组织诱导期间SOD活性对H₂O₂水平变化起主导作用。     

白姜花胚性愈伤组织的诱导与植株再生体系的建立

将白姜花（Hedychium coronarium）未成熟花丝接种在MS + 4 mg ? L^-1 2,4-D + 4 mg ? L^-1 NAA + 1 mg ? L^-1 6-BA的培养基上,经过180 d的培养,诱导出3种愈伤组织：Ⅰ,浅黄色松散易碎;Ⅱ,白色疏松半透明水渍状;Ⅲ,黄色致密颗粒状。对愈伤组织继代培养基中的2,4-D、NAA和6-BA浓度进行优化,结果表明培养基中含有1 mg ? L^-1 2,4-D、0.25 mg ? L^-1 NAA、0.25 mg ? L^-1 6-BA时可获得胚性状态良好的愈伤组织。胚性愈伤组织在MS无机盐 + 0.25 mg ? L^-1 NAA + 0.5 mg ? L^-1 TDZ + 维生素B₅ + 100 mg ? L^-1谷氨酰胺 + 230 mg ? L^-1脯氨酸 + 100 mg ? L^-1麦芽提取物 + 45 g ? L^-1蔗糖的体胚诱导培养基中培养20 d后,转移到MS基本培养基上培养30 d,1 g胚性愈伤组织可获得50 ~ 60个体胚。成熟体胚在MS + 0.2 mg ? L^-1 IAA + 0. 5 mg ? L^-1 6-BA的萌发培养基上培养20 d时,体胚萌发率为85%。萌发的体胚转移到1/2 MS + 1 g ? L^-1活性炭的成苗培养基中可发育成正常植株,植株室外栽培成活率达90%。对100株再生植株的染色体数进行分析,发现3株三倍体（2n = 3x = 51）、6株四倍体（2n = 4x = 68）和2株六倍体（2n = 6x = 102）。     

南瓜疏松愈伤组织诱导的研究

获得生长迅速,疏松的愈伤组织是进行植物细胞悬浮培养的前提.研究以"粟冠"南瓜子叶做外植体,在添加不同浓度的BA和NAA的MS固体培养基上诱导南瓜愈伤组织,比较南瓜愈伤组织的诱导率和长势,其中当外植体在MS 1.0 mg/L6-BA 0.1 mg/L NAA的培养基上培养时,愈伤组织诱导率和长势最好.     

多花蔷薇胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株

利用多花蔷薇‘无刺3号’假珠芽诱导的胚性愈伤细胞悬浮系分离得到原生质体,并培养获得再生植株。酶种类和浓度, 酶解时间及悬浮细胞继代时间对原生质体分离有重要影响,最佳酶液组成是2.0%纤维素酶,0.5%离析酶,5.0 mmol·L^-1 MES, 0.5 mol·L^-1甘露醇,0.5% CaCl₂·2H₂O。采用继代3 d的悬浮细胞系,酶解10 h,原生质体产量达到26.67×10⁶g^-1,原生质体活力为92.21%。采用液体浅层培养,肌醇比蔗糖更有利于纯化后的原生质体分裂和生长。愈伤组织形成增殖培养基为1/2MS + 2,4-D 1.0 mg·L^-1+ EBR 0.2 mg·L^-1 + 10 g·L^-1 Ficoll + 500 mg·L^-1谷氨酰胺 + 20 mg·L^-1甘氨酸 + 20 mg·L^-1天冬氨酸,分化培养基为1/2MS + 10 mg·L^-1 TDZ + 500 mg·L^-1谷氨酰胺+ 20 mg·L^-1甘氨酸+ 20 mg·L^-1天冬氨酸,后转入1/2MS培养基上获得完整植株。     

藏药雪莲花的化学成分及药用价值研究

藏医藏药上藏雪莲花作为药物已有悠久的历史。藏医学文献《月王药珍》和《四部医典》上都有记载。文章综述了藏雪莲花的化学成分、使用方法及药用价值。雪莲化学成分为:生物碱、黄酮、甾醇、挥发油、16种氨基酸、雪莲内酯等。雪莲性味:苦、微苦、温,有重要的药用价值。     

橄榄愈伤组织诱导体系的初步建立

采用橄榄不同部位外植体、抗氧化剂和植物生长调节剂,研究不同消毒剂、消毒时间和浓度以及植物生长调节剂、光照条件对诱导愈伤组织的影响。结果表明,新鲜去外表皮的幼嫩茎段作为外植体最利于愈伤组织诱导和防止褐变。外植体用自来水冲洗30分钟—洗衣粉水清洗5分钟—70%酒精浸泡30秒—0.1%升汞振荡10分钟效果最好。采用MS+2,4-D4.0mg/L+6-BA0.5mg/L+活性炭1g/L培养基,24小时光照培养更有利于抑制外植体褐化和愈伤组织诱导。     

“爱神玫瑰”葡萄杂交胚胚性愈伤组织诱导与保持的研究

以无核葡萄“爱神玫瑰”的杂交胚为试材,通过试验筛选出了胚性愈伤诱导基本培养基:NN69;胚性愈伤组织诱导培养基:NN69 +TDZ 0.05 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L;胚性愈伤组织长期保持与增殖培养基:NN69 +6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L和NN69+2,4-D 0.2 mg/L+TDZ 0.1 mg/L为“爱神玫瑰”较适宜的培养基.     

银耳菌丝原生质体分离和再生研究

以菌株Tr01为材料，研究了不同菌龄、溶壁酶浓度、酶解温度、稳渗剂对银耳工力丝在的原生质体产量及不同稳渗剂对原生质再生的影响。结果表明，原生质体分离的最佳条件为：菌丝菌龄9天，酶液浓度2％，稳渗剂0.4mol/L硫酸镁，在34℃下酶解4h，原生质体以0.4mol/L甘露醇作稳渗剂再生率较高，为1.13%。     

芹菜胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株

利用芹菜胚性细胞悬浮系成功分离得到大量原生质体, 获得芹菜大量原生质体的最佳反应体系为: 酶液组成为3.0%纤维素酶Onozuka R210、1.0%离析酶R210、11%甘露醇、0.5% CaCl₂ ·2H₂O和0.1% MES; 摇床转速为80 r/min, 温度(25 ±2) ℃, 酶解时间5～6 h; 原生质体产量为25.00 ×10⁶ /g, 原生质体活力83.41%。原生质体浅层培养, 培养基为1 /2 MS + 1 mg/L 2, 4-D + 0.5 mg/L KT + 11%甘露醇+ 500 mg/L水解络蛋白, 两天后, 重新再生细胞壁之后进行第1次分裂, 逐步降低渗透压至甘露醇3% ,大约30 d形成小细胞团。小愈伤组织经增殖培养后在1 /2MS + 500 mg/L CH + 0.25 mg/L KT固体分化培养基诱导出不定芽, 30 d后再转入MS基本培养基, 获得完整的再生植株。