陕西省犊牛安氏隐孢子虫多位点序列分型研究

为了对陕西省犊牛安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni)进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST),本研究基于4个基因位点对陕西省4个地区的36份犊牛(0~6月龄)C.andersoni阳性粪便样品进行PCR检测和序列分析。结果显示,15份C.andersoni分离株在CM-MS1、CM-MS2、CM-MS3、CM-MS16 4个基因位点均被成功分型,形成A4、A4、A2、A1,A4、A4、A4、A1,A5、A4、A4、A1和A1、A4、A4、A1共4个MLST亚型。其中A4、A4、A4、A1广泛分布于各个养殖场与不同品种犊牛中,为该地区犊牛C.andersoni的优势亚型。该研究结果表明,陕西地区犊牛C.andersoni存在遗传多样性,具有多种MLST亚型。     

高寒牧区燕麦播种量与生产性能的关系

对青海燕麦 4 4 4进行了不同播种量的比较试验 ,结果表明 :播种量对青海燕麦 4 4 4的物候期、产草量、生长速度、生长速率均产生明显的影响。试验区内燕麦 4 4 4的最佳播种量为 150kg/hm2 。     

猪链球菌病C、D、E三价灭活蜂胶疫苗的研制

以C、D、E群猪链球菌强毒株经培养后灭活、浓缩、混合,用蜂胶作佐剂(10mg/头剂),制成C、D、E三价蜂胶灭活疫苗,并在实验室内进行安全性试验及免疫效果实验。结果表明,该疫苗对实验猪、小鼠及家兔均安全;小鼠免疫21天后攻毒,对C55138株的保率护分别是4/5、5/5、4/5;C55938株的保护率分别是3/5、4/5、4/5;C55914株的保护率分别是4/5、3/5、3/5,对照组均5/5死亡;猪免疫21天后以C55138株攻毒,0401试制疫苗保护率为3/4外,其余均4/4保护;对C55938株攻毒保护率三批分别为4/4、2/4、3/4。对照猪均4/4死亡,疫苗免疫保护效果良好。     

蜜蜂花粉中Fe、Zn、Cu、Mn元素初级形态分析

以蜜蜂花粉为试验材料 ,应用原子吸收分光光度法测定了花粉中微量元素Fe、Zn、Cu、Mn初级形态含量及形态分布。结果表明 ,用 70℃水浸泡花粉 ,花粉中Fe、Zn、Cu及Mn元素 2次总提取率都不高 ,分别为6 931%、5 2 786 %、4 4 4 4 3%和 4 6 5 4 9%。     

抗血清4型禽腺病毒纤突蛋白2的单克隆抗体研制及其部分特性研究

近年血清4型禽腺病毒(Serotype 4 fowl adenovirus,FAdV-4)在国内鸡群流行,给养鸡业带来了巨大经济损失。目前尚无针对FAdV-4特异性单克隆抗体的制备及其应用报道。研究通过将FAdV-4全病毒免疫小鼠,以纤突蛋白2原核表达产物为筛选抗原,研制出了4株针对FAdV-4的单克隆抗体,分别命名为3C2、4A6、5C4、5H6。间接免疫荧光试验证明4株单克隆抗体不与所检测的血清8型禽腺病毒反应,也不与FAdV-4的纤突蛋白1反应,仅与FAdV-4的纤突蛋白2反应,并且单克隆抗体3C2在体外能有效抑制FAdV-4的感染。4株抗FAdV-4纤突蛋白2单克隆抗体的成功获得为研制FAdV-4快速诊断试剂盒及探究纤突蛋白2在FAdV-4致病机制中的作用奠定了基础。     

酶和化学处理对羽毛溶解度和消化率的影响

试验的目的是评价酶和化学方法处理羽毛对营养重复利用的影响。试验分 5个处理组 :1)对照、2 ) 2 4 -h酶水解、3) 2 4 -hNaOH水解、4 ) 2 -hNaOH水解、5 ) 2 -hNaOH和 2 4 -h酶水解。各处理组氮的溶解度分别为 0 .91、2 .5 5、78.83、30 .0 3和 5 0 .0 4 %。对照、2 4 -h酶、2 -hNaOH、2 -hNaOH和 2 4 -h酶处理的羽毛渣用胃蛋白酶消化 ,氮的溶解度分别为 4 .6 7、13.19、5 5 .83和5 9.0 8%。除丙氨酸外 ,2 -hNaOH和 2 4 -h酶处理的体外氨基酸消化率明显高于 2 -hNaOH或2 4 -h酶处理 (p <0 .0 5 )。除蛋氨酸、组氨酸外 ,2 -hNaOH处理的氨基酸消化率明显高于 2 4 -h酶处理。 2 4 -h酶、2 4 -hNaOH、2 -hNaOH、2 -hNaOH和 2 4 -h酶处理每溶解 1kg羽毛的造价分别为 9.6 4、4 .72、12 .39、2 2 .97美元。结果表明 ,延长NaOH处理时间 ,可提高羽毛的溶解度 ;进一步的酶处理可提高羽毛的溶解度、胃蛋白酶的消化率和体外氨基酸的消化率。     

BMP4和SMAD4基因在公绵羊繁殖相关组织的表达

试验旨在探索骨形态发生蛋白4(Bone morphogenetic protein 4,BMP4)和SMAD家族蛋白4(SMAD family member 4,SMAD4)基因在公绵羊繁殖中的作用,以便深入研究公绵羊繁殖机制。采用荧光定量PCR技术检测BMP4和SMAD4基因在高繁殖力的小尾寒羊公羊(n=3)和低繁殖力苏尼特公羊(n=3)大脑、小脑、下丘脑、垂体、输精管、肾上腺、睾丸和附睾8种组织中的表达。结果表明:BMP4和SMAD4基因在小尾寒羊公羊和苏尼特羊公羊各种组织中均有表达。其中BMP4基因在睾丸中高表达,在输精管、肾上腺中中等表达,在其他组织中均呈痕量表达;SMAD4基因在睾丸、下丘脑、小脑、大脑中高表达,在其他组织中中等表达。BMP4基因在低繁殖力苏尼特羊公羊睾丸中表达量显著高于高繁殖力小尾寒羊公羊(P0.05);SMAD4基因在低繁殖力苏尼特公羊8种组织中表达量均显著高于高繁殖力小尾寒羊公羊(P0.05)。说明BMP4和SMAD4基因在公绵羊繁殖中起到一定程度的负调控作用,这为公羊高繁殖性状选育提供了参考依据。     

供应蜂具、蜂药、蜂产品广告

敦化市北方蜂产品研究所出售优质椴树蜜我所今年继续向全国各地提供新产优质椴树蜜。塑料桶包装,每桶80公斤。1吨集装箱装10桶,770公斤。椴树蜜原蜜39度、4 0度,真空浓缩蜜4 1度、4 2度。每吨价格如下:原蜜4 0度6 70 0元,浓缩蜜4 0度6 6 0 0元、4 1度6 80 0元、4 2度710 0元(含     

5种青藏高原中药材对磷酸二脂酶4活性的影响

目的：从青藏高原地产中药材中筛选磷酸二脂酶4（PDE4）特异性抑制剂。方法：选取甘草、羌活、柴胡、大黄、红景天5种药材为试验对象,以PDE4特异性抑制剂Rolipram为阳性对照组,从猪中性粒细胞中提取PDE4进行PDE4活性实验。结果：5 mg/mL甘草、羌活、柴胡、大黄、红景天水提物、10μmol/L Rolipram组PDE4活性分别为6.8%、11.02%、11.07%、12.7%、18.7%、7.61%;抑制率分别为38.18%、0.02%、-0.47%、-15.21%、-69.66%、30.90%。与空白对照组PDE4活性相比较,甘草组P〈0.05;红景天组P〈0.001。与Rolipram组抑制率相比较,柴胡组P〈0.05;大黄组P〈0.01;红景天组P〈0.001。甘草组对PDE4抑制率高于PDE4特异性抑制剂Rolipram。结论：5mg/mL甘草水提物能显著抑制PDE4活性,且高于PDE4特异性抑制剂Rolipram,5 mg/mL柴胡、羌活水提物对PDE4活性的影响不明显,5 mg/mL大黄水提物对PDE4的活性具有促进作用,5 mg/mL红景天对PDE4的活性具有极显著的促进作用。     

《当家人的基本功》(连载十六) 营销战术模型的构建

正如果大家看过一些营销书籍,对4P和4C营销应该都不陌生,4P指的是产品、价格、渠道和促销,随着社会的发展,4P理论有点过时了,逐渐被4C理论取代,4C指的是需求、成本、便利性和沟通。我们应该用4C来思考,用4P去执行,这样才是比较完美的销售。该如何把二者相结合,4P是传统的站在中间商和企业的角度,考虑怎么样把产品卖出去,是以自我为中心的一种销售方     

鸡精液稀释比例和输精时间对种蛋受精率的影响

采用1 500羽健康的海兰白种鸡,随机分为4组（即1、2、3和4组）。试验1分别用稀释液对原精液按1：1、1：1.5、1：2稀释和原精液对海兰白种鸡进行人工授精,每组800枚种蛋,结果显示,1、2和3组的受精率显著高于原精液对照组（4组）（P〈0.05）,1、2和3组之间无显著差异（P〉0.05）。试验2分别在下午3：00-3：30、3：30-4：00、4：00-4：30和4：30-5：00进行输精,每组800枚种蛋,结果 3、4组种蛋受精率显著高于1、2组（P〈0.05）,1、2组之间及3、4组之间无显著差异（P〉0.05）。下午4：00以后输精种蛋的受精率最高。     

鸡CTLA-4蛋白在昆虫细胞中的表达及其单克隆抗体的制备

旨在制备鸡细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)的特异性单克隆抗体,为家禽免疫检查点和疫苗研发提供有益制剂。利用杆状病毒表达系统体外表达鸡的CTLA-4蛋白,以其为免疫原免疫8周龄Balb/c小鼠,经B淋巴细胞融合技术制备、筛选出针对鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体。通过间接免疫荧光、蛋白免疫印迹、流式细胞术等方法分析抗CTLA-4单克隆抗体的生物学特性。结果显示：构建了在Sf9昆虫细胞中表达CTLA-4蛋白的重组杆状病毒,成功筛选出3株能稳定分泌抗鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体,分别命名为：mAb-CTLA4-3D7、mAb-CTLA4-5A4、mAb-CTLA4-6A12。亚类鉴定表明,mAb-CTLA4-3D7为IgG2a, Lambda链;mAb-CTLA4-5A4为IgG3,Kappa链;mAb-CTLA4-6A12为IgG2a, Kappa链。3株单克隆抗体均能与转染真核表达质粒pCAGGS-CTLA-4-Flag的DF-1细胞和感染重组杆状病毒rBac-CTLA-4的Sf9昆虫细胞反应。单克隆抗体mAb-CTLA4-3D7与鸡的PBMC有较好的结合活性,且能与CD3<...     

禽腺病毒血清4型贵州株全基因序列分析

为了解禽腺病毒血清4型（FAdV-4）地方流行毒株的分子进化情况,基于实验室分离的2株FAdV-4贵州株GZ-BJ株和GZ-QL株,分别对2株FAdV-4毒株进行PCR分段扩增,扩增产物克隆至载体,提取质粒进行PCR和双酶切鉴定后筛选出重组质粒进行测序,将测序结果依次拼接得到病毒的全基因组,获得FAdV-4贵州株的全基因序列,并对其进行序列和遗传进化分析。结果显示,通过PCR分段扩增成功获得了2株FAdV-4贵州株（GZ-BJ株和GZ-QL株）的全基因序列,长度分别为43 352、43 723 bp,FAdV-4 GZ-BJ株全基因序列长度比FAdV-4 GZ-QL株短371 bp,少6个ORF（22K、putative 9.1 ku、u-exon、ORF17、ORF28、ORF42）,二者的氨基酸同源性为57.1%。2株FAdV-4贵州株同国内外不同地区FAdV-4毒株核苷酸同源性在88.7%~100%,与FAdV-4经典毒株ON1比对,2株FAdV-4贵州株和国内FAdV-4分离株均缺失ORF19、ORF27、ORF30。系统进化树分析显示,2株FAdV-4贵州株GZ-BJ株和GZ-QL株仍属于Ⅰ群C种FAdV。研究结果表明,2株贵州株FAdV-4 GZ-BJ株和FAdV-4 GZ-QL株较国内外FAdV-4毒株均存在进化与突变,且FAdV-4 GZ-BJ株变化较大,但尚未改变其血清型,这为探索FAdV-4致病机理的分子机制研究提供依据。     

胆碱+硫酸钠对肉鸭血液生化指标和生长性能的影响

在基础日粮相同的 1 68只肉鸭前 (1～ 1 4日龄 )、后 (1 5～ 4 2日龄 )期日粮添加 1 (对照 )、2、3、4四种不同水平的蛋氨酸、氯化胆碱、硫酸钠。结果表明 :4 2日龄 2、3、4组较对照组 ,日增重提高 1 4、1 3和2 2g/只 (P >0 0 5 ) ,饲料转化率提高 0 3 4 %、1 7%和 3 1 %。各组 1 4日龄碱性磷酸酶、甘油三酯等指标有明显差异 (P <0 0 5或P <0 0 1 )。对照组前期胫骨短粗症发病率为 9 8% ,其余各组为零。全期仅 4组无啄羽现象发生     

禽腺病毒血清4型贵州株全基因序列分析

为了解禽腺病毒血清4型(FAdV-4)地方流行毒株的分子进化情况,基于实验室分离的2株FAdV-4贵州株GZ-BJ株和GZ-QL株,分别对2株FAdV-4毒株进行PCR分段扩增,扩增产物克隆至载体,提取质粒进行PCR和双酶切鉴定后筛选出重组质粒进行测序,将测序结果依次拼接得到病毒的全基因组,获得FAdV-4贵州株的全基因序列,并对其进行序列和遗传进化分析。结果显示,通过PCR分段扩增成功获得了2株FAdV-4贵州株(GZ-BJ株和GZ-QL株)的全基因序列,长度分别为43352、43723 bp,FAdV-4 GZ-BJ株全基因序列长度比FAdV-4 GZ-QL株短371 bp,少6个ORF(22K、putative 9.1 ku、u-exon、ORF17、ORF28、ORF42),二者的氨基酸同源性为57.1%。2株FAdV-4贵州株同国内外不同地区FAdV-4毒株核苷酸同源性在88.7%~100%,与FAdV-4经典毒株ON1比对,2株FAdV-4贵州株和国内FAdV-4分离株均缺失ORF19、ORF27、ORF30。系统进化树分析显示,2株FAdV-4贵州株GZ-BJ株和GZ-QL株仍属于Ⅰ群C种FAdV。研究结果表明,2株贵州株FAdV-4 GZ-BJ株和FAdV-4 GZ-QL株较国内外FAdV-4毒株均存在进化与突变,且FAdV-4 GZ-BJ株变化较大,但尚未改变其血清型,这为探索FAdV-4致病机理的分子机制研究提供依据。     

鸡减蛋综合症病毒不同提纯方法的比较

试验采用50%(NH4)2SO4、60%(NH4)2SO4、10%聚乙二醇初提病毒,然后用DEAE52和Sephadex G-200层析。最后得出60%(NH4)2SO4、10%聚乙二醇沉淀,Sephadex G-200层析可得到纯度较高的病毒样本。     

猪繁殖和呼吸综合征病毒HuN4株nsp9、nsp10、nsp11对毒力影响的研究

为研究高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒非结构蛋白对病毒毒力的影响,本研究通过反向遗传操作技术将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株的非结构蛋白编码区nsp9、nsp10、nsp11分别置换弱毒疫苗株HuN4-F112中的相应片段,经间接免疫荧光鉴定拯救的重组病毒,分别命名为rHuN4-F112-nsp9、rHuN4-F112-nsp10、rHuN4-F112-nsp11,测序证实HuN4强毒nsp9、nsp10、nsp11片段正确替换入HuN4-F112骨架。拯救病毒在Marc-145细胞上的生长曲线显示,rHuN4-F112-nsp9和rHuN4-F112-nsp10在前24 h的复制速度明显高于rHuN4-F112-nsp11和拯救的母源毒rHuN4-F112,36 h后无明显差别。将拯救病毒以105TCID50剂量接种仔猪,对体温、临床症状、病毒血症、组织器官病变情况进行观察和检测。结果显示,拯救病毒rHuN4-F112-nsp9、rHuN4-F112 nsp10、rHuN4-F112 nsp11在致病性、发热以及病毒血症强度上与rHuN4-F112无显著差异,提示单独nsp9、nsp10、nsp11对病毒致病性以及病毒在体内的复制无影响。     

仔猪产肠毒素大肠杆菌F4受体研究进展

猪肠毒素大肠杆菌F4(ETEC F4)是引起1～2周龄仔猪黄、白痢最普遍、危害最大的大肠杆菌。ETEC F4能否致病,决定于猪的小肠上皮细胞有无ETEC F4受体。本文综述了ETEC F4的黏附模式,F4特异受体在猪小肠中的分布,受体的生化特性,受体编码基因的定位、克隆现状及存在的问题,并对今后F4受体的研究方向及应用前景进行了展望。     

TLR4基因在三黄鸡不同器官中的表达规律分析

为探究TLR4基因在三黄鸡不同器官中的表达规律,试验通过运用real-time PCR方法检测TLR4基因在100日龄三黄鸡公、母鸡不同器官中的表达情况。结果显示:三黄鸡母鸡的法氏囊、肌肉、肺、心、肝、下丘脑中TLR4的表达水平最高,脾脏、十二指肠中TLR4的表达水平较高,腺胃、胸腺、卵巢、回肠、肌胃、垂体、肾、盲肠、空肠和大脑最低。三黄鸡公鸡的心、胸腺、下丘脑、肺、法氏囊、垂体、肌肉、肝、脾中TLR4的表达水平显著高于其他器官。而公、母鸡对比,公鸡胸腺中TLR4的表达水平显著低于母鸡,但是法氏囊中TLR4的表达水平显著高于母鸡。研究结果为TLR4的深入研究提供了理论基础,同时为三黄鸡的抗病育种提供新思路。     

过表达KDM4家族基因对猪克隆胚胎体外发育效率的影响

为了探究过表达H3K9me3的组蛋白去甲基化酶4(KDM4)家族基因对猪克隆胚胎体外发育效率的影响，试验采用pc-KDM4A～D质粒构建、酶切鉴定、细胞转染、定量PCR扩增及体外转录等方法制备过表达KDM4A～D的猪胎儿成纤维细胞和KDM4A～D mRNAs,通过体细胞核移植和显微注射的方式制备过表达KDM4A～D的猪克隆胚胎。将供体细胞过表达KDM4A～D的猪克隆胚胎分为1个对照组和5个试验组，分别为pcDNA3.1(+)组、pc-KDM4A组、pc-KDM4B组、pc-KDM4C组、pc-KDM4D组及4质粒组；将注射KDM4A～D mRNA的猪克隆胚胎分为1个对照组和5个试验组，分别为H₂O组、KDM4A组、KDM4B组、KDM4C组、KDM4D组及4mRNA组。统计各组的卵裂数、囊胚数和囊胚细胞数；利用免疫荧光检测4质粒组和4mRNA组4-细胞期猪克隆胚胎中H3K9me3的表达水平。结果表明：pc-KDM4A～D质粒构建成功，质粒转染的猪胎儿成纤维细胞可过表达KDM4A～D和降低细胞内H3K9me3水平。与pcDNA3.1(+)组比较，4质粒组可显著提高猪...