β-防御素在金华猪和长白猪肠道中表达规律的研究

本试验旨在研究金华猪和长白猪从初生到60日龄不同肠段中3种β -防御素[β-防御素-1( pBD-1)、β -防御素-2( pBD-2)和β-防御素-3( pBD-3)]基因表达规律,并比较β -防御素基因在2个品种之间的表达差异.选取初生、20、40和60日龄的金华猪和长白猪各3头,屠宰后取十二指肠、空肠、回肠和结肠...     

Myogenin mRNA丰度在金华猪和长白猪背最长肌中的表达

运用半定量RT-PCR方法对不同生长阶段金华猪和长白猪背最长肌中肌细胞生成素(Myogenin,MyoG)基因mRNA的表达丰度进行测定,分析与肌肉沉积的关系.结果表明:在2种猪35、80、125日龄均可检测到MyoGmRNA,金华猪背最长肌中MyoG基因的表达随着年龄和胴体瘦肉率的增加而增加,并且MyoG基因表达与胴体瘦肉率呈正比;而长白猪背最长肌中MyoG基因的表达恰好相反.除35日龄以外品种间无显著差异.     

金华猪和长白猪肠道产丁酸菌相对丰度与丁酸代谢的相关性分析

本试验旨在研究金华猪和长白猪各肠段主要产丁酸菌相对丰度及丁酸代谢的相关性.选取相同条件下饲养的240日龄金华猪和长白猪各10头,分别取不同肠段内容物,采用高通量测序技术分析不同肠段主要产丁酸菌的相对丰度,实时荧光定量PCR法测定产丁酸关键功能基因丁酰-CoA:乙酰-CoA转移酶和丁酸激酶相对表达量的变化,气相色谱法测定...     

金华猪和长白猪粪便微生物移植小鼠的肠道古菌结构分析

本试验旨在比较肥胖型的金华猪和瘦肉型的长白猪肠道古菌结构的差异,分析菌群移植小鼠肠道古菌结构。采集金华猪和长白猪的新鲜粪便,通过灌胃移植到经广谱抗生素处理过的小鼠肠道中,提取2种猪粪便及其移植小鼠的盲肠内容物总基因组DNA,使用古菌通用引物对古菌16S rRNA的V4区进行PCR扩增,通过Illumina Hiseq测序平台对扩增产物进行高通量测序,使用QIIME等软件对测序序列进行分析统计。结果表明:金华猪和长白猪粪便及其移植小鼠盲肠内容物中的古菌主要包含3个门,分别为奇古菌门(Thaumarchaeota)、广古菌门(Euryarchaeota)和泉古菌门(Crenarchaeota),其中金华猪粪便中广古菌门的丰度高于长白猪;在属水平上主要包含4个已知属,优势属为餐古菌属(Cenarchaeum)。二者移植小鼠的盲肠内容物古菌结构,在门水平上,移植小鼠的奇古菌门比例占70%以上;奇古菌门的古菌几乎全部来源于餐古菌属;在门和属的水平上,金华猪和长白猪粪便移植小鼠的盲肠古菌结构无显著差异(P0.05),但基于操作分类单元(OTU)水平的主成分分析显示出很好的组内聚集。由此可见,奇古菌门的餐古菌属是金华猪和长白猪粪便和其移植小鼠盲肠中的优势古菌;金华猪粪便中广古菌门的丰度高于长白猪粪便,且二者移植小鼠盲肠内容物之间古菌结构在OTU水平上存在一定的差异。     

金华猪和长白猪背最长肌不同肌纤维类型表达差异

为揭示国内外猪种肌纤维组成差异及其对肉质的影响,本实验以肉质优良的地方品种金华猪和肉质欠佳的外来良种长白猪为研究对象,在比较了180 d两猪种胴体性能及肉质差异的基础上,利用荧光定量PCR方法探讨了两猪种背最长肌4种肌球蛋白重链(MyHC)亚型基因(Ⅰ、ⅡA、ⅡX、ⅡB)mR NA表达量在30、90、150、180 d的差异。结果表明:180 d金华猪活体重、瘦肉率、眼肌面积、滴水损失极显著低于长白猪(P<0.01);背膘厚、肌内脂肪含量极显著高于长白猪(P<0.01)。金华猪背最长肌中含有更多的氧化型肌纤维,特别是Ⅰ型肌纤维,酵解型肌纤维特别是ⅡB型肌纤维含量极显著地低于长白猪(P<0.01)。本研究初步揭示了两猪种在生长发育过程中肌纤维组成的品种差异,为进一步通过营养调控肌纤维类型及组成,进而改善肉质提供基础数据。     

金华猪肠道ANGPTL4的表达分布特征和发育性变化研究

血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)在机体脂肪和能量代谢中起重要的调控作用,并参与介导肠道微生物区系对脂肪沉积的调节.本实验以金华猪为研究对象,分析ANGPTL4在猪肠道中的分布特征及其发育性变化.分别选取45、90、150日龄和270日龄体重相近的健康金华猪各4头,取十二指肠、空肠、回肠、盲肠和结肠等组织,通过RT-...     

五指山猪与长白猪妊娠期65d猪胎儿肌纤维差异比较研究

为寻找五指山猪与长白猪肌肉发育关键时期(妊娠期65d)肌纤维发育差异情况,采用石蜡切片、HE染色、Image-Pro Plus软件测量及SAS软件统计分析多种技术对两猪种骨骼肌肌纤维的表观组织学特征、数目和横截面积差异进行分析。结果表明,五指山猪和长白猪妊娠期65d胎儿肌纤维组织学外观有明显差异;并且长白猪猪胎儿骨骼肌肌纤维数目和横截面积均显著高于五指山猪(P0.05)。试验结果确定两猪种肌肉发育关键时期肌纤维发育差异,为日后深入研究影响肌肉发育的机制提供了参考。     

五指山猪和长白猪断奶仔猪肠道免疫性能及微生物多样性比较分析

【目的】探讨早期断奶对五指山猪和长白猪小肠肠道免疫性能及微生物多样性的影响差异。【方法】选择生长发育及营养状况良好、28日龄断奶的长白猪与五指山猪各6头,于50日龄采集小肠各段组织、内容物、黏膜,依次采用石蜡切片(HE染色)、16S rDNA V3-V4区基因高通量测序、实时荧光定量PCR测定,比较两品种间肠道形态学、肠道菌群及肠道黏膜免疫相关基因mRNA相对表达量的差异。【结果】(1)五指山猪空肠绒毛高度显著低于长白猪(P<0.05)。(2)长白猪十二指肠与回肠微生物多样性均较五指山猪更丰富(P<0.05)。(3)在门水平上,五指山猪空肠、回肠中厚壁菌门(Firmicutes)的丰度均显著高于长白猪,但变形菌门(Proteobacteria)出现相反的表达趋势(P<0.05)。在属水平上,五指山猪回肠中乳杆菌属(Lactobacillus)的丰度显著高于长白猪(P<0.05)。(4)黏膜免疫相关基因表达量的检测结果显示,长白猪十二指肠中抑炎因子白细胞介素10(IL-10)和紧密连接蛋白闭锁小带蛋白1(ZO1)的mRNA表达量均显著高于五指山猪(P<0.0...     

沙子岭猪ASB17基因克隆、生物信息学分析及组织差异表达研究

本研究利用RACE法克隆沙子岭猪ASB17基因cDNA全长并进行生物信息学分析,应用实时荧光定量PCR对ASB17基因在沙子岭猪D30时期9个不同组织（睾丸、肌肉、小肠、肺脏、心脏、肾脏、肝脏、脾脏、脂肪）及睾丸组织8个不同发育阶段（E90、D1、D30、D60、D90、D120、D150、D180）进行差异表达分析。结果显示,ASB17基因克隆所得片段长1 135 bp,其中ORF区为888 bp,编码295个氨基酸。实时荧光定量PCR结果显示沙子岭猪D30时期ASB17 mRNA在睾丸中表达量最高,其次为脂肪及脾脏,而在肌肉及小肠中表达量最低,其中睾丸与肌肉、小肠及肺脏中表达量差异显著（P<0.05）;睾丸组织不同发育时期中,ASB17 mRNA在D120、D150时期表达量达到最高,在D180时期表达量略有下降,其中E90、D1、D30、D60与D90、D120、D150、D180时期差异极显著（P<0.01）;D90与D180时期差异不显著（P>0.05）,与其余时期均差异极显著（P<0.01）;沙子岭猪性成熟期D120、D150、D180 3个时期表达量差异不显著（P>0.05）。本试验成功克隆了沙子岭猪ASB17基因cDNA全长并检测了其在猪不同组织及睾丸组织不同发育阶段表达量,为进一步研究ASB17基因功能奠定基础。     

PIC猪与荣昌猪和长白猪与荣昌猪二元杂交效果分析

利用PIC父母代种公猪×荣昌母猪(下称"P×荣")与长白公猪×荣昌母猪(下称"L×荣")杂交后代的生长发育及屠宰测定材料,对其生长育肥及胴体肉质性状进行了分析。结果表明,"P×荣"杂交猪较"L×荣"杂交猪,日增重差异不显著(P>0.05);瘦肉率较高(P<0.05),肉质好;料肉比较好(P<0.05);饲养成本比"L×荣"杂交猪低,经济效益高,在生产中具有较强的推广价值。     

不同日龄大白猪骨桥蛋白基因的表达研究

本研究采用RT-PCR方法对大白猪的骨桥蛋白（osteopontin,OPN）基因在1、7、90、180、270和360日龄的心、肝、胃、脾、肾、肺、大肠、小肠、肌肉、子宫、卵巢共11个组织的表达情况进行了研究。结果表明,OPN基因是一个广谱表达基因,在所检测的11个组织、6个时间点上均表达,但是存在时间和空间上的变化。据此推测该基因的生物功能非常广泛。     

金华猪促黑激素皮质素受体4基因多态性分析

应用PCR—RFLP方法对金华猪Ⅰ系(154头)、金华猪Ⅱ系(41头)和金华猪Ⅲ系(53头)的MC4R基因的1269∽1494bp区段进行扩增，并用TaqⅠ酶进行酶切，比较了MC4R酶切后基因型频率分布情况。结果表明，AA基因型频率在金华猪上较高达到0．9194，在Ⅱ系中最高达到0．9512，Ⅲ系次之达到0．9434，Ⅰ系最低达到0．9026，而金华猪的AB基因型和BB基因型频率都较低分别为0．0565和0．0242。     

长白种猪抗腹泻后代选育探究

为探索利用现代生物技术培育种猪抗腹泻专门化品系,采长白种猪耳组织样品27份,送江西农业大学动物生物技术国家重点实验室培育基地进行抗腹泻基因检测,检测结果为：腹泻抗性有利基因GG型个体比例占40.74%（11/27）,G的基因频率为0.67,A的基因频率为0.33。将作过基因检测的种猪按照不同基因型进行选配,分别为对照组（GG×GG）、试验1组（GG×GA）、试验2组（GA×GA）,观察、统计、比较不同组合所产仔猪在断奶前的腹泻发生率、腹泻死亡率、断奶成活率等指标。试验结果表明：1）对照组（GG×GG）哺乳仔猪腹泻发生率3.08%（2/65）,哺乳仔猪腹泻死亡率0（0/65）,30日龄断奶仔猪成活率98.46%（64/65）,这3个指标均与试验1组、试验2组差异显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）;2）试验1组（GG×GA）后代腹泻发生率20.75%（11/53）与试验2组（GA×GA）后代腹泻发生率40.91%（18/44）差异显著（P＜0.05）,这可能与试验1组的选配公猪是抗腹泻基因型（GG）个体有关;试验1组与试验2组腹泻死亡率差异极显著（P＜0.01）,断奶成活率差异不显著（P＞0.05）;3）携带腹泻抗性有利基因GG型比例高的后代,哺乳仔猪腹泻率和腹泻死亡率低,断奶仔猪成活率高,表现出较强的抗腹泻力,在种猪世代选育中,加大GG纯合抗性个体的选留比例,最终可以建立长白种猪抗K88（F4）腹泻专门化品系。     

陆川猪与杜洛克猪正反交F1代UCP3基因表达差异研究

为培育优质猪品系,提高猪肉品质,本试验探索了陆川猪与杜洛克猪正反交F1代及其亲本陆川猪肌内脂肪含量和UCP3基因表达差异。试验分别选取陆川猪、陆川猪与杜洛克猪正反交F1代各8头,采用实时荧光定量RT-PCR方法测定肌肉中UCP3基因mRNA在不同品种猪中的表达量,并测定眼肌面积和肌内脂肪含量,以分析UCP3基因的表达量与脂肪和眼肌面积的相关性。结果显示,3组猪在眼肌面积、肌内脂肪含量和UCP3基因mRNA表达量上均差异显著(P<0.05),且正反交F1代均遗传了杜洛克猪体型大、陆川猪肌内脂肪含量高的优势,UCP3基因的表达量与猪眼肌面积呈极显著负相关,与肌内脂肪含量呈极显著正相关。初步推断UCP3基因可作为影响猪脂肪性状的主效基因。     

鸡白介素-17 cDNA基因的克隆、序列分析及表达

用RT-PCR方法,分别以ConA体外刺激培养12、24、48 h的鸡脾脏淋巴细胞(SP)和经人工感染2次堆型艾美尔球虫(E im eria tenella)孢子化卵囊(约3.6×104个/鸡)的鸡盲肠扁桃体/肠上皮淋巴细胞(IELS)总RNA为模板,成功扩增出预计大小的鸡白介素-17 cDNA基因,并克隆入pM D 18-T载体,进行序列测定。测序结果显示其阅读框(ORF)为507 bp,与G enB ank上鸡IL-17基因已知序列(A J493595)BLA ST的比较表明:核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.4%和82.4%。将cDNA基因克隆入pET-32a质粒,构建了pET 32a-IL-17原核表达载体,IPTG诱导后表达出的融合蛋白大小为36 000左右。     

Study on Differences of UCP3 Gene Expression of Reciprocal Crosses F1 with Luchuan Pig and Duroc Pig

In order to breed high quality pig strain and improve the pork quality,the intramuscular fat content and the differences of UCP3 gene expression were studied in Luchuan pigs with Duroc reciprocal cross F1 and its parents Luchaun pigs.8 head of Luchuan pigs,Luchuan pigs with Duroc reciprocal cross F1 generation were respectively selected to analyze the correlation of UCP3 gene expression with intramuscular fat and eye muscle area.Expression of UCP3 mRNA in muscles of different pig breeds were measured by Real-time RT-PCR,and the eye muscle area and intramuscular fat content were measured too.The results indicated that the eye muscle area,intramuscular fat and the UCP3 gene expression were significantly different in the three groups of pigs (P<0.05).The crossbreds inherited the big body size of Duroc,and the high intramuscular fat content of Luchuan pig.The extremely significantly negative correlations were observed between UCP3 gene expression and the pig eye muscle area,the extremely significantly positive correlations were observed between UCP3 gene expression and intramuscular fat content.UCP3 gene should be the main candidate gene for fat trait research in pigs.     

金华猪遗传多样性保护研究

金华猪是国家级遗传资源保护品种,随着外来优良猪种的引入,遇到了前所未有的挑战.对金华猪的特点及保护中存在的问题进行了全面分析,并在阐述开发保护该品种资源重要性的基础上提出了一些可参考的切实可行的保护措施,以拯救中国"熊猫猪",保护地方猪品种遗传资源,维持生物多样性,促进养殖业的可持续发展.     

不同日龄大白猪甲状腺素运载蛋白基因的表达研究

本研究采用RT-PCR方法对大白猪的甲状腺素运载蛋白基因在1、90、180、270和360 d的心、肝、胃、脾、肾、肺、大肠、小肠、肌肉、子宫、卵巢共11个组织的表达情况进行了研究。结果表明,甲状腺素运载蛋白（transthyretin, TTR） mRNA在大白猪的肝脏、子宫和卵巢持续表达,且在肝脏中持续高表达,这与RBP mRNA的表达情况一致;1 d时所检的11个组织均表达,且表达量较高,而90 d时除了心脏、肝脏和胃外,其余组织的表达水平均较低。     

金华猪心脏脂肪酸结合蛋白基因的多态性分析及其与繁殖性能的关系

应用PCR-RFLP方法对金华猪Ⅰ系(164头)、金华猪Ⅱ系(41头)和金华猪Ⅲ系(52头)的心脏脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因的1125～1817bp和1401～2216bp段进行扩增,并用HinfⅠ、HaeⅢ和MspⅠ酶分别酶切,结果表明只有HinfⅠ存在RFLP。分析不同基因型对金华猪死产数和母仔猪初生重的影响,结果表明,H-FABP基因对经产母猪的死产数影响接近极显著(P=0.015),对头胎母仔猪初生重的影响不显著(P>0.05),对经产及所有胎次的母仔猪初生重影响极显著(P<0.01)。