创伤诱导苹果离体叶片高效直接体细胞胚胎发生

以苹果品种“嘎拉”试管苗叶片为试材 ,建立了苹果离体叶片高效直接体细胞胚胎发生体系 ,研究了创伤处理对外植体直接体细胞胚胎发生的效应。结果显示 ,创伤处理提高了外植体直接体细胞胚胎发生率和单位外植体体细胞胚胎产量 ,其中 ,各处理效应大小依次为 :刺伤 >横切 >纵切 ;一定范围内随横切次数和刺点数增加 ,外植体直接体细胞胚胎发生率保持稳定的高水平 ,单位叶片直接体细胞胚胎产量逐渐增加。刺 8点时直接体细胞胚胎发生率由对照的 6 5%增至 1 0 0 % ,直接体细胞胚胎再生数量由对照的 2 9 叶增至 2 6 2 叶     

多年生黑麦草体细胞无性系变异分析

以多年生黑麦草成熟胚诱导获得的再生植株为材料,利用RAPD标记方法对其体细胞变异进行了研究。结果表明多年生黑麦草体细胞无性系在分子水平发生了多态性变异。     

八倍体小黑麦体细胞无性系性状变异

利用八倍体小黑麦‘h739’护颖分化期幼穗作外植体,成功地建立了愈伤组织诱导和再生程序,并获得了长期保持胚性的无性系。经446天继代培养后,在HC-0、HC-4和HC-5三个无性系再生植株中观察到广泛的形态变异,包括育性、株高、抽穗期、穗形和穗颈毛等。在SC_1代中这些变异除抽穗期外均有较坚实的遗传基础。SC_2代的表现表明,在SC_1代发生的是隐性突变或纯合突变更长时间(852天)继代后,无性系变异更丰富,但育性明显下降,有害突变增加,所以在体细胞无性系变异中也有一个适宜的继代时间问题。     

四倍体刺槐无性系组织培养技术的研究

通过茎段离体培养建立了四倍体刺槐无性系的微体繁殖体系。结果表明 :基本培养基为MS或WPM培养基。BA、NAA影响芽的增殖生长 ,在一定的范围内 ,BA对芽的增殖影响比NAA大 ,而NAA对芽高的影响比BA大 ,二者的比例对芽的增殖生长也有影响 ,芽增殖生长的最适BA和NAA组合应为BA0 5mg/L +NAA0 1mg L。四倍体刺槐无性系生根的最适生长调节物质配比为NAA0 2 5mg L +IBA0 4mg L。通过植株叶解剖观察 ,进一步证明了分步练苗能提高移栽成活率。     

忽地笑体细胞无性系变异的ISSR分析

以外植体母株为对照,利用ISSR标记对来自同一忽地笑鳞茎诱导,通过不定芽和体胚发生途径形成的再生一代和二代植株的体细胞无性系变异进行了分析。结果表明,再生植株出现不同程度的ISSR位点变异,表现为新增加带和缺失带。体胚发生途径出现的ISSR位点变异率高于不定芽形成途径。第二世代的变异率高于第一世代。体胚发生途径形成的第...     

河北杨不同再生途径组培苗遗传稳定性的RAPD检测

;运用RAPD标记对河北杨不同培养途径获得的再生植株遗传稳定性进行检测,结果表明,以试管苗幼嫩叶片为外植体,通过直接不定芽发生途径获得的再生植株(20株)与对照株间表现出相同的条带数,说明此途径具有较高的遗传稳定性;以试管苗幼嫩叶片为外植体诱导愈伤组织,通过器官发生途径获得的再生植株(20株)中有2株分别在引物S268和引物S104中各出现一条多态性带,位点变异率为2/288,楦株变异率为2/20,说明此培养途径过程中发生体细胞无性系变异,遗传稳定性较前者低,因此河北杨不同培养途径再生植株间存在遗传稳定性差异.     

苹果叶柄体细胞胚胎发生

以苹果栽培品种嘎拉试管苗带柄叶片为材料,接种于附加不同浓度BA和蔗糖及不同氨基酸的MS培养基上,诱导叶柄产生体细胞胚和再生嫩梢。研究显示,附加BA 1.5mg/L的MS培养基是叶柄形成体细胞胚进而发育成嫩梢的适宜培养基。培养基中蔗糖浓度调控叶柄的分化类型,浓度在5～10g/L时,叶柄由体细胞胚途径分化嫩梢,浓度为20g/L时,叶柄同时由体细胞胚和器官发生途径形成嫩梢,浓度30g/L以上时,叶柄由器官发生途径分化嫩梢。4种氨基酸中,L-脯氨酸和谷氨酰胺促进叶柄体细胞胚形成,以L-脯氨酸促进效果最好。     

赞皇大枣叶片再生植株的初步研究

以赞皇大枣组培苗叶片为试材 ,研究了叶片诱导再生不定根的最佳培养基及其生长调节物质种类及浓度 ,在此基础上从不定根诱导出不定芽 ,获得了完整的再生植株。结果表明 ,在 1 /2MS +IBA 1 0mgL- 1+NAA 0 3mgL- 1培养基上 ,可从叶片上诱导产生不定根 ,将上述不定根转接到 1 /2MS + 6 BA 1 0mgL- 1+NAA 0 2mgL- 1培养基上继续培养 ,从不定根诱导出不定芽 ,从而获得完整的体细胞再生植株     

日本臭菘体细胞胚胎发生及植株再生体系的建立

以日本臭菘幼叶为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导、体细胞胚胎发育及植株再生的培养基配方,建立日本臭菘体细胞胚胎发生体系。结果表明,LS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L适宜日本臭菘幼叶胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导,诱导率为98%;LS+6-BA 0.50 mg/L+NAA 0.10 mg/L+IAA 0.10 mg/L最适宜体胚发育及植株再生,体胚萌发率为100%,萌发的体胚在发育培养基上继续培养42 d后全部发育成完整植株。对不同阶段培养材料的形态结构及超微结构的观察证明,成功建立了日本臭菘体细胞发生及植株再生体系。     

小麦体细胞无性系籽粒胚乳醇溶蛋白的变异

聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定表明,小麦体细胞无性系籽粒胚乳醇溶蛋白发生了变异,这种变异在SC_1代就能表达。测定的两个基因型间存在显著差异,农大139的变异频率明显高于衣大142;同一基因型不同株系间也有差别。SC_1代的变异有的直至SC_3代仍发生分离,但绝大部分变异能稳定地遗传到后代。     

榨菜继代培养愈伤组织及其再生植株的变异性分析

通过分子标记对榨菜愈伤组织及其再生植株的变异性进行了分析。RAPD检测表明:经2、3和5次继代培养的愈伤组织以及经2次继代培养愈伤组织的再生植株的分子标记呈现多态性,变异频率分别为2.04%、1.85%、1.79%和1.56%;流式细胞仪(FCM)分析表明,继代培养后的愈伤组织及其再生植株在染色体倍性上与亲本相比没有发生变化,皆为二倍体(2n=36)。另经2、3和5继代培养只有2次继代培养的愈伤组织分化出了再生植株,且有3.33%的植株与其亲本间存在表型差异。     

杜鹃抗盐突变体的筛选

利用杜鹃的离体叶片诱导不定芽 ,发现MS +BA2 0ppm +ZT0 1ppm培养基不定芽分化率最高。用γ射线作诱变剂 ,对离体叶片产生的不定芽进行了耐盐筛选 ,得到了耐 0 5%、0 7%和 1 %NaCl的变异株系 ,并对变异株系进行了初步鉴定。     

苹果离体叶片培养直接体细胞胚胎发生的形态学研究

研究了苹果离体叶片直接体细胞胚胎发生体系和外植体直接体细胞胚胎发生过程中的形态学特征。结果显示 ,苹果直接体细胞胚胎发生过程经历原胚、球形胚、心形胚、子叶形胚、成熟胚等阶段 ;子叶形胚以前的阶段没有观察到形态学多样性 ,发育至子叶形胚期的直接体细胞胚胎表现出形态学多样性 ,分别观察到一子叶胚、两子叶胚、三子叶胚、杯状胚、多子叶胚、畸形胚等 ,这些类型的胚最终都能发育成正常的成熟胚进而发育成小植株。     

两种基因型泡桐体细胞胚胎发生及植株再生

以叶片和茎段为外植体,研究了毛泡桐和白花泡桐胚性愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生情况。结果表明,白花泡桐叶片和茎段胚性愈伤组织诱导的最适培养基分别为MS+0.3mgLNAA+14mgLBA和MS+0.3mgLNAA+8mgLBA,其最适培养基皆为MS+0.3mgLNAA+17mgLBA。从体细胞胚胎发育所需时间来看,两种泡桐叶片的体细胞胚胎发育能力均高于茎段。     

箭根薯的试管繁殖

本实验用箭根薯成熟种子为材料，培育出无菌幼苗，再用幼叶、叶柄进行试管繁殖。经实验得出各阶段适宜的培养基分别为：（1）种子萌了：MS＋6－BA 1mg/L(单位下同）＋NAA 0．1；（2）诱导愈伤组织：MS＋6－BA 1＋2，4－D 1．5＋KT0．2；（3）丛芽诱导：MS＋6－BA0．5＋NAA0．5；（4）生根培养：1／2MS＋NAA0．5。     

赞皇大枣组织培养快速繁殖技术研究

为解决赞皇大枣组织培养快速繁殖问题 ,通过对启动培养、增殖培养、壮苗培养和生根培养 4个阶段培养条件的研究 ,筛选出该品种的最佳启动、增殖、壮苗和生根培养基 ,分别为 :MS+6-BA0 5mg L +IBA0 1mg L ;MS +6-BA1 5mg L +IBA0 1～0 2mg L ;MS +KT0 5mg L +NAA0 2mg L ;1 2MS+IBA0 6mg L +NAA0 2～ 0 3mg L。     

土三七不定芽直接发生与遗传稳定性的RAPD分析

以土三七叶片为外植体,在MS+6-BA2mg/L+NAA1mg/L培养基上直接生成不定芽,经MS+IBA0.2mg/L培养基诱导生根,多次继代培养、移栽,建立了土三七不定芽植株再生体系。用RAPD分析了野生土三七、连续3次继代试管苗和移栽苗的遗传稳定性。结果显示:用选取的20条随机引物共扩增出清晰的88个条带,条带数在2～8条之间,平均4.4条。不同植株扩增获得的条带数目和带型一致,表明在所检测范围内继代培养和移栽未影响土三七DNA序列。所建立的直接再生程序可用于土三七试管苗大量生产。