金线莲组培快繁技术研究进展

金线莲为兰科开唇兰属多年生草本植物,具有重要的药用价值。该文对金线莲组培快繁的研究现状进行了综述,包括金线莲无菌培养的建立、增殖培养、生根培养及移栽驯化4个阶段,以期为今后组培方面的相关研究提供一定参考。     

金线莲组培快繁技术体系的研究

通过设置不同的试验来优化金线莲的组培条件,结果表明:金线莲外植体消毒处理以75%乙醇(浸泡30 s)+0.1%HgCl(浸泡8 min)的效果较好,诱导芽培养基以MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L的处理效果最优,芽丛生增殖培养基以MS+BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L的效果最优,在增殖培养基中添加20%香蕉泥对芽苗的增殖及壮苗培养均有极大的促进作用。在芽体分化培养过程中,在MS+BA 0.05 mg/L+NAA 0.5 mg/L的培养基中,接种密度为每瓶10颗和800lx的光照处理效果较为理想。     

不同产地金线莲组培快繁试验

以不同产地金线莲幼嫩茎段为外植体诱导丛生芽,通过不同培养基配方的筛选,建立不同产地金线莲组培快繁体系。结果表明,不同产地金线莲最佳初代培养基分别是,福建永安产地为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT,台湾南投产地为MS ＋3.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT,广西玉林产地为MS＋4.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT;最佳继代培养基分别是,福建永安产地为MS＋2.0 mg/L 6-BA ＋0.2 mg/L NAA,台湾南投产地为MS＋3.0 mg/L 6-BA ＋0.3 mg/L NAA,广西玉林产地为MS ＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA;在壮苗培养阶段,使用外源添加物蛋白胨后,不同产地金线莲外植体苗的生长状况在不同程度上得到了改善,最佳生根培养基分别是,福建永安产地为1/2MS ＋1.5 mg/L NAA ＋0.5 mg/L IBA＋2.0 mg/L ABT1,台湾南投产地为1/2MS ＋0.5 mg/L NAA＋0.5 mg/L IBA,广西玉林产地为1/2MS ＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L IBA＋1.0 mg/L ABT1,同时添加1.5 g/L Ac;炼苗移栽基质V （蛭石）∶V（泥炭土）＝1∶1,移栽生根率均达90％以上。     

苦楝组培快繁技术优化试验

为解决苦楝组织培养中出现的芽苗玻璃化、叶黄化、愈伤组织异常等问题,以苦楝半年生种子实生苗带腋芽茎段和茎尖为外植体,诱导出无菌芽,进行培养方法改进及培养基优化对比试验。结果表明：适宜的芽诱导培养基是MS+0.4 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+3.5 g/L琼脂;最佳继代增殖培养基是改良MS+0.8 mg/L6-BA+0.3 mg/L KT+0.3 mg/L IBA+1 g/L花宝1号+40 g/L蔗糖+3.8 g/L琼脂,增殖系数达到3.93;适宜的生根培养基是1/2 MS+0.6 mg/L ABT 6号+0.2 mg/L NAA+15 g/L蔗糖+3.2 g/L琼脂,平均生根率达到93.56%。     

月季组培快繁技术的研究

通过诱导芽分化和诱导愈伤两种途径 ,研究不同植物生长调节剂及浓度、对外植体萌发和生根的影响。MS附加不同种类、不同浓度的细胞分裂素和生长素 ,进行正交设计。结果表明 ,细胞分裂素 6 - BA分别与 3种生长素NAA,IAA,IBA配合使用均能诱导月季出芽。     

台湾金线莲(Anoectochilus formosanus)快繁体系的构建

以台湾金线莲(Anoectochilus formosanus)为研究材料,系统地研究了丛生芽的诱导和繁殖、生根壮苗培养以及驯化移栽等方面,旨在探索台湾金线莲快繁的最佳途径并构建其快繁体系.研究结果表明:丛生芽诱导和繁殖的最佳配方是MS+TDZ0.1mg/L+椰乳5%+蔗糖3%;生根壮苗的最佳配方是MS+BA0.1mg/L+IBA0.5mg/L+2g/L;驯化移栽期间的最佳基质是水草,最佳营养液为H2.     

百合组培快繁技术研究

百合为百合科百合属,其除具有观赏价值外,大多数可以食用。百合主要靠小鳞茎进行分株繁殖。一株百合每年只能得到1～3个鳞茎,繁殖速度非常缓慢。有些种类可用鳞片扦插,但往往容易腐烂。另外。百合长期采用营养繁殖,使病毒日趋严重而影响品质。因此组织培养技术在百合上的应用将会提高名优品种的繁殖速度,并可获得无毒苗。     

青杨工厂化快繁技术研究

研究了青杨带芽茎段的工厂化快繁技术。选出了简化的最佳分化培养基和最佳生根培养基，确定了青杨试管苗工厂化生产的规范化工艺流程。解决了工厂化生产过程的关键问题。并采用珍珠岩和营养土两步炼苗，成活率可达90％以上。     

非洲紫罗兰组培快繁技术

非洲紫罗兰是著名的室内观赏花卉，它株型紧凑，颜色五彩缤纷，叶绿色或暗红色，且厚实，室内栽培容易，它不需强光，只需少许散射光即可正常生长及开花，花期长达2－3个月，只要注意环境调节及肥水管理，可以常年花开不谢，有室内花卉皇后的美誉，居室内摆放有画龙点睛之效果，在国际贫花市场中极为流行，自90年代将非注；我兰引入北京市场以来，深受欢迎，并在许多大城市开始流行，深受花卉爱好者欢迎，我们从1999年2月份开始对引入的非洲紫罗兰进行组培研究，在短短的半年时间里，已生产数万株组培苗。     

芋离体快繁体系的优化

试验以芋芽茎尖为材料进行组培快繁研究。在BA,ZT,KT3种细胞分裂素中,以BA分化不定芽效果最好。其中MS BA3.0～4.5mg／L NAA0．2mg／L分化率较高。在进一步的芽增殖培养中,经过优化试验,发现培养芋芽半个月时,以MS BA4、0mg／L NAA0．2mg／L的增殖系数最高,为5．9。另外,芋芽的生根培养基以MS N从0．2mg／L最佳。     

发酵花生壳在金线莲栽培中的应用

[目的]探索在金线莲栽培基质中腐熟花生壳代替腐熟松树皮的可行性。[方法]以金线莲组培苗为试验材料,研究不同栽培基质对金线莲生长和生物产量的影响。[结果]以农富康秸秆发酵剂发酵花生壳+泥炭土(1∶1)为栽培基质的金线莲生长最好,其成活率、生物产量最高。[结论]在栽培基质配方为花生壳+泥炭土(1∶1)情况下,自然风干花生壳不能用于金线莲栽培,自然条件下腐熟花生壳可用于金线莲栽培,选用适宜发酵菌剂发酵花生壳用于金线莲栽培,能达到更好的栽培效果,完全可以替代腐熟松树皮用于金线莲栽培。     

不同干燥温度对金线兰品质与有效成分的影响

采用不同温度对金线兰新鲜植株进行烘干处理,并进行品质特征、折干率、总黄酮和多糖含量的测定比较,结果表明,不同烘干温度处理后,金线兰植株的颜色、外形和香气滋味有差异;折干率随着烘干温度的升高而降低;不同烘干温度的总黄酮与多糖含量存在显著差异,60℃处理的多糖与总黄酮含量最高,100℃恒定高温烘干的干样二者含量最低。高温杀青后于低温下烘干其折干率、多糖与总黄酮含量都降低。综合金线兰的品质特性、折干率及其主要成分含量,建议金线兰适宜的烘干温度为60℃。     

金线莲原球茎的诱导与快速繁殖

[目的]寻求金线莲原球茎诱导、增殖、分化与生根的最佳培养基及影响原球茎增殖与分化的主要因子。[方法]以金线莲茎段为外植体,MS为基本培养基,附加不同浓度的6-BA、NAAT、DZ和S-3307,对原球茎的诱导、继代增殖、苗的分化、生根等进行研究。[结果]原球茎诱导的最佳培养基为MS+TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L,诱导率达93.3%;原球茎增殖的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+S-33071.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,增殖系数达9.4;芽分化的最佳培养基为MS+S-33071.5 mg/L+TDZ 0.4 mg/L+NAA 1.5 mg/L+琼脂0.7%,分化率达91.7%;最佳的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+活性炭0.05%+琼脂0.7%,生根系数达4.4;组培苗移栽30 d后,存活率均达93%左右。[结论]S-3307是金线莲原球茎增殖的主要因子,TDZ是原球茎分化的主要因子。     

不同栽培方式对金线莲中微量元素的影响

[目的]建立微波消解-ICP-MS法测定金线莲中微量元素,为企业种植金线莲及质量标准的制定提供依据。[方法]样品微波消解后,采用ICP-MS法测定各元素含量,比较不同品种、不同栽培方式及月龄对金线莲中各微量元素的影响。[结果]各微量元素标液工作曲线的线性良好,相关系数≥0.999,精密度RSD≤4.4%,重复性RSD≤5.8%,回收率89.4%~114.2%,回收率RSD≤4.8%。金线莲不同品种间微量元素含量有较大差异,其中以Ca、Mg、Fe、Mn、Zn的含量较高。[结论]金线莲中的微量元素含量随种植周期的延长而增长。该方法快捷准确、灵敏稳定、重现性好,可用于同时测定金线莲中各微量元素的含量。     

金线莲组培快繁条件的优化

为优化金线莲快繁技术体系以批量生产金线莲,以其无菌苗为外植体,MS为基本培养基,附加不同浓度的植物激素(6-BA,NAA,IBA)、蔗糖及活性炭等研究金线莲不定芽增殖、生根的影响,并进行移栽试验。结果表明:金线莲不定芽增殖培养以MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.5mg/L+蔗糖40g/L的效果较佳,生根培养以1/2MS+IBA 0.5mg/L+NAA 0.3mg/L+活性炭0.2g/L的效果较好,较适移栽基质为珍珠岩∶泥炭土∶松树皮=1∶1∶1,成活率达98%。     

金线莲茎腐病病原菌分离及分子鉴定

采用组织块法对金线莲疑似茎腐病病原菌进行分离,用致病性试验、病原菌形态学观察、分子生物学方法对该病原菌进行鉴定。结果表明：从收集的金线莲疑似茎腐病病原菌感染植株中分离得到的菌株,在培养基中产生大量气生菌丝呈棉絮状,菌丝在培养基中产生紫色色素,有隔及分枝,大型分生孢子纺锤形,小型分生孢子卵形或长圆形。分离的菌株回接后可使金线莲植株产生病害,对扩增得到的rDNA-ITS序列进行 Blast对比分析,确定该病害为尖孢镰刀菌FusariumoxysporumSchl．引起的茎腐病。     

不同月龄金线莲多糖和总黄酮含量的比较

对福建主要的栽培类型及其0,4月龄的金线莲进行多糖和总黄酮含量测定,结果表明：多糖含量随着金线莲的栽培月龄的增加而降低,总黄酮含量则随着金线莲的栽培月龄的增加而上升。